全 文 ：［收稿日期］ 20101029(008)
［基金项目］ 国家自然科学基金项目(30360113);吉林省科技
发展计划项目(200705426)
［第一作者］ 全吉华，护师，研究方向:临床护理教学与科研，E-
mail:jihua128@ sina. com
［通讯作者］ * 尹学哲，教授，博士，研究方向:临床医学教学与
科研，E-mail:yinxz@ ybu. edu. cn
漏芦醇提取物的体外抗氧化作用
全吉华1，金延华2，尹学哲2*
(1. 延边脑康医院，吉林 延吉 133000;2. 延边大学附属医院，吉林 延吉 133000)
［摘要］ 目的:研究祁州漏芦醇提取物的抗氧化活性。方法:以高铁还原法检测祁州漏芦醇提取物对肝组织总抗氧化能
力的影响，以硫代巴比妥酸(TBA)法检测对肝组织的抗脂质过氧化作用。结果:漏芦醇提取物浓度依赖性地增高肝匀浆总抗
氧化能力，同时浓度依赖性地抑制肝组织脂质过氧化作用，其对 H2O2，·OH 和 Fe
2 +诱导的肝匀浆脂质过氧化作用的半数抑制
浓度(IC50)分别为 56. 4，144. 2，355. 6 mg·L
－1;对 H2O2 和 Fe
2 诱导的肝线粒体脂质过氧化作用的 IC50分别为 781，36. 3 mg·
L －1。结论:漏芦醇提取物具有体外抗氧化作用。
［关键词］ 祁州漏芦;醇提取物;抗氧化;脂质过氧化
［中图分类号］ R285. 5 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)06-0197-03
Antioxidative Effect of Ethanol Extract of Rhaponticum uniflorum
QUAN Ji-hua1，JIN Yan-hua2，YIN Xue-zhe2*
(1. Yanbian Brain Heaith Center，Yanji 133000，China;2. Hospital of Yanbian University，Yanji 133000，China)
［Abstract］ Objective:To study the antioxidative effect of ethanol extract of Rhaponticum uniflorum.
Method:The effect of R. uniflorum ethanol extract on the total antioxidant capacity of liver was determined by ferric
reducing method，and the anti-lipid peroxidative activity was detected by thiobarbituric acid (TBA)method.
Result:R. uniflorum ethanol extract concentration-dependently elevated the total antioxidant capacity of liver
homogenate，inhibited the lipid peroxidation of liver homogenate induced by H2O2，·OH and Fe
2 + with the IC50s of
56. 4，144. 2 and 355. 6 mg·L －1，respectively，and inhibited the lipid peroxidation of liver mitochondria induced by
H2O2 and Fe
2 + with the IC50 s of 781 and 36. 3 mg·L
－1，respectively. Conclusion:The ethanol extract of R.
uniflorum has an antioxidative effect in vitro.
［Key words］ Rhaponticum uniflorum;ethanol extract;antioxidation;anti-lipid peroxidative
漏芦为菊科植物 Rhaponticum uniflorum (L)
DC.的根，主治乳腺炎，乳汁不通，腮腺炎，风湿性关
节炎和痔疮［1］。研究表明，漏芦具有提高细胞免疫、
抗动脉粥样硬化、抗炎、抗衰老等作用［2-3］。本文探
讨了漏芦的体外抗脂质过氧化作用，为中药漏芦的
开发提供科学依据。
1 材料
总抗 氧 化 能 力 (TAOC)测 试 盒 (批 号
20080612)、丙二醛(MDA)(批号 20100319)和蛋白
质测试盒(批号 20080613)购自南京建成生物工程
研究所，试剂均为国产分析纯。U-2010 型紫外分光
光度仪(日本岛津公司)和 HITACHI himac cp 100α
超速离心机(日本日立公司)。
漏芦采自吉林省长白山，由延边大学药学院刘
勇镇教授鉴定。将 2 kg漏芦切碎后，用 90%乙醇回
流提取 2 h，滤液经减压浓缩即得漏芦乙醇提取物
0. 174 kg，得率为 8. 7%。
2 方法
2. 1 动物及动物样品的制备 家兔 12 只，4 月龄，
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第 17 卷第 6 期
2011 年 3 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 6
Mar.，2011
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2011.06.051
体重 2. 0 ～ 2. 5 kg，雌雄不限，由延边大学医学部动
物科提供，合格证号 SCXK(吉)2007-0004。将家兔
肝用冷生理盐水清洗，冰浴制成 10%肝匀浆悬液，4
℃保存备用。将肝匀浆悬液于 3 000 × g 离心 20
min，沉淀洗 2 次，合并上清液，再于 1 万 × g 离心 20
min，所得沉淀洗 2 次后，用 10 mmol·L －1 Tris-HCl缓
冲液配成含蛋白质 1. 25 g·L －1的肝线粒体悬液，4
℃保存备用。
2. 2 总抗氧化能力的测定［4］ 肝匀浆悬浮液 1 mL
中加入不同浓度漏芦醇提取物溶液 0. 1 mL，混匀后
于 37 ℃预热 10 min。按试剂盒操作方法测定 520
nm处的吸光度(A520 nm)，计算 TAOC 单位数。每分
钟每毫升样品溶液使反应体系的 A520 nm增加 0. 01 定
义为一个 TAOC单位(U)。
2. 3 抗脂质过氧化活性的测定 肝匀浆或肝线粒
体悬浮液 1 mL中加入不同浓度漏芦醇提取物溶液
0. 1 mL，混匀后于 37 ℃预热 10 min。按参考文献方
法［4］，分别加入 60 mmol·L －1 H2O2 0. 1 mL或 6 mmol
·L －1 FeSO4 0. 1 mL或 6 mmol·L
－1 FeSO4 0. 1 mL 和
60 mmol·L －1 H2O2 40 μL启动脂质过氧化反应。37
℃孵育 1 h后，加入 15%三氯乙酸 1 mL 终止反应。
最后加 0. 67% TBA 1 mL，煮沸 15 min，冷却后离心，
测上清液 A532 nm，计算 MDA生成量和抑制率(IR)。
IR = (A模型 － A测定)∕(A模型 － A正常)× 100%。
2. 4 统计学处理 数据以 珋x ± s 表示，用 SPSS 11. 0
统计软件进行方差分析，P < 0. 05 具有显著性差异。
3 结果
3. 1 漏芦醇提取物对肝匀浆总抗氧化能力的影响
见图1。在化学模拟体系中，4 g·L －1漏芦醇提取
物 的总抗氧化能力为13. 2U，是等浓度维生素C
的 3. 5 倍。在此基础上，本试验主要考察了漏芦醇
提取物对肝匀浆总抗氧化能力的影响。在供试浓度
范围内，漏芦醇提取物可明显提高肝匀浆体系的总
抗氧化能力(P < 0. 01)，且肝匀浆总抗氧化能力随
漏芦醇提取物浓度升高而增高。漏芦醇提取物质量
浓度小于 0. 5 g·L －1时，回归方程为 Y = 54. 401X +
6. 530 5，R2 = 0. 981 1;其在 0. 5 ～ 2. 0 g·L －1时回归
方程为 Y = 19. 535X + 23. 264，R2 = 0. 999 6;呈明显
的量效关系。
图 1 漏芦醇提取物对肝匀浆总抗氧化能力的影响
3. 2 漏芦醇提取物对 H2O2，·OH 以及 Fe
2 +诱导的
肝匀浆脂质过氧化作用的影响 见表 1。经 H2O2，·
OH或 Fe2 +诱导后，模型组肝匀浆 MDA 增高，与正
常对照组相比，差异均非常显著(P < 0. 01)，说明
H2O2，·OH和 Fe
2 +可促使肝匀浆体系中脂质发生过
氧化反应。在一定浓度范围内，漏芦醇提取物明显
抑制肝匀浆体系 MDA的生成(P < 0. 01)，且抑制率
随漏芦醇提取物浓度的增加而增高，呈浓度依赖性。
根据回归方程测得，漏芦醇提取物对 H2O2，·OH 和
Fe2 +诱导的肝匀浆体系脂质过氧化作用的 IC50分别
为 56. 4，144. 2，355. 6 mg·L －1。
表 1 漏芦醇提取物对 H2O2，Fe2 +和·OH诱导的肝匀浆脂质过氧化作用的影响(珋x ± s，n = 6)
组别
药物质量浓度
/ g·L －1
H2O2 诱导 Fe2 +诱导 ·OH诱导
MDA /mmol·L －1 抑制率 /% MDA /mmol·L －1 抑制率 /% MDA /mmol·L －1 抑制率 /%
对照 － 0. 64 ± 0. 01 － 0. 53 ± 0. 00 － 0. 80 ± 0. 01 －
模型 － 2. 79 ± 0. 0. 21) － 0. 94 ± 0. 011) － 4. 89 ± 0. 021) －
药物 0. 025 2. 31 ± 0. 042) 22. 3 0. 92 ± 0. 042) 18. 6 4. 06 ± 0. 02 20. 4
0. 05 1. 82 ± 0. 092) 45. 2 0. 85 ± 0. 092) 22. 7 3. 45 ± 0. 032) 32. 6
0. 1 1. 05 ± 0. 042) 80. 7 0. 79 ± 0. 042) 36. 6 2. 97 ± 0. 022) 47. 1
0. 2 0. 64 ± 0. 012) 99. 7 0. 77 ± 0. 092) 42. 8 2. 19 ± 0. 042) 66. 2
0. 5 0. 24 ± 0. 042) 109. 4 0. 71 ± 0. 042) 56. 7 1. 52 ± 0. 042) 82. 6
1. 0 0. 27 ± 0. 032) 116. 9 0. 66 ± 0. 032) 68. 6 0. 26 ± 0. 012) 113. 4
注:与对照组相比1)P < 0. 01;与模型组相比2)P < 0. 01(表 2 同)。
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第 17 卷第 6 期
2011 年 3 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 17，No. 6
Mar.，2011
表 2 漏芦醇提取物对 H2O2 和 Fe2 +诱导的肝线粒体脂质过氧化作用的影响(珋x ± s，n = 6)
组别
药物质量浓度
/ g·L －1
H2O2 诱导 Fe2 +诱导
MDA /mmol·L －1 抑制率 /% MDA /mmol·L －1 抑制率 /%
对照 － 0. 28 ± 0. 01 － 0. 49 ± 0. 00 －
模型 － 3. 62 ± 0. 021) － 1. 48 ± 0. 031) －
药物 0. 01 3. 26 ± 0. 022) 11. 4 1. 37 ± 0. 022) 11. 0
0. 025 3. 19 ± 0. 022) 12. 7 1. 13 ± 0. 012) 35. 1
0. 05 3. 14 ± 0. 032) 14. 5 0. 78 ± 0. 022) 70. 3
0. 1 2. 92 ± 0. 012) 20. 9 0. 49 ± 0. 022) 99. 8
1. 0 1. 63 ± 0. 022) 59. 4 － －
10. 0 1. 11 ± 0. 012) 75. 1 － －
3. 3 漏芦醇提取物对 H2O2 或 Fe
2 +诱导的肝线粒
体脂质过氧化作用的影响 见表 2。分别经 H2O2
或 Fe2 +诱导后，所有模型组肝线粒体 MDA 生成也
均有增高(P < 0. 01)，而漏芦醇提取物则明显抑制
肝线粒体 MDA生成(P < 0. 01)，且呈一定浓度依赖
性。根据回归方程测得，漏芦醇提取物对 H2O2 和
Fe2 +诱导的肝线粒体脂质过氧化作用的 IC50分别为
781，36. 3 mg·L －1。
4 讨论
活性氧自由基引发的体内脂质过氧化是机体衰
老和癌变的重要原因。在自由基和活性氧作用下，
诱发多不饱和脂肪酸氧化，破坏生物膜的结构和功
能，从而造成组织细胞及机体的病变和死亡。MDA
是脂质过氧化物的主要分解产物，其含量常常反映
组织脂质过氧化程度，也间接反映组织受自由基攻
击的严重程度。所以测定 MDA 可以判断受试物是
否具有阻断自由基链式反应的能力和抗氧化的损伤
效应。本试验结果表明，漏芦醇提取物具有的较强
总抗氧化能力，同时可浓度依赖性地抑制 H2O2，
Fe2 +以及·OH所诱导的肝线粒体和肝匀浆体系的脂
质过氧化发生。漏芦醇提取物对 Fe2 +所致肝线粒体
脂质过氧化作用的半数抑制浓度约为 36. 3 mg·L －1，
以肝线粒体体系中的终浓度来表示，即为 3. 3 mg·
L －1，体外抗脂质过氧化作用非常显著。
现代研究表明，漏芦含化学成分主要有蜕皮甾
酮类、黄酮类、三萜皂苷、挥发油和有机酸等［5］，而黄
酮类化合物的抗氧化作用早已被证明。因此，漏芦
醇提取物的抗氧化作用的机制之一可能为漏芦醇提
取物中所含黄酮、齐墩果酸和蜕皮甾酮等成分通过
捕捉脂质过氧化链式反应中产生的活性氧，减少脂
质过氧化反应链式反应。而体外抗脂质过氧化的研
究只能反映药物抗氧化作用的一个侧面，因此，漏芦
作为一种潜在的抗氧化功能食品有待进一步研究。
［参考文献］
［1］ 《全国中草药汇编》编写组. 全国中草药汇编［M］. 北
京:人民卫生出版社，1996:919.
［2］ 邹莉波，杜立阳，董爱梅，等. 祁州漏芦乙醇提取物益
智作用的实验研究［J］. 沈阳药学院学报，2003，20
(2):139.
［3］ 张学武，李天洙，孙权. 漏芦提取物抗炎、镇痛、耐缺氧
及抗疲劳作用的研究［J］. 四川中医，2005，23
(7):22.
［4］ 尹学哲，李天，汪霞. 大豆皂醇抗脂质过氧化作用的研
究［J］. 食品工业科技，2010，31(7):143.
［5］ 布日额，东格尔道尔吉，其其格玛. 漏芦属植物化学成
分及生物活性研究进展［J］. 中国民族民间医药杂志，
2004，70:291.
［责任编辑 邹晓翠］
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全吉华，等:漏芦醇提取物的体外抗氧化作用