全 文 ：植物生理学通讯 尸的 ,比 外妇诫脚 己哪翔恻城幼以必昭 1 9 9 2 , 2 8 ( 5 ) t 3 6 5~ 3 6 7
沿阶草叶片愈伤组织的诱导及其植株再生
杨乃博 (中国科学院上海植物生理研究所 ,上海 : 0 03 2 )
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oB (及. 尹` 才`盆山幽 of 矛恤. t 摊妇诫侧 , A娜翻子山 `如加 . 翻口娜画 20 0 32 )
植物名称 : 沿阶草 (〔秘叻毋祝 尸杯砚困贴 ) 。
材料类别 : 幼苗叶片 。
培养条件 : 种子萌发培养基 ( l) M S + 2 , 4 一 D
Zgm / L (单位下同 ) 十 B A 0 . 5 ,诱导愈伤组织培养荃
( 2 ) M S + 2
,
4
一
0 8+ N A A 4 + 1人 A 4 ; 分化培养荃 ( 3 )
M S十N A A 0 . 2 + B A Z ; ( 4 )M S十 IA A I + B A I+ K T I ;
( 5) M S
。 (不加生长素 ) 。 上述培养基均添加水解乳蛋
白 50 0 . 用琼脂固化 , p H S , 4 , t 25℃下 ,光照 ( 5 0 0 伙 )
1 2 h
。
生长与分化情况 : 把经常规方法灭过菌的种
子 , 接种在培养基 ( l) 上 ,种子萌发后 ,苗长到 3~ 5
c m 长时 , 自叶基部剪取整张叶片 ,并把它们整张地接
种到培养基 (2 )上培养 2~ 3 个月 , 此期间 , 在叶片不
断长长 、 变厚 、增宽的同时 ,叶墓部产生白色颗粒状愈
伤组织 ,叶身近叶尖处也会产生少量顺粒状愈伤组
织 , 3个月后统计愈伤组织诱导率为 40 % 。 将愈伤组
织及分化出小叶的愈伤组织移接到分化培养基 ( 3) 一
( 5) 上 , 约 2一 4 周分化出不定苗 ,并随时间的延长 ,个
别苗的基部分化出粗壮的根 ,成为完整植株 。 培养墓
( 3 )
,
( 5 )上分化率为 2 0%一 4 0% ,培养基 ( 4 )上未见
分化 。
意义与进展 : 沿阶草系属百合科的单子叶植
物 , 是一种观赏草花和药用植物 , 在医学上沿阶草与
麦冬的块根统称麦冬 . 但沿阶草的块根为正品 .优于
麦冬块根 。 因此用沿阶草作试验材料有一定实用价
值 。 本文除为沿阶草的试管京殖提供了初步的方法
外 ,更主要的是取得了叶片荃部 、 叶片上部的脱分化
与再分化的成功 , 而单子叶植株叶片上部取得脱分化
的例子甚少 ,它至今仍是组织培养中的难题 . 因此 ,
本文的结果有一定的参考价值 。 沿阶草叶片脱分化
再分化再生植株 ,国内尚未见报道 。
收稿 1 9 9 2一 0 4一 l月
蜂斗菜的组织培养
姜长阳 程 华 (辽宁师范大学生物系 ,大连 1 160 2 )
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C H E N G H au (及李浏杯哈心 oj 压而四 , 乙姐用峋 从护m 以 右如脚滋勺 . 丈划如 . 1 1 6 022 )
. 植物名称 : 蜂斗菜 (八白诫助 , 如吻 , ) 。
材料类别 : 根典生长点 .
培养条件 : 春初 、 秋末或冬季 ,将鲜根放在温室
中进行沙埋 。 取具有开始萌动芽的根 , 放在流水中洗
3 0咖 , 再放在广 口 瓶中 ,用蒸馏水摇晃振荡洗涤
1 0 而 n ,然后用 0 . 05 %的 H g cl : 溶液振荡消毒 5 m in .
转移到超净工作台上 , 用 70 %的酒精消毒 20 5 左右 ,
再用 0 . 1%的 H解l : 振荡消毒 5 而n ,然后用无菌水洗
涤 4 次 。 把根策生长点剥离至 l ~ 2 ~ 大小时培养
。
培养基为 ( 1) M S + B A 1 . 4 哪 / L (单位下同 ) 十
N 人A O, 2 + I A A 0 . 1 . ( 2 ) M S + B A 1
.
0 + N A A O
,
5 ;
收稿 19 9 2一 0 3一 3 0
致谢 大连华侨果树农场赵德元同志提供试材 .
3 65
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1992. 05. 021
( 3 )M S+ B ^0
.
5十 G ^l, 5+ 】A人 0 。 4 , ( 4 ) 1 / 2 M S+
I A A 1
.
0
。 培养墓所含琼脂的脉力强度为 16 0 `八m , ;
培 养墓 ( 4) 含蔗搪 1 5吕 / L , 其它各种培养蓦含蔗褚
3 0 9 / L ;培养温度 2 3~ 2 7℃ ,光照度 2 0 00~ 2 3 00 lx ,
每日光照 10~ 1 2 h 。
生长与分化惰况 : 将消毒后剥离的茎尖接种到
培养墓 ( 1) 上 ,开始出现轻微的褐化现象 ,约 1 个月左
右 , 大部分芽开始生长 , 培养至 50 d 左右 ,每个芽尖
分化出 2~ 6 个小芽 。 将小芽切开转接到培养基 ( 2)
上 , 小芽不断的分化 ,并缓慢生长 ,经 6 周即可分化为
丛生苗 ,把丛生苗转接到培养基 (3 )上 ,丛生苗迅速生
长 ,茎不断伸长 , 经 1个月左右的培养 ,可长成4~ 6cm
高的无根苗 . 将无根苗剪成 3 cm 长的茎段 ,插入培养
荃 ( 4) 中 , 2 5 d 生根率达 94 % ,其中 79 %的苗长出 4
条以上的根 。 将生根苗移栽到下部装着肥沃的园土 ,
上面搜盖约 矛cm 厚干净河沙的花盆中 ,移栽第 l 周
防止直射光照 ,保持湿度 80 % ~ 90 % ,半个月可长出
新根和新芽 , 移栽成活率达 82 % 。
意义与进展 : 蜂斗菜属菊科蜂 一斗菜属多年生草
本植物 ,主要分布在小兴安岭完达山一带 。 国内尚未
见组织培养的报告。 蜂斗菜的肉质叶柄和嫩茎 ,是颇
受欢迎的蔬菜 。 现已从小兴安岭引种到大连 。 几年的
栽种观察表明 ,试管苗春季比分株苗提前 s d 左右发
芽 ,根系是分株苗的 2~ 3 倍 ,长势也较旺盛 。 组织培
养可在短期内提供大量的种苗。 这既解决了种撅缺
乏 , 也为野生资佩的种质保存和筛选 良种提供 了保
证 。
大赖草成熟胚愈伤组织诱导及其植株再生
张茂银 戚家华 王子霞 郝峥嵘 古 力(新吸农业科学院原子能研究所生物室 , 乌备木齐
8 30 00 0 )
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口即如助加 oj 油姗滋了服吮 , , 叉如 .脑匆 座细蜘呷 of J今必必州 及油袱犯八才肋呼 83 0 0 )
植物名称 : 大赖草 (及 , 昭 ,
~
)
。
材料类别 : 成熟胚 。
培养亲件 : 以 M S 为荃本培养墓 ,诱导愈伤组
织和分化培养基为 : ( 1 ) 2 , 4一 D l . o gm /L (单位下
同 ) ; ( 2 ) 2 , 4 一 n 1 . 0 + 盯 0 . 2 ; ( 3 ) 2 , 组一 0 1 . 0+ K T
0
.
5 ; ( 4 ) 2
,
4
一
D 2
.
0 ; ( 5 ) 2
,
4
一
D 5
.
0+ K T 0
.
2 ; ( 6 )
2
,
4
一
D 1 0
·
0+ KT 0
.
2 ; ( 7 ) I A A 5
.
0+ 6
一
BA 1
.
0
。 成苗
培养墓为 ( 8 ) 2 , 4一 n 0 . 5+ IA A 0 . 5+ K T 2 . 0 。 上述培
养基均添加水解酪蛋白 2 5 0 ; 谷氨酞胺 2 0 ; 精氨酸
1仇 -L 夭门冬氨酸 1 0 0 , 蔗糖 3% ;麦芽搪 1% ;琼脂
0
.
6 % , PH 5
.
8
。 培养温度 25 士 2℃ , 愈伤组织诱导至
器官发生为暗培养 ;成苗为光培养 。每日光照 12 h , 光
照度为 2 0 0 0 肠 .
生长与分化愉况 : 取成熟种子经常规消毒后 .
在超净台上剥取胚 ,接种于培养基 〔1) ~ ( 7) 中 。 暗培
养 6 d 后 .胚呈白色膨大且表面粗糙 。 在培养荃 ( 7) 培
养 Z O d 后胚芽 、 胚根发育全部长成无菌苗 ,无愈伤组
织形成 ;胚在培养荃 ( 1 ) , “ )中暗培养 2 个月后或转
入原培养基 ( 1 ) , ( 4) 中光培养 50 d 皆无愈伤组织形
成 ,胚在培养荃 ( 2 ) , ( 3 ) , ( 5 ) , (叭)中经 1 4 d 暗培养 ,
其前部逐渐形成白色愈伤组织 , 25 d 后观察 , 以 (2 ) ,
(5 )培养基较好 (愈伤获得率 10 % ) 。 在 ( 5 ) , (6 )培养
荃上的愈伤组织中出现可见的胚状体 , 30 d 后发育成
清晰的绿色芽点 ,其中以培养墓 ( 6) 上发生率最高
(3 0% )
。 一块愈伤组织中可产生 2~ 3 个绿色芽点 , 它
与愈伤组织无明显生理隔离而较难分离 。
将已发育的绿色芽点转移到成苗培养基 ( 8) 上 ,
光培养 10 d 后 ,子叶伸长 , 继续培养后芽展开并生长
根可发育成完整小植株 。 本实验表明 , 新疆大赖草成
熟胚愈伤组织诱导和器官发生中 2 , 4 一 D 与 KT 是必
须的 , 其中以较高浓度的 2 , 4一 D 和低浓度的 K T 效果
较好 。
意义与进展 : 新孤大赖草属禾木科赖草属 ,在
我国仅分布于新获 。 抗干早 ,杭真菌与细菌病害 , 耐
盐孩 ,是抗性育种珍贵的遗传资源 , 其成熟胚愈伤组
织化及植株再生尚未见报道 。 本文结果为进一步培
养禾谷类与大赖草杂种胚和建立体细胞无性系利用
其种质资像创造了条件。
收稿 2 99 2一 0 1一 2 1
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