全 文 ：8 en iM
o de川 Bo im e山 en ie2) ( 08 _ V心l卫 .丝鱼匡
川木香对实验性胃溃疡形成的抑制作用研究 *
赖先荣 ’ 孟保华 ` 江志尧 ` 宋 阳 ’ 吴秦西 ’
( 1成都中医药大学 四川成都 6 1 0 07 ;2 5成都市第五人民医院 四川成都 6 113 1) 0
摘要 目的 :研究川木香对实验性胃清疡形成的抑制作用 。 方法 : 采用利血平型小鼠胃溃疡模型 、 醋酸型大鼠胃溃疡模型 , 以雷尼
替丁为对照药物 ,观察动物溃疡指数和溃疡抑制率。 结果 :川木香单体提取物 (去氢木香内醋 ) 、 醋酸 乙酣提取物 、 乙醉提取物 ,抑
制利血平型溃疡存在统计学差异 (与模型对照组比较 , P < 0 . 0 1) ; 醋酸 乙醋提取物 ,抑制醋酸型溃疡存在统计学差异 (与模型对照组
比较 , P < 0 一05 ) ,其中高剂量组作用存在统计学差异 (与模型对照组比较 , P0< 01 )。 结论 : 川木香具有抑制实验性胃溃疡的形成作
用 ,醋酸乙醋提取物可以作为川木香抑制胃溃疡形成的有效部位 。
关键词 :川木香 ;有效提取物 ; 去氢木香内醋 ;抗溃疡 ;行气止痛
中图分类号 : 2R 85 . 5 ,9R 65 . l 文献标识码 : A 文章编号 : 167 3一 62 73 ( 2 00 8 )0 1一0 034 一 0 3
E fe
e t s o f aR d i
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BA S T R A C T Obj
e c it v e : T o s ot dy ht e ihn ib iot 甲 e fe e t s o f R a d ix V lad im iir ae o n het fo mr iat o n o f e x p enm e ant l g a istr c u lc er in asrt
·
M eht 侧如: A m i e e m o de l w iht g a s itr e u le e r in du e e d by er s e pr i n e an d a art s mo de l w iht g a s itr e u le e r in du e ed b y a e e it e a e id w e er
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D ife er nt d o s e s o f d e勿dor e o s ut s l ac ot n e ( e x tr a c t o f aR d ix V lad im lir a e ) , e ht yl a e e t a te e x tr a e仁 e h an o l e x tr a c t
w e er a山nr in i set er d t o di fe r e n t gor uP s er sP e e ti v e ly ;h y d r o u s P o lye ht yl e n e gvcl o l ot mo de l e o n t ro l gr o uP : r a n l ti d in e w as akt en fo r e o n tr o l
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U le e r in d e x e s a n d g a s itr e u le e r ihn i biot yr art
e s o f ht e s e e x Pe ir me
n at l an 如 a l s w e er o bs e vr e d . 取孤地 : hT e er w a s s iat s it e a l
s ign i if e acn
e in ht e ihn ibi ot yr
e fe e ts o f g a istr
e u l e e r in du e ed b y er s e pr in e be t w e e n de h州 or c o s ut s lac ot n e ( e x 奴’a c t o f Ra d议 V lad im iir ae ) ,
e ht yl ac e at et e x湘 e t, he a n o l e x如 e t ( c o m Pa er d w iht m o de l e o n otr l gor uP , p < 0 . 0 1 ) ; ht er aw s s iat s ti e a l dife r e n e e i n ht e ihn i bi toyr e fe e t
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t (e o哪aer d w iht mo de l e on otr l脚叩 , P < 0 . 0 5 ) , e sP e e ia l ly fo r high do s e o f
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a ls o w iht s at i ist e a l di fe r e n e e ( P < 0
.
0 1 )
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e fe e tiv e in ht e ihn ib i ot yr
e fe e ts o f g a istr
e u le e r
访d u c e d by er s帅 in e ht an in ht e ihn ib iot yr e fe e t o f g a sitr e u le e r in du e e d b y ac e it e a e id .
K e y w o r ds : R a d ix V la dim iir a e : E fe e it v e e x tr ac t : D e抑由 。 c o s ut s lac t o n e : nA ti g a s itr e u le e r
Ch匕e se L ib ar yr C俪 s伍 c iat on (C LC ) : 2R 85 .5咫65 . 1 D o c切nt e in e o d e : A
A币 e le DI : 1673一 62 73 ( 2 0() 8 )0 1一0 03今03
前言
川木香为常用川产道地药材 , 为菊科植物川木香
v lad im iir a s o u lie i ( Far n e h
.
)L in g 或灰毛 川木香 V la d ha 试 a
s o u li e i ( Fanr
e h
.
)L m g v ar
. 。 in e er a L in g 的干燥根 ,是中医 、 藏医
(藏药名 : 布嘎木拉 )川 、蒙医朦药名 :斯布斯格尔 一其奴嘎纳 )闭 、
羌医 (羌药名 : 曲合思柏户交叉用药的品种之一 ,是治疗消化道
疾病的常用药之一。 自 1963 年版中国药典一部首次收载以来 ,
川木香成为包括现行中国药典 2005 年版 [’] 在内的历版中国药
典收载品种 ,功能是行气止痛 ,主要用于治疗院腹胀痛等症 ,适
用于气机阻滞所致疼痛 ,对以院腹胀痛性胃院痛为主要症状的
溃疡病标本兼治。 在 1743 年成书的藏医药经典名著 《晶珠本
草》中已记载有川木香功能清培根热 ,能使干瘦者生肌脂阎 ,适
宜于胃溃疡病的治疗 。
目前 , 已有研究对以川木香为主要药味的成方制剂防治溃
疡病的临床研究 ,如黄修海等问用陈香露白露片治疗溃疡病 ,健
胃和中、 理气止痛 ,认为陈香露白露片是治疗老年溃疡病较理
想的药物 。 有研究表明 :川木香药材中主要含有去氢木香内醋
和木香烃内醋等化学成分 , 其中去氢木香内醋的含量约为 1%
礴%切 , 去氢木香内醋对多种实验性胃溃疡模型均有抑制溃疡
形成的作用 ,试验研究模型包括水浸拘束型 、 乙醇型 、 盐酸型 、
幽门结扎型 、幽门结扎 一阿司匹林型 、 醋酸型 8I] 等 。 本研究结合
传统用药经验和国内外文献研究资料 ,在药材提取物— 有效部位— 有效成分多层次相关性物质化学分离的基础上 , 以
H: 受体抑制剂雷尼替丁为对照药物进行药效学试验研究 ,筛
选确定川木香抑制实验性胃溃疡形成的有效提取物。
* 基金项目 : 四川省中医药管理局中医药科学技术研究专项 , 川产道地药材川木香质量标准研究 ( 2 003 A o 6 ) 、
成都中医药大学科技发展基金 一 川木香抗消化性溃疡和改善溃疡愈合质量有效组分研究 (ZR 拍20 5 0 6) 资助
作者简介 :赖先荣 , ( 1 9 71 一 ) , 男 ,助理研究员 , 主要研究方向 : 中药及民族药创新药物的研究与开发 ,
E
一
m a il : Ia ix i anr
o n g@ 16 3
.
n e t
(收稿 日期 : 2 0 0 7一0 8一 29 接受日期 : 2 0 0 7一0 9 一3 0 )
DOI : 10. 13241 /j . cnki . pmb. 2008. 01. 019
材料与方法
1
.
1实验动物
KM小鼠 :普通级 ,雌雄各半 ,体重 18佗2g , 由四川省医学
科学院实验动物研究所提供 ,许可证号 s c xK (lJ , )20 04一 15。 s D
大鼠: SP F级 ,雌雄各半 ,体重 150一 1809 , 由四川省医学科学院
实验动物研究所提供 ,许可证号 s C X K (川 )20 04 一 15。 饲养条
件 : 成都中医药大学药学院中药药理实验动物观察室 (许可证
号 : 0 15 ) 。 动物进人观察室后 ,雌 、雄分笼饲养 ,备用。
1
.
2 实验药品
) l }木香 : 在川木香主产区 (四川省阿坝藏族羌族自治州小
金县 )定点收购 ,药材性状对比与薄层色谱鉴别等研究结果表
明 ,本品符合中国药典 2005 年版一部川木香 R a di x vl ad im ir ae
项下的有关规定。
雷尼替丁胶囊 (西南合成制药股份有限公司 , 批号 :
061 0 3)
, 利血平注射液 (北京双鹤药业有限公司 , 批号 :
05 10 27 )
。
1
.
3 实验试剂
冰醋酸 (成都市科龙化工试剂厂 ) , 40 % 甲醛溶液 (成都市
科龙化工试剂厂 ) ,聚乙二醇 40 0( 成都市科龙化工试剂厂 ) , 以
上试剂均为分析纯 。
1
,
4 实验器材
镊子 、 手术剪 、手术线 、手术针 、 微量注射器 、针头 、棉签 、电
子天平 、灌胃针头 、注射器 、止血钳 、游标卡尺 ,放大镜
1
.
5 供试品制备与剂 t 设置
模型对照组供试品制备与剂量设置 : 以含水聚乙二醇 碑0
代替药物 , 同等容量灌胃给药。
雷尼替丁供试品制备与剂量设置 : 取雷尼替丁胶囊内容
物 ,加含水聚乙二醇 4 0 制成每 lml 含 s m g 的溶液 (给药剂量
为 s o m叭 g ) ,备用。
去氢木香内醋供试品制备与剂量设置 : 取川木香 ,粉碎成
粗粉 ,加人浓度为 90 %的乙醇 ,浸润后 , 回流提取 ,减压回收乙
醇 ,加水混悬 ,石油醚脱脂 , 乙醚萃取 , 回收溶剂 ,加硅胶拌匀 ,
硅胶柱层析 ,环己烷 一 醋酸乙醋梯度洗脱 ,收集环己烷 一醋酸乙
醋 ( 9 5 : 5) 洗脱液 ,减压回收溶剂 ,结晶 , 环己烷 一 乙醚重结晶 ,
收集无色柱状结晶 ,取无色柱状结晶 ,加含水聚乙二醇 一4 0 制
成高剂量组供试品 (给药剂量为 90 m叭 g ) 、 中剂量组供试品
(给药剂量为 45 mgk/ g ) 、 低剂量组供试品 (给药剂量为 15
m gk/ g )
,备用 。
醋酸乙醋提取物供试品制备与剂量设置 : 取川木香 ,粉碎
成粗粉 ,加人浓度为 90 % 的乙醇 , 回流提取 ,减压回收乙醇 ,加
水混悬 ,醋酸乙醋萃取 ,减压回收醋酸乙酷 ,加含水聚乙二醇
一
4 0 制成高剂量组供试品 (给药剂量为 9叭 g ) 、 低剂量组供试
品 (给药剂量为 .4 5叭g ) ,备用 。
乙醇提取物供试品制备与剂量设置 : 取川木香 ,粉碎成粗
粉 ,加人浓度为 90 %的乙醇 , 回流提取 ,减压回收乙醇 ,加含水
聚乙二醇一o 制成高剂量组供试品 (给药剂量为 g gk/ g ) ,备用。
1
.
6 方法
1
.
6
.
1 川木香对利血平致小鼠急性实验性胃溃疡的影响 取
KM 小鼠 80 只 ,随机分 8 组 (模型对照组 、雷尼替丁对照组 、去
氢木香内醋高 、 中 、低剂量组 、醋酸乙醋提取物高 、 中剂量组 、乙
醇提取物高剂量组 ) ,每组 10 只 ,各组灌胃给药 .0 2 m l/2 09 ,模
型对照组给予等量的含水聚乙二醇 ,连续 5 天 ,实验前禁食不
禁水 2h4 , 各组再给药 1次 , hl 后皮下注射利血平 6 m叭 g , h6
后颈椎脱臼处死动物 ,解剖取胃 ,结扎胃的责门部和幽门部并
经胃壁向胃腔内注人 l%甲醛 2 m l ,将胃取出浸人 1% 甲醛溶液
中 , 30 m in 后沿胃大弯剪开 ,洗净胃内容物 ,将胃粘膜展开 , 胃
粘膜损伤表现为腺胃区粘膜的条状出血 ,用游标卡尺测定胃粘
膜损伤的程度 , (计分方法 :无损伤为 0分 ,疲血点为 1 分 ,线状
痕血长度 1< ~ 为 2 分
,
1一 Z
nlt 为 3分
,
2一 3
unIT 为 4 分
,大
于 3nlI 为 5分)
,计算溃疡指数 ,并计算溃疡抑制率。
溃汤抑制率(% 卜 量组平均溃疡指数 x 10 (玲白
1
.
.6 2 川木香对醋酸致大鼠慢性实验性胃溃疡的影响 取 SD
大鼠 40 只 ,禁食 1h2 后 ,腹腔注射 5%水合氯醛 2 m l麻醉 ,剪掉
腹壁毛 ,用碘酒和酒精消毒 。 在剑突下腹部正中 2一 2 . sc m 处剪
开皮肤和腹壁 ,用弯止血钳在右侧肝脏下方将十二指肠轻轻钩
出 ,然后将腺胃部轻轻拉出腹外 ,在胃的腹侧面 ,将微量注射器
平刺人胃体部与幽门窦交界处的浆膜下 0 . 4司 . smln 处
, 注人
4 0%醋酸 .0 05 m l ,缝合切口 ,术后常规喂养 ,次日随机分 4 组
(模型对照组 、 雷尼替丁对照组 、 醋酸乙醋提取物高 、 中剂量
组 ) ,每组 10 只 ,每日灌胃给药 Zm此 009 ,连续给药 14 日。 第
巧 天处死动物 ,取出胃后用 1%甲醛溶液固定 or m in ,沿胃大弯
剪开胃壁 ,将胃外翻 ,洗净胃内容物 ,取腺胃区展开 ,用纸吸干
溃疡内的水分 ,用游标卡尺测定胃粘膜损伤的程度 ,用溃疡的
最长径和最短径的均值表示溃疡指数 ,并计算溃疡抑制率。
1
.
7 数据处理和结果判定
实验数据以平均值土 标准差 (又土 s )表示 ,采用 s P s s 巧 。
(试用评估版 , Eva fu iat on V e sr ion )软件提供的单因素方差分析
方法方差分析 ( H o m o罗n e iyt o f v iar an c e /NA o v A /T e s t o f H o m o -
ge ne iyt of v an an ce s)
,按方差分析的程序先进行方差齐性检验 :
方差齐性 ,用多个实验组和一个对照组间均数的两两 比较方法
( M
u lt ip le e o m p a ir s o n观 SD 法 )进行统计 :方差不齐性 , 对数据
进行适当的变量转换 ,待满足正态或方差齐要求后 , 用转换后
的数据进行统计 ; 若变量转换后仍未达到方差齐性 , 改用秩和
检验进行统计 。
2 结果
2
.
1 川木香对利血平致小鼠急性实验性胃溃疡的抑制作用
数据统计分析结果表明 :与模型对照组比较 , 川术香提取
物及其有效成分 ,抑制利血平致小鼠急性实验性胃溃疡形成作
用存在统计学差异 ( P <住 0 1) (表 1 、图 1 ) 。
数据统计分析结果还表明 : 川木香提取物及其有效成分 ,
抑制利血平致小鼠急性实验性胃溃疡形成作用 ,与雷尼替丁对
照组相近 , 无统计学差异 ( P> .0 05 ) ; 其中醋酸乙醋提取物高剂
量组 ,溃疡抑制率高于雷尼替丁对照组 ,存在统计学差异 ( P < .0
0 5 )
。
各实验剂量组与模型对照组进行比较 , 溃疡抑制率高于模
型对照组 , 且统计学处理差异有显著性意义 , 可以判断川木香
提取物及其有效成分对利血平致小鼠急性实验性胃溃疡有保
护功能 ,其中醋酸乙醋提取物高剂量组作用明显 。
表 l 川木香对利血平致小鼠急性实验性胃溃疡的抑制作用试验结果
Tab le 1 eR su lst o f
e x tar c t o f R iad
x 巩 ad im iir ae tr e at in g het g a istr e
u le er In d u e e d by r e sepr i
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M o de l e o n t r o l
3 1
.
57士 9 . 6 9 0
各实验剂量组与模型对照组进行比较 ,溃疡抑制率高于模
型对照组 ,且存在统计学差异 ,川木香提取物对醋酸致大鼠慢
性实验性胃溃疡有保护功能 ,其中醋酸乙醋提取物高剂量组作
用明显 。
表 2 川木香对醋酸致大鼠慢性实验性胃溃疡的抑制作用试验结果
Tab le 2 R e s ul t s o f e x t r a c t o f aR d i
x
Vl ad im汤 a e 毓 at in g ht e gas itr e u le er
访d u e e d b y ac e t ie ac id
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89士 7 . 5 4* * 52 .84
1 13肚 1此 l * * △ 6 4 10
M o d e ! e o n tr o l
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图 2 川木香提取物对醋酸致大鼠慢性实验性胃溃疡的抑制作用
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n仙ōUnù内Uǎ1八,少ù6`J月峥九,`,上了ào一韶ó口。三召二石匕nō祝“O
2 3 4 5 6 7 8
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图 1 川木香提取物对利血平致小鼠急性实验性胃溃疡的抑制作用
F i.g 1 R e s
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lst o f ex 湘e t o f aR d ix Vl ad im i万a e t r e a t in g ht e g a s itr e u lc er
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.2 2 川木香对醋酸致大鼠慢性实验性胃溃疡的抑制作用
实验结果表明醋酸乙醋提取物 (高剂量组 ) ,抑制醋酸致大
鼠慢性实验性胃溃疡形成作用 ,存在统计学差异 (与模型对照
组比较 , P< .0 ol ) ;醋酸乙醋提取物 (中剂量组 ) ,抑制醋酸致大
鼠慢性实验性胃溃疡形成作用存在统计学差异 (与模型对照组
比较 , P < .0 05 ;) 雷尼替丁对照剂量组 ,抑制醋酸致大鼠慢性实
验性胃溃疡形成作用存在统计学差异 (与模型对照组 比较 ,
P < 0
.
0 1 ) (表 2 和图 2 ) 。
数据统计分析结果还表明 : 川木香提取物及其有效成分 ,
抑制利血平致小鼠急性实验性胃溃疡形成作用 ,与雷尼替丁对
照组 比较 ,存在统计学差异 ( P < .0 01 ) 。
3 讨论
雷尼替丁作为典型的 H: 受体抑制剂 , 在消化性溃疡的治
疗中有很好疗效 ,主要通过抑制胃酸分泌 、 降低酸度来抑制溃
疡形成 ,从本研究中溃疡抑制率的数据可以看出对醋酸型胃溃
疡的作用优于利血平型 。 比较雷尼替丁的抗溃疡作用 ,川木香
醋酸乙醋提取物对利血平型胃溃疡的作用优于醋酸型 ,对利血
平型溃疡的保护作用可能与改善胃肠运动和胃分泌等作用机
制有关 , 适宜用于以院腹胀痛性胃脱痛为主要症状的溃疡病 ,
以行气止痛 (脱腹胀痛* 胃脱痛、 胃溃疡 )达到抗溃疡的作用 。
川木香醋酸乙醋提取物制备方法简单 ,制备成本远低于单
一化合物 (去氢木香内醋 ) ; 对利血平型胃溃疡 ,醋酸乙醋提取
物与去氢木香内醋相应组别的溃疡指数无统计学差异 ;在以去
氢木香内酷计算的同等剂量下 ,应用提取物的成本 一效应优势
明显 ,将为寻找疗效较好 ,价格低廉 ,副作用少的抗溃疡病药物
提供开发应用的实验依据 。
(下转第 29 页 )
现代生物医学进展 切、甲 w.b i o m ed . n e t. e nP ro妞 r e s s inM od e rnB i o m ed i e in e 2 00 8V o l. 8 N o. 1
激模型 , 适用于研究某一方面因素在应激性疾病中的作用 1;o]
应激性疾病的产生往往是多因素综合渐进的慢性过程 , 因此 ,
慢性多重应激模型在人应激性疾病的研究中有重要意义 。
本实验采用刺激脉冲随机变动的噪声 、夜间光照 、 足底电
击以及强迫游泳和束缚的复合刺激 ,心理应激和躯体应激相结
合 ,体现了人类应激性疾病的多因素机制 。 在本实验中随机出
现的足底电击结合噪声刺激 , 是制作恐惧动物模型常用的方
法 ,可用于研究学习和记忆障碍等神经系统疾病l3] 。游泳是简便
的躯体疲劳应激 ,是一种卷人 “情感因素”最少的刺激方式 4jI 。 束
缚是普遍采用的精神或心理类应激源 ,束缚作为非损伤性刺激
更接近于人的心理应激 ,能较好地模拟人类精神刺激所致疾病
的病理过程 ,适用性和可操作性更强 5jI 。 将夜间光照与束缚相结
合 ,动物无法躲避光照 ,提高光照刺激实施率。
实验结果表明 ,模型组大鼠各项指标有显著的变化 ,动物
行为发生明显改变 , 经历了由兴奋焦虑到抑制抑郁的变化 ,体
重增长缓慢 ,食物利用率降低。 应激刺激使动物心率增快 , 血压
增高 ,下丘脑一垂体一肾上腺轴功能发生变化 , 血清 A C T H 和
皮质酮水平明显增高 ,在实验的最后一周稳定在较高水平 。
本模型实验过程具有较好的可重复性 , 应激刺激开始时
间 、持续时间具有最大可能随机性 , 最大限度地量化了实验条
件 ,多重应激相结合 ,提高了应激刺激实施效率 。 虽然模型组大
鼠一般行为由实验之初的兴奋状态逐渐进人抑制状态 ,体重增
长和食物利用率逐渐下降 , 但由于刺激的多重性和随机性 ,大
鼠的应激反应一直处于较高兴奋状态。 因此 ,为复制应激性疾
(上接第 36 页 )
从临床应用效益分析 ,采用川木香醋酸乙醋提取物及其制
剂 ,在传统用药经验的基础上辨证施治 ,必要时作为化学药物
治疗的辅助用药 ,避免长期抑酸治疗后停药引起胃酸分泌反弹
性升高 ,降低溃疡病复发率 ,减少不良反应 ,增加临床应用的有
效性 。
致谢 : 成都中医药大学民族医药研究所的在读硕士研究生王战
国 、 王兰 、 肖莹莹参与了本研究的前期工作。
参 考 文 献 ( R e fe r e n e e s )
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病模型提供良好的条件。
4 结论
本研究采用多重应激刺激建立了应激模型 ,动物表现出与
人类应激状态下相似的主要症状 , 应邀反应处于高反应状态 ,
致病机率高 ,提示本实验所建立的动物模型可以用于一般应激
性疾病的研究 。
参考 文 献《eR fe er nc e s )
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