全 文 ：·药品检验·
ICP-AES测定漏芦水煎液及其有机溶剂萃取液中微量元素萃取率
丁健华1 ,李凤2 ,熊松2 ,廖振环2(1.广东佛山科技学院 ,广东 佛山 528000;2.武汉大学化学与环境科学学院 ,湖北武汉 430072)
摘要:目的　中药漏芦水煎液及其有机溶剂萃取液中微量元素提取率及比较研究。 方法　采用等离子体原子发射光谱法
(ICP-AES)。测定了不同提取液中微量元素含量计算并比较了提取率。结果　中药漏芦各种剂型中微量元素含量(萃取率)是
不同的。结论　提示了中药中微量元素种类 、含量与其存在形态对其药效的关系。
关键词:等离子体原子发射光谱法;漏芦水煎液;微量元素;萃取率
中图分类号:R284.2　文献标识码:A　文章编号:1001-2494(2000)09-0619-03
Investigation on the extraction rates of the trace elements from water leaching solution and organic reagent leach-
ing solution of Rhaponticum uniflorum using ICP-AES
DING Jian-hua1 ,LI Feng2 ,XIONG Song2 ,LIAO Zhen-huan2(1.Department of Chemistry and Chemical Engineering , Foshan Univer-
sity , Foshan 528000 , China;2.College of Chemistry and Environment Science , Wuhan University , Wuhan 430072 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　The extraction rate of the trace elements in Chinese Medicine Rhaponticum uniflorum with water leaching and
organic reagent leaching solution was comparatively studied.METHODS　The inductively coupled plasma atomic emission spectrometry(ICP-
AES)was used for determination.The extraction rates of the trace elements with different preparations were determined and the comparative
study was made.RESULTS　The extraction rates of the trace elements with different preparations were different.CONCLUSION　The rela-
tionship between the contents of the trace elements in Chinese Medicines and their clinical effects was explored.
KEY　WORDS:ICP-AES;water leaching solution of Rhaponticum uniflorum;trace elements;extraction rate
　　微量元素是中药归经和药性物质基础的重要组
成部分 ,其特点是数量少 ,功能作用大 ,对人类健康
的作用已引起世人的广泛关注[ 1] 。中药水煎液(汤
剂)是传统常用剂型 ,因此研究中药水煎液中的无机
微量元素的种类和含量及其存在形态对探讨中药真
正的有效成分及药理作用具有重要意义 。
中药漏芦具有清热解毒 ,舒筋通脉 ,抑制动脉粥
样硬化 ,抗脂质过氧化 ,减弱血小板聚集及促进免疫
的作用[ 2 ～ 4] ,已开始受到临床应用的关注 。漏芦及
其制剂中微量元素的含量作者尚未见报道 ,我们以
ICP-AES测定了漏芦 、漏芦水煎液(汤剂)、水煎液的
乙酸乙酯萃取液 、漏芦乙醇提取液(酊剂)等不同剂
型中的 Fe ,Mn ,Cu ,Cr ,Zn ,Ti ,Al ,Ba 和 Sr 等 ,元素的
含量并计算在不同剂型中各元素的浸取率或萃取
率 ,比较其差异性 ,初步探讨中药漏芦水煎液中微量
元素及其可能存在形态对临床药理作用研究的意
义。
1　仪器 、材料与方法
1.1　仪器及工作条件
2 kW高频等离子体发生器(北京广播器材厂):
工作电压4.0 kV ,阳极电流 0.7 A ,栅流 110 mA;三
层同轴石英等离子矩管 ,同轴型气动高盐雾化器 ,冷
却气(Ar)流量为 16 L·min-1 ,载气(Ar)0.8 kg·cm2 ,
PGS-2平面光栅光谱仪 ,光栅刻数 1302条·mm-1 ,闪
耀波长 290.0 nm ,中心波长 280.0 nm 或 400.0 nm;
观察高度:负载线圈上方 9 mm ,曝光时间 40 s ,天津
紫外 Ⅰ型感光板;Zeiss G Ⅱ测微光度计 , S 标尺 ,日
本夏普 PC-1500微型数据处理机 ,各元素分析线波
长(nm):Fe 259.9 ,Mn 257.6 , Cu 324.8 ,Ti 323.4 , Cr
283.6 ,Zn 334.5 ,Al 308.3 , Ba 455.4 ,Sr 407.8。
1.2　主要试剂与标准溶液系列
HClO4 ,HNO 3·HCl ,乙醇 ,乙酸乙酯均为分析纯
或优级纯 ,金属 In为光谱纯 ,蒸馏水为二次蒸馏水。
各元素的标准储备液均采用光谱纯金属或氧化物单
独配制而成 ,其浓度为 1 mg·ml-1 。使用时以 5%
HCl逐级稀释配制成 Fe ,Mn ,Cu , Ti , Cr ,Zn ,Al , Ba和
Sr的标准溶液系列 , 内均含内标元素 In (20 μg·
ml
-1)。
1.3　试样制备
1.3.1　漏芦全药[ Rhaponticum uniflorum (L.)DC.,
·619·中国药学杂志 2000年 9月第 35卷第 9期　　　　　　　　　　　　　 Chin Pharm J , 2000 September , Vol.35 No.9
湖北中医学院附属中医院] 　将漏芦药材洗净沙 、泥
后 ,用蒸馏水反复清洗 ,晾干后放在烘箱(102℃)中
烘干 ,粉碎过180目筛制得粉末 。准确称取1 g置于
定氮瓶中以 HNO3-HClO4(4∶1)消化分解后 ,加入内
标元素 ,用水稀释至 25 ml。
1.3.2　漏芦水煎液　称取25 g漏芦粉末 ,加入一定
量蒸馏水煎煮 2 h ,滤液定容至 50 ml ,取此水煎液进
行离心分离后 ,准确移取上层清液 2 ml ,以 HNO 3-
HClO 4(4∶1)消化分解后 ,加入内标元素 ,水定容至
25 ml。
1.3.3　乙醇提取液　准确称取漏芦粉末 10 g 于
100 ml锥形瓶中 ,加入无水乙醇 50 ml ,沸水浴加热
浸取 1 h ,过滤 ,然后反复用无水乙醇洗涤滤渣 ,将所
得浸取液常压蒸馏除去溶剂 ,提取物以 HNO 3-HClO4
(4∶1)消化后 ,加入内标元素 ,水定容至 25 ml。
1.3.4　乙酸乙酯萃取液　准确移取 20ml水煎液于
100 ml分液漏斗中 ,以乙酸乙酯为溶剂反复萃取分
离其中的有机成分 ,至萃取液为无色 ,合并萃取液 ,
用二次蒸馏水洗涤乙酸乙酯提取物 ,常压蒸馏除去
溶剂。提取物以 HNO3-HClO4(4∶1)消化后加入内标
元素 ,水定容至 25 ml。
2　结果与讨论
2.1　水煎液与乙醇浸取液比较分析
以 ICP-AES法对漏芦全药粉末 、水煎液(汤剂)、
乙醇浸取液(酊剂)进行测定 ,结果见表 1。
表 1　水煎液与乙醇浸取液微量元素含量及其提取率
元素 漏芦全药 μg·g-1
漏芦水煎液
μg·g-1
水煎液提取率
%
乙醇浸取液
μg·g -1
乙醇浸取率
%
Fe 9.11×102 15.95 1.75 5.97 0.66
Mn 91.67 28.28 30.85 0.82 0.89
Cu 16.62 9.66 58.12 0.31 1.87
Cr 5.48 0.75 13.69 0.51 3.58
Zn 53.18 14.21 26.72 <2.5 <4.7
Ti 36.64 7.12 19.43 0.29 0.79
Al 1.06×103 14.53 1.37 1.67 0.16
Ba 71.96 5.84 8.12 <0.25 <0.35
Sr 1.14×102 10.08 8.84 <0.25 <0.88
　　以上实验结果表明:①水煎液(汤剂)中微量元
素的提取率比酊剂要大。水煎剂是中医临床用药的
传统常用剂型 ,研究水煎液 ,探索其微量元素种类和
含量对中药药效成分与药理的研究具有指导意义 。
②中药化学组成的复杂性可能导致微量元素水提取
率的差异性 。漏芦原料中含量高的元素 ,在水煎液
中含量不一定高 ,如 Fe ,Al , Sr 等元素。由此说明 ,
单从漏芦原药中微量元素的种类 、含量来推测其微
量元素与临床药效的关系是不全面的 ,必需注意到
用药的相应剂型 。③漏芦水煎液中提取率较高的元
素有Mn ,Cu ,Zn ,Ti等 ,而已知Zn是构成多种蛋白质
分子所必需 ,是归肾经的基础元素 ,Mn参与许多酶
促反应 ,Ti能刺激吞噬细胞 ,使免疫作用增强 ,而 Cu
能调节心搏 ,它在人体的各种氧化还原反应中表现
出巨大的多能性 ,这些微量元素具有抑制动脉粥样
硬化 ,抗脂质过氧化功效与较强的生理作用 。漏芦
水煎液中富含Mn ,Cu ,Zn等;与其显著地降血脂 、消
蛋白尿等临床药理活性必然有联系。
2.2　水提取液及其乙酸乙酯萃取液比较分析
同样采用 ICP-AES考察了水提取液的乙酸乙酯
萃取液中9种微量元素含量及乙酸乙酯萃取液中各
元素相对水煎液的中的含量比值(萃取率)。结果见
表 2。
表 2　漏芦水煎液 、乙酸乙酯萃取液中微量元素含量及萃取
率
元素 漏芦水煎液 μg·g-1 乙酸乙酯萃取液 μg·g-1 萃取率 %
Fe 15.95 4.98 31.22
Mn 28.28 2.91 10.29
Cu 9.66 1.04 10.77
Cr 0.75 0.08 10.60
Zn 14.21 10.64 74.88
Ti 7.12 0.38 5.33
Al 14.53 1.29 8.88
Ba 5.84 0.90 15.41
Sr 10.08 0.30 2.97
　　以上实验结果表明:①以中等极性的有机溶剂
乙酸乙酯萃取水煎液 ,与水煎液相比 ,大部分微量元
素在乙酸乙酯萃取液中的含量均明显偏低 。乙酸乙
酯萃取率较高的 Fe , Zn ,Cu ,Mn 等元素是典型的金
属离子 ,根据埃-威廉姆士序列[ 5] ,它们均有较强的
形成配位化合物的能力 。文献报道[ 6] 中药的乙酸乙
酯提取物中一般含有蒽醌 、黄酮类衍生物 。而蒽醌 、
黄酮类衍生物是较强的金属离子配体 ,这些元素在
水煎液中可能与之络合以金属有机络合物状态存在
被乙酸乙酸萃取 ,因此 ,萃取率较高。 ②水煎液中有
机 、无机两类成分兼备 ,就抗病作用而言 ,金属有机
络合物的脂溶性较大 ,容易透入细胞内 ,故能显示出
较强的生理活性 ,说明金属有机络合物比单独无机
离子有更强的药理活性 ,提示药物的药理活性可能
是有机与无机两类成分协同作用的结果。
3　结　论
水煎液中各元素提取率较大 ,而 Fe ,Zn , Cu ,Mn
等元素在水煎液中被乙酸乙酯萃取的量相对较高 ,
说明中药水煎液中无机成分可能与其中的有机成分
呈现某种形式的结合状态存在而被萃取。提示了中
药中微量元素及其存在状态对临床药理作用的研究
的意义 。
·620· Chin Pharm J , 2000 September , Vol.35 No.9　　　　　　　　　　　　 中国药学杂志 2000年 9月第 35卷第 9期
参考文献
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[ J] .中国免疫学杂志 , 1993 , 9(6):381.
[ 5] 唐任环 ,宿明明 ,刘元方.化学元素对生物体作用规律性探讨
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量元素的分布及含量[ J] .中国药学杂志 ,1993 , 28(9):534.
(收稿日期:2000-01-11)
高效毛细管电泳测定胸腺肽中α1 的含量
张海松 ,邹晓军 ,胡军高 ,刘卫红 ,许可 (空军广州医院肝病研究所 ,广东 广州 510602)
摘要:目的　测定胸腺肽溶液中α1 的含量。方法　以胸腺肽α1 纯品作为标准品 , 用高效毛细管电泳测定 , 未涂层石英毛细管
柱(78 cm×30μm);电泳缓冲溶液为 0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH 7.0);运行电压 15 kV;负压进样(66.7 kPa);温度 25℃;检
测波长200 nm;进样时间 1 s。用比例色谱的方法确定胸腺肽溶液中α1 峰的纯度。结果　胸腺肽α1 标准溶液的线性范围50 ～
800 μg·ml-1 ,低 、中 、高 3种浓度的平均回收率分别为87.2%, 91.0%, 97.4%。分离出的胸腺肽溶液中α1 的组分峰为单一组分
峰 , 3批胸腺肽溶液中α1 的质量百分比分别为 1.24%, 0.812%, 0.732%。结论　该方法可用于胸腺肽质控中α1 含量的测定。
关键词:高效毛细管电泳;胸腺肽;胸腺肽α1
中图分类号:R927.2　文献标识码:B　文章编号:1001-2494(2000)09-0621-02
Determination of thymosin alphal1 amount in thymopeptide by high performance capillary electrophoresis
ZHANG Hai-song ,ZOU Xiao-jun ,HU Jun-gao ,LIU Wei-hong ,XU Ke(Institute of Hepatopathy of Guangzhou Hospital , Air Force
of PLA , Guangzhou 510602 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To determine the content of thymosin alphal1 in thymopeptide.METHODS　High Performance Capillary elec-
trophoresis (HPCE)analysis method was used at 25℃, using thymosin alphal1 as the standard reference.The separation was performed on a 78
cm×30 μm uncoated sillica capillary column with the voltage 15 kV.The electrophoresis solution was 0.05 mol·L-1 phosphate buffer(pH 7.
0).The sample was detected with a UV-detector at 200 nm.RESULTS　The linearity was obtained over the range of 50～ 80 μg·ml -1.The
average recoveries of the check sample at the low ,middle and high concentrations were 87%, 91% and 97%, respectively.The mass content of
thymosin alpha1 in 3 lots of thymopeptide solution were 1.24%, 0.812% and 0.732% respectively.CONCLUSIONS　The method could be
used to determine the content of thymosin α1 in thymopeptide for quality control.
KEY　WORDS:high performance capillary electrophoresis;thymopeptide;thymosin alphal1
　　胸腺肽首先被发现具有很高活性的组分为胸腺
肽α1 ,它由28个氨基酸组成 ,相对分子质量 3108 ,等
电点 4.2。国内外文献报道胸腺肽α1 对乙肝有较好
的疗效[ 1 ～ 2] ,但 α1 价格十分昂贵 , 患者难以承受 。
张宜俊等[ 3]用大剂量国产胸腺肽治疗慢活肝 ,取得
较好的效果。为了给国产胸腺肽治疗乙肝提供科学
依据 ,我们以 α1 纯品为对照品 ,用高效毛细管电泳
分离测定胸腺肽中α1 的含量 。
1　仪器与试剂
270A-HT高效毛细管电泳系统(美国 ABI生物
技术公司);未涂层石英毛细管柱(78 cm×30μm ,河
北永年光导纤维厂);PETC4 色谱工作站 。
胸腺肽 α1(1.6 mg 支 , ZADXIN , Sciclone pharm-
ceticals ,广州市药检所生化室提供),胸腺肽溶液(4
mg·ml-1 ,广东宏远生化制药厂);其余试剂均为分析
纯 。
2　实验方法
2.1　电泳条件
每次测定前用 0.1 mol·L-1HCl及缓冲液冲洗毛
细管各 5 min。运行电压 15 kV;负压进样(66.7
kPa);进样时间 1 s;测定温度 25℃;检测波长 200
nm;电泳液为 0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液(pH 7.0),
用 0.45μm 滤膜过滤 。
2.2　胸腺肽α1 标准品的配制
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