全 文 ：2010年
第 3期 　　　　　　
青海师范大学学报(自然科学版)
Journal of Qinghai No rmal U niversi ty(Natural Science)　　　　　　
2010
No.3
收稿日期:2010-06-23
作者简介:韩鸿萍(1974-),女(汉族),青海乐都人 ,理学硕士 ,青海师范大学讲师.
水母雪莲花中总黄酮的提取工艺及含量测定研究
韩鸿萍1 ,王发春2
(1.青海师范大学 化学系 ,青海 西宁　810008;2.青海师范大学 生命与地理科学学院 ,青海 西宁　810008)
摘　要:本文采用水提法 、有机溶剂提取法 、超声波提取法提取水母雪莲花中黄酮化合物.以芦丁为对照品 ,对其进行络合显
色 ,用紫外及可分光光度法测定水母雪莲粗提物中总黄酮的含量 , 回归方程为 A=1.20932C-0.07937 , r=0.9973.3种提
取方法相比 ,超声波提取法提取总黄酮的含量高 ,更容易实现产业化生产.
关键词:水母雪莲;分光光度法;黄酮;提取工艺
中图分类号:O157.5　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1001-7542(2010)03-0068-03
水母雪莲花是一种生长在海拔 3900-5000米的多年生草本植物 ,生于高山流石滩或冰雪碎石中 ,
主要分布于青海 、甘肃 、四川 、云南 、西藏等地.水母雪莲花中含有的黄酮类化合物 ,具有增强免疫 、抗氧
化 、抗炎 、镇痛等功效 ,主治炭疽 、风湿性关节炎 、高山反应等症[ 1] .在许多中药复方制剂中均有其成分 ,
用途较广.国内外文献对黄酮的测定多采用 HPLC法[ 2] 、比色法等 , HPLC 法需要较多单体标准品 ,且
受实验条件所限 ,本文采用水提法 、有机溶剂提取法 、超声波提取法对水母雪莲花中总黄酮进行了提取 ,
以芦丁为对照品 ,利用分光光度法测定了水母雪莲花中总黄酮的含量 ,该方法简便 、快速 、重现性好.
1　仪器 、试剂和样品
1.1　实验材料
水母雪莲花:2009年 9月采自青海省果洛州班玛县 ,经青海师范大学生命与地理科学学院马继雄
副教授鉴定为水母雪莲花;洗净 ,在 100℃条件下烘干 ,粉碎后过 50目筛 ,备用.
1.2　仪器与试剂
仪器:TU-1901型双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器公司);MD100-2型电子分析
天平(上海天平仪器厂);F9-160 万能粉碎机(河南省荥阳市三张机械厂);DZKW -4型电子恒温水浴
锅(黄骅市新兴仪器厂);101A-3型电热鼓风干燥箱(上海实验仪器有限公司);超级恒温器(上海市实
验仪器厂).
试剂:芦丁对照品 BR含量≥95%(购于国药化学试剂有限公司).
甲醇 、亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠等均为分析纯;水为单蒸水.
2　实验方法
2.1　对照品溶液的制备
准确称取芦丁标准品 35.2mg ,置于 100mL 容量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,准确称取
10mL 上述配制好的溶液 ,用甲醇稀释并定容至 100mL 容量瓶中 ,作为芦丁标准储备液(0.352mg/
mL).
2.2　标准溶液的制备
精密吸取 1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0mL 芦丁标准储备液(0.352mg/mL),分别置于 25 mL 容量瓶中 ,
分别加 30%甲醇溶液至 6mL , 再依次加入 5%NaNO 3溶液 1mL 摇匀 ,放置 5min , 依次加入 10%
DOI :10.16229/j.cnki.issn1001-7542.2010.03.008
第 3期 韩鸿萍 ,等:水母雪莲花中总黄酮的提取工艺及含量测定研究
A L(NO 3)3 溶液 1mL ,摇匀 ,静置 10min 后 ,再依次加入 10%NaOH 溶液1mL ,最后用 30%甲醇溶液定
容至刻度 ,密塞摇匀 ,放置 15min后 ,以相应试剂空白为参比 ,立即用紫外及可见分光光度计在 410nm
波长处测定吸收度.以芦丁对照品浓度(C)与吸光度(A)进行线性回归 ,得回归方程为 A=1.20932C-
0.07937 , r=0.9973 , 芦丁对照品浓度在 0.1-0.5μg/mL 范围内呈良好线性关系.
2.3　样品溶液的制备
2.3.1　水提取法　称取水母雪莲花样品 5.00g ,用滤纸包好 ,置 200mL 圆底烧瓶中 ,加水适量 ,进行回
流提取 ,提取后抽滤 ,滤液在 60℃条件下真空浓缩干燥后 ,得浸膏 1 ,浸膏用水溶解 ,转移至 50mL 容量
瓶中 , 加水稀释至刻度 ,摇匀 ,既得待测样品 1.
2.3.2　有机溶剂提取法　称取水母雪莲花样品粗粉 5.00g ,用滤纸包好 ,置 200mL 圆底烧瓶中 ,加
70%甲醇适量 ,进行回流提取 ,提取后抽滤 ,滤液在 60℃条件下真空浓缩干燥后 ,得浸膏 2.浸膏用 30%
甲醇溶液溶解 ,转移至 50mL容量瓶中 , 加 30%甲醇溶液至刻度 ,摇匀 ,既得待测样品 2.
2.3.3　超声波提取法　称取水母雪莲花样品 5.00g ,置于 250mL 具塞锥形瓶中 ,加入 70%甲醇 ,80℃
超声法提取 30min ,冷却 ,用 70%甲醇少量多次冲洗锥形瓶及药渣 ,并入提取液中 ,提取后抽滤 ,滤液在
60℃条件下真空浓缩干燥后 ,得浸膏 3.浸膏用 30%甲醇溶液溶解 ,转移至 50mL 容量瓶中 , 加 30%甲
醇溶液至刻度 ,摇匀 ,既得待测样品 3.
2.4　测定
精密吸取待测试样溶液 3mL ,置于 25mL 容量瓶中 ,分别加 30%甲醇溶液至 6mL ,再依次加入 5%
NaNO 3溶液 1mL 摇匀 ,放置 5min , 依次加入 10%AL(NO3)3溶液1mL ,摇匀 ,静置 10min 后 ,再依次加
入 10%NaOH 溶液 1mL ,最后用 30%甲醇溶液定容至刻度 ,密塞摇匀 ,放置 15min后 ,用紫外及可见分
光光度计在 410nm波长处测定吸光度(以试液空白为参比),由线性回归方程计算待测样品溶液中总黄
酮百分含量.不同提取方法提取结果见表 1.
表 1　3 种提取方法提取效果比较
提取方法 料液比 提取时间(min) 总黄酮含量(%)
水提取 1∶20 180 0.9049
有机溶剂提取 1∶20 180 0.9446
超声波提取 — 30 1.0231
3　结果与讨论
用 NaNO 3 -A L(NO3)3 -NaOH 体系分光光度法测定水母雪莲中总黄酮的含量 ,用超声波法提取
30min的提取物中测得的黄酮含量为 1.0231%,高于水提法和有机溶剂提取法.超声波法是在超声场
中破坏植物细胞壁 ,在 80℃条件下物料在溶剂中溶解能力增强 ,提取 30min效果好 ,避免了水提法和有
机溶剂提取法耗时的特点 ,达到快速且省溶剂的目的.该工艺具有实用和经济科学的特点 ,同时该工艺
操作简单 、步骤少 、容易实现产业化生产.从而为水母雪莲的进一步开发提供了基础依据.
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(下转第 79页)
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第 3期 杨萍 ,等:青海湖水面蒸发量计算
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Calculation of Qinghai Lake Evaporation
Y ANG Ping
1 ,CAO Sheng-kui 1 ,MENG Cai-hong2 ,WANG Cui-yun3
(1.School of Li fe and Geog raphy Sciences , Qinghai No rmal Universi ty , Xining 810008 , China;
2.Schoo l of Environment and Planning , Liaocheng Unive rsity , Liaocheng 252059 , China;
3.Lanzhou City Co llege , Lanzhou 730070 , China)
Abstract:The monthly and annual evapo ration of Qinghai Lake a re calculated f rom 1960 to 2006
on the basis o f me teorolo gical data f rom w eather stations around it w ith mended-and-ex tended Pen-
man fo rmula acco rding to characteristics o f the plateau lake.The re sul ts show :the average value of 47
years is 924.3mm , ranging f rom 761.1mm in1989 to a maximum 1066.2mm in 1979.It i s more exact
considering the impact of the underw ater heat f lux on the w ater body.
Key words:water evapo rat ion;Penman fo rmula;Qinghai Lake
(上接第 69页)
Studies the Determination of the Content of Total Flavones and Extraction
Technology in Saussurea Medusa Maxim
H AN Hong-p ing ,WANG Fa-chun
(1.Chemist ry department of Qinghai No rmal U niversi ty , Xinning 810008 ,China;
2.Life and Geology Science Faculty o f Qinghai N ormal University)
Abstract:This art icle review s the technolog y on ext raction of w ater and ex t raction of orgnic sol-
vent and ex traction o f rhapont inum.the three technolog y ex tract the flavones compounds f rom Saus-
surea medusa Max im.The f lavones w as reference standard and the concert ration of flavones w as de-
termined by UV spect ropho tome ter , then found the equation of curve is A=1.20932C-0.07937 , r=
0.9973.By contrast the three technolog y , the ext raction of rhapontinum is bet ter than those technolo-
gy and can be easily reached.
Key words:Saussurea medusa Maxim ;spect rometric method;Flavonoids;ex t raction technolog y
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