全 文 ：摘 要:比较不同产地苣荬菜对自由基的清除作用。结果表明:大庆地区的苣荬菜对羟自由基的清除作用较为显著;饶河地区
的苣荬菜对超氧自由基清除效果较好;不同地区的苣荬菜对自由基的清除作用存在一定的差异。
关键词:黑龙江;苣荬菜;自由基;清除作用
中图分类号:TS201.2
StudyontheRadicalScavengingEfectofSonchusarvensisL.inHeilongjiangProvince
DaiLingyan1,ZhuDan1,XueJun2
(1.ColegeofLifeScienceandTechnology,HeilongjiangAugustFirstLandReclamationUniversity,Daqing163319;
2.VeterinaryMedicineBranchofGuangMingChemicalengineeringFactory,JiNan)
Abstract:TheradicalscavengingefectindiferentzoneofHeilongjiangprovincewasstudiedinthispaper.Theresultsshowedthat:
ThesonchusarvensisLinDaqingregionhasthestrongeliminatinghydroxylradicalscavengingefect,thesonchusarvensisLinRaohe
regionhasthebetereliminatingsuperoxidefreeradicalscavengingefect,andtheeliminatingradicalscavengingefectindiferentzone
hassomedistinctness.
Keywords:Heilongjingprovince;SonchusarvensisL.;radical;scavengingefect
苣荬菜(SonchusbranchyotusL)又名苦菜、牛舌
头、苦葛菜、取麻菜等,属菊科多年生草本植物[1]。苣荬
菜营养成分极其丰富,含有丰富的钙、镁、锰、钛、硒和
锌等多种无机元素。研究表明:每100g鲜品中含碳水
化合物11g、蛋白质3.6g、脂肪1.2g、粗纤维2.1g、胡
萝卜7.35mg、维生素C47mg、维生素B10.03mg、微生
素E20.39mg、尼克酸1.9mg、钙216mg、磷115mg、铁
12.4mg、其含铁量之多列野菜之前茅。
苣荬菜既有较高的营养价值还有较高的药用价
值。中药大辞典记载,苣荬菜具有清热解毒、活血化
淤、化腐生肌等功能,用于治疗肠痈、疮疥及产后淤
血、腑痛等症[1,2]并具有降血压和降胆固醇作用、抗
菌作用、抗心率失常作用、抗肿瘤作用、治肝和保肝
作用。苣荬菜中嫩茎叶含水分 88%,蛋白质 3%,脂
肪1%,氨基酸17种,其中精氨酸、组氨酸和谷氨酸含
量最高,占氨基酸总量的43%。并具有适应广泛、抗逆
性强、耐旱、耐寒、耐贫瘠、耐盐碱的优点。苣荬菜为纯
绿色食品,可直接生食,也可炒菜、做汤等,也可加工
为清汁饮料[3]。苣荬菜具有很强的适应性,不仅耐寒、
耐干旱,而且在酸性、碱性土壤中都能生长,即使在盐
分高达0.5%的富盐垦区也能生长,分布十分广泛。
自由基在生命科学、医学、农学、化学等方面成
为一个非常活跃的研究领域[4,5]。自由基产生于机体
内的许多氧化还原过程,他们可由特定的酶(超氧化
物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶等)捕
获或破坏,因此,机体自由基的产生和清除处于一种
动态平衡。如果这个平衡被打破,机体内就会产生过
量的氧自由基而对机体造成伤害,如引起脂质过氧
化而改变生物膜结构及功能,损伤,使蛋白质变性及
酶活力丧失等,这些危害将直接或间接地导致炎症、
衰老、心血管疾病及肿瘤的发生[6]。
调动人体内源性的自由基清除系统及补充和摄
收稿日期:2008-01-09
作者简介:戴凌燕(1977-),女,讲师,黑龙江八一农垦大学硕士研究生毕业,现主要从事植物生理生化、农产品加工的教学与科研
工作。
第20卷 第1期
2008年 2月
黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报
JournalofHeilongjiangAugustFirstLandReclamationUniversity
20(1):1~4
Feb.2008
文章编号:1002-2090(2008)01-001-04
黑龙江省各地苣荬菜对自由基的清除作用研究
戴凌燕 1,朱丹 1,薛军 2
(1.黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆 163319;2.济南市光明化工厂兽药分厂)
文献标识码:A
黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 第20卷
入富含酚类、多糖等天然物质,已成为保健食品行
业、制药行业的开发热点。研究开发苣荬菜提取物体
外清除羟自由基、超氧自由基效果,可为清除人体自
由基、天然食药研究拓展技术思路。本文利用分光光
度法检测不同地区苣荬菜提取物对羟自由基和超氧
阴离子自由基的清除效果,为充分开发利用这一天
然资源提供理论参考。
1 材料与方法
1.1试验材料及试剂
1.1.1试样的采集
采集的全茎无花苣荬菜来自黑龙江省的呼玛、
甘南、大庆、呼兰、牡丹江、八面通、饶河、双鸭山、伊
春这9个地区境内,如图1。
1.1.2试剂
乙醇,水杨酸,邻苯三酚,过氧化氢,FeSO4,Tris,
浓HCl等均为分析纯。
1.1.3试验仪器
W201B恒温水浴锅,上海申胜生物技术有限公
司;LD4-2A离心机,北京医用离心机厂;SHB-Ⅲ循
环水式多用真空泵,郑州长城科工贸有限公司;ALC-
210.4电子天平,ACCULAB;202-4A型电热恒温干燥
箱,天津泰斯特仪器有限公司;FW80型微型高速万
能试样粉碎机,天津市泰斯特仪器有限公司;722光
栅分光光度计,上海精密科学仪器有限公司;GS型
冷凝回流装置,威海化工器械有限公司。
1.2试验方法
1.2.1原料预处理
将从黑龙江省各地区挑选的全株、无花苣荬菜
洗净后,剔除糟粕,洗净。阴干,待没有水分时放入恒
温干燥箱中65℃烘干,取出粉碎80目过筛,称量。
1.2.2苣荬菜清除自由基提取物制备的工艺流程
取各地区苣荬菜5g,用35%乙醇浸润0.5h,然
后于20℃料液比1∶30回流2h,旋转蒸干,冷却至室
温用于清除羟自由基(OH·);用25%乙醇浸润0.5h,
然后于 60℃料液比 1∶25回流 2.5h,旋转蒸干,冷却
至室温用于清除超氧自由基(O2-)。
1.2.3苣荬菜提取物清除羟自由基(OH·)原理
根据Fenton反应,OH·具有很高的反应活性,存
活时间短,但在反应体系中加入水杨酸,能有效地捕
捉OH·并产生有色产物,该产物在510nm处有强吸
收,若加入具有清除功能的被测物,便会与水杨酸竞
争,从而使有色产物的生成量减少,采用固定反应时
间法,在510nm处测量含被测物反应液的吸光度,
并与空白液比较,便能测定被测物对其的清除作用。
其清除率计算公式为:清除率%=(A0-As)/A0×100%。
其中 A0为空白对照吸光度,As为加入被测物后吸
光度。按照 Smirnof等方法改进,在 25mL比色管中
依次加入 6mmol·L-1FeSO4、2mL,6mmol·L-1水杨
酸2mL及不同体积的浓缩液加蒸馏水至 8mL,最后
加2mL、6mmol·L-1过氧化氢启动反应,静置10min,
在510nm处测其吸光度,吸光度越低,OH·的清除效
果越好。每试样测定3次。
1.2.4苣荬菜提取物清除超氧自由基(O2-)原理
在 10mL具塞试管中加入 0.4mL样品和
4mLTris-HCl缓冲溶液(50mmol·L-1,pH8.2)于25℃
恒温水浴中温育 20min。加入 0.4mL邻苯三酚
(2.5mol·L-1,在25℃下提前温育)启动反应。反应在
25℃下进行4min,每隔30s于410nm处记录一次
A值,将所得 A410值与时间 t(min)进行分析。计算清
除率 S=(V0-V)/V0×100%,式中,V0为无清除剂时的
邻苯三酚自氧化反应速率;V为有清除剂时的反应速
率。每试样测定3次。
2 结果与分析
2.1苣荬菜提取物对羟自由基(OH·)的清除效果
由图2可以看出,来自大庆地区的试样是 8个
地区中羟自由基清除效果最好的,清除率为83.2%;
其次为饶河地区,清除率为76.77%;最差是伊春地
区,清除率为 47.1%,其中牡丹江和呼兰地区相差不
大。各地区苣荬菜中清除羟自由基的成分,在不同的
地理种群之间显示出的含量差异可能是缘于种群间
的遗传差异,亦有可能是受不同环境因子的影响而
表现出的差异,有文献报道植物中清除羟自由基的
物质受气候和温度的影响,而8个地区的气候和温
图1 试样采集地分布图
Fig.1Distributeddiagramofsamplecolections
2
第1期
2.2苣荬菜提取物对超氧自由基(O2-)的清除效果
由图3可以看出,来自饶河地区的试样是 9个
地区中对超氧自由基清除效果最好的,清除率为
75.12%;其次是大兴安岭呼玛地区 62.8%;最差是穆
棱,清除率为 12.1%;大庆和大兴安岭地区清除率相
差不大。不同地区的苣荬菜中对超氧自由基具有清
除作用的成分有一定的差异,这与土壤中的微量元
素有关,还可能与不同采集地点的土地肥力有很大
的关系,这些因素都可能影响超氧自由基的清除。
度是存在显著差异的。因此不同地区采集的苣荬菜
清除羟自由基的提取物含量是不同的,所以清除率
有所不同。
表1 苣荬菜提取物清除自由基的多重比较分析
Table1MultiplesignificantanalysisoffreeradicalscavengingefectofSonchusarvensisL.extract
图3 各地区苣荬菜提取物对超氧自由基清除效果
Fig.3EfectofradicalscavengingofSonchusarvensisL.extractindiferentzoneonSuperoxidefree
注:表中字母不同的即为组间差异显著(小写字母)或极显著。
书
羟自由基清除效果的多重比较结果 超氧自由基清除效果的多重比较结果
地区 平均值 ! ! # $ ! ! # % 地区 平均值 ! ! # $ ! ! # %
大庆 &’# ( ) * 呼玛 +(# & , -
饶河 .+# & , - 大庆 +%# / 0 1
呼玛 .$# / 0 1 牡丹江 /$# & 2 3
呼兰 .# ( 2 3 呼兰 ’/# ’ 4 5
牡丹江 .# ( 2 3 甘南 ’/# % 6 7
八面通 +.# 8 4 5 伊春 ’’# . 9 :
甘南 +.# ’ 6 7 双鸭山 (&# $ ; <
伊春 /.# % 9 : 穆陵 %(# % = >
饶河 .$# % ) *
图2 各地区苣荬菜提取物对羟自由基清除效果
Fig.2Hydroxylradicalscavengingefectof(SonchusarvensisL.)extractindiferentzone
戴凌燕等:黑龙江省各地苣荬菜对自由基的清除作用研究 3
黑 龙 江 八 一 农 垦 大 学 学 报 第20卷
2.3不同地区苣荬菜提取物清除自由基的显著性分
析
将上述结果进行方差分析可知,上述 8个地区
苣荬菜提取物对羟自由基清除效果差异极显著。
地区间对2种自由基清除效果的多重比较见表
1。
3 结论与讨论
3.1由图2和图3可以看出,在不同地区苣荬菜试样
中,大庆地区苣荬菜提取物对羟自由基清除效果最
好、饶河地区对超氧自由基清除效果最好,因此,可
以据此结论对苣荬菜在种植行业、食品行业、药品行
业开发研究中提供参考。
3.2苣荬菜在生长的过程中受生长环境、气候条件等
因素的影响较大,其富含的多糖、酚类、醇类等具有
一定的清除自由基效果的活性物质在植物体内含量
不同[7,8],因此,外界条件对苣荬菜清除自由基的影响
机理及活性成分的检测还有待于进一步的研究。
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