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煨制川木香的止泻作用及其物质基础研究



全 文 :加强青天葵的系统研究 , 用科学的方法阐明其化学成分 、药
理作用 、构效关系 、临床应用机理 , 寻找和扩大药源以充分发挥青
天葵药用价值 , 实现青天葵的可持续利用 , 使广西这一特产药材
得到更科学地开发应用。
参考文献:
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收稿日期:2009-11-30; 修订日期:2010-07-28
基金项目:四川省科技厅基金项目(No.07JY029-093)
作者简介:章津铭(1987-),男(汉族),四川内江人 ,现为成都中医药大学
在读硕士研究生 ,学士学位 ,主要从事中药新制剂研究工作.
*通讯作者简介:傅超美(1961-),男(汉族),四川简阳人 ,现任成都中医
药大学教授 ,博士研究生导师 ,博士学位 , 主要从事中药新制剂新剂型研
究工作.
煨制川木香的止泻作用及其物质基础研究
章津铭 ,傅超美* ,许丽佳 ,瞿燕 ,胡慧玲 ,
(教育部重点实验室 ,成都中医药大学药学院 ,四川 成都 610075)
摘要:目的 研究川木香炮制后的止泻作用 , 筛选煨制川木香止泻作用的药效部位。方法 通过小鼠抗麻油所致小肠性腹
泻实验 , 探讨川木香煨制前后止泻作用;采用在体 、离体两种模型 , 考察其止泻作用最强的部位。 结果 川木香煨品高剂
量(20g· kg-1· d-1)可显著抑制麻油所致小鼠小肠性腹泻(P<0.05),生品无此作用;川木香煨品石油醚部位可显著减
小小鼠小肠推进率(P<0.05), 且对正常情况家兔离体肠肌抑制作用最强 , 其抑制作用在终浓度为 1.2 ×10-5 ~ 1.08×
10-4g/ml范围下与正丁醇部位 、乙醇部位均有显著性差异(P<0.05), 呈一定的量效关系。结论 川木香煨制后具有抗腹
泻的作用 , 煨品石油醚部位为川木香的止泻作用相对较强的部位。
关键词:煨制; 川木香; 消化道; 药效部位
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.12.058
中图分类号:R285.5  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2010)12-3161-02
  川木香为菊科植物川木香 Vladimiriasouliei(Franch.)Ling
或灰毛川木香 Vladimiriasouliei(Franch.)Lingvar.cinaereaLing
的干燥根 , 主要分布于四川西北部民族地区 , 系川产道地药材 ,与
菊科植物木香 AucklandialappaDecne亲缘 ,均具有行气止痛的功
效 , 临床上常相互混用。 《中国药典》 2005年版木香功能与主治
项下规定煨木香实肠止泻 ,用于泄泻腹痛 , 但对煨制川木香的功
能主治并未作阐述 , 且目前川木香煨制后药效基础研究薄弱 [ 1] ,
因此川木香煨制后能否用于脾虚泄泻及其药效物质基础都亟待
考察。据文献报道 , 川木香药效成分主要是挥发油成分 [ 2] , 故本
试验研究川木香煨制前后醇提部位的消化道作用 ,并且筛选煨制
川木香药效物质基础 ,以便进一步揭示其作用机制。
1 材料
1.1 动物 KM小鼠 , 18 ~ 22 g, 四川省医学动物实验中心提供 ,
合格证号:SCXK(川)2008-24;日本大耳兔 , 2 ~ 3 kg, 成都中医
药大学实验动物中心提供 ,合格证号:SCXK(川)2004-14。
1.2 药品和试剂
1.2.1 工具药及试剂 颠茄磺苄啶片 , 哈药集团六厂 , 批号
080325;硫酸阿托品 , 杭州民生药业集团有限公司 , 批号
T08C204;蓖麻油 , 湖北科田药业有限公司 , 批号 Z42020991;台氏
液 , 配置方法参考相关文献 [ 3] 。
1.2.2 川木香生品 购于成都市五块石中药材市场 , 经本校卢先
明教授鉴定为 Vladimiriasouliei(Franch.)Ling的根 , 系药典载正
品药材 。
1.2.3 川木香煨品 根据 2005年版《中国药典》川木香项下的纸
煨工艺 , 结合急性毒性以及相关主要药效学实验 , 优化设计筛选
出的最优纸煨工艺参数制备而成 ,由成都中医药大学炮制教研室
提供。
1.2.4 药液制备 ①止泻作用研究:称取川木香生品及煨品各
50 g, 加入 8倍量 95%乙醇进行回流提取 2次 , 1 h/次 , 减压回收
至干膏 ,加入 10%吐温 -80配制成不同浓度溶液。 ②药效成分
筛选:同上述方法制得川木香煨品醇提液 , 减压回收溶剂 ,浓缩至
3∶1浓度(即每 3 ml药液中相当于含原生药 1 g), 将浓缩液置于
分液漏斗中依次加入石油醚(沸程 60 ~ 90℃)、氯仿 、醋酸乙酯 、
正丁醇 、乙醇 ,少量多次萃取至无色 , 将各萃取液浓缩成干膏 , 加
入 10%吐温 -80, 置于磁力搅拌器上使之溶解。
1.3 仪器 HW-400S恒温平滑肌槽(成都泰盟科技有限公司),
BL-420生物机能实验系统(成都泰盟科技有限公司), 压力换能
器 , 手术器械 , 200 μl可调式移液枪等。
2 方法 [ 4 ~ 6]
2.1 煨制前后对麻油所致小肠性腹泻的影响 选取 KM小鼠 , 雌
雄各半 ,随机分为 9组 ,每组 10只 ,即空白组与模型对照组(均灌
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胃给予 10%吐温 -80溶液),阳性组(灌胃给予颠茄磺苄啶混悬
液 1 mg/kg),川木香生品和煨品醇提部位的高 、中 、低剂量实验
组。各组单笼饲养于隔板上 , 隔板下垫滤纸 , 按 0.2 ml/10 g灌
胃 , 1次 /d, 连续给药 7 d。 禁食 16 h后 , 各组末次给药 30 min
后 , 除空白组外均按 0.2 ml/10 g灌胃给予蓖麻油 , 造模 30 min
后开始计时 , 1~ 4 h内每 h换滤纸 1次 , 采用腹泻指数作为评价
指标。
腹泻指数 =稀便率 ×平均稀便数。稀便率 =每只动物所排
的稀便数 /总便数;平均稀便数 =所有稀便级数 /稀便次数。稀便
级表示每只动物稀便的程度 , 以稀便浸渍滤纸的直径定级 , 分为
4级:<1 cm为 1级 , 1 ~ 1.9cm为 2级 , 2 ~ 3 cm为 3级 , >3 cm
为 4级
2.2 对小鼠在体小肠推进的影响 取 KM小鼠 , 雌雄各半 , 随机
分为 17组 , 每组 10只 , 即空白组(灌胃给予 10%吐温 -80溶
液),阳性组(灌胃给予硫酸阿托品), 各部位高 、中 、低剂量实验
组。各组均按 0.2ml/10 g灌胃 , 1次 /d, 连续给药 7d。禁食 16h
后 , 各组末次给药 45min后 ,每鼠灌胃 4%CMC-活性炭溶液 0.2
ml/只 , 20 min后脱颈椎处死。开腹 , 剪取幽门至回盲部的肠管 ,
轻轻将肠管拉直 , 测量总长度 , 将幽门至活性炭前沿的距离作为
其在小肠内推进距离。 活性炭推进率(%)=小肠推进距离 /肠
总长度 ×100%。
2.3 对家兔离体肠平滑肌的影响 取家兔猛击头部致死 , 迅速剖
腹 , 取近幽门端十二指肠约 10 cm, 置于盛有冷台氏液之器皿中 ,
沿肠壁剪去肠系膜 , 将肠管剪成 1.5 ~ 2 cm的小段备用。调节恒
温平滑肌槽 , 使水温保持在(37±0.5)℃。将压力换能器与 BL-
420生物机能实验系统连接。取兔肠一段 ,两端各穿一线 , 其中
一线固定于 L型通气管上 ,放入有 50 ml台氏液的浴漕内 ,固定L
型通气管 , 并调节恒温平滑肌槽 ,缓慢通入 95%O2和 5% CO2(2
个气泡 /s)。肠管另一端与压力换能器相连 ,加 1g负荷 ,打开 BL
-420生物机能实验系统 , 待肠管运动恢复正常后 ,记录肠管正
常情况下 2 min活动曲线 , 采用累积给药的方式滴加药液 , 每次
50 μl, 记录各给药量下肠管 2 min的活动曲线。 抑制率(%)=
(给药前平均张力 -给药后平均张力)/给药前平均张力 ×
100%。
2.4 统计学处理 实验数据以 x±s表示 , 采用 OnewayANOVA
检验判断组间差异。
3 结果
3.1 对小鼠麻油所致小肠性腹泻的影响 与模型组相比 , 正常组
无腹泻现象(P<0.05), 说明此法造模的合理性;阳性组在实验
过程中几乎无腹泻现象(P<0.05);煨品高剂量组在实验考察 2,
3 h中可明显减少腹泻(P<0.05);而其他实验组无明显差异。
结果如表 1所示。
表 1 川木香炮制前后对小鼠小肠性腹泻的影响( x±s)
组别 剂量C/g· kg-1
腹泻指数
1 h 2 h 3 h 4 h
空白 - 0* 0* 0* 0*
模型 - 0.43±0.13 0.86±0.24 1.04±0.21 1.02±0.38
阳性 0.001 0* 0.13±0.06* 0.18±0.11* 0.21±0.1*
川木香生品高剂量 20 0.39±0.17 0.72±0.38 0.96±0.35 0.98±0.25
川木香生品中剂量 12 0.42±0.21 0.79±0.27 0.99±0.25 0.97±0.29
川木香生品低剂量 6 0.45±0.20 0.83±0.25 1.02±0.12 0.92±0.26
川木香煨品高剂量 20 0.24±0.11 0.25±0.1* 0.44±0.16* 0.73±0.33
川木香煨品中剂量 12 0.29±0.25 0.57±0.33 0.82±0.24 0.90±0.39
川木香煨品低剂量 6 0.35±0.10 0.75±0.34 1.12±0.46 0.95±0.56
  与模型组比较 , *P<0.05, **P<0.01;n=10
3.2 对小鼠在体小肠推进的影响 与空白组相比 , 阳性组小肠推
进率明显缩短(P<0.01), 川木香煨品石油醚部位高剂量组可明
显缩短小肠推进率(P<0.05), 其他部位实验组表现出抑制其小
肠推进的趋势。结果见表 2。
3.3 对家兔离体肠平滑肌的影响 各部位在药槽终浓度为 1.2
×10 -5 ~ 1.08×10-4 g· ml-1范围 9个剂量组内 , 均可抑制离体
肠运动 ,且其抑制作用呈一定的量效关系。其量效曲线如图 1所
示。
表 2 川木香煨品各部位对小鼠小肠推进的影响( x±s)
组别 剂量 C/mg· kg-1 推进率(%)
空白 - 72.5±5.6
阳性 6 45.2±4.5**
川木香煨品石油醚部位 72 63.4±10.3
144 58.1±5.2
240 50.8±6.3*
川木香煨品氯仿部位 72 65.2±9.7
144 62.6±9.3
240 58.3±7.8
川木香煨品醋酸乙酯部位 72 65.6±11.3
144 63.8±12.5
240 60.3±8.5
川木香煨品正丁醇部位 72 70.4±15.2
144 70.1±11.5
240 68.9±10.8
川木香煨品乙醇部位 72 68.4±9.4
144 67.5±8.5
240 65.3±8.5
  与空白组比较 , *P<0.05, **P<0.01;n=10
图 1 川木香煨品各部位作用正常离体肠肌的量效曲线
由图 1可知 , 各部位抑制作用基本呈随极性减小 ,作用增大
的趋势 , 在各个给药浓度下石油醚部位较其他部位作用更强 , 与
乙醇部位作用相比具有显著性差异(P<0.05),与正丁醇部位作
用相比具有极显著性差异(P<0.01)。 从 1.2×10-5 ~ 1.08 ×
10 -4 g· ml-1浓度范围内 9个剂量组中选取高 、中 、低 3个给药剂
量 , 各部位作用结果比较如表 3 ~ 5所示。
表 3 1.20×10-5浓度川木香煨品各部位对
家兔离体肠肌的作用( x±s)
组别 给药量 C/g· ml-1 抑制率(%)
石油醚部位 1.20×10-5 11.65±2.91
氯仿部位 1.20×10-5 8.11±2.23
醋酸乙酯部位 1.20×10-5 6.68±2.61
正丁醇部位 1.20×10-5 2.65±1.15**
乙醇部位 1.20×10-5 5.17±2.14*
  与石油醚部位比较 , *P<0.05, **P<0.01;n=10
表 4 4.80×10-5浓度川木香煨品各部位对
家兔离体肠肌的作用( x±s)
组别 给药量 C/g· ml-1 抑制率(%)
石油醚部位 4.80×10-5 24.47±2.13
氯仿部位 4.80×10-5 21.62±2.61
醋酸乙酯部位 4.80×10-5 16.12±1.68
正丁醇部位 4.80×10-5 7.84±2.03**
乙醇部位 4.80×10-5 13.8±3.61*
  与石油醚部位比较 , *P<0.05, **P<0.01;n=10
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时珍国医国药 2010年第 21卷第 12期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2010VOL.21NO.12
表 5  1.80×10-4浓度川木香煨品各部位
对家兔离体肠肌的作用( x±s)
组别 给药量 C/g· ml-1 抑制率(%)
石油醚部位 1.08×10-4 30.27±3.03
氯仿部位 1.08×10-4 29.76±2.85
醋酸乙酯部位 1.08×10-4 20.97±2.28
正丁醇部位 1.08×10-4 14.06±1.41**
乙醇部位 1.08×10-4 20.18±7.23*
  与石油醚部位比较 , *P<0.05, **P<0.01;n=10
4 讨论
《中国药典》 2005版规定炮制川木香采用纸煨法 , 但并未对
其炮制工艺参数及煨制后功能主治等进行阐述。国内外学者对
其生品的化学成分 、药理作用 、质量控制方面的研究较多 [ 7 ~ 11] ,
对其炮制机理及其炮制品研究较少 ,目前对川木香煨制后的止泻
作用未做描述 , 也未深入阐明其药效物质。本研究发现与川木香
生品相比 , 煨制后确实具有抗腹泻作用;并且对煨制川木香的 5
个极性不同的部位进行筛选发现 ,石油醚部位能显著减小在体动
物模型活性炭的小肠推进率(P<0.05),其他各部位有减小推进
的趋势;在家兔离体肠肌实验中 , 6个部位均表现出抑制离体肠
节律性张力 , 并呈量效关系 ,但以石油醚部位作用最强 ,与正丁醇
部位 、乙醇部位相比具均有显著性差异 , 说明其石油醚部位是川
木香炮制后消化道作用相对较强的药效部位。由此提示我们 ,川
木香煨制后具有抗消化道腹泻的作用 , 且同木香相似 , 属于 “实
肠止泻” ,通过抑制小肠平滑肌运动状态而达到抗腹泻;并且物
质成分极性越小 , 药效越强 , 因此进一步提示我们川木香传统入
汤剂的科学性和合理性值得我们探讨 ,同时川木香药效部位的确
定 , 也为我们进一步寻找和分离川木香炮制后用于 “肠鸣腹泻”
的药效成分奠定基础 ,以便深入揭示其止泻机制和炮制机理 。
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收稿日期:2010-01-20; 修订日期:2010-07-20
基金项目:云南省科技厅应用基础研究基金(No.2002TJ15)
作者简介:陈兴荣(1961-),男(汉族),云南弥勒人 ,现任大理学院药学院
副教授 ,学士学位 ,主要从事天然药物的开发研究工作.
滇黄精对诱导性高血糖小鼠血糖影响的实验研究
陈兴荣 , 赖 泳 , 王成军
(大理学院·药学院 ,云南 大理 671000)
摘要:目的 观察滇黄精提取物对正常小鼠血糖及几种物质诱导性小鼠高血糖的影响。方法 用 10%葡萄糖和 240 μg/
kg肾上腺素造成小鼠生理性高血糖模型 , 80 mg/kg四氧嘧啶造成小鼠糖尿病模型 , 滇黄精提取物与优降糖进行对照 , 观
察滇黄精提取物对上述模型动物血糖的影响。结果 滇黄精提取物对正常小鼠血糖无明显作用;滇黄精提取物能降低葡
萄糖性和肾上腺素性高血糖小鼠的血糖水平(P<0.05);滇黄精提取物能显著降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠的血糖水平
(P<0.01)。结论 滇黄精提取物对多种原因导致的高血糖小鼠有降糖的作用。
关键词:滇黄精; 降血糖
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.12.059
中图分类号:R285.5  文献标识码:B  文章编号:1008-0805(2010)12-3163-02
  滇黄精 PolygonatumkingianumCol.etHemsl是我国药典规
定作为黄精使用的 3种原生药之一 [ 1] ,药食两用。滇黄精主产于
云南 , 四川 、贵州 、广西等省区也有分布。
黄精主要含有黄精多糖 、低聚糖 、黄精皂苷等活性成分 ,具有
增强免疫功能 、抗肿瘤 、抗衰老 、降血糖 、降血脂等多种作用。黄
精主要用来治疗糖尿病 、冠心病 、高脂血症 、肺结核等 [ 2] 。
云南是道地药材的故乡 , 大理滇黄精更是品质优良 , 具有很
高的药用价值 [ 3] 。为了更好地开发利用滇西地区的特色天然药
物资源 , 项目开展了滇黄精功能性保健食品的开发研究 , 滇黄精
的毒理学实验表明无任何毒副作用。为了考察其配伍组方的合
理性及其主要的功能作用 ,本文通过滇黄精提取物对血糖影响的
实验研究 ,为滇黄精的开发利用 , 提供科学依据。
1 仪器与材料
1.1 仪器 日立 7170全自动生化分析仪(日本), LD25-2离心
机。
1.2 试剂材料 优降糖(格列本脲 , 2.5 mg/片 , 中山市三才医药
集团有限公司),临用前配成 0.5%的混悬液。 1mg/ml盐酸肾上
腺素注射液(福建省福州制药厂)。葡萄糖(上海科华生物公
司)。四氧嘧啶(BDHlimitedpooleEngland),临用前配制成 0.4%
的溶液 。
ICR小鼠(II级),体质量 18 ~ 22 g, 雌雄各半(昆明医学院实
验动物中心提供)。滇黄精提取物(单味 、复方滇黄精浸膏), 实
验时用蒸馏水溶解稀释至所需浓度。
2 方法
2.1 对正常小鼠血糖的影响 [ 4] 将禁食不禁水 3 h的小鼠随机
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