全 文 ：书毛大丁草总黄酮含量测定
何可群１，李相兴２，杨　琼１
（１．贵州民族大学 化学与环境科学学院，贵州 贵阳５５００２５；
２．贵州民族大学 民族学与社会学学院，贵州 贵阳５５００２５）
摘　要：目的：建立毛大丁草总黄酮的含量测定方法。方法：以芦丁为对照品，用超声辅助提取、紫外－可
见分光光度法测定了毛大丁草总黄酮含量。结果：毛大丁草中总黄酮的相对百分含量为４．４３８％，精密
度实验ＲＳＤ为１．０８％；节丁对照品在０．０１３７５～０．２２００ｍｇ／ｍＬ范围有良好的线性关系，回归方程为Ａ
＝９．９２６１Ｃ＋０．０１３，相关系数Ｒ２＝０．９９９７。结论：该方法操作简便，结果可靠，能为毛大丁草药用价值
的开发及扩大资源利用提供科学的依据。
关键词：毛大丁草；分光光度法；总黄酮
中图分类号：Ｒ２８４．２　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１３）０３－００３６－０２
收稿日期：２０１２－１２－１８
作者简介：何可群（１９７１－），女，硕士，贵州民族大学教授，研究方向为分析化学和药用植物学。
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｏｔａｌ　Ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｆｒｏｍＧｅｒｂｅｒａ　ｐｉｌｏｓｅｌｌｏｉｄｅｓ（Ｌ．）Ｃａｓｓ．
Ｈｅ　Ｋｅｑｕｎ１，Ｌｉ　Ｘｉａｎｇｘｉｎｇ２，Ｙａｎｇ　Ｑｉｏｎｇ１
（１．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｍｉｎｚｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ　５５００２５，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｅｔｈｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｓｏｃｉｏｌｏｇｙ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｇｕｉｚｈｏｕ　Ｍｉｎｚｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕｉｙａｎｇ，Ｇｕｉｚｈｏｕ，５５００２５，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｈａｉｒ　ｇｅｒｂｅｒａ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ
ｉｎ　Ｇｅｒｂｅｒａ　ｐｉｌｏｓｅｌｌｏｉｄｅｓ（Ｌ．）Ｃａｓｓ．ｗａｓ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｂｙ　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ　ａｔ　５１０ｎｍ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｃｕｒｖｅ　ｗｉｔｈ　ｒｕ－
ｔｉｎ　ａｓ　ｃｏｎｔｒｏｌｅｄ　ｓａｍｐｌｅ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｇｅｒｂｅｒａ　ｐｉｌｏｓｅｌｌｏｉｄｅｓ（Ｌ．）Ｃａｓｓ．ｗａｓ４．４３８％ａｎｄ　ｔｈｅｒｅ　ｗａｓ
ｇｏｏｄ　ｌｉｎｅａｒｉｔｙ（Ｒ２＝０．９９９７）ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｒａｎｇｅ　ｏｆ　０．０１３７５～０．２２００ｍｇ／ｍＬ　ｆｏｒ　ｒｕｔｉｎ．Ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｖｅ　ｓｔａｎｄａｒｄ　ｄｅｖｉａｔｉｏｎ　ＲＳＤ　ｗａｓ　１．
０８％．Ｔｈｅ　ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ　ｍｅｔｈｏｄ　ｉｓ　ｓｉｍｐｌｅ　ａｎｄ　ｒｅｌｉａｂｌｅ　ｔｏ　ｍｅａｓｕｒｅ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｉｎ　Ｇｅｒｂｅｒａ　ｐｉｌｏｓｅｌ－
ｌｏｉｄｅｓ（Ｌ．）Ｃａｓｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｉｔ　ｐｒｏｖｉｄｅｓ　ａ　ｃｅｒｔａｉｎ　ｒｅｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｇｉｓｔ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｅｘｐｌｏｉｔａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｅｘｐａｎｄ　ｒｅｓｏｕｒｃｅ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｇｅｒｂｅｒａ
ｐｉｌｏｓｅｌｌｏｉｄｅｓ（Ｌ．）Ｃａｓｓ．’ｓ　ｍｅｄｉｃａｌ　ｖａｌｕｅ．
Ｋｅｙ　Ｗｏｒｄｓ：Ｇｅｒｂｅｒａ　Ｐｉｌｏｓｅｌｌｏｉｄｅｓ（Ｌ．）Ｃａｓｓ．；Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ；Ｔｏｔａｌ　Ｆｌａｖｏｎｅｓ　Ｃｏｎｔｅｎｔ
　　毛大丁草（Ｇｅｒｂｅｒａ　ｐｉｌｏｓｅｌｌｏｉｄｅｓ（Ｌ．）Ｃａｓｓ．）是菊科
（Ａｓｔｅｒａｃｅａｅ）大丁草属（Ｇｅｒｂｅｒａ）植物，别名：小一支箭、一
支香、巴地香、白眉草、毛丁白头翁、白头翁等，是云南、贵
州、广西等地民间常用草药。毛大丁草以全草入药，具有清
热解毒、凉血止血、止咳化痰、活血化瘀的功效，用于感冒发
热、咳嗽痰多、痢疾、大肠下血、疮疡、跌打损伤、毒蛇咬伤等
症。毛大丁草在我国南部地区均有分布［１－６］。目前对毛大丁
草化学成分的研究还很少，唐小江等［６］用ＧＣ－ＭＳ技术对毛
大丁草叶、茎、根等部位的挥发油成分进行了研究，结果表
明其挥发油主要成分为一些长链脂肪酸及烯萜类化合物。
通过文献检索，国内外还未见有关毛大丁草总黄酮测定的
研究报道，本实验用亚硝酸钠－硝酸铝比色法对毛大丁草全
草７０％乙醇提取液的紫外可见光谱及总黄酮类物质含量进
行研究，以便为该民族药的进一步开发及扩大资源利用提
供科学依据。
１　材料与方法
１．１　试验材料
１．１．１　毛大丁草　采自贵阳市花溪十里河滩，经贵州民
族大学民族药物研究所卢文芸副教授鉴定为毛大丁草
（Ｇｅｒｂｅｒａ　ｐｉｌｏｓｅｌｌｏｉｄｅｓ（Ｌ．）Ｃａｓｓ．），标本保存于贵州民族大
学化学与环境科学学院药学教研室。
１．１．２　仪器　７５６ＰＣ紫外－可见分光光度计（上海舜宇恒
平科学仪器有限公司），ＭＥＴＴＬＥＲＡＥ２４０电子分析天平
（上海天平仪器厂），ＢＧＺ－３０电热鼓风干燥箱（上海博迅实
业有限公司医疗设备厂），ＳＧ３２００ＨＥ超声清洗仪（上海冠
特超声仪器有限公司），数显恒温水浴锅（常州博远实验分
析仪器有限公司）。
１．１．３　试剂　氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝、无水乙醇、石
油醚均为分析纯，芦丁对照品 （色谱纯，购自贵州迪大科技
—６３—
书有限责任公司）。
１．２　试验方法
１．２．１　毛大丁草总黄酮的提取方法［７－９］　将自然晾干的
毛大丁草在电热鼓风干燥箱中于（６０±１）℃烘干５ｈ，精确称
取干燥、研碎的毛大丁草粉末适量，按１∶２０的固液比用体
积分数为７０％的乙醇浸泡、超声提取。提取条件：时间３０
ｍｉｎ，超声频率４０ｋＨｚ，功率１５０Ｗ，提取结束后，合并提取
液，过滤、冷却，用沸程３０℃～６０℃的石油醚萃取除去叶绿
素，浓缩、用７０％的乙醇定容、摇匀备用。
１．２．２　芦丁标准曲线绘制［１０－１７］　（１）芦丁标准溶液的制
备。精确称取１２０℃干燥至恒质量的芦丁２７．５ｍｇ，置５０ｍＬ
容量瓶中，加７０％乙醇适量，置水浴上微热使其溶解、冷却，
加入７０％乙醇至刻度，摇匀，每１ｍＬ含芦丁０．５５０ｍｇ。
（２）标准曲线的绘制。精确吸取质量浓度０．５５０ｍｇ／ｍＬ
的芦丁标准溶液０、０．２５、０．５０、１．００、２．００、３．００、４．００ｍＬ分别
置于７支１０ｍＬ比色管中，加体积分数７０％的乙醇补足至５．
０ｍＬ，分别加入５０ｇ／Ｌ亚硝酸钠溶液０．４０ｍＬ，摇匀，放置
６ｍｉｎ后，精确加入５０ｇ／Ｌ硝酸铝溶液０．４０ｍＬ，摇匀，放置
６ｍｉｎ，再精确加入４０ｇ／Ｌ氢氧化钠溶液４．００ｍＬ，并用体积分
数为７０％乙醇稀释至刻度，摇匀，静置１２ｍｉｎ。以试剂空白为
参比，于５１０ｎｍ波长下测定吸光度Ａ，以吸光度为纵坐标，显
色液中芦丁的质量浓度Ｃ（ｍｇ／ｍＬ）为横坐标，绘制标准曲
线，经回归处理得方程：Ａ＝９．９２６１Ｃ＋０．０１３，相关系数：Ｒ２＝
０．９９９７，芦丁浓度在０．０１３７５～０．２２００ｍｇ／ｍＬ范围内吸光度
与质量浓度线性关系良好。
１．２．３　芦丁、毛大丁草紫外吸收光谱研究　精确吸取芦
丁标准溶液（０．５５０ｍｇ／ｍＬ）、毛大丁草的提取液各１．００ｍＬ，
分别置于２支１０ｍＬ比色管中，加体积分数７０％的乙醇补
足至１０．００ｍＬ，以７０％的乙醇溶液建立基线，在２００～
７００ｎｍ波长范围进行扫描，得到芦丁和毛大丁草提取液显
色前的紫外吸收光谱；精确吸取芦丁标准溶液（０．５５０ｍｇ／
ｍＬ）、毛大丁草提取液各１．００ｍＬ，分别置于２支１０ｍＬ比色
管中，加体积分数７０％的乙醇补足至５．０ｍＬ，分别加入
５０ｇ／Ｌ亚硝酸钠溶液０．４０ｍＬ，摇匀，放置６ｍｉｎ后，精确加
入５０ｇ／Ｌ硝酸铝溶液０．４０ｍＬ，摇匀，放置６ｍｉｎ，再精确加
入４０ｇ／Ｌ氢氧化钠溶液４．００ｍＬ，并用体积分数为７０％乙醇
稀释至刻度，摇匀，静置１２ｍｉｎ。以试剂空白建立基线，在
２００～７００ｎｍ波长范围进行扫描，得到芦丁和毛大丁草提取
液显色后的紫外吸收光谱。
１．２．４　样品测定［１０－１７］　精确量取“１．２．１”所得毛大丁草
乙醇提取液１．００ｍＬ，按标准曲线的绘制方法加显色剂处
理，于５１０ｎｍ波长下测得毛大丁草的吸光度Ａ，代入回归方
程得毛大丁草的总黄酮类化合物以芦丁计算的质量浓度Ｃ
（ｍｇ／ｍＬ），换算为干燥药材中总黄酮的％含量。
１．２．５　重复性试验　精确称取毛大丁草全草样品５份，
按含量测定方法进行测定，计算平均含量及ＲＳＤ％值。
１．２．６　加标回收试验　精确称取一定量毛大丁草全草样
品３份，再精确加入芦丁标准溶液（浓度为０．５５０ｍｇ／ｍＬ）
４．００ｍＬ，按样品含量测定方法进行提取、测定，计算加标回
收率及ＲＳＤ值。
２　结果与分析
２．１　标准曲线
于５１０ｎｍ波长下测定芦丁标准溶液系列的吸光度Ａ，
以吸光度为纵坐标，显色液中芦丁的质量浓度Ｃ（ｍｇ／ｍＬ）
为横坐标，绘制标准曲线（图１），经回归处理得方程：Ａ＝
９．９２６１Ｃ＋０．０１３，相关系数：Ｒ２＝０．９９９７，芦丁浓度在
０．０１３７５～０．２２００ｍｇ／ｍＬ范围内吸光度与质量浓度线性关
系良好。
图１　芦丁标准曲线
２．２　芦丁、毛大丁草紫外吸收光谱研究
图２、图３表明，在加显色剂前后，芦丁标准溶液和毛大
丁草样品溶液的紫外吸收光谱均有所改变，显色后在
５１０ｎｍ处有较平缓的吸收峰，适于定量测定。
图２　芦丁标准溶液的紫外吸收光谱
图３　毛大丁草样品的紫外吸收光谱
２．３　样品总黄酮含量测定
由表１可知，毛大丁草样品中总黄酮的平均含量为
４．４３８％，重复性试验ＲＳＤ为１．０８％，精密度高。
表１　总黄酮测定及精密度试验结果
测定次数 １　 ２　 ３　 ４　 ５
样品总黄酮含量（％） ４．３７９　 ４．３９６　 ４．４５１　 ４．４７６　 ４．４８７
平均值（％） ４．４３８
ＲＳＤ（％） １．０８
２．４　加样回收率
由表２可知加样回收率在９８．１７％～９８．７２％，ＲＳＤ为
０．２７９％。
—７３—
书多西他赛纳米乳注射液的制备与药代动力学研究
刘　芳，王淑君
（沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳１１００１６）
摘　要：目的：制备多西他赛纳米乳注射液，并对其药代动力学特点进行研究。方法：采用高压均质法制
备多西他赛纳米乳注射液；选用Ｂｅａｇｌｅ犬作为实验动物，分别给予相同剂量的多西他赛乳注射液
（ＤＴＸ－ｍ）和上市品多西他赛注射液（ＤＴＸ－ｓ），利用ＬＣ－ＭＳ检测给药后各时间点的血药浓度，并计算各
自对应的药代动力学参数进行比较研究。并对两者进行大鼠体内组织分布研究。结果：多西他赛纳米
乳注射液载药量为２ｇ·Ｌ－１，粒径为（４６．７±３５．０）ｎｍ，含量质量分数为９６．６９％；给予Ｂｅａｇｌｅ犬ＤＴＸ－ｍ
和ＤＴＸ－ｓ，等剂量的ＤＴＸ－ｍ药代参数Ｃｍａｘ、ＡＵＣ较ＤＴＸ－ｓ明显提高，体外与血浆蛋白质的结合率明
显提高。结论：ＤＴＸ－ｍ和ＤＴＸ－ｓ比较，ＤＴＸ－ｍ更易于与血浆蛋白结合，一定程度上提高了生物利用
度，易于被肝脏、淋巴结及肿瘤组织摄取，同等剂量的ＤＴＸ－ｍ更易于快速进入血浆、心、肝、脾、肾、肿
瘤，二者之间靶向效率未见显著差异，在血液和组织中其他主要的药代动力学参数未见显著改变。
关键词：多西他赛；纳米乳注射液；药代动力学；组织分布
中图分类号：Ｒ９４　　　文献标识码：Ａ　　　文章编号：１６７３－２１９７（２０１３）０３－００３８－０４
收稿日期：２０１２－１１－１３
作者简介：刘芳（１９８３－），女，沈阳药科大学硕士研究生，助理研究员，研究方向为药物新剂型；王淑君（１９５５－），女，沈阳药科
大学副教授，硕士生导师，研究方向为药物制剂。
　　多西他赛（ｄｏｃｅｔａｘｅｌ）属于紫杉烷类抗肿瘤药，其适应 症为晚期卵巢癌、非小细胞肺癌、乳腺癌。

临床还适用于胰
表２　加样回收试验结果
样品
重量（ｍｇ）
样品黄酮
含量（ｍｇ）
加样量
（ｍｇ）
测得量
（ｍｇ）
回收率
（％）
平均值
（％）
ＲＳＤ
（％）
１００．００　 ４．４３８　 ２．２００　 ６．５１７　 ９８．１７
１００．００　 ４．４３８　 ２．２００　 ６．５３６　 ９８．４６　 ９８．４５　 ０．２７９
１００．００　 ４．４３８　 ２．２００　 ６．５５３　 ９８．７２
３　结论
本文首次对毛大丁草全草的紫外光谱及总黄酮含量进
行研究，结果表明毛大丁草干燥全草中黄酮类物质丰富，百
分含量为４．４３８％，为该民族药的药用价值开发及扩大资源
利用提供了一定的科学依据。
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（责任编辑：姜付平）
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