全 文 ：收稿日期:2006-09-14
作者简介:侯柏玲(1963-),女(汉族), 辽宁沈阳人 , 高级工程师 , 从事天然药化实验工作 , Tel.024-23986470 , E-mail
houbailing@sohu.com。
文章编号:1006-2858(2007)06-0371-03
中药漏芦提取工艺的优化
侯柏玲 ,孟大利 ,李　宁 ,李　铣
(沈阳药科大学 中药学院 , 辽宁 沈阳 110016)
摘要:目的 优化中药祁州漏芦的提取工艺。方法 采用正交实验法 , 考察提取溶媒 、提取次数和提
取时间对提取效率的影响。以β-蜕皮甾酮含量为指标 ,采用 HPLC 法测定提取物含量。结果 祁州
漏芦的最佳提取工艺条件为用质量分数为 70%的乙醇提取 3 次 ,第 1 次 8倍量乙醇 ,提取1.5 h , 第
2 次 6 倍量乙醇 , 提取 1.0 h 时 ,第 3 次 4 倍量乙醇 ,提取 1.0 h。按照筛选出的最佳工艺条件进行
了 3次重复性实验 ,测得总β-蜕皮甾酮含量质量分数为 0.84%,与预测值基本一致。结论 所确定
的最佳提取工艺可合理提取漏芦中的活性成分。
关键词:祁州漏芦;正交实验;提取工艺
中图分类号:R 284　　　文献标志码:A
　　祁州漏芦(Raidx Rhapontici)为菊科植物祁
州漏芦(Rhapont icum uni f lorum(L.)DC.)的干
燥根 ,始载于《神农本草经》 ,被列为上品 ,具有清
热解毒 、消痈排脓 、通乳的功效 。药理研究表明 ,
祁州漏芦具有较好的抗动脉粥样硬化和抗脂质过
氧化作用 ,能降低血清中胆固醇含量 ,减小血小板
聚集[ 1-2] 。其中β-蜕皮甾酮具有的药理活性与漏
芦的功效十分吻合[ 3] 。欲利用或研究漏芦中的
有效成分 ,则必须将 β-蜕皮甾酮从中药中提取出
来。但漏芦提取方法的研究报道相对较少。目前
中药提取方法主要有溶剂提取法 、水蒸气蒸馏法 、
超声提取法 、冷浸法等 。作者采用质量法测定出
膏率 ,采用 HPLC法测定漏芦提取液中 β-蜕皮甾
酮含量 ,并以此为指标 ,研究漏芦的提取方法 ,为
合理提取漏芦中的活性成分提供实验依据。
1　仪器与材料
HP 1100高效液相色谱仪及 UV 检测器(美
国 Hew let tpackard 公司), ODS 柱(200 mm ×
4.6 mm ,5μm ,美国迪马公司), β-蜕皮甾酮对照
品(含量质量分数为 100%,美国 Sigma公司)。
重蒸水(沈阳药科大学分析教研室自制),质
量分数为 95%乙醇(食品级 ,山东禹王实业总公
司化工厂),其他试剂(色谱纯或分析纯 ,市售)。
中药漏芦购自沈阳中药饮片厂 ,经沈阳药科
大学中药学院孙启时教授鉴定为菊科植物祁州漏
芦(Rhaponticum unif lorum(L.)DC.)的干燥根。
2　方法与结果
2.1　干浸膏得率的测定
取漏芦根粗粉100 g ,加一定量溶剂 ,回流提取
3次 ,过滤 ,所得滤液经减压浓缩回收溶剂 ,最后将
浓缩液置于水浴上蒸干 ,按下式计算出膏率。
出膏率=干膏质量/粗粉质量×100%。
2.2　β-蜕皮甾酮的测定
2.2.1　色谱条件的选择与测定
色谱柱:ODS 柱(200 mm ×4.6 mm , 5 μm);
流动相:乙腈-水(体积比为 30∶70);流速:
0.8 mL·min-1;检测波长:242 nm;柱温:35 ℃。
按此色谱条件进样测定 ,色谱图见图 1。
2.2.2　对照品溶液的制备
精密称取 β-蜕皮甾酮对照品适量 ,加甲醇制
成 80 mg·L-1β-蜕皮甾酮溶液 。
2.2.3　供试品溶液的制备
精密称取漏芦药材粗粉约 4 g ,置索氏提取器
中 ,加甲醇85mL ,85 ℃水浴提取8 h ,将甲醇提取液
浓缩至约1mL ,用甲醇定量转移至10mL量瓶中 ,稀
释至刻度 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液作为供试品溶液。
第 24 卷 第 6 期
2 0 0 7 年 6 月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
Journal of Shenyang Pharmaceutical University
Vol.24　　　No.6
Jun.2007 p.371
1— β-Ecdysterone
Fig.1　High performance liquid chromatogram of β-ecdysterone
2.2.4　线性关系考察
精密称取 β-蜕皮甾酮对照品约 10 mg ,置
10 mL量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 。
精密吸取该溶液 0.4 、0.8 、1.2 、1.6 、2.0 mL
置 10 mL 量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀 ,得系
列对照品溶液 。精密吸取该系列对照品溶液
20μL注入高效液相色谱仪 ,以 β-蜕皮甾酮峰面
积(A)为纵坐标 , β-蜕皮甾酮质量浓度(ρ, g·L-1)
为横坐标 ,回归得线性方程A =6.667×106ρ+
2.322×104 , r=0.999 8。在 38.64 ～ 193.2mg·L-1
内 , β-蜕皮甾酮质量浓度与峰面积呈良好的线性关
系。
2.2.5　精密度试验
精密称取漏芦药材粉末约 4 g ,按“2.2.3”条
方法制备供试品溶液 ,连续进样 6 次 ,测定 β-蜕
皮甾酮含量 , RSD=1.7%。
2.2.6　重复性试验
精密称取漏芦药材粉末约 4 g , 共 6 份 ,按
“2.2.3”条方法操作并测定 β-蜕皮甾酮含量 ,
RSD=2.9%。
2.2.7　回收率试验
精密称取漏芦药材粉末约 4 g ,精密加入 β-蜕
皮甾酮对照品溶液适量 ,按“2.2.3”条方法操作并
测定 ,平均回收率为 96.4%,RSD=2.2%(n=6)。
2.3　提取溶剂的选择
取漏芦干燥根粗粉 100 g ,分别用水和质量分
数为 90%的乙醇为提取溶剂 ,考察两种不同溶剂
的提取效率。按“2.1”条方法进行实验 ,考察提取
次数 、提取时间和溶媒用量对提取后漏芦干浸膏
量得率的影响 。表 1表明 ,在相同实验条件下 ,以
水作为提取溶剂时 ,漏芦药材的出膏率较高 ,但是
有效成分含量较低 ,故选取乙醇作为提取溶剂。
Table 1　Extraction rates(w)in different extracting solvents
Extracting solvent w a/ % w b/ % w c/ % w total/ % w(β-ecdysterone)/%
Water 5.34 1.63 0.63 7.60 0.30
90%Alcohol 2.55 0.87 0.34 3.76 0.56
　　a— The solid-liquid ratio is 1∶10 and extractive time is 3 h;b—The solid-liquid ratio is 1∶8 and ex tractive time is 2 h;c—
The solid-liquid ratio is 1∶6 and ex tractive time is 1.5 h
2.4　提取工艺的优化
采用正交实验法 ,考察因素 A 乙醇浓度质量
分数(w)、因素 B 提取时间(t)、因素 C溶剂用量
(times of solvent)对药材中 β -蜕皮甾酮含量的影
响。实验因素水平及实验设计见表 2 。
Table 2　Factors and levels of orthogonal design
Level
Factor
A
w(EtOH)/ %
B
textraction/ h
C
Times of solvent
1 90 7.5(3.0 , 2.5 , 2.0) 18(8 , 6 , 4)
2 70 5.5(2.0 , 2.0 , 1.5) 14(6 , 4 , 4)
3 50 3.5(1.5 , 1.0 , 1.0) 12(4 , 4 , 4)
　　以乙醇为提取溶剂 ,按正交设计方法进行实验
所得 β-蜕皮甾酮含量见表3 ,方差分析见表4。
2.5　实验验证
按照筛选出的最佳实验条件进行了 3次重复
性实验 , 测得总 β-蜕皮甾酮含量质量分数为
0.84%,与预测值基本一致 ,证明了该工艺提取效
率高 ,稳定可行 。
3　结论
　　实验结果表明 ,采用乙醇回流提取方法提取
372 　　　沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 24卷
Table 3　Scheme and results of L9(34)orthogonal design
No. A B C w(β-ecdysterone)/%
1 1 1 1 0.425 0
2 1 2 2 0.464 3
3 1 3 3 0.311 7
4 2 1 2 0.833 5
5 2 2 3 0.824 2
6 2 3 1 0.838 9
7 3 1 3 0.644 0
8 3 2 1 0.621 0
9 3 3 2 0.660 0
I 1.201 0 1.904 5 1.884 9
I I 2.498 6 1.909 5 1.959 8
II I 1.925 0 1.810 6 1.779 9
Table 4　Results of analysis of variance
Source of variation S s d f F P
A 0.281 9 2 48.79 <0.05
B 0.002 1 2 0.36 —
C 0.005 5 2 0.94 —
ErrorsD 0.005 9 2
物中有效成分含量较高 ,质量分数为 0.84%。最
终确定漏芦提取工艺为 A2B 3C1 ,即以质量分数
为70%的乙醇作为提取溶剂 ,提取 3次 ,第 1次
8倍量乙醇 ,提取 1.5 h ,第 2 次 6倍量乙醇 ,提取
1.0 h ,第 3次 4倍量乙醇 ,提取 1.0 h;该提取工
艺可合理提取漏芦中的活性成分。
参考文献:
[ 1] 侯世样 ,廖工铁.中药制剂常用提取工艺条件的实验
筛选[ J] .华西药学杂志 , 1989 , 4(2):120-122.
[ 2] 姜晓峰 ,李铣.祁州漏芦地上部位的植物蜕皮激素化
合物[ J] .中草药 , 1997 , 28(5):262-264.
[ 3] 徐南杰 , 郭月英 , 李铣.蜕皮甾酮的药理作用研究进
展[ J] .沈阳药科大学学报 , 1997 , 14(4):300-302.
Optimization for extraction of Rhaponticum uniflo-
rum(L.)DC.
HOU Bai-ling ,MENG Da-li , LI Ning , LI Xian
(School of Tradit ional Chinese Materia Medica , Shenyang Pharmaceutical University , Shenyang
110016 , China)
Abstract:Objective To optimize the conditions for the ex traction of Rhapont icum uni f lorum (L.)DC.
Methods The conditions for the ex traction w ere studied by the orthogonal test , and the weight of ext ract
w ere detected taking content of ecdysterone as index.Results The optimum condition for the ext ract ion of
Rhapont icum uni f lorum (L.)DC.was as follow :70% alcohol was chosen as solvent.Firstly , 8 times the
amount of alcohol w as added , the mix ture w as kept refluxing for 1.5 h;next ,6 times the amount of alcohol
for 1.0 h;f inally ,4 times the amount of alcohol for 1.0 h.Conclusions The optimized method can be applied
for the ext ract ion of active components in Rhapont icum uni f lorum (L.)DC.
Key words:Rhaponticum uni f lorum (L .)DC.;orthogonal test;ex traction process
373第 6 期 侯柏玲等:中药漏芦提取工艺的优化