全 文 ：吕 寒，裴咏萍，李维林，等． 红凤菜总黄酮清除自由基的活性［J］． 江苏农业科学，2011，39(6) :528 － 529．
红凤菜总黄酮清除自由基的活性
吕 寒，裴咏萍，李维林，任冰如
(江苏省中国科学院植物研究所，江苏南京 210014)
摘要:采用 DPPH·法测定红凤菜总黄酮提取物的抗氧化活性。结果显示:红凤菜总黄酮的抗氧化活性呈量效关
系，半数抑制浓度为 0． 122 mg /mL。说明红凤菜总黄酮提取物具有抗氧化活性。
关键词:红凤菜;总黄酮;DPPH·;抗氧化活性
中图分类号:S647． 01 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2011)06 － 0528 － 01
收稿日期:2011 － 01 － 10
基金项目:国家自然科学基金(编号:30900123)。
作者简介:吕 寒(1980—) ，女，浙江永康人，硕士，研究实习员，研究
方向为植物化学。Tel: (025)84347081;E － mail:xiaohan1814@
163． com。
通信作者:李维林，博士，研究员，研究方向为药用植物。Tel: (025)
84347002;E － mail:lwlcnbg@ mail． cnbg． net。
红凤菜(Gynura bicolor DC．)别称观音苋、紫背天葵、木耳
菜、血皮菜、水三七，为菊科菊三七草属多年生草本，分布于江
西、福建、台湾、广东、广西、四川及云南等地［1］。红凤菜在民
间作为药，食两用蔬菜，作为民间用药，红凤菜具有清热凉血、
解毒消肿作用，主治咳血、崩漏、外伤出血、痛经等［2］。据报
道，红凤菜中含有花青苷、黄酮及挥发性萜类等成分［3 － 5］，其
生理活性报道较少，有关其抗氧化活性的研究还未见报道。
本研究采用 DPPH·清除法对红凤菜中的总黄酮提取物进行
体外抗氧化活性研究，为进一步利用该植物提供依据。
1 材料与方法
1． 1 仪器和试剂
TU － 1810 紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限公
司) ;Mettler AE240 电子天平。DPPH·(二苯代苦味酰自由
基，Sigma公司)、BHT(国药集团化学试剂有限公司) ;无水乙
醇等均为分析纯。红凤菜采自江苏省南京市，原植物经江苏
省中国科学院植物研究所李维林研究员鉴定。
1． 2 方法
1． 2． 1 总黄酮的制备 红凤菜干品，以 70%乙醇回流提取 2
次，合并提取液，浓缩离心，取上清液通过大孔树脂，依次用
水，20%、50%、90%乙醇梯度洗脱，取 50%乙醇部分浓缩，干
燥，得到红凤菜总黄酮提取物。
1． 2． 2 抗氧化活性的鉴定 准确称取 20 mg DPPH·，用无
水乙醇溶解并定容至 250 mL。取预制备的红凤菜总黄酮，用
无水乙醇配置成不同浓度，分别取 2 mL 待测液及 2 mL
DPPH·溶液，置于 1 支具塞试管中，摇匀，放置 25 min。以无
水乙醇为空白对照，于 517 nm 测其吸光度 Di
［6］;同时，以 2，
6 －二叔丁基对甲基苯酚(BHT)为阳性对照，每组试验均重复
3 次。用下式计算 DHHP·清除率(I) :
I =［1 －(Dsample － Dblank)/Dcontrol］× 100%
式中:Dcontrol为 2 mL无水乙醇加 2 mL DPPH·溶液的吸光度;
Dsample为 2 mL待测液加 2 mL DPPH·溶液的吸光度;Dblank为
2 mL待测液加 2 mL无水乙醇的吸光度。
2 结果与分析
DPPH·分析法被广泛用于清除自由基物质活性的研究，
DPPH·在有机溶剂中是一种稳定的自由基，其孤对电子在
517 nm附近有强吸收(显深紫色)。当自由基清除剂存在时，
孤对电子被配对，吸收消失或减弱，通过测定吸收减弱的程
度，可评价有机清除剂的活性［7］。因此，利用红凤菜总黄酮
与 DPPH·反应，可检测其清除自由基的能力。清除能力的
大小用抑制率来表示，抑制率越大，抗氧化活性越强。从表 1
可以看出，红凤菜总黄酮对 DPPH·有较强的清除作用，且清
除率随着提取物浓度增加而增高。在低浓度下，红凤菜总黄
酮对 DPPH·的清除能力低于人工合成抗氧化剂 BHT的清除
能力。半清除率浓度即自由基清除率在 50%时的浓度，以
EC50表示，常用来比较清除 DPPH·的能力大小，EC50值越小，
表明其抗氧化、清除自由基的能力越强。从图 1 中可以看出，
红凤菜总黄酮的清除能力(EC50 = 0． 122 mg /mL)比 BHT
(EC50 = 0． 037 5 mg /mL)弱，但随着浓度的增高，BHT 达到一
个最高抑制率，此时红凤菜总黄酮的抑制率高于 BHT，故具
有进一步开发研究的价值。
表 1 红凤菜总黄酮和 BHT对 DPPH·的清除作用
样品液浓度
(mg /mL)
BHT抑制率
(%)
红凤菜总黄酮抑制率
(%)
0． 012 5 22． 11 4． 70
0． 025 0 44． 22 16． 47
0． 037 5 50． 00 18． 21
0． 050 0 59． 34 25． 00
0． 100 0 77． 49 43． 41
0． 150 0 83． 60 54． 91
0． 200 0 87． 23 68． 88
0． 250 0 89． 11 75． 87
0． 300 0 90． 99 83． 74
0． 400 0 91． 13 89． 05
0． 500 0 91． 87 93． 28
(下转第 529 页)
—825— 江苏农业科学 2011 年第 39 卷第 6 期
DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2011.06.174
周桃英． 鱼腥草黄酮的提取及对羟自由基的清除能力［J］． 江苏农业科学，2011，39(6) :529 － 531．
鱼腥草黄酮的提取及对羟自由基的清除能力
周桃英
(黄冈职业技术学院生物系，湖北黄冈 438002)
摘要:采用超声波辅助法萃取鱼腥草黄酮，并对工艺进行优化，以期获得最佳的提取方法，同时对其抗氧化特性
进行了研究。结果表明，鱼腥草黄酮超声波辅助法提取的最佳工艺是液料比 45 mL ∶ 1 g，乙醇浓度 60%，超声 35 min，
温度为 35 ℃，此时鱼腥草黄酮提取量为 11． 91 mg /g。鱼腥草黄酮对羟自由基有一定的清除作用。
关键词:黄酮;提取;羟自由基
中图分类号:S567． 230． 1 文献标志码:A 文章编号:1002 － 1302(2011)
櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄櫄
06 － 0529 － 03
(上接第 528 页)
3 讨论
试验结果表明，红凤菜总黄酮对 DPPH·自由基有清除
作用，并呈量效关系，说明红凤菜总黄酮有一定的抗氧化作
用，这一结果为红凤菜提取物在食品和药品领域的利用开发
提供依据。
参考文献:
［1］中国科学院中国植物志编辑委员会． 中国植物志:第七十七卷第
一分册［M］． 北京:科学出版社，1999:768．
［2］江苏新医学院． 中药大词典:上册［M］． 上海:上海科学技术出
版社，1997:988 － 989．
［3］Tsai T C，Chen C W，Yeh P Y． Stablity study of anthocyanins:antho-
cyanins from G． bicolor，grape and hibiscus［J］． Tunghai J，1992，33
(10) :1085 － 1099．
［4］吕 晴，秦 军，陈 桐． 紫背天葵茎叶挥发油化学成分的研究
［J］． 贵州工业大学学报:自然科学版，2004，33(2) :23 － 25．
［5］卓 敏，吕 寒，任冰如，等． 红凤菜化学成分研究［J］． 中草药，
2008，39(1) :30 － 32．
［6］严 敏，李 崎，顾国贤． 利用 DPPH 自由基清除率评价啤酒内
源性抗氧化能力［J］． 食品工业科技，2005，26(8) :82 － 83，87．
［7］胡喜兰，韩照祥，陶 莹，等． DPPH·法测定 17 种植物抗氧化活
性［J］． 食品科技，2006，31(10) :264 － 268．
鱼腥草为三白草科多年生草本植物蕺菜(Houttuynia cor-
data)的新鲜全草或干燥地上部分，因其茎叶搓碎后有鱼腥味
得名，别名岑草、菹子、臭猪巢、侧耳根、猪鼻孔等，产于我国长
江流域以南各省，尤以湖南、湖北、四川、江苏等省居多［1］。
鱼腥草营养价值很高，每 100 g 鱼腥草含碳水化合物 0． 3 g、
膳食纤维 0． 3 g、维生素 A 575 μg、胡萝卜素 3 450 μg、维生
素 C 70 mg，此外还含有丰富的矿物质，是常用的野生蔬菜之
一，被国家卫生部正式确定为“药食两用”的品种［2］。鱼腥草
还是我国的传统中药材，性微寒，味苦，具有清热解毒、排脓消
痈、利尿通淋之功效。现代药理研究表明，鱼腥草具有抗菌、
增强免疫力、抗肿瘤、抗过敏、镇痛等作用［3］。鱼腥草的主要
活性成分为黄酮类化合物、水溶性多糖、挥发油等。鱼腥草黄
酮主要含有葡萄糖苷、金丝桃苷、槲皮苷、芸香苷、槲皮素、山
萘素、异鼠李素等物质［4］。由于天然植物黄酮类化合物展现
出各种药理活性，目前已被广泛注意和研究。本研究采用超
收稿日期:2011 － 01 － 26
作者简介:周桃英(1971—) ，女，湖北黄冈人，副教授，从事新型食品
开发研究工作。Tel: (0713)8345265;E － mail:zhoutaoying@ 163．
com。
声波辅助法萃取鱼腥草黄酮，并对工艺进行优化，以其获得较
佳的提取方法。同时对其抗氧化特性进行了研究，为鱼腥草
的进一步开发提供技术支持。
1 材料与方法
1． 1 材料
鱼腥草购于黄冈药材市场，并经黄冈职业技术学院生物
技术制药教研室鉴定。
1． 2 仪器与试剂
供试试剂有芸香苷(中国药品生物制品检定所生产) ，乙
醇、NaNO2、Al(NO3)3、NaOH、FeSO4、水杨酸、H2O2 等(均为
市售分析纯)。供试仪器有 KQ5200B 型超声波清洗器(昆山
超声仪器有限公司生产) ，UV － 160A 紫外可见分光光度计
(日本岛津公司生产) ，RE52CS旋转蒸发仪(上海荣生仪器厂
生产) ，SHB －Ⅲ循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限
公司生产) ，粉碎机(江阴市伟翔药化机械厂生产)。
1． 3 试验方法
1． 3． 1 鱼腥草黄酮提取 将干净、干燥的鱼腥草经 65 ℃烘
箱烘干，用粉碎机粉碎，过 40 目筛，然后用氯仿回流去油脂，
挥干溶剂，干燥备用。精确称取鱼腥草粉末 3． 0 g，按一定的
—925—江苏农业科学 2011 年第 39 卷第 6 期