全 文 ：收稿日期:2008-10-18
基金项目:青海省重点科技攻关资助项目(2005-N-149).
联系人简介:包锦渊(1958-),男 ,教授 ,主要从事有机物结构与分析研究.
E-mail:baojinyuand@126.com
[ 文章编号] 1000-9035(2009)01-0072-03
乳白香青中黄酮类成分的定性定量分析
包锦渊＊ ,卢永昌 ,白鹤松
(青海民族学院化学系 ,青海 西宁 810007)
[摘　要] 　采用化学试剂法进行定性 ,利用分光光度法 ,芦丁做对照品 ,在 508 nm 进行定量测
定 ,测得乳白香青中总黄酮含量为 80.72 mg·g-1 ,平均回收率为 100.12%, RSD为 2.99%(n=
5).此测定方法简便快速 ,重复性好.
[关键词] 　乳白香青;总黄酮;定性分析;定量分析
[中图分类号] 　O 623　　　[学科代码] 　150·20　　　[文献标识码] 　A
　　乳白香青(Anaphalis lacteal Maxin)属菊科香青属多年生草本植物 ,主要分布于青海东部 、甘肃南部及
四川西北部.根状茎粗壮 ,上生莲座状叶丛和花茎 ,茎高 10 ～ 40 cm ,不分枝.莲座状叶呈匙状矩圆形 ,茎
生叶披针形或条形;全部叶被白色或灰白色密绵毛.头状花序多数排成复伞房状;总苞钟状 ,长 6 mm ,内
层苞片乳白色.瘦果黄褐色圆柱形 ,冠毛白色.全草药用 ,有活血散瘀 、平肝潜阳 、祛痰 、平喘及外用止血
等功效[ 1-3] .
尤其乳白香青中含有大量黄酮类化合物 ,研究表明黄酮类化合物具有广泛的生物活性及药理作用 ,
且无毒无害 ,如抗癌作用 、对肾脏的保护作用 、营养作用 、对心血管的保护作用 、抗辐射 、抗炎 、镇痛 、解热
及护肝等作用等.我们对乳白香青中黄酮类成分用化学试剂法进行定性[ 4-6] ,利用分光光度法 ,进行定量
测定[ 6-8] .方法简便快速 ,重复性好.
1　仪器与试剂
1.1　仪器
HH-4数显恒温水浴锅(常州国华电器有限公司);RE 5285A 旋转蒸发器(上海亚荣生华仪器厂);
721-可见分光光度计(上海第三分析仪器厂).
1.2　试剂和原料
芦丁(中国药品生物制品检定所);石油醚 、甲醇和乙醇等均为分析纯;乳白香青(2004年 7月采于
青海省互助北山林场 ,阴干 ,粉碎 ,过0.14 mm 筛).
2　溶液的配制
2.1　对照品储备液的制备
精密称取在 120 ℃恒温干燥的芦丁对照品 20 mg 至100 mL容量瓶中 ,加入无水乙醇 20 mL 置水浴
第 25卷第 1 期 分 子 科 学 学 报 Vol.25 No.1
2009年 2 月 JOURNAL　OF　MOLECULAR　SCIENCE February 2009
DOI :10.13563/j.cnki.jmo lsci.2009.01.016
上微热使溶解 ,放冷 ,加无水乙醇定容至刻度 ,摇匀即得.
2.2　供试品溶液的制备
精密称取乳白香青粗粉(0.14 mm)5.000 g ,置于索氏提取器中 ,加入适量石油醚回流提取至无色 ,
冷却后 ,倾出石油醚提取液 ,分别加入 60 mL甲醇 ,回流提取至无色 ,浓缩提取液置于 50 mL 容量瓶中 ,
用无水乙醇定容至刻度.
3　定性检验
3.1　乙酸镁试验
取样品溶液 1滴 ,滴于滤纸上 ,滴乙酸镁试液 1滴 ,晾干于 365 nm紫外灯下观察 ,出现淡蓝色荧光.
3.2　三氯化铝试验
取样品溶液 1滴 ,滴于滤纸上 ,滴三氯化铝试液 1滴 ,晾干 ,紫外(365 nm)灯下观察 ,出现亮黄色荧
光.
3.3　浓氨水试验
取样品溶液 1滴 ,滴于滤纸上 ,晾干 ,再用浓氨水熏 ,颜色加深.
3.4　3%三氯化铁溶液试验
样品溶液与三氯化铁溶液反应呈绿色.
3.5　金属离子合试验
样品溶液于亚硝酸钠溶液 、硝酸铝溶液 、氢氧化钠溶液反应呈樱红色.
4　定量测定
4.1　线性关系的确定
精密吸取对照品溶液 0.0 ,0.5 ,1.0 ,2.0 ,3.0 ,4.0 , 5.0 ,6.0 ,7.0 mL ,分别置于 25 mL 容量瓶中 ,加水
至 10mL ,加入5%NaNO2 1 mL ,混合均匀 ,放置6 min;然后加入10%Al(NO3)31 mL ,摇匀 ,放置6 min;加
1 mol·L-1NaOH 10 mL ,加水至刻度 ,摇匀 ,放置 15 min.以第一份溶液为空白 ,在 508 nm 处测吸光度值.
得回归方程 A=16.621c+0.000 3 ,相关系数 r=0.999 8 ,线性范围:0.004 ～ 0.056 g·L-1.
4.2　样品含量的测定
精密称取乳白香青粗粉 6 份 ,按“2.2”处理.按 “4.1”的操作得乳白香青中总黄酮含量为 80.72
mg·g-1 , RSD为 2.34%(n=6),见表 1.
表 1　样品中总黄酮含量测定结果
样品号 测得 A值 样品含量/(mg·g-1) 平均含量/(mg·g -1) RSD/ %
1 0.549 82.50
2 0.536 78.59
3 0.558 79.25 80.72 2.34
4 0.549 82.53
5 0.548 82.21
6 0.540 79.26
4.3　稳定性试验
取供试品溶液 0.1 mL ,置 25 mL 容量瓶中 ,按“4.1”操作 ,每 10 min测次 ,结果表明在 40 min内样品
溶液的稳定性良好 , RSD为 1.04%.
4.4　精密度考察
取对照品溶液 ,按“4.1”的操作 ,连续测定其吸光度 6次 ,RSD为 0.36%,表明本方法精密度良好.
73第 1期 包锦渊 ,等:乳白香青中黄酮类成分的定性定量分析
4.5　样品回收率实验
取样品液 5份 ,分别置于 25 mL容量瓶中 ,每份中加入芦丁对照品分别 4.0 mL ,按“4.1”的操作 ,得
平均回收率为 99.41%, RSD为 2.66%,结果见表 2.
表 2　加样回收率试验
测得量/(g·L-1) 样品含量/(g·L-1) 标准品量/(g·L-1) 回收率/ % 平均值/ % RSD/ %
0.065 2 0.033 0 0.032 2 100.62
0.063 7 0.033 0 0.030 7 95.93
0.066 1 0.033 0 0.033 1 103.44 100.12 2.99
0.065 7 0.033 0 0.032 7 102.19
0.064 5 0.033 0 0.031 5 98.44
5　结果讨论
(1)通过用乙醇和甲醇分别提取乳白香青中的黄酮 ,由实验得出的测定结果 ,表明用甲醇提取乳白
香青中的黄酮较为完全 ,提取含量较高.
(2)用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH体系与黄酮形成络合物的化学吸光分析法 ,其回归方程的相关分析和
方差分析结果表明 ,线性关系好 ,且线性范围宽 ,其方法简便快捷.
实验表明乳白香青中含有较高含量的黄酮 ,为从乳白香青中提取黄酮的最佳工艺研究提供了依据 ,
具有重要应用价值.
[参　考　文　献]
[ 1] 　中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(32)卷.[M] .北京:科学出版社 ,1999.
[ 2] 　中国科学院西北高原生物研究所.藏药志.[M] .西宁:青海人民出版社, 1991:465.
[ 3] 　袁彦平 ,刘兆平.[ J] .中国实验动物学报 , 2004(4):29-32.
[ 4] 　齐晓丽 ,孟祥颖 ,王淑萍,等.[ J] .分子科学学报 , 2006, 22(2):138-140.
[ 5] 　黄阿根 ,钱建亚.[ J] .食品与机械 , 2000(5):14-17.
[ 6] 　王淑萍 ,乌垠 ,孟祥颖 ,等.[ J] .分子科学学报 , 2007, 23(3):181-184.
[ 7] 　周兰香 ,黄阿根 ,谢凯舟,等.[ J] .中草药 , 2002(3):35-37.
[ 8] 　包贝华 ,杨建平 ,张丽 ,等.[ J] .南京中医药大学学报 , 2004 , 20(2):124-125.
Quantitative and qualitative analysis on flavonoids in anaphalis lacteal maxin
BAO Jin-yuan＊ ,LU Yong-chang ,BAI He-song
(Department of Chemistry of Qinghai Nationalities University , Xining 810007 , China)
Abstract:To determine the content of flavonoids , the content of flavonoids in anaphalis lacteal maxin was determined
by spectrophotometry at 508 nm with rutin as the standard.The content of flavonoids is 80.72 mg·g-1 in anaphalis
lacteal maxin.the average recovery rate is 100% and RSD=0.00%(n=5)The method is simple rapid and reli-
able and remove the effects of reducing.
Keywords:anaphalis lacteal maxin;flavonoids;qualitative analysis;quantitative analysis
74 分 子 科 学 学 报 第 25卷