全 文 ：第 40 卷第 9 期
2012 年 5 月
广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol． 40 No． 9
May． 2012
金盏银盘总黄酮提取工艺研究*
韦国兵，熊 魏，廖夫生
(江西中医学院药学院，江西 南昌 330006)
摘 要:对从金盏银盘中提取总黄酮的工艺进行了优化:首先以金盏银盘总黄酮的含量为考察指标，比较了乙醇回流提取和超
声提取方法;接着采用 L9(3
4)正交试验，以金盏银盘总黄酮含量为考察指标，考察了乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取温度 4 个因
素对提取总黄酮的影响。结果表明:超声提取法优于回流提取法，最优的提取工艺是用 20 倍量的 70%的乙醇在 60 ℃的温度下超声
提取两次，每次提取 1． 5 h。该工艺操作简单，结果可靠，为金盏银盘总黄酮的提取和金盏银盘的进一步开发奠定了基础。
关键词:金盏银盘;总黄酮;含量测定;提取工艺
中图分类号:R972 文献标识码:A 文章编号:1001 － 9677(2012)09 － 0064 － 02
* 基金项目:江西省卫生厅中医药计划项目(NO:2008B003) ;江西省教育厅青年科学基金项目(NO:GJJ10213)。
作者简介:韦国兵(1976 －) ，副教授，研究方向:中药活性成分分离与药物质量标准分析。
The Research of Extraction Process of Total Amount
of Flavones in Bidens biternata*
WEI Guo － bing，XIONG Wei，LIAO Fu － sheng
(College of Pharmacy，Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine，Jiangxi Nanchang 330006，China)
Abstract:The extraction process of the total amount flavones from Bidens biternata was optimized． Firstly，the ex-
traction processes of ethanol extraction and ultrasonic extraction method were compared by determination of the total a-
mount flavones in Bidens biternata． Then using the L9(3
4)orthogonal method，the impact of the four factors of ethanol
concentration and ethanol amount，extraction time and temperature on the extraction process were investigated by determi-
nation of the total extracted flavonoids． The ultrasonic extraction method was better than reflux extraction method，the opti-
mal extraction process was 20 times amount of 70% ethanol，at 60 ℃ temperature，twice ultrasonic extraction，and ex-
traction of 1． 5 h each． The process was rapid，sensitive and accurate，which laid a solid foundation for the extration of the
total flavones and comprehensive development of Bidens biternata．
Key words:Bidens biternate;total flavonoids;determination;extraction process
金盏银盘(Bidens biternate(Lour．)Merr． et Sherff)为菊科鬼针
属植物金盏银盘全草，药性:甘，微苦，凉。功用主治:清热，解
毒，凉血。主治感冒暑热，黄疸，泻痢，吐血，血崩，跌打损伤，痈
肿，鹤夕风，疥疮等［1］。据报道鬼针草能针草提取降低血压、降
低血浆胆固醇，提高血浆高密度脂蛋白，并能降低胰岛素，可抑
制 ADP、胶原诱导的血小板聚集［2］。近年来，临床研究表明从鬼
针草中提取的黄酮类化合物具有活血化瘀、通脉降压等功效，用
于治疗原发性高血压，心脑血管疾病，具有抗血栓形成作用，对
动脉硬化、血管栓赛有预防和治疗作用［3 － 4］。此外，还有研究发
现鬼针草总黄酮对 CCl4 所致的小鼠急性化学性肝损伤和大鼠肝
纤维化均有很好的防治作用［5］。金盏银盘是鬼针属类药材，该
药材含有较多的黄酮类化合物，因此金盏银盘总黄酮在医药领
域的应用具有广阔的前景，为了进一步开发和充分利用金盏银
盘中总黄酮，我们采用正交实验的方法对其提取工艺进行研究。
1 仪器和试剂
电子天平 AB104 － N;UNICO － UV － 2102 － PC 型紫外可见
分光光度计;KQ －500B型超声波清洗器。
芦丁标准品(100080 － 200707) ，中国药品生物制品检定所;
金盏银盘药材，江西樟树药材市场购买，由我校药用植物教研室
葛菲教授鉴定;无水乙醇、三氯化铝均为分析纯。
2 方法和结果
2． 1 对照品溶液的制备
取芦丁对照品 10 mg，精密称定，加 70%乙醇充分溶解，转移
至 25 mL容量瓶，加 70%乙醇定容到刻度，摇匀，得对照品溶液。
2． 2 测定波长选择
取芦丁对照品溶液 1． 0 mL于 10 mL容量瓶中，加 10% AlC3
溶液 1 mL(70%乙醇配制) ，用 70%乙醇定容到刻度，摇匀。以
70%乙醇溶液为空白，在 200 ～ 800 nm范围内扫描。结果表明芦
丁对照品溶液在 428 nm处有最大吸收，因此选择 428 nm为测定
波长。
第 40 卷第 9 期 韦国兵等:金盏银盘总黄酮提取工艺研究 65
2． 3 标准曲线的绘制
分别移取芦丁对照品溶液 0、0． 1、0． 2、0． 4、0． 6、0． 8、1． 0、
1． 2 mL 于 10 mL容量瓶，加 10%AlC3 溶液 1 mL，用 70%乙醇定
容到刻度，摇匀。以 70%乙醇溶液为空白，在 428 nm 范围内测
定吸光度，以吸光度(A)对溶液浓度(C)作图，绘制标准曲线。
得回归方程:
A =36． 5148C + 0． 0028，R =0． 9997
表明芦丁在浓度 0． 00415 ～ 0． 0815 mg /mL 范围内，A 对 C
具有良好的线性关系。
2． 4 供试品溶液的制备
取金盏银盘药材粗粉 4． 0 g，精密称定，置于 250 mL 的单口
烧瓶中，加入 20 倍量的 70%乙醇(80 mL) ，超声提取两次，提取
温度为 60 ℃，每次提取 1． 5 h，抽滤，合并滤液，药渣用 70%乙醇
洗涤2 ～ 3 次，一并纳入滤液，置于 250 mL的容量瓶中，用 70%乙
醇定容，摇匀，的供试品溶液，待用。
2． 5 金盏银盘总黄酮提取方法的建立
2． 5． 1 用乙醇超声提取
精密称取金盏银盘全草 4． 0 g，置于250 mL的单口烧瓶中，加入
20倍量的 70%乙醇(80 mL)，超声提取两次，提取温度为 60 ℃，每次
提取 1 h，抽滤，合并滤液，药渣用乙醇洗涤 2 ～3次，一并纳入滤液，
置于 250 mL的容量瓶中，用 70%乙醇定容，摇匀，待用。
2． 5． 2 用乙醇回流提取
精密称取金盏银盘全草 4． 0 g，置于 250 mL 的单口烧瓶中，
加入 20 倍量的 70%乙醇(80 mL) ，水浴回流提取两次，提取温度
为 80 ℃，每次提取 1 h，趁热抽滤，合并滤液，药渣用乙醇洗涤
2 ～ 3 次，一并纳入滤液，置于 250 mL的容量瓶中，用 70%乙醇定
容，摇匀，待用［6］。
2． 5． 3 样品溶液总黄酮含量测定
精密量取样品溶液 3 mL，置于 10 mL的容量瓶中，按标准曲
线制定方法进行操作，测定吸光度，由回归方程计算样品中总黄
酮的含量，结果见表 1。
表 1 提取方法与含量的关系
提取方法 吸光度值 金盏银盘总黄酮含量 C /(mg /g)
回流提取法 1． 084 6． 168
超声提取法 1． 251 7． 083
由表 1 结果可以看出，超声提取法优于回流提取法。超声
提取的总黄酮的量比回流提取的总黄酮的量约多 1． 1%。故本
实验选择用乙醇超声提取的方法提取金盏银盘总黄酮。
2． 6 乙醇超声提取法的工艺试验考察
2． 6． 1 正交试验因素水平的确定
取 9 份金盏银盘药材，每份约 4 g，用托盘天平称定，置于
250 mL的单口烧瓶中，按正交试验设计的要求进行实验。实验
采用 L9(3
4)正交设计，考察的影响因素有:A 乙醇的浓度(%)、
B乙醇的用量(倍)、C 提取时间(h)、D 提取的温度(℃)四个因
素，提取的次数均为两次，确定的因素水平见表 2。
表 2 乙醇超声提取工艺的正交试验设计
因素水平 A /% B /倍 C /h D /℃
1 70 10 0． 5 60
2 80 15 1． 0 70
3 90 20 1． 5 80
2． 6． 2 正交实验结果
表 3 正交实验结果
实验号 A B C D 总酮含量 /(mg /g)
1 1 1 1 1 5． 910
2 1 2 2 2 6． 606
3 1 3 3 3 7． 320
4 2 1 2 3 6． 259
5 2 2 3 1 7． 455
6 2 3 1 2 5． 726
7 3 1 3 2 4． 186
8 3 2 1 3 3． 682
9 3 3 2 1 5． 133
均值 1 6． 612 5． 452 5． 106 6． 166
均值 2 6． 480 5． 914 5． 999 5． 822
均值 3 4． 334 6． 060 6． 320 5． 754
极差 R 2． 278 0． 608 1． 214 0． 412
根据表 3 的分析结果可知，金盏银盘乙醇超声提取时，各个
因素对金盏银盘总黄酮提取效果的影响程度不同，各因素的影
响程度依次为 A ＞ C ＞ B ＞ D，可知对提取效果影响有统计学意义
的因素是乙醇浓度 A。综合直观的分析和方差分析的结果，金
盏银盘总黄酮提取的最优工艺为 A1B3C3D1，即用 20 倍量的
70%乙醇，在 60 ℃超声提取两次，每次提取 1． 5 h。
2． 6． 3 精密度和重复性实验
取同一供试品溶液，同法测定 5 次，分别计算供试品溶液中
总黄酮的含量，其 RSD 为 1． 26%，表明该方法具有较好的精密
度。
取同一样品 5 份，各 4． 0 g，精密称定后依法提取测定总黄酮
的含量，每份样品测定 3 次，并取平均值，计算 RSD 为 2． 47%。
说明在金盏银盘中总黄酮的提取和含量测定中，该提取工艺具
有良好的稳定性和重现性。
3 结 论
对金盏银盘总黄酮提取结果影响较大的是乙醇浓度和提取
时间，其次是乙醇的用量，影响最小的是提取温度。通过实验最
后确定最优工艺的提取条件是，乙醇浓度为 70%，提取时间为
1． 5 h，乙醇用量为药材量的 20 倍，提取温度为 60 ℃。经验证该
方法具有可靠地稳定性，为提高金盏银盘的使用价值和效率提
供了指导。
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