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第 2 3 卷 ,第 1
2 0 0 6 年 1
光 谱 实 验 室
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毛细管电泳法测定四味土木香散中
氧化苦参碱的含量
陈玉花①
(内蒙古民族大学化学学院
席海山“
内蒙古通辽市 0 2 8 0 4 3 )
a( 内蒙古民族大学分析测试中心 内蒙古通辽市 。 28 04 3)
摘 要 毛细管 电泳法测定四 味土木香散中氧化苦参碱的含量 。 苦参碱的 线性 范 围为 : 25 一
1 5 0子, g / m L相关系数为 0 . 9 9 9 8 ;线性方程为 y 一 0 . 7 4 2 2 6 8x 一 3 . 4 7 0 8 。 R SD ( n = 5 )为 0 . 改5 % ;平均 回 L友率为
9
.
76 %
。 该法简便 、 快速 、 结果准确 、 重现性好 。
关 键 词 毛细管电泳 , 四味土木香散 ,氧化苦参碱 。
中图分类号 ; 0 6 5 7 . 7 文献标识码 : B 文章编号 : 1 0 0 4一 8 1 3 8 ( 2 0 0 6 ) 0 1一 0 0 7 8 一 ( ) 3
1 前言
四味土木香散 (查干汤 )是由土木香 ( 2 0 0 9 ) 、 苦参 (2 0 9 ) 、 珍珠杆 ( 1 0 9 ) 、 山李 ( 5 0 9 )而组成的 ,
具有清瘟解表 , 用于瘟病初期 ,发冷发热 ,头疼咳嗽 ,咽喉肿痛 ,胸胁作痛作用的蒙成药 。其中豆科槐
属植物苦参 (S 吵h a ar F I口 v es ,’e sn A it . )的干燥根 ,苦 ,寒 , 归心 ,肝 , 胃 ,大肠 。 具有清热 、 祛湿 、 杀虫 、 利
尿之效 。 用于热痢 、 便血 、 黄疽尿闭 、 赤白带下 , 湿疹 ,皮肤瘤痒 。 苦参中主要含生物碱成分 ,同时还
含苦黄酮类 ,醒类成分 lj[ 。 生物碱中氧化苦参碱含量较高 。 多作为控制质量的有效成分 。 对生物碱
的测定有毛细管电泳法 (C E )和高效液相色谱法 ( H IP J c )等 〔2一 4〕 ,本文采用 毛细管电泳法对四味土
木香散中氧化苦参碱的含量进行测定 , 结果表明 : 该法操作简便 , 快速 ,准确 ,适于对四味土木香的
质量控制 。
2 实验部分
2
.
1 仪器和试剂
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一
1 05 L u m e x 高效毛细管电泳仪 (俄国 I , u m ex 公司 ) , 电子天平 , 四味土木香 (内蒙古蒙药
股份有限公司提供 、 产品批号为 0 5 0 3 0 2 1 42 5 ) ;氧化苦参碱的对照品 (购自中国药品生物检定所 ) ,
其他试剂均为分析纯 。
2
.
2 对照品和供试品容液的制备
称取氧化苦参碱 5 . o m g ,加人无水乙醇定容于 10 m I J 容量瓶中 ,制备 0 . 50 m g /m I J 氧化苦参碱
的对照品溶液 。
将四味土木香散 ,准确称取 0 . 2 9 ,至 50 m I J 容量瓶中加人氯仿 25 m l 矛 、 浓氨试液 l m I J ,密塞后振
摇放置 24 h 后超声萃取 2 次每次超声 30 m in ;过滤后留下的残渣用 10 m I J Z% H C I再提取 2 次 ,过
滤后滤液中加滴氨水 ,溶液呈碱性 。 然后用适量氯仿萃取 2次 ;合并氯仿液 。 置 65 C水浴蒸干 。 残
渣用乙醇定容至 10 m I J ,得供试品溶液 。
① 联系人 · 电话 : ( 0 4 7 5 ) 5 10 25 1 8 ; E 一 m a i l : e h e n y h 7 7 5@ y a h o o . e o n 、 . c : ,
作者简介 : 陈玉花 ( 1 9 7 1一 ) ,女 , 内蒙古通辽市人 ,讲师 ,主要从事蒙药成分分析研究 。
收稿 日期 : 2 0 0 5一 1 0一 1 7 ;接受 日期 : 2 0 0 5一 1 1一 0 7
第 l期 陈玉花等 :毛细管电泳法测定四味土木香散中氧化苦参碱的含量
2
.
3 实验方法
毛细管在使用前 ,分别用 0 · l m o l / I J N a O H 溶液 、 H ZO : 缓冲溶液冲洗 3 0 、 1 5 、 1 5 m in ,每次测定
后 ,依次用上述溶液洗 3m in 。 进样压力 30 x l护 P a ,进样时间 15 . 05 ,分离 电压 12 . ok v 。 实验在恒温
( 3 0
`
C ) 的条件下进行 。 该条件下测定氧化苦参碱对照品及四味土木香散供试品溶液进行毛细管电
泳分析 。
3 结果与讨论
3
.
1 毛细管电泳条件
缓冲溶液为 2 0m m o l / I J 的 T r is 一 4 o m m o l / I J N a H Z PO 4一 2 0%异丙醇 (用磷酸调到 p H ~ 5 . 5 ) ;检测
波长 Z o o n m ;分离电压为 12 kV (正电压 ) ,进样 (压力 3o X 1 0 2 P a ) 1 55 ,每次进样前分别用 o . l m o l / I J
H C I 0
.
l m o l / I
J
N a O H 和缓冲溶液冲洗 3 m in ,然后进样分析 。
3
.
2 标准样品和被测样品的毛细管电泳图
标准样品和被测样品的毛细管 电泳图见图 1 、 图 2 。
丫仁化 {`丁参碱
认化 苦参碱
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12 13 14
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图 l 氧化苦参碱标准样品 图 2 四味土木香散供试品
3
.
3 绘制校准曲线
分别吸取浓度为 25 、 50 、 75 、 1 0 、 1 50 拜g / m l 』 的氧化苦参碱对照品溶液 , 按毛细管电泳条件测
定 , 所得氧化苦参碱峰面积和浓度 (拼g / m I J )作校准曲线 。 校准曲线方程为 y ~ 0 . 74 2 68一 3 . 4 7 0 8 ;
r 一 0 . 9 9 9 8 。
3
.
4 样品含量测定
按供试品溶液的制备 5 份四味土木香散 ,制备成溶液 ,按毛细管电泳方法测定得到的每克四味
土木香散中的氧化苦参碱含量和 R S D % ,见表 1 。
表 1 氧化苦参碱含盆测定值 (m g / g )
次数 R S D ( ” = 5 )
氧化苦参碱 2 . 52 2 . 5 1 2 . 5 3 2 , 5 2
平均值
2 5 1 6 0
.
4 5写
3
.
5 回收率试验
采用加人回收法 ,在已知含
量的样品中准确加人一定量的
氧化苦参碱对照品 ,按供试样品
的处理和毛细管电泳条件测定 ,
结果见表 2 。
表 2 氧化苦参碱的加标回收结果
检测项 加人量
( n
i Z / 卫 )
平均测定量
(一1 19 八 1 11 )
平均回收率 (% )
丈, 老一 5 )
氧化苦参碱
原有值
( n
、 g / g )
2 5 1 6 4
.
5 1 0 9 9
.
7 6
光谱实验室 第 23 卷
4 结论
实验表明 ,上述建立的优选条件可使四味土木香散中的氧化苦参碱 , 14 m in 内实现基线分离 。
此实验操作具有分离时间更短 ,杂质干扰更少 ,使用有机溶剂少 ,操作简便的优点 ,是一种很有应用
前景的分析方法 。
参考文献
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《光谱实验室 》编辑部
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