全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2010，25(3)∶359 ～ 360
作者简介:邹继红(1971—)，女，内蒙古赤峰，硕士，副教授，从事药物分析的教学与科研工作。Email:zoujihong188@ 163. com
HPLC测定四味土木香散中的苦参碱
邹继红
(赤峰学院医学院，内蒙古 赤峰 024000)
摘要:目的 采用 HPLC测定四味土木香散中的苦参碱。方法 色谱柱为 TIANHE C18柱，流动相为甲醇 －乙腈 － 0. 1%磷酸
溶液(10∶6∶9，三乙胺调 pH7. 2)，流速为 1 mL·min －1，检测波长为 220 nm。结果 苦参碱进样量 0. 624 ～ 4. 16 μg与峰面积
呈良好的线性，回归方程为:Y = 877. 75X － 41. 89(r = 0. 9996);平均加样回收率为 98. 8%，RSD = 1. 24%。结论 所用方法简
便、快速、准确，适用于四味土木香散中苦参碱的质量控制。
关键词:反相高效液相色谱法;四味土木香散;苦参碱;含量测定
中图分类号:R917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2010)03 － 0359 － 02
Determination of matrine in Siwei Tumuxiang powder by HPLC
ZOU Ji － hong
(Medical College of Chifeng University，Chifeng，Neimenggu，024000 P. R. China)
Abstract:OBJECTIVE To establish an RP － HPLC method for the determination of matrine in Siwei Tumuxiang powder.METH-
ODS Seperation was achieved on a TIANHE C18 column and detected at 220 nm. The mobile phase was the mixture of methanol and
acetonitrile and 0. 1%H3PO4(10∶6∶9)at a flow rate of 1 mL·min
－1 . RESULTS The linear range was 0. 624 － 4. 16 μg(r =
0. 9996). The method recovery was 98. 8% with RSD of 1. 24% . CONCLUSION The method is simple，quick，accurate，and is
suitable for the determination of matrine in Siwei Tumuxiang powder.
Key words:RP － HPLC;Siwei Tumuxiang powder;Matrine;Content determination
CLC number:R917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2010)03 － 0359 － 02
四味土木香散系蒙古族验方，由土木香、珍珠
杆、苦参和山奈组成;具有清瘟解表之功效，主要用
于治疗瘟病初期的发冷发热、头痛咳嗽、咽喉肿痛、
胸肋作痛等疾病［1］。为有效控制其质量，文中采用
RP － HPLC 法测定了四味土木香散中的苦参碱，操
作简单、省时，结果准确、可信，精密度、重复性
较好。
1 实验部分
1. 1 仪器与试剂
Agilent 1200 高效液相色谱系统(美国安捷
伦)。苦参碱对照品(中国药品生物制品检定所);
甲醇、乙腈为色谱纯;水为娃哈哈纯净水;其余试剂
为分析纯;四味土木香散(内蒙古蒙药股份有限公
司，批号:081210、081211、081212);阴性对照药材
(内蒙古赤峰市中蒙医院)。
1. 2 方法与结果
1. 2. 1 色谱条件与系统适用性 色谱柱为 TIAN-
HE C18色谱柱(250 mm × 4. 6 mm，10 μm )，柱温为
室温，流动相为甲醇 －乙腈 － 0. 1%磷酸溶液(10∶
6∶9，三乙胺调 pH7. 2)，流速为 1. 0 mL·min －1，检
测波长为 220 nm，进样量为 20 μL。取苦参碱对照
品溶液、供试品和阴性样品溶液，在“1. 2. 1”项的色
谱条件下分别进样 20 μL，测定(图 1)。阴性样品
对苦参碱的测定无干扰，且苦参碱与其他组分可达
基线分离。
t/min
0 5 10
m
at
rin
e
A B C
m
at
rin
e
0 5 10 0 5 10
图 1 对照品(A)、阴性对照(B)和供试品(C)溶液的色谱图
Fig 1 Chromatograms of control solution(A)，negative sample
solution(B)and sample solution(C)
1. 2. 2 溶液的制备 精密称取 5. 2 mg 苦参碱，置
25 mL量瓶中，用流动相溶解，并定容，即得 208 mg·
L －1的对照品溶液。精密称取 3. 0 g 四味土木香散，
置具塞锥形瓶中，精密加入 25 mL 氯仿、2 mL 浓氨
水，超声 20 min，放冷，过滤，容器及滤器用 30 mL氯
仿分 3 次洗涤，合并滤液及洗液，置水浴上蒸干，残
渣加适量甲醇溶解，置 10 mL量瓶中，定容，用 0. 45
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2010.03.030
μm的微孔滤膜过滤，即得供试品溶液。按处方要
求制备不含苦参药材的样品，同法制成阴性样品
溶液。
1. 2. 3 标准曲线的制备 精密吸取 3、6、9、12、15、
18、20 μL苦参碱对照品溶液，进样，测定峰面积，以
进样量(μg)为横坐标、峰面积为纵坐标，绘制标准
曲线，得回归方程为:Y = 877. 75X － 41. 89(r =
0. 9996)。结果表明:苦参碱进样量 0. 624 ～ 4. 16
μg与峰面积具有良好的线性关系。
1. 2. 4 精密度试验 分别取 20 μL 208 mg·L －1的
对照品溶液及供试品溶液，进样，重复 5 次测定峰面
积。计算得对照品的 RSD = 0. 89%，样品的 RSD =
1. 26%，表明仪器精密度良好。
1. 2. 5 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，分
别于 0、4、8、12、24 h 时进样，测定峰面积。计算得
苦参碱峰面积的 RSD = 1. 79%，表明供试品溶液在
24 h内稳定。
1. 2. 6 重复性试验 精密称取同一批样品，按
“1. 2. 2”项下方法制备 6 份供试品溶液，按“1. 2. 1”
项的条件进样测定。计算得苦参碱的平均含量为
0. 583 mg·g －1，RSD = 1. 38%，表明方法的重复性
良好。
1. 2. 7 加样回收率试验 分别精密称取 1. 0 g 已
知苦参碱含量的同一批样品粉末(含量为 0. 583
mg·g －1)6 份，分别精密加入一定量 208 mg·L －1的
苦参碱对照品溶液，按“1. 2. 2”项方法处理后进样
20 μL，测定，计算苦参碱的回收率(表 1)。
表 1 加样回收率的试验结果(mg)
Table 1 Results of recovery test(mg)
Original Added Detected Recovery /% 珔X /% RSD /%
0. 592 0. 416 0. 996 97. 1 98. 8 1. 24
0. 546 0. 416 0. 958 99. 0
0. 601 0. 416 1. 017 100. 0
0. 583 0. 624 1. 186 96. 6
0. 576 0. 624 1. 192 98. 7
0. 594 0. 624 1. 213 99. 2
0. 569 0. 832 1. 391 98. 8
0. 584 0. 832 1. 418 100. 2
0. 591 0. 832 1. 420 99. 6
1. 2. 8 样品的测定 取 3 批样品 6 份，按“1. 2. 2”
项方法处理，然后分别精密吸取 20 μL 对照品溶液
和供试品溶液，进样，测定峰面积，按外标法计算苦
参碱的含量。3 批样品的平均含量分别为 0. 490、
0. 583、0. 549 mg·g －1。
2 讨论
以分光光度计扫描苦参碱对照品溶液时，最大
吸收为 220 nm，故选取检测波长为 220 nm。在流动
相选择的过程中，参考有关文献［2 － 7］，尝试用乙腈 －
水和甲醇 －水作为流动相，但苦参碱峰形不佳，故加
入三乙胺进行调节。当流动相为甲醇 － 乙腈 －
0. 1%磷酸溶液(10∶6∶9，三乙胺调 pH7. 2)时，苦
参碱的峰形对称，且与其他组分分离良好。曾采用
Agilent Eclipse XDB － C18柱测定，但苦参碱保留时
间太短，与阴性对照品前面的组分分不开，后改用
TIANHE C18柱，保留时间适中，且能与其他组分得
到良好分离。样品的预处理，曾试图直接用甲醇超
声萃取，发现苦参碱含量太低，故采用氯仿超声萃
取，滤液蒸干后，用甲醇溶解残渣，浓缩样品，提高了
测定的灵敏度。
参考文献:
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收稿日期:
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2009 － 09 － 07
申 明
由于作者的原因，本刊 2010 年第 2 期发表的朱英杰《HPLC 测定曼地亚红豆杉中的紫杉醇》一文
作废。
063 华 西 药 学 杂 志 第 25 卷