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田基黄色素的提取及其稳定性



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[责任编辑 仝燕]
[收稿日期] 20111205(006)
[第一作者] 王海涛,在读本科,从事中药制药研究,Tel:
15521105812,E-mail:1806304794@ qq. com
[通讯作者] * 张璐,本科,从事中药制剂工艺研究与质量标准
控 制, Tel: 020-61648263, E-mail: ulgnahz
@ 163. com
田基黄色素的提取及其稳定性
王海涛,彭金龙,张斌,张璐 *
(南方医科大学中医药学院,广州 510515)
[摘要] 目的:探讨不同溶剂提取田基黄色素的方法,并考察各种因素对色素稳定性的影响。方法:采用 6 种不同溶剂
提取色素,测试 pH、温度、光照、还原剂及氧化剂等因素对色素稳定性的影响。结果:田基黄色素用 95%乙醇 30 ℃超声提取
10 min 效果最佳,该色素在光照、强酸碱性、Mg2 +、Al3 +等条件下不稳定,食品添加剂、还原剂、氧化剂对色素的稳定性影响不
大。结论:该色素具有较好稳定性,但须防止光照,避免酸碱性条件下使用。田基黄色素可作为一种较好的天然植物色素
资源。
[关键词] 田基黄;色素;提取条件;稳定性
[中图分类号] R283. 6 [文献标识码] A [文章编号] 1005-9903(2012)09-0069-03
Extraction and Stability of Pigment from Hypericum japonicum
WANG Hai-tao,PENG Jin-long,ZHANG Bin,ZHANG Lu*
(College of Traditional Chinese Medicine,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China)
[Abstract] Objective: To investigate extraction methods of pigment from Hypericum japonicum by
different solvents, and investigate effects of different factors on stability of pigment. Method:Pigment was
extracted with 6 different solvents, stability of pigment was tested with pH,temperature,light,reducing agents
and oxidants. Result:Extraction effect of pigment was optimum by ultrasonic extraction 10 min with 95% ethanol
at 30 ℃,These pigment was unstable in light,strong acidity and alkaline,metal ions of Mg2 +,Al3 + and other
conditions. Food additives,reducing agents and oxidants had little effect on stability of pigment. Conclusion:
These pigment had good stability,but it must prevent pigment using in light and avoid acidity and alkaline
condition. Pigment from H. japonicum could be used as a good resource of natural plant pigment.
[Key words] Hypericum japonicum;pigment;extraction condition;stability
田基黄药材收载于《中华人民共和国卫生部
药品标准》中药材第一册[1],具有利湿退黄、清热
解毒、活血消肿、跌打损伤等功效。据相关报道
表明田基黄含有大量黄酮类成分[2,3],其中黄酮
类色素作为一种天然色素,具有抗氧化、抗突变
性、类雌激素等作用[4],在食品、化妆、医药方面
运用较多。目前对田基黄色素的研究尚无报道,
本试验对其提取工艺进行考察,并对其稳定性进
行初步探讨,以期为田基黄色素的推广应用提供
试验依据。
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第 18 卷第 9 期
2012 年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 18,No. 9
May,2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.09.068
1 材料
UV-2401PC 型紫外-分光光度计(日本岛津) ,
JA2003 型电子天平(上海良平仪器仪表有限公司) ,
pHS-25 型数显 pH 计(上海精密科学仪器有限公
司) ,DFT-200 型手提式高速万能粉碎机(温岭市林
大机械有限公司)。
田基黄药材鲜品(产地广东)购于白云山农贸
市场,经南方医科大学中医药学院中药鉴定教研室
陈兴兴老师鉴定为藤黄科金丝桃属植物田基黄
Hypericum japonicum Thunb. 的鲜品。乙醇、蔗糖、阿
斯巴甜、甜菊素为食品级,其余试剂为分析纯。
2 方法及结果
2. 1 提取溶剂考察 根据溶剂极性及安全性考
虑,选用蒸馏水、甲醇、95%乙醇、丙酮、乙酸乙酯、石
油醚(60 ~ 90 ℃)等溶剂进行比较。
取田基黄全草(鲜品) ,剪切成 2 ~ 3 cm,粉碎,
分别称取 6 份粉末,每份 1. 0 g,按料液比 1∶ 10 分别
加入上述溶剂,30 ℃下超声提取 10 min,滤过得翠
绿色澄明溶液。置紫外分光光度计下检测,以各提
取溶剂作为空白溶液,在波长 664 nm 处测定吸收
度。结果吸收度分别为 0,0. 78,0. 63,0. 48,0. 34,
0. 02;其中 95% 乙醇和甲醇提取液吸收度较大,考
虑到医用乙醇具有成本低廉和无毒性的特点,同时
对色素的提取效果较好。故最终选用 95% 乙醇为
提取溶剂。
2. 2 影响因素考察
2. 2. 1 样品溶液制备 取 10 g 田基黄鲜品置试管
中,按料液比 1 ∶ 100 加入 95% 乙醇在 30 ℃下超声
提取 10 min,滤过得翠绿色澄明溶液,备用。
2. 2. 2 温度 取 9 份 2. 2. 1 项下溶液置于试管
中,每份 5 mL,分别在 0,4,20,30,40,50,60,70,80
℃温度下放置 30 min,取出,用紫外-可见光光度计
于 664 nm 波长处测定吸光度。不同温度下,其颜色
均无明显变化;吸光度随着温度升高而降低,但变化
不大(图 1)。
图 1 温度对田基黄色素稳定性的影响
2. 2. 3 光照时间 取 7 份 2. 2. 1 项下溶液于试管
中,每份 5 mL,于照度(4 500 ± 500)lx 分别光照 0,
2,4,6,8,10,15,30 min,紫外-可见光光度计于 664
nm 波长处测定吸光度(图 2)。
图 2 光照时间对田基黄色素稳定性的影响
2. 2. 4 pH 取 9 份 2. 2. 1 项下溶液置于试管中,
每份 5 mL,分别用 HCl 溶液调 pH 为 2,3,4,5,6,
NaOH 溶液调节 pH 为 7,8,9,放置 30 min,用紫外-
可见光光度计于 664 nm 波长处测定吸光度(图 3)。
图 3 pH 对田基黄色素稳定性的影响
2. 2. 5 H2O2 取 6 份 2. 2. 1 项下溶液置于试管
中,每份 15 mL,分别加入质量浓度为 0. 5%,1%,
2%,5%,10%的 H2O2 溶液各 2 mL,放置 0,15,30,
45,60 min 后,用紫外-可见光光度计于 664 nm 波长
处测定吸光度,结果发现加入氧化剂后,颜色无明显
变化,但吸光度会降低,减至一定程度时趋于稳定
(图 4)。
图 4 H2O2 对田基黄色素稳定性的影响
2. 2. 6 亚硫酸钠 取 5 份 2. 2. 1 项下溶液置于试
管中,每 份 15 mL,加 入 质 量 浓 度 为 0. 025%,
0. 05%,0. 1%,0. 2%,0. 5% 的亚硫酸钠溶液各 2
mL,放置 0,15,30,45,60 min 后,用紫外-可见光光
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第 18 卷第 9 期
2012 年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol. 18,No. 9
May,2012
度计于 664 nm 波长处测定吸光度,结果发现加入该
抗氧剂后,溶液吸光度随着时间和抗氧剂浓度增加
而变化,但不是非常明显,说明色素溶液在此条件下
稳定性较好(图 5)。
图 5 亚硫酸钠对田基黄色素稳定性影响
2. 2. 7 食品添加剂 取 17 份 2. 2. 1 项下溶液 20
mL 于试管中,其中 1 份作为“0”,其余分别加入葡
萄糖、甜菊糖、NaCl、苯甲酸各 0. 5,1. 0,1. 5,2. 0 g
使其溶解,放置 10 min 后用紫外-可见光光度计于
664 nm 波长处测定吸光度,结果发现加入食品添加
剂后吸光度均有降低,但继续加入食品添加剂则没
有明显变化(图 6)。
图 6 食品添加剂对田基黄色素稳定性影响
2. 2. 8 金属离子 取 21 份 2. 2. 1 项下溶液 15 mL
于试管中,其中 1 份作为“0”,其余分别加入 0. 1%,
0. 2%,0. 5%,1%,2%的氯化钙、硝酸铝、氯化镁、硝
酸银、硫酸铜、硫酸锌溶液,放置 24 h 后用紫外-可
见光光度计于 664 nm 波长处测定吸光度。结果发
现加入氯化镁后,翠绿色减淡,随加入量增多,变化
越显著,渐成为黄棕色。加入硝酸铝后,完全变为棕
黄色(图 7)。
图 7 金属离子对田基黄色素稳定性影响
3 讨论
田基黄色素光照后,翠绿色溶液渐变为棕黄色,
且随光照时间的延长,颜色改变愈大。有文献报
道[5]田基黄中含有大量槲皮素-7-O-鼠李糖苷,该成
分极不稳定在空气中易被氧化,生成槲皮素-7-O-鼠
李糖,这是田基黄色素变色的主要原因。
调节 pH 后,溶液颜色无明显变化,但在强酸、
强碱性条件下,吸光度改变显著,说明该色素在此环
境下不稳定而在中性条件下相对稳定,因此田基黄
色素可使用在化妆品制剂中。
[参考文献]
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王海涛,等:田基黄色素的提取及其稳定性