全 文 ：＊延边大学药学院 2001 届毕业生
[ 收稿日期] 　2001-07-24
[ 作者简介] 　张学武(1973-), 男 , 助教 , 医学硕士;金海玲
(1949-),女(朝鲜族), 副研究员;尹宗柱(1934-), 男(朝
鲜族),教授.
珍珠梅对亚硝酸钠和四氯化碳所致肝损伤的保护作用
张学武 ,金海玲 ,朴春梅 ,赵　楠＊ ,尹宗柱
(延边大学医学院 生物化学教研室 , 吉林 ,延吉 133000)
[ 摘要] 　[ 目的] 研究珍珠梅乙酸乙酯提取物对亚硝酸钠清除率和大鼠血清谷草转氨酶 、琥珀酸脱氢酶
的影响.[ 方法] 在体外测定珍珠梅乙酸乙酯提取物作用下亚硝酸钠清除率的变化 , 在四氯化碳所致急
性肝损伤大鼠上测定谷丙转氨酶 、琥珀酸脱氢酶活性 ,在小鼠肝匀浆中测定脂质过氧化的产物丙二醛.
[ 结果] 珍珠梅乙酸乙酯提取物在体外对亚硝酸钠有明显的清除作用 , 能抑制肝匀浆中脂质过氧化产物
丙二醛的产生;在体内能显著降低由于四氯化碳肝损伤所致的大鼠血清谷丙转氨酶的升高 , 明显回升肝
线粒体琥珀酸脱氢酶活性的降低.[ 结论] 珍珠梅乙酸乙酯提取物对亚硝酸钠 、四氯化碳所致的肝损伤
具有保护作用.
[ 关键词] 　创伤和损伤;肝;植物 ,药用;琥珀酸脱氢酶;丙二醛;大鼠
[ 中图分类号] 　R575　　　[ 文献标识码] 　A　　　[ 文章编号] 　1000-1824(2001)03-0186-03
Protective effects of Sorbaria Sorbifolia extract on ethyl acetate and
carbon tetrachloride-induced liver damage in rats
ZHANG Xue-wu ,JIN Hai-ling ,PIAO Chun-mei ,ZHAO Nan ,YIN Zong-zhu
(Department of Biochemistry , Yanbian University College of Medicine , Yanji 133000 , J ilin , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE To study the effects of the Sorbaria Sorbi fol ia ex t ract for clearance rate of ethyl
acetate , glutaminate-pyruvate t ransaminase(GPT)and succinate dehydrogenase(SD)in rats.METHODS The
injury of rat liver w as induced by ethyl acetate and carbon tet rachloride.It w as detected f rom serum by colori-
metric method in vit ro that the clearance rate of ethy l nat riumacetate , activity of GPT and SD and the content of
liver malondiadehyde in mice.RESULTS The Sorbaria Sorbi folia ex tract increased significantly clearance rate
of ethy l acetate in rats in vitro , reduced the content of liver malondiadehyde in mice damaged by carton tetra-
chloride and the activi ty of GPT in vivo and increase the activity of SD of liver mitrochondia in rats damaged by
carbaon tetrachloride.CONCLUSION The Sorbaria Sorbifolia ext ract has protective effects for ethy l acetate
and carton tet rachlo ride-induced liver damage in rats.
Key words:wounds and injuries;liver;plants , medicinal;succinate dehydrogenase;malondialdehyde;rats
　　珍珠梅(Sorbaria Sorbifolia)属蔷薇科植物 ,
又称山高粱 、八木条 ,广泛分布于云南 、贵州 、四
川、湖北、甘肃、宁夏及东北 ,有活血化瘀、消肿
止痛 、治骨折及跌打损伤的作用[ 1] .1980年代初
期研究发现珍珠梅水提物有抗缺氧作用[ 2] .本
实验通过体内外实验研究珍珠梅乙酸乙酯提取
·186· Journal of Medical Science Yanbian University　Sep.2001 Vol.24 No.3
DOI :10.16068/j.1000-1824.2001.03.009
物对亚硝酸钠和四氯化碳中毒的影响.
1　材料和试剂
1.1　药物　为茎 、叶 、花 ,采集于吉林省延吉
市市郊.乙酸乙酯提取物:分 3 次浸泡珍珠梅
于乙酸乙酯中 ,温度为 40℃,每次 12 h ,合并
3次滤液 ,用旋转蒸发器减压浓缩 ,获珍珠梅
乙酸乙酯提取物浸膏(1 g 珍珠梅有效成分相
当于 33.3 g 生药).
1.2　试剂　硫代巴比妥酸 、2 , 6-二氯酚靛酚
为 MERCK 公司产品 ,吩嗪二甲酯硫酸盐是
FLUKA公司产品 ,其他试剂均为国产分析
纯.
1.3　动物　为昆明种小鼠和 Wistar 雌性大
鼠 ,大鼠体重为 180 ～ 200 g ,由延边大学医学
院实验动物科提供.
1.4　仪器　为 Centrikon-1055 型超速离心
机 、LXJ-64-10 型离心机 、CSS-200 型超声波
粉碎机 、722 型分光光度计 、旋转蒸发仪 、电
热恒温水浴箱.
2　方法与结果
2.1　珍珠梅乙酸乙酯提取物在体外对亚硝
酸钠的清除作用　操作及结果见表 1.
表 1　珍珠梅乙酸乙酯提取物在体外对亚硝酸钠的清除作用
1 mol/ L亚硝
酸钠(mL) 提取物浓度(g/ L)
光密度(A 540)
清除率(%)
对照管 0.1 0 0.362 0
测定管 1 0.1 1.200 0.099 75.41
2 0.1 0.600 0.186 48.61
3 0.1 0.120 0.289 20.17
4 0.1 0.012 0.301 16.85
上述反应液中再加入一定量的 pH 3.0
的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液 ,使之变成等体
积 ,置于(37±1)℃水浴保温 1 h ,加入蒸馏水
2.5 mL 、格氏试剂 0.5 mL(现用现配),静置
20 min ,用 722分光光度计测 A540值.按下式
计算亚硝酸钠清除率.清除率 =(1 -A样/
A对照)×100%(A样:样品管吸光度;A对照:对
照管吸光度).
实验结果表明 ,珍珠梅乙酸乙酯提取物
对亚硝酸钠有明显的清除作用 ,而且随剂量
的增加 ,清除率明显提高.
2.2　珍珠梅乙酸乙酯提取物对四氯化碳所
致肝损伤的保护作用
2.2.1　珍珠梅乙酸乙酯提取物对四氯化碳所
致小鼠肝匀浆丙二醛的清除作用　肝匀浆制
备:小鼠断头处死 ,立即取出肝脏 ,用生理盐水
洗净 ,滤纸吸干 ,称重.按 1∶10比例加入冰冷
的 pH 7.4 , 10 mmol/L Tris-盐酸缓冲液制备肝
匀浆 ,然后按表 2操作.上述反应液中再加入
一定量的 pH 7.4 , 10 mmol/L Tris-盐酸缓冲液
使之变为等体积 ,置于 37 ℃水浴中振荡 30
min ,取出后加入 200 g/ L三氯醋酸 2.0 mL终
止反应 ,并使蛋白质沉淀 ,静止 10min ,3 000 r/
min离心 ,取上清液 2.0 mL ,加入 10 g/ L硫代
巴比妥酸 1.0mL , 90 ℃煮沸 10 min ,用 722型
分光光度计测波长 532 nm处的光密度 ,其数
据表示丙二醛含量.由表 2可见 ,珍珠梅乙酸
乙酯提取物能抑制过氧化脂质降解产物丙二
醛的生成 ,具有抗氧化作用.
表 2　珍珠梅乙酸乙酯提取物对四氯化碳所致小鼠肝匀浆
丙二醛的影响
肝匀浆(mL) 10 g/ L 四氯化碳(mL) 提取物浓度(g/ mL)
丙二醛(A 532)
清除率(%)
对照管 1.0 0.5 0 0.284
样品管 1 1.0 0.5 0.222 0.121 57.39
样品管 2 1.0 0.5 0.111 0.146 48.59
样品管 3 1.0 0.5 0.055 0.186 34.51
样品管 4 1.0 0.5 0.028 0.217 23.59
样品管 5 1.0 0.5 0.014 0.225 20.77
·187·延边大学医学学报　2001 年 9 月　第 24卷　第 3期
2.2.2　珍珠梅乙酸乙酯提取物对四氯化碳所
致肝损伤大鼠谷丙转氨酶的影响　取Wistar大
鼠 30只 ,分为正常组 、模型组、给药组 ,每组 10
只.给药组按 13.2 g/kg剂量珍珠梅乙酸乙酯提
取物灌胃5 d ,正常组、模型组等体积生理盐水灌
胃.第 4 d ,模型组和给药组按 5.0mL/kg剂量给
背部皮下注射四氯化碳 ,正常组给背部皮下注
射等体积生理盐水.皮下注射四氯化碳 24 h后 ,
眼球取血 ,分离血清.用北京北化康泰临床试剂
有限公司的试剂盒检测谷丙转氨酶 ,结果见表
3.结果表明 ,珍珠梅乙酸乙酯提取物明显降低
四氯化碳所致大鼠血清丙转氨酶活性的升高.
表 3　珍珠梅乙酸乙酯提取物对四氯化碳所致肝损伤大鼠
谷丙转氨酶的影响( x±SD)
组别 动物数(只) 四氯化碳(mL/ kg) 提取物(g/ mL) 谷丙转氨酶(IU/ L)
正常组 10 0 0 18±3＊
模型组 9 5.0 0 285±27
给药组 9 5.0 13.2 97±16＊
与模型组比较 , ＊ P<0.01
2.2.3　珍珠梅乙酸乙酯提取物对四氯化碳所
致肝损伤大鼠琥珀酸脱氢酶的影响　模型同
2.2.2 ,处死大鼠后取出肝脏 ,称取 1.0 g ,放入
置有冰冷匀浆介质(pH=7.5 , 0.25 mol/ L蔗
糖 , 0.005mol/L Tris-盐酸 , 0.001mol/ L乙二胺
四乙酸)的玻璃匀浆器中 ,在冰浴中匀浆 ,制成
10 g/ L的肝组织匀浆.将匀浆在 2 000×g 下
离心 10 min ,取上清液用低温超速离心机以
16 000×g 离心 20min ,取其沉淀部分 ,即为线
粒体.再加入 20 g/L蔗糖溶液 8 mL ,混匀后制
成线粒体悬浮液 ,参照文献[ 3] 的方法进行琥
珀酸脱氢酶活力的测定 、蛋白质含量按双缩脲
法测定 ,结果见表 4.结果表明 ,珍珠梅乙酸乙
酯提取物明显升高四氯化碳所致大鼠肝线粒
体琥珀酸脱氢酶活性的降低.
表 4　珍珠梅乙酸乙酯提取物对四氯化碳所致大鼠肝线粒
体琥珀酸脱氢酶活性的影响( x±SD)
组别 动物数(只) 四氯化碳(m L/kg) 提取物(g/ mL) 琥珀酸脱氢酶(IU/ L)
正常组 10 0 0 6.27±1.07＊
模型组 9 5.0 0 0.44±0.13
给药组 9 5.0 13.2 2.80±0.60＊
与模型组比较 , P<0.05
3　讨论
亚硝酸钠在酸性条件下是一种强氧化剂 ,
其分解产物一氧化氮是一种活性氧 ,做为自由
基可激发脂质过氧化反应.亚硝酸钠既可以使
血红蛋白变性引起缺氧性损伤 ,本身又能产生
自由基而可直接损伤细胞.本实验结果表明 ,珍
珠梅乙酸乙酯提取物在体外对亚硝酸钠有明显
的清除作用;其次珍珠梅乙酸乙酯提取物在体
外能清除自由基 ,抑制四氯化碳所致丙二醛生
成.目前公认的四氯化碳引起肝损伤的机理系
四氯化碳在肝微粒体细胞色素 P450激活下生成
自由基CCl3·及Cl·,这些自由基可与肝细胞内
大分子发生共价结合 ,也可攻击膜下饱和脂质 ,
引起脂质过氧化 ,损伤肝细胞[ 4] ,细胞浆内谷丙
转氨酶渗入血液 ,线粒体内琥珀酸脱氢酶释放 ,
结果血清谷丙转氨酶活性升高、丙二醛含量增
加、线粒体内琥珀酸脱氢酶含量下降 ,而给予珍
珠梅乙酸乙酯提取物对四氯化碳肝损伤所致的
大鼠血清谷丙转氨酶的升高有明显降低作用 ,
明显回升四氯化碳肝损伤所致的大鼠肝线粒体
琥珀酸脱氢酶活性的降低.
[参　考　文　献]
[ 1] 　江苏新医学院 编.中华大辞典[ M] .上海:上海科学技
术出版社 , 1994.8.[ 2] 　李亦秀 ,张永春 , 李文汉.中草药山高粱的抗缺氧作用
的初步研究[ J] .哈尔滨医科大学学报 , 1981 , 4:1.[ 3] 　姜妙娜.肝细胞琥珀酸脱氢酶活力检测条件的探讨
[ J] .大连医学院学报 , 1991 , 13(1):76.[ 4] 　朴文花 ,韩颖 , 孙权 ,等.祁州漏芦对亚硝酸钠和四氯化
碳所致肝损伤的保护作用[ J] .中国中医药科技 , 2000 ,
7(增刊):19.
·188· Journal of Medical Science Yanbian University　Sep.2001 Vol.24 No.3