全 文 ：盘龙七中儿茶素的含量测定
冯永辉1，李 鹏1，汪兴军1，张 博1，郭耀武2
(1．西安医学院药学院，陕西西安 710021;2．陕西省食品药品检验所，陕西西安 710061)
摘要 ［目的］建立 HPLC测定盘龙七中儿茶素含量的方法。［方法］采用超声波辅助提取，HPLC法测定，色谱条件为:色谱柱为 Kroma-
sil-C18(4． 6 mm ×150 mm，5 μm)，流动相为无水甲醇 －水 －冰醋酸(15∶84∶1，V/V /V) ，流速为 1． 0 ml /min，检测波长为 276 nm。［结果］
儿茶素的线性范围为 0． 624 ～3． 12 μg /ml(r =0． 999 3)，平均回收率为 100． 05%，RSD为 1． 73%(n =6)。［结论］该测定方法简便、准确，
可用于盘龙七中儿茶素的含量测定。
关键词 盘龙七(RHIZOMA BERGENIAE SCOPULOSAE);儿茶素;高效液相色谱法
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2011)28 －17235 －02
Determination of Catechin Content in RHIZOMA BERGENIAE SCOPULOSAE by HPLC
FENG Yong-hui et al (College of Pharmacy，Xi’an Medical University，Xi’an，Shaanxi，710021，China)
Abstract ［Objective］The aim was to establish a determination method for the catechin content of RHIZOMA BERGENIAE SCOPULOSAE
by HPLC． ［Method］Ultrasonic-assisted extraction was adopted and HPLC was used for the determination． The chromatographic conditions
were:Kromasil-C18(4． 6 mm × 150 mm，5 μm )as the column，methanol-water-glacial acetic acid (V /V /V，15∶84∶1)as the mobile phase，1． 0
ml /min flow rate，and 276 nm detection wavelength． ［Result］ The linear range of catechins was between 0． 624 and 3． 12 μg /ml(r =
0． 999 3);the average recovery was 100． 05%，with RSD = 1． 73%(n = 6)．［Conclusion］This method was simple and accurate，and could be
used for the determination of catechins in RHIZOMA BERGENIAE SCOPULOSAE．
Key words RHIZOMA BERGENIAE SCOPULOSAE;Catechin;High Performance Liquid Chromatography
基金项目 陕西省科技厅，项目编号:2010JM3014。
作者简介 冯永辉(1972 － ) ，男，陕西韩城人，副教授，从事天然药物学
的教学与研究工作，E-mail:f20048858@ 126． com。
收稿日期 2011-06-15
盘龙七(RHIZOMA BERGENIAE SCOPULOSAE)为虎耳
草科(Saxifragaceae)植物秦岭岩白菜 Bergenia scopulosa T． P．
Wang的干燥根茎，主要分布在陕西等地，全年可采。盘龙七
又名石白菜、地白菜，其性平，味涩微苦，入肺、脾、肝、膀胱
经。盘龙七具有补脾健胃，收涩固肠，除湿利水，活血的功
效，临床可用于治疗急慢性肠胃炎，浮肿，崩漏，白带，淋症，
痢疾，黄水疮，秃疮，疥癣等。去须根，晒干用。该药材尚无
国家或地方药材标准。儿茶素具有止泻、解毒、抗病毒、杀真
菌、保护肝脏等作用［1 －4］。为了更好地控制该药材的质量，
笔者采用高效液相色谱法对盘龙七药材中主要药效成分儿
茶素含量的测定方法进行研究，现报道如下。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 试材。盘龙七，采于太白山，经鉴定为 Bergebia scopu-
losae。
1． 1． 2 主要仪器。DIONEX高效液相色谱仪，配置:四元泵、
手动进样器、真空脱气机、恒温柱温箱、Chromeleon数据处理
软件，购自于戴安中国有限公司;KQ-202 型超声波清洗器，
购自于昆山市超声仪器有限公司;GR-202 型分析天平，购自
于日本 AND公司。
1． 1． 3 主要试剂。儿茶素对照品购自中国生物制品检定
所，供含量测定(批号:877-200001) ;所用试剂均为分析纯，水
为重蒸水。
1． 2 方法
1． 2． 1 样品中儿茶素的提取。精确称取盘龙七药材粗粉
1． 10 g，用浓度 100%甲醇 50 ml浸泡 60 min，再超声提取 45
min(功率 300 W，40 kHz) ，滤过，用少量无水甲醇淋洗滤
器，滤液用浓度 100%甲醇定容于 50 ml 棕色量瓶中，即得
供试品溶液。
1． 2． 2 标准溶液的配置。精确称取经五氧化二磷真空干燥
48 h的儿茶素对照品 3． 12 mg，置 10 ml量瓶中，用无水甲醇
溶解并稀释至刻度，制成每 1 ml含 0． 312 mg的对照品溶液。
1． 2． 3 HPLC色谱条件。色谱柱为 Kromasil － C18 column (4． 6
mm ×150 mm，5 μm );流动相为甲醇(原液)－水 －冰醋酸(原
液)(15∶84∶1，V/V/V)，流速为 1． 0 ml /min;柱温 30 ℃;检测波
长为 276 nm，理论塔板数以儿茶素计不低于3 000。
1． 2． 4 方法学考察。
1． 2． 4． 1 专属性考察。分别吸取(+)儿茶素对照品溶液、供
试品溶液、空白溶剂各 10 μl进样，按上述色谱条件进行检测。
1． 2． 4． 2 线性关系的考察。精密吸取儿茶素对照品溶液 2、
4、6、8、10 μl，进样测定，以儿茶素的浓度(μg /ml)为横坐标，
以峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。
1． 2． 4． 3 精密度的考察。精密吸取同一供试品溶液 10 μl，
重复进样 5次，分别测定峰面积并计算 RSD。
1． 2． 4． 4 重复性试验。取同一批药材粉末 5 份，制成供试
品，按上述条件，测定其儿茶素含量并计算平均含量和 RSD。
1． 2． 4． 5 稳定性试验。分别精密吸取同一供试品溶液 10
μl，于 0、2、4、6、8、10、12 h进样，测定儿茶素峰的峰面积积分
值，计算得 RSD。
1． 2． 4． 6 加样回收试验。取已知含量的药材粉末 6份，每份
0． 120 0 g，精密称定，分别加入儿茶素对照品适量，按供试品溶
液处理方法操作，测定儿茶素峰面积，计算回收率和 RSD。
1． 2． 5 样品测定。取 3份样品溶液，在“1． 2． 3”的色谱条件
下，测定盘龙七中儿茶素的含量。
2 结果与分析
2． 1 方法学考察
2． 1． 1 专属性考察。由图 1 可知，儿茶素对照品、供试品
图谱中在 10 min左右出现儿茶素特征吸收峰，供试品中儿
安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39(28):17235 － 17236 责任编辑 石金友 责任校对 况玲玲
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.28.200
茶素峰与其他组分色谱峰达到了基线分离，空白溶剂中无 吸收峰(图 1)。
图 1 儿茶素专属性试验结果
Fig． 1 Results of specificity tests of catechin
2． 1． 2 线性关系的考察。计算并绘制的回归曲线方程为 Y
=3． 277X +1． 015 7，r =0． 999 35。结果表明，儿茶素在0． 624
～3． 12 μg /ml范围内线性关系良好。
2．1．3 精密度的考察。分别测定峰面积为 39． 491、38． 601、
39．668、40．139、38．956，RSD为1．553%，表明该方法精密度良好。
2． 1． 4 重复性试验。测定其儿茶素含量分别为 0． 155 7%、
0． 150 3%、0． 153 4%、0． 152 2%、0． 157 5%，计算得平均含量
为 0． 153 8%，RSD为 1． 846%，表明该方法试验重复性较好。
2． 1． 5 稳定性试验。测定儿茶素峰的峰面积积分值分别为
39． 903、39． 458、39． 446、39． 093、38． 862、38． 573、38． 097，计算
RSD为 1． 550%，表明供试品在 12 h内基本稳定。
2． 1． 6 加样回收试验。由表 1 可知，平均回收率为
100． 05%，RSD为 1． 73%(n = 6) ，表明该方法具有良好回收
率，可用于盘龙七中儿茶素的含量测定。
表 1 回收率试验结果
Table 1 Experimental results of recovery
编号
No．
样品中儿茶
素的含量
Catechin
content in
sample
mg
加入的儿
茶素的量
Amount of
added ca-
techin∥mg
测得儿茶
素的总量
Total catec-
hin measu-
red∥mg
回收率
Recovery
rate∥%
平均回
收率
Average
recovery-
rate∥%
RSD
%
1 1． 058 0． 90 1． 953 99． 44
2 1． 045 0． 90 1． 964 102． 11
3 1． 043 1． 00 2． 027 98． 40
4 1． 042 1． 00 2． 031 98． 90 100． 05 1． 73
5 1． 039 1． 10 2． 129 99． 09
6 1． 036 1． 10 2． 162 102． 36
2． 2 样品含量测定 根据试验方法测得 3份盘龙七中儿茶
素的平均含量为 0． 150%。
3 讨论
3． 1 流动相选择 试验对多种流动相及其比例进行了比
较，发现选择无水甲醇 －水 －冰醋酸(15∶84∶1，V /V /V)作为
流动相时，儿茶素与其他物质分离效果良好，结果比较理想。
3． 2 检测波长的选择 参考药典对儿茶素项下检查方法
的规定，应用紫外可见光分光光度计(UV1100)在 270 ～ 282
nm波长间对儿茶素对照品溶液进行扫描以确定最大吸收波
长。由图 2可知，该化合物在 276 nm 处吸光度最大。故试
验的检测波长确定为 276 nm。
图 2 儿茶素紫外图谱
Fig． 2 UV spectrum of catechin
3． 3 结论 该方法处理简单，重复性好，结果准确，可用于
盘龙七的质量控制。通过测定显示，来源于虎儿草科岩白菜
属植物秦岭岩白菜(Bergenia scopulosa T． P． Wang)根茎的盘
龙七中儿茶素的含量为 0． 150%。
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