全 文 :基金项目:陕西省自然科学基金资助项目(编号:2010JM3014);陕西省食品药品监督管理局资助项目(陕西省中药材标准 2010 - 86)
作者简介:冯永辉,男,陕西韩城人,西安医学院副教授,从事天然药物学研究,Tel:(029)86177539,E - mail:f20048858@ 126. com
麸炒对盘龙七中岩白菜素含量的影响
冯永辉 谭汗青
(西安医学院药学院,西安,710021)
摘要 目的:考察盘龙七麸炒前后岩白菜素的含量变化。方法:采用 HPLC 法测定盘龙七麸炒前后岩白菜素的含量,色谱柱:
UltisilTMXB - C18柱(150 mm ×10 mm,5 μm);流动相为甲醇∶水(32∶ 68);流速 1. 0 mL /min;柱温为室温;检测波长 275 nm。进样
量:20 μL。结果:盘龙七麸炒前所测岩白菜素平均含量为 16. 82 mg /g;盘龙七麸炒后所测岩白菜素的平均含量为 22. 15 mg /g。
结论:麸炒后盘龙七中岩白菜素的含量高于麸炒前的盘龙七,麸炒盘龙七可以提高其治疗效果。
关键词 麸炒;盘龙七;岩白菜素
Effects of Stir Fried Bran on Bergenin Content in Rhizoma Bergeniae Scopulosae
Feng Yonghui,Tan Hanqing
(School of Pharmaceutical Sciences,Xian Medical University,Xian 710021,China)
Abstract Objective:To study the content changes of bergenin in Rhizoma Bergeniae Scopulosae before and after stir-baking with bran.
Methods:Bergenin content in Rhizoma Bergeniae Scopulosae was determined by HPLC. Chromatographic column:UltisilTM XB-C18 col-
umn (150 mm ×10 mm,5 μm);moving phase:taking moving phase as carbinol to nater(32∶ 68);flow velocity:taking flow velocity as
1. 0 ml /min;column temperature:taking colum temperature as room tomperature;determine wavelength was 275nm;sample size was 20
μl. Results:Bergenin content in Rhizoma Bergeniae Scopulosae before stir-baking with bran was 16. 82 mg /g,and after bran fried was
22. 15 mg /g. Conclusion:Bergenin content in Rhizoma Bergeniae Scopulosae after stir-baking with bran is higher than before. So we can
see that stir-baking with bran can increase therapeutic effect of Rhizoma Bergeniae Scopulosae.
Key Words Bran Fried;Rhizoma Bergeniae Scopulosae;Bergenin
中图分类号:R284 文献标识码:A doi:10. 3969 / j. issn. 1673 - 7202. 2014. 10. 031
盘龙七为虎耳草科植物秦岭岩白菜(Bergenia
scopulosa T. P. Wang)的干燥根茎[1],为陕西地区民间
用药,主要分布于秦岭太白山、柞水、长安太平峪等地
方,广泛用于脾胃病。其味甘、微涩。性平。归肺、脾、
肝、膀胱经。功能补脾益胃,收涩固肠,除湿利水,活
血,用于脘腹胀痛,水肿,崩漏,白带,淋症,痢疾,黄水
疮,秃疮,疥癣[2 - 4]。盘龙七主要有效成分为岩白菜
素,岩白菜素具止咳作用,已有药品“岩白菜素”出
售[5 - 6]。岩白菜素口服无毒,对咳嗽中枢有选择性抑
制,具有镇痛抗炎,提高免疫,抗氧化性的作用[7 - 8]。
笔者研究了不同采收期盘龙七中岩白菜素的含量变
化[9],确定出盘龙七最佳采收期,建立盘龙七中多糖的
含量测定方法[10],同时制定了盘龙七的质量标准,研
究中笔者发现盘龙七传统炮制中采用麸炒法,但关于
其麸炒机制尚不明确。查文献知,迄今为止,尚未有报
道麸炒对盘龙七中有效成分岩白菜含量的相关报道,
我们采用 HPLC法分别测定麸炒盘龙七前后岩白菜素
的含量[11 - 13],来分析比较麸炒是否对岩白菜素的含量
有影响,旨在考察盘龙七麸炒前后岩白菜素的含量变
化,进一步阐明麸炒盘龙七的机制。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 安捷伦高 1220 效液相色谱仪,UV—170
紫外检测器;超声波仪器清洗仪(型号:KQ5200DE);
十万分之一电子天平(Q /SYDLKOO5 - 2012);纯水制
备仪(型号:Scienetool R300)。
1. 2 试药 岩白菜素对照品(批号:MUST - 12030102
生产厂家:北京恒元启天技术研究院和京世纪奥科生
物技术有限公司联合研制);盘龙七药材采自秦岭太白
山,经陕西省食品药品检验所郭耀武主任药师鉴定为
Bergenia scopulosa T. P. Wang的干燥根茎。甲醇(天津
市科密欧化学试剂有限公司生产)为色谱纯,水为超纯
水,提取盘龙七所用甲醇为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 色谱柱:UltisilTMXB - C18柱(150 mm
×10 mm,5 μm);流动相为甲醇:水(32∶ 68);流量 1. 0
mL /min;柱温为室温;检测波长 275 nm。样品及对照
品进样量 20 μL,理论塔板数不低于 4 500。在上述色
谱条件下,对照品有较好的峰型;样品中岩白菜素和其
·8531· WORLD CHINESE MEDICINE October. 2014,Vol. 9,No. 10
他杂质有较好的分离。见图 1。
图 1 高效液相色谱图
2. 2 溶液制备
2. 2. 1 对照品溶液制备 精密称取岩白菜素对照品
9. 00 mg,置 50 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀至刻度,
摇匀,制成 0. 18 mg /mL的溶液,作为岩白菜素的对照
溶液。
2. 2. 2 供试品溶液制备
2. 2. 2. 1 生品盘龙七供试品溶液制备 称取 7 g盘龙
七,粉碎,过 20 目筛。精密称定粉末 0. 203 2 g,以 4 倍
的甲醇超声提取 30 min,离心(3 000 r /min),取上清
液,容至 50 mL容量瓶中,作为供试品 1。
2. 2. 2. 2 麸炒盘龙七供试品溶液制备 称取 7 g盘龙
七,将铁锅预热,均匀撒入麦麸,待起烟,将称量好的药
材加入其中,不断搅拌,文火炒 10 min,至药物表面呈
黄色至深黄色,出锅,筛去麦麸,放凉[14]。粉碎,过 20
目筛。精密称定麸炒药材粉末 0. 205 2 g,以 4 倍的甲
醇超声提取 30 min[15],离心(3 000 r /min),取上清液,
容至 50 mL容量瓶中,作为供试品 2。
2. 3 方法学考察
2. 3. 1 线性关系 精密量取对照品溶液 1,2,3,4,5
mL至 10 mL 容量瓶中,用甲醇定容至刻度,摇匀,即
得。取上述对照品溶液 20 μL 过 0. 45 μm 滤膜,按上
述色谱条件,分别进样测定。以浓度为横坐标(x),峰
面积为纵坐标(y)绘制标准曲线,得岩白菜素回归方程
(图 2),表明线性关系良好。
图 2 线性关系图
2. 3. 2 精密度试验 精密量取岩白菜素对照品溶液
20 μL,重复进样 5 次,测得岩白菜素对照品峰面积的
RSD为 1. 6%,表明精密度良好。
2. 3. 3 稳定性试验 精密量取麸炒秦岭岩白菜和生
品秦岭岩白菜供试品溶液,分别在 0,2,4,8,12,24 h
各进样 20 μL,分别测定 2 组供试品在不同时间段的峰
面积的 RSD,麸炒品的 RSD 为 0. 17%,生品的 RSD 为
0. 13%,结果表明,样品在 24 h内稳定性较好。
2. 3. 4 重复性试验 精密量取麸炒秦岭岩白菜和生
品秦岭岩白菜按供试品溶液的制备方法制的溶液,平
行操作 5 次,测得峰面积 RSD,麸炒品的 RSD 为
0. 18%,生品的 RSD为 0. 12%,结果表明,具有良好的
重复性。
2. 3. 5 加样回收率试验 精密量取以测的含量的上
述以配好的麸炒秦岭岩白菜和生品秦岭岩白菜样品各
3 份,分别加入对照品,进行回收率试验。结果见表 1、
表 2,表明加样回收率良好。
2. 4 结果 样品含量测定:以色谱峰面积(y)对标准
品溶液岩白菜素浓度(x)绘制标准曲线,得回归方程
为:y = 11 503x + 88. 17,r = 0. 998 8,岩白菜素在 0. 02
~ 0. 10 mg /mL 之间与吸光度值呈良好的线性关系。
精密量取麸炒盘龙七和生品盘龙七供试品溶液,各分
3 组,分别进样 20 μL,经计算得,麸炒盘龙七中岩白菜
素的平均含量为 22. 15 mg /g,生品盘龙七中岩白菜素
的平均含量为 16. 82 mg /g。结果表明,麸炒后盘龙七
中岩白菜素的含量高于麸炒前的盘龙七。
·9531·世界中医药 2014 年 10 月第 9 卷第 10 期
表 1 麸炒盘龙七加样回收率试验(n = 3)
样品号
投入量
/mg
回收量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
1 0. 1028 98. 9
2 0. 09 0. 1031 99. 2 99. 2 0. 125
3 0. 1034 99. 6
4 0. 1922 99. 1
5 0. 18 0. 1932 99. 6 99. 5 0. 13
6 0. 1935 99. 8
7 0. 2833 99. 7
8 0. 27 0. 2822 99. 4 99. 7 0. 065
9 0. 2835 99. 9
表 2 生品盘龙七加样回收率试验(n = 3)
样品号
投入量
/mg
回收量
/mg
回收率
/%
平均回收率
/%
RSD
/%
1 0. 1077 99. 7
2 0. 09 0. 1078 99. 9 99. 6 0. 35
3 0. 1071 99. 1
4 0. 1975 99. 5
5 0. 18 0. 1961 99. 0 99. 3 0. 11
6 0. 1973 99. 3
7 0. 2862 99. 4
8 0. 27 0. 2873 99. 8 99. 4 0. 125
9 0. 2857 99. 1
3 讨论
3. 1 检测波长的选择 查阅文献,岩白菜素的检测波
长在 275 nm 处有最大吸收峰[16],经对岩白素在
UV200 ~ 400 nm扫描,发现岩白菜素在 275 nm处有最
大吸收峰,故选择 275 nm作为检测波长。
3. 2 超声提取时间的选择 本实验分别考察了在超
声 20、30、40、60 min 的提取率,结果在 20 min 提取率
不完全,在 30、40、60 min 提取率所测值基本一致。故
选择超声提取 30 min。
3. 3 麸炒盘龙七后岩白菜素含量提高的原因分析
岩白菜素,沸点 236 ~ 238 ℃,从理论上讲麸炒不会影
响岩白菜素的提取率,但实验结果表明麸炒盘龙七后
岩白菜素含量提高,其原因可能是:1)麸炒后盘龙七药
材水分含量降低,可能导致岩白菜素含量偏高;2)麸炒
后可能破坏盘龙七细胞壁,从而影响其多糖成分、挥发
油等化学成分发生变化,从而可能改变岩白菜素的提
取率,导致麸炒后所测盘龙七中岩白菜素含量偏
高[17]。关于传统炮制方法采用麸炒法炮制盘龙七的
机制还有待于进一步深入研究。
4 结论
麸炒后盘龙七中岩白菜素的含量高于麸炒前的盘
龙七,麸炒盘龙七可以提高其治疗效果。本文通过
HPLC法对盘龙七麸炒前后岩白菜素的含量进行对比
测定,结果发现麸炒后盘龙七中岩白菜素的含量相对
较高,因而麸炒盘龙七后可以提高其治疗效果。
盘龙七功能补脾益胃,收涩固肠,民间广泛使用于
脾胃病。传统认为,麸炒能够缓和药性,能够增强药物
健脾和中的功能[18]。酚羟基化合物可以清除自由基,
其主要机制是酚羟基与自由基反应形成稳定半酮式自
由基结构终止自由基链式反应[19]。盘龙七主要有效
成分岩白菜素是多酚类化合物,含有较多的酚羟基化
合物,因而具有独特的药理活性。麸炒盘龙七后提高
了岩白菜素的含量即提高了多酚类化合物,因而提高
了盘龙七清除自由基的效果,从而提高其治疗效果。
参考文献
[1]中国科学院西北植物研究所. 秦岭植物志 1(2)[M]. 北京:科学出
版社,1974:433.
[2]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志 34(2)[M].北京:
科学出版社,1992:26 - 27.
[3]中国医学科学院药物研究所.中药志[M]. 北京:化学工业出版社,
1977:444.
[4]陕西省革命委员会卫生局、商业局.陕西中草药[M]. 北京:科学出
版社出版,1971:386 - 388.
[5]林启寿.中草药成分化学[M].北京:科学出版社,1997:294.
[6]覃容贵,龙庆德,范菊娣,等.炮制对虎耳草中岩白菜素及其止咳抗
炎作用的影响[J].中成药,2013,35(5):1027 - 1030.
[7]黄丽萍,吴素芬,张甦,等.岩白菜素镇痛抗炎作用研究[J].中药药
理与临床,2009,25(3):24 - 25.
[8]吕修梅,王军宪. 岩白菜属植物的研究进展[J]. 中药材,2003,26
(1):58 - 60.
[9]冯永辉,边军昌,张博,等.不同采收期盘龙七中岩白菜素的含量比
较[J].光谱实验室,2013,30(5):2242 - 2245.
[10]冯永辉,曹东凯,郭耀武.蒽酮 -硫酸比色法测定盘龙七中多糖的
含量[J].西北大学学报:自然科学版,2013,43(6):921 - 923.
[11]纪兰菊.西藏产两种岩白菜中岩白菜素的 HPLC 测定[J]. 西北植
物学报,2005,25(2):397 - 399.
[12]罗新建,蔡光先,杨永华,等.液相色谱法测定矮地茶超微饮片中岩
白菜素的含量[J].中国中医药科技,2007,14(3):183 - 184.
[13]罗定强,张国跃,李涛. HPLC法测定七叶鬼灯檠不同部位岩白菜素
的含量[J].安徽医药,2008,12(12):1153 - 1154.
[14]蔡宝昌.中药炮制学[M].北京:中国中医药出版社,2008:210.
[15]高辉,黎云祥,权秋梅,等.药用植物中岩白菜素提取工艺的研究进
展[J].光谱实验室,2013,30(1):93 - 97.
[16]陈秀敏,陈爱民,陈华国. HPLC测定双羊喉痹通颗粒剂中岩白菜素
的含量[J].贵阳中医学院学报,2005,27(3):61 - 62.
[17]刘佳鑫,李古月,才谦.苍术麸炒后增量成分研究[J].中国医药导
报,2014,11(5):105 - 108.
[18]孟莉,陈缤,贾天柱.中药麸炒古今研究概述[J]. 中成药,2006,28
(9):1311 - 1313.
[19]郝志云,高云涛,王雪梅.岩白菜素体外抗氧化作用研究[J].云南
中医中药杂志,2007,28(8):27 - 28,64.
(2014 - 07 - 10 收稿 责任编辑:洪志强)
·0631· WORLD CHINESE MEDICINE October. 2014,Vol. 9,No. 10