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新疆党参多糖的提取及含量测定



全 文 :实 验
研 究 新疆党参多糖的提取及含量测定
石河子大学医学院药学系(832002) 李 艳 鲁建江 孙 萍 王 莉
摘要 目的:从新疆党参中提取多糖 , 并测其含量。方法:用水提醇沉法制得党参多糖 ,用苯酚
-硫酸法测其含量。结果:测得多糖含量为 50.01%, 回收率为 99.3%, RSD=1.28%(n=3)。结论:
党参多糖含量高 ,具有较高的开发利用价值。
关键词 新疆党参 多糖 提取 含量测定
  新疆党参 COdonopsis Clematidea(schrenk)Clarke
为桔梗科党参属多年生草本植物。药用根 ,其性甘 、
平 ,补脾胃 , 益气血 ,生津止渴 , 是重要的传统补益中
药 ,民间用于治疗功能性子宫出血 、体虚无力 、胃下
垂 、风湿性心脏病等[ 1] 。据报道 , 新疆党参含 12 种
生命必需微量元素;含 37 种挥发油[ 2] ;在小鼠脑内
抗自由基作用优于潞党参[ 3] 。新疆党参在全疆均有
分布 ,且储量丰富 , 但对新疆党参的利用却很少 , 药
店 、药房几乎都用明党和潞党。为了开发利用这一
药用资源 ,我们从新疆党参中提取多糖 , 并对其含量
进行测定[ 4] ,为正确评价新疆党参的药材质量提供
依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器与试剂 721分光光度计 、索氏提取器 、葡
萄糖对照品 ,试剂为分析纯。
1.2 样品与制备 样品采自新疆天山 , 秋季挖取 ,
洗净 , 阴干 , 60℃烘 3h , 粉碎成粗粒 , 置干燥器中备
用。
2 实验部分
2.1 党参多糖的提取与精制 称取党参 100g , 置索
氏提取器中 , 依次用石油醚(30℃~ 60℃)、乙醚和
80%的乙醇回流提取 5h。残渣挥干溶剂后 , 再以水
回流提取 4h。减压浓缩至一半体积 , 加入 0.1%活
性炭脱色 ,抽滤 , 滤液加 95%乙醇使含醇量达 80%,
冰箱静置过夜 ,滤过 , 残渣先后用无水乙醇 、乙醚 、丙
酮洗涤数次 ,得多糖粗品 , 用水—乙醇重结晶纯化数
次 , 60℃烘干 , 即得纯党参多糖。
2.2 党参多糖理化性质分析 党参多糖为灰白色
粉末 , 可溶于水 , 不溶于乙醇 、丙酮 、氯仿等有机溶
剂。Molish 反应呈阳性 , 碘化钾—碘反映呈阴性 , 钠
熔法元素分析不含氮。
2.3 标准曲线的制备
2.3.1 标准葡萄糖溶液的配制 精密称取 105℃干
燥至恒重的葡萄糖对照品 24.9mg , 加适量水溶解 ,
转移至 250mL容量瓶中 , 加水至刻度 , 摇匀 , 配成浓
度为 99.6ug/ mL标准葡萄糖溶液备用。
2.3.2 5%苯酚溶液的配制 取苯酚 100g , 加铝片
0.1g 和 NaHCO30.05g , 常压蒸馏 , 收集 182℃馏分
10g , 加蒸馏水 200mL溶解 , 置棕色瓶内放冰箱备用。
2.3.3 标准曲线的绘制 精密吸取葡萄糖标准溶
液 0.1 、0.2、0.3、0.4 、0.5 、0.6、0.7mL置干燥试管中 ,
依次加蒸馏水使最终体积均为 1.0mL , 另取 1.0mL
蒸馏水作空白对照 , 对试管再加入 5%苯酚溶液
1.6mL ,摇匀 , 迅速滴加浓硫酸 7.0mL , 充分摇匀 , 室
温放置 26min ,于 490nm 处测定吸光度 , 绘制标准曲
线 , 回归方程 A=0.0498C+0.04066 , r=0.9996 , 在
1.0~ 7.0ug/ mL内服从比尔定律。
2.4 换算因素的测定 精密称取干燥至恒重的党
参多糖 20.5mg , 水溶解后定容到 100mL容量瓶中 ,
摇匀 , 作为多糖储备液。精密吸取此溶液 0.2mL , 加
水至 1mL ,照标准曲线制备项下的方法 , 测其吸光度
值。按下式:
f=W/CD
式中 ,W为多糖重量(ug), C 为多糖液中葡萄糖的浓
度(ug/ mL), D为多糖的稀释因素 ,测得 f=1.36。
2.5 样品溶液的制备  精密称取党参各样品
0.20g , 用 80%乙醇浸泡过夜 , 再于索氏提取器中用
80%乙醇回流 2h , 残渣挥去溶剂后 , 断续用水回流
2h ,反复洗至 250mL容量瓶中 , 定容 , 摇匀成为样品
液。
2.6 稳定性实验 取样品溶液按标准曲线制备项
下的方法测定吸光度 , 每隔 1h 测 1 次 ,结果表明 5h
内稳定性良好。
2.7 样品多糖含量测定 精密吸取各样品液 1mL ,
于 250mL容量瓶中 ,蒸馏水定容 , 摇匀 , 精密吸取此
溶液 1mL ,按测定标准曲线同样方法测其吸光度值 ,
按下式计算多糖含量:
多糖含量%=CDF/W*100
式中 , C 为多样品容液的葡萄糖浓度(ug/mL), D 为
样品的稀释因素 , F 为换算因素 , W 为样品的重量
9新疆中医药 2001 年 第 19卷 第 3 期(总第 75 期)
(ug), 测得多糖平均含量为 50.01%。
2.8 回收率测定 精密称取党参 0.15g , 精密加入
党参多糖 7.0mg , 再于索氏提取器中用 80%乙醇回
流 2h , 残渣溶剂挥去后 ,连续用水回流 2h ,反复洗至
250ml容量瓶中定容。 摇匀后 , 精确移取 1mL 于
25mL容量瓶中 ,蒸馏水定容 , 摇匀 ,精密吸取此溶液
1mL , 按测定标准曲线同样方法测其吸光度值 , 按样
品测定同样的方法进行提取和测定。计算多糖含
量 ,平均回收率为 99.3%, RSD=1.28%(n=3)。
3 讨  论
多糖类化合物是多种中草药的有效成份之一 ,
具有多种生物活性。某些多糖不但具有抗癌 、抗炎 、
抗病毒 、抗衰老等作用 , 还是理想的免疫增强剂。目
前对多糖的研究不断深入 , 而且不断有新的多糖被
发现 , 但新疆党参多糖还未见报道。 我们首次从新
疆党参中提取出多糖 , 并对其含量进行了测定 ,研究
表明 , 新疆党参多糖含量高 ,具有较高的开发利用价
值。党参多糖的结构组成和药理活性 , 有待进一步
研究确证。
参 考 文 献
1 新疆中草药.乌鲁木齐:新疆人民出版社 , 1976
2 陈敏 ,等.新疆党参挥发油成份的研究.中草药 , 2000 ,
31(4)∶254.
3 陈敏 ,等 ,新疆党参和潞党参对小鼠脑 SOD 、MDA 的影
响.中草药 ,2000 , 31(4)∶280
4 周静 ,等.酸浆果多糖的提取及含量测定.数理医药学
杂志 ,2000 , 13(3)∶242.
(2000年 9月 27日收稿)
刺五加注射液对离体猪冠状动脉解痉作用的研究
上海市浦东新区中医医院(201200) 田 俊
湖北中医学院附属医院心内科(430061) 张道亮
摘要 目的:观察刺五加注射液(简称刺五加 , 下同)对离体猪冠状动脉平滑肌的作用 , 并探讨
其作用机制。方法:用猪冠状动脉环为标本 , 以麦角新碱 、乙酰胆碱 、组织胺 、去甲肾上腺素及氯化
钾分别预收缩冠脉作为对照 ,观察刺五加用药前后冠状血管收缩幅度。分别加入 2.5g/ L和 5.0g/ L
刺五加于浴液中 ,观察对 KCl和 CaCl2颈冠脉收缩量效曲线的影响。结果:刺五加使麦角新碱 、去甲
肾上腺素 、组织胺 、氯化钾引起的冠状动脉环肌张力收缩幅度均明显下降(P>0.05 ~ 0.01)。但对
乙酰胆碱引起的冠状动脉收缩无对抗作用(P<0.05)。两种浓度的刺五加均能使 KCl和 CaCl2 量效
曲线右移 ,最大反应降低 , 呈非竞争性拮抗 ,其特点与维拉帕米类似。结论:刺五加能明显扩张冠状
动脉 ,其作用与维拉帕米类似 , 提示具有钙拮抗作用。
  关键词 刺五加 猪 冠状血管 钙通道阻滞剂 实验研究
  刺五加注射液是用五加科植物刺五加茎叶经提
取精制而成的灭菌水溶液。临床用于治疗冠心病和
脑梗塞等均获良效[ 1] 。药理实验证实本品具有扩张
血管 、抗心肌缺血的作用[ 2, 3] 。但其作用机理尚有
争议 ,其对冠状血管解痉作用尚未见报道。本文采
用猪的离体冠状血管环 ,观察刺五加对冠状动脉平
滑肌的作用特点 ,并探讨其可能的作用机理。
1 材料与方法
1.1 实验动物 新鲜猪心 , 由武汉市江夏区屠宰场
提供。
1.2 药物及试剂 刺五加注射液由完达山制药厂
生产 ,批号 970828。盐酸维拉帕米(Ver)由德国 Knoll
药厂 ,批号 69631099。重酒石酸去甲肾上腺素(NE)
武汉制药厂 ,批号 960206。马来酸麦角新碱(Erg)上
海天丰制药厂生产。磷酸组织胺(His)中科院上海
生化所产品。氯化乙酰胆碱(Ach) sigma 公司产品。
氯化钾(KCl)和氯化钙(CaCl2)均为化学试剂分析纯。
1.3 离体冠状血管实验 杂种食用猪 , ♀♂不拘 ,
体重 100 ~ 150kg ,击昏放血后立即取出心脏 , 迅速分
离出左冠状动脉前降支 , 清除周围结缔组织后截取
中下 1/ 3段 , 制成冠状动脉环(直径 1.5 ~ 2.0mm , 长
度 4 ~ 5mm), 分别将两根直径约 0.1mm 的不锈钢丝
小心穿入 , 制成三角环状 , 随后置于盛有 20mL 
Krebs—Henseleit(K-H)液的浴槽内(含 mmol· l-1:
NaCl 119 , KCl 4.7 , CaCl22.5 ,MgCl21.64 , KH2PO4 1.2 ,
NaHCO325 , EDTA—Na20.026 , Glucose 11.1 , pH7.4), 温
度 37±0.5℃,标本的一端固定 , 另一端经张力换能
器与 XWT-204 型台式自动平衡记录仪相连 , 连续
通入含 95%O2 和 5%CO2 的混合气体 , 标本前负荷
为 4g , 平衡 12min 以后才开始实验。实验时用成对
10 新疆中医药 2001 年 第 19卷 第 3 期(总第 75 期)