全 文 ：云南大学学报 (自然科学版)，2012，34 (4):450 ～ 453 CN 53 －1045 /N ISSN 0258 －7971
Journal of Yunnan University http:/ /www． yndxxb． ynu． edu． cn
柄果海桐化学成分研究
*
潘争红1，罗 蕾2，李祖强3，张吕丽2，董 勤3，马国义4
(1．中国科学院广西植物研究所，广西 桂林 541006;2．云南师范大学 化学化工学院，云南 昆明 650092;
3．云南大学 化学科学与工程学院，云南 昆明 650091;4．密西西比大学药学系，美国)
摘要:在细胞毒试验结果指导下，采用萃取、柱层析、重结晶等方法，同步对柄果海桐(Pittosporum podo-
carpum Gagnep)枝叶粗提物的有效部位进行化学成分分离纯化得 9 个单体，通过理化数据测定及波谱数据分
析鉴定了结构，分别是 kielcorin(1) ，2 3 －二甲氧基口山酮(2，3 － dimethoxyxanthone，2) ，槲皮素 － 3，7 －二甲氧基
(quercitrin － 3，7 － dimethoxy，3) ，木犀草素(luteolin，4) ，羽扇豆醇(lupeol，5) ，蜡酸(cerotic acid，6) ，二十八酸(1
－ octacosanic acid，7) ，β －谷甾醇(β － sitosterol，8) ，胡萝卜甙(daucosterol，9)．化合物 1 ～ 9 均为首次从该植物中
分离得到．细胞毒试验发现其石油醚、氯仿及乙酸乙酯提取物有细胞毒活性，其 IC50分别为 6． 5，3． 5，5． 0 μg /
mL．
关键词:柄果海桐;细胞毒性;口山酮;甾醇;黄酮
中图分类号: Q 949． 758． 5;Q 946 文献标识码:A 文章编号:0258 － 7971(2012)04 － 0450 － 04
柄果海桐(Pittosporum podocarpum Gagnep)为海桐花科(Pittosporaceae)海桐花属(pittosporum Bank )植
物．该科植物全球有 9 属 300 种，主要分布在澳大利亚、亚洲热带及非洲，我国只有海桐花属 1 属，分布于
云南、四川、贵州、湖南、湖北、广西、福建等地，越南北方及印度东北也有分布［1］．
柄果海桐枝叶可入药，民间用于治疗扁桃体炎、咽喉炎、止血等．国内有学者报道过该属植物中的峨眉
海桐与光叶海桐种子的化学成分［2 － 3］，化学成分有三萜、二萜、黄酮、口山酮、甾体和脂肪酸等．柄果海桐的化
学成分及抗癌活性，国内外尚无文献报道．
细胞毒试验表明，柄果海桐的粗提物有明显的细胞毒活性．本文的化学成分研究是在细胞毒活性结果
指导下进行的．对有活性的石油醚、氯仿和乙酸乙酯提取物部分进行分离纯化，得到 9 个单体，通过理化数
据测定及波谱(1D、2D NMR 与 MS)分析，分别鉴定为:kielcorin(1) ，2，3 － 二甲氧基口山酮(2，3 － dime-
thoxyxanthone，2) ，槲皮素 － 3，7 －二甲氧基(quercitrin － 3，7 － dimethoxy，3) ，木犀草素(luteolin，4) ，羽扇豆
醇(lupeol，5) ，蜡酸(cerotic acid，6) ，二十八酸(1 － octacosanic acid，7)． β －谷甾醇(β － sitosterol，8) ，胡萝
卜甙(daucosterol，9) ，化合物 1 ～ 9 均为首次从该植物中分离得到．
1 实验部分
1． 1 仪器和材料 熔点用北京第三光学仪器厂 X － 6 型显微熔点测定仪测定，温度未校正． NMR 用
Brucker 公司 Avance DRX 500 型核磁共振仪测定，TMS为内标． MS用英国 VG公司 Auto spec － 3000 型质
谱仪测定．柱层析用粗硅胶(0． 075 ～ 0． 037mm)为青岛海洋化工厂产品，细硅胶(40 ～ 60 μm)及 TLC 硅胶
片(F254)为 Merck公司产品．柄果海桐枝叶采自云南省石屏县，由云南大学胡志浩教授鉴定，拉丁学名为
Pittosporum podocarpum Gagnep．
* 收稿日期:2011 － 09 － 10
基金项目:国家自然科学基金资助项目(20962024)．
作者简介:潘争红(1979 － ) ，男，广西人，博士，副研究员，主要从事天然药物化学研究． E － mail:pan9418@ yahoo． com． cn．
通迅作者:罗 蕾(1961 －) ，女，广东人，硕士，副教授，主要从事其生物活性天然产物方面的研究． E － mail:lluo12@ yahoo． com．
1． 2 分离提取 12 kg干燥的柄果海桐枝叶用 95%乙醇冷浸 30 d，减压浓缩提取液，得粗提物浸膏 PPO
(900 g) ，分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和甲醇等不同极性溶剂分步萃取，得组分 PPA(55 g)、PPB(100
g)、PPC(80 g)、PPD(500 g)．对细胞毒试验筛选有活性的组分(PPA、PPB 和 PPC) ，经过反复硅胶柱层析，
及细硅胶真空抽提层析或重结晶的方法，纯化得 9 个单体．
1． 3 细胞毒性试验 分别称取 10 ～ 15 mg的 PPO、PPA、PPB、PPC、PPD等 5 个样品，用二甲亚砜溶解分别
配成 0，1，10，100 μg /L等 4 种质量浓度溶液，置于培养瓶中，分别加入含有等同数目的 HL60(人白血病)
细胞的 10%小牛血清的 RPMI1640 培养基，保存在 5% CO2 的 37 ℃恒温箱内．分别在 12，24，48，72 h的时
间段，观察细胞生长情况，最后用染料排斥试验法计算对 HL60 细胞生长抑制率．体外试验由美国密西西
比大学药学系药理实验室合作完成．
2 结果与讨论
2． 1 细胞毒活性 柄果海桐的粗提物(PPO)及其分步提取组分(PPA、PPB、PPC、PPD)对 HL60 细胞的
IC50分别为 8． 0，6． 5，3． 5，5． 0，35． 0 μg /mL．结果表明，石油醚、氯仿及乙酸乙酯提取组分有一定的细胞毒
活性．
2． 2 结构鉴定 对 9 个单体分别进行理化数据(熔点)和波谱(MS、1D NMR、2D NMR)测定，鉴定了结构，
分别是:kielcorin(1) ，2 3 －二甲氧基口山酮(2，3 － dimethoxyxanthone，2) ，槲皮素 － 3，7 －二甲氧基(quer-
citrin － 3，7 － dimethoxy，3) ，木犀草素(luteolin，4) ，羽扇豆醇(lupeol，5) ，蜡酸(cerotic acid，6) ，二十八酸(1
－ octacosanic acid，7) ，β －谷甾醇(β － sitosterol，8) ，胡萝卜甙(daucosterol，9)．化合物(1)～(7)的结构见
图 1．
图 1 化合物(1)～(7)的结构
Fig． 1 Structures of compounds 1—7
化合物(1) ，黄色针晶，m． p． 247 ～ 249 ℃，EI － MS(m/z) :436(5) ［M +］，258(22) (256 + 2H) ，257(6)
(256 + 1H) ，180(85) (M + － 256) ，137(100) ，124(55) (C7H8O2)．
1H NMR(500 MHz，C5D5N)δ:8． 55(d，
J = 7． 7 Hz，H －8) ，7． 72(t，J = 7． 2 Hz，H －6) ，7． 65(s，H －1) ，7． 53(dd，J = 8． 2，1． 7 Hz，H － 5) ，7． 47(s，H
－2) ，7． 40(d，J = 7． 9 Hz，H － 7) ，7． 35(d，J = 8． 8 Hz，H － 5) ，7． 30(dd，J = 7． 9，2． 4 Hz，H － 6) ，5． 64
(dd，J = 7． 8，2． 0 Hz，H － 7) ，4． 65(d，J = 5． 5 Hz，H － 8) ，4． 39(d，J = 12． 6 Hz，H － 9a) ，4． 01(d，J =
154第 4 期 潘争红等:柄果海桐化学成分研究
12． 6 Hz，H －9b) ，3． 83(s，－ OMe) ，3． 75(s，－ OMe)． 13C NMR(125 MHz，C5D5N)δ:97． 63(C － 1) ，148． 96
(C －2) ，140． 69(C －3) ，133． 62(C －4) ，142． 34(C － 4a) ，156． 32(C － 4b) ，148． 92(C － 4c) ，118． 32(C －
5) ，135． 47(C －6) ，124． 23(C －7) ，126． 65(C － 8) ，175． 9(C － 9) ，115． 14(C － 9a) ，112． 4 － 9b) ，126． 65
(C －1) ，112． 42(C － 2) ，146． 01(C － 3) ，116． 61(C － 5) ，121． 74(C － 6) ，77． 59(C － 7) ，79． 62(C －
8) ，61． 08(C －9)． 55． 93(－ OMe) ，61． 08(－ OMe)．与文献 kielcorin 13C NMR数据对照一致．以上波谱数
据与文献［5］的 kielcorin一致，故确定该化合物为 kielcorin．
化合物(2) ，白色粒晶(氯仿) ，分子式:C15 H12 O4，m． p． 158 ～ 159 ℃ ． MS(m/z) :258{1 ，(M + 2)
+}，
257(8，M +1) ，256(100，［M +］) ，241(48) ，213(68) ，185(30) ，170(20) ，142(15) ，63(5)． 13 C NMR(100
MHz ，CDCl3) ，δ:105． 54(C －1) ，146． 83(C － 2) ，152． 51(C － 3) ，99． 71(C － 4) ，156． 15(C － 4a) ，155． 55
(C －4b) ，117． 70(C － 5) ，133． 99(C － 6) ，125． 81(C － 7) ，126． 61(C － 8) ，121． 61(C － 8a) ，115． 00(C －
9a) ，176． 11(C －9) ，58． 40(2 － OMe) ，56． 50(3 － OMe)．上述数据与文献［6］的 2，3 － dimethoxyxanthone
13C NMR数据对照一致．
化合物(3) ，黄色针晶，分子式:C17H14O7，m． p． 175 ～ 177 ℃，EI － MS(m/z) :300(M
+) (100) ，329(95)
(M + － 1) ，312(33) ，301(33) ，287(60) ，16(25) ，137(36)． 1H NMR(500 MHz，CDCl3) ，δ:12． 3(1H，s，OH
－5) ，7． 60(1H，d，J = 2． 5 Hz，H －2) ，7． 34(1H，dd，J = 8． 7，2． 5 Hz，H － 6) ，3． 94(3H，s，OMe) ，3． 80(3H，
s，OMe)．上述数据与文献［7］的 3，4，5 － trihydroxy － 3，7 － dimethoxyflavone对照一致．
化合物(4) ，白色针晶(CHCl3) ，分子式:C15 H10 O6，m． p． 177 ～ 179 ℃，EI － MS(m/z) :286［M
+］． 286
(70) (M +) ，153 (35) ，152 (5) ，124 (5) ，134 (5)． 13 C NMR(125 MHz，(CD3)2CO)δ:164． 3(s，C － 2) ，
103． 3(s，C －3) ，182． 2(s，C －4) ，162． 5(s，C －5) ，98． 8(d，C －6) ，164． 3(s，C － 7) ，93． 8(d，C － 8) ，157． 9
(s，C －9) ，104． 4(s，C －10) ，122． 9(s，C －1) ，113． 2(d，C －2) ，145． 6(s，C －3) ，149． 3(s，C － 4) ，115． 7
(d，C －5) ，119． 2(d，C － 6)． 13 C NMR 数据与文献［8］的木犀草素一致，故该化合物确定为木犀草素
(luteolin)．
化合物(5) ，白色粒晶(CHCl3) ，MS(m/z) :426(100) (M
+) ，218(47) (M －207) ，207(59) (M －218) ，
189(50) (207 － 18) ，109(40) ，13 C NMR δ:38． 12(C － 1) ，27． 49(C － 2) ，79． 05(C － 3) ，38． 77(C － 4) ，
55． 37(C －5) ，18．(C －6) ，34． 35(C －7) ，40． 90(C － 8) ，50． 51(C － 9) ，37． 23(C － 10) ，20． 98(C － 11) ，
25． 22(C － 12) ，38． 12(C － 13) ，42． 88(C － 14) ，27． 49(C － 15) ，35． 63(C － 16) ，43． 04(C － 17) ，
48． 37(C －18) ，48． 02(C － 19) ，150． 98(C － 20) ，29． 81(C － 21) ，40． 04(C － 22) ，28． 02)C － 23) ，15． 38(C －
24) ，16． 14(C －25) ，16． 02(C －26) ，14． 58(C －27) ，18． 03(C －28) ，109． 33(C －29) ，19． 34(C －30)． 13C NMR
数据与文献［9］的 lupeol(羽扇豆醇)一致，故鉴定化合物为羽扇豆醇(lupeol)．
化合物(6) ，白色蜡状粒晶(CHCl3) ，分子式:C26 H52 O2，m． p． 85 ～ 87 ℃，IR(KBr)νmax:3 524(OH) ，
1 707(羧羰基 C O) ，显示有羧基信号． EI － MS(m/z) :396［M］+ ． 1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ:2． 30(2H，
t，CH2 － 2) ，1． 62(2H，m，CH2 － 3) ，1． 21 ～ 1． 25［44H，m，－(CH2)22］，0． 88(3H，t，CH3)．
13 C NMR(125
MHz ，CDCl3) :178． 7(COOH) ，33． 9(CH2) ，32． 2(CH2) ，29． 4(nCH2) ，，22． 7(CH2) ，14． 3(CH3)．上述数
据与文献［10］蜡酸对照一致，故确定该化合物为蜡酸(cerotic acid)．
化合物(7) ，白色蜡状块晶(CHCl3) ，分子式:C28 H56 O2，m． p． 88 ～ 89 ℃，IR(KBr)νmax:3 508(OH) ，
1 703(羧羰基 C O) ，显示有羧基信号． EI － MS(m/z) :424［M］+ ． 1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ:2． 45(2H，
t，CH2 － 2) ，1． 65(2H，m，CH2 － 3) ，1． 22 ～ 1． 27［48H，m，－(CH2)24］，0． 88(3H，t，CH3)．
13 C NMR(125
MHz，CDCl3，) :179． 3(COOH) ，33． 5(CH2) ，31． 7(CH2) ，29． 2(nCH2) ，24． 5(CH2) ，22． 4(CH2) ，14． 1
(CH3)．上述数据与文献［11］二十八酸对照一致，故确定为二十八酸．
化合物(8) ，无色针状晶体，分子式:C29H50 O，m． p． 141 ～ 142 ℃，与 β －谷甾醇标准品进行薄层层析
(TLC)对照，在多种溶剂系统中 R f 值均一致，且显色相同，故确定为 β －谷甾醇(β － sitosterol)．
1H NMR
及13C NMR数据与文献［12］中 β － sitosterol的1H NMR，13C NMR数据对照一致．
254 云南大学学报(自然科学版) 第 34 卷
化合物(9) ，白色粉末(MeOH) ，m． p． 296 ～ 298 ℃，波谱数据与文献［13］的胡萝卜甙(daucosterol)的
波谱数据一致．
2． 3 讨论 柄果海桐枝叶树皮在民间用于治疗扁桃体炎、咽喉炎、止血等．本课题组通过细胞毒试验，发
现柄果海桐的醇提物及其石油醚、氯仿和乙酸乙酯萃取组分有明显的细胞毒活性，表明柄果海桐是一种潜
在的抗癌天然药物．但有关柄果海桐化学成分迄今还知之甚少，也未能确定其药效作用物质基础．本文在
抗癌活性药理筛选结果指导下，对柄果海桐乙醇浸膏的石油醚、氯仿和乙酸乙酯萃取组分进行分离纯化，
已鉴定了 9 个成分．我们将进一步鉴定其余成分并对其进行抗癌活性研究，为柄果海桐药用开发提供科学
数据．
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The chemical constituents from Pittosporum podocarpum Gagnep
PAN Zheng-hong1，LUO Lei2，LI Zu-qiang3，ZHANG Lv-li2，DONG Qin3，MA Guo-yi4
(1． Guangxi Institute of Botany，Chinese Academy of Sciences，Guilin 541006，China;
2． Chemical ＆ Engineering College of Yunnan Normal University，Kunming 650092，China;
3． School of Chemical Science and Technology，Yunnan University，Kunming 650091，China;
4． Faculty of Pharmacy，University of Mississibi ，USA)
Abstract:The chemical constituents of Pittosporum podocarpum Gagnep were studied by methods of extrac-
tion，column chromatography，crystallization and so on． Nine compounds were isolated from this plant by column
chromatogramphies of sephadex LH －20 and silica gel． Their structures were identified by analyses of their physi-
cal － chemical properties and spectral datas． All these compounds were isolated for the first time from this plant．
These are:kielcorin(1) ;2，3 － dimethoxyxanthone(2) ;quercitrin － 3，7 – dimethoxy(3) ;luteolin(4) ;lupeol
(5) ;cerotic acid(6) ;1 － octacosanic acid(7) ;β － sitosterol(8) ;daucosterol(9)． Cytotoxicity screening of ex-
tracts from Pittosporum podocarpum Gagnep was carried out by HL60 cell． Three extracting fractions of petroleum
ether，chloroforn and ethyl acetate possess cytotoxic activities and the IC50 are 6． 5，3． 5 and 5． 0 μg /mL for
HL60，respectively．
Key words:Pittosporum podocarpum Gagnep;cytotoxicity;xanthone;sterol;flavonoid
354第 4 期 潘争红等:柄果海桐化学成分研究