全 文 ：复方土牛膝糖浆剂抗炎作用的实验研究
梅全喜 1 ,田素英 2 ,钟希文1 ,高玉桥 1 ,胡　莹 1 ,刘　婷1 ,林　慧 1 ,吴惠妃 1
(1.广州中医药大学附属中山中医院 ,广东中山 528400;2.广东药学院中山校区实验中心 ,广东中山
528405)
　　摘要　目的:观察复方土牛膝糖浆剂对炎症动物模型的抗炎作用。方法:采用鸡蛋清致大鼠足跖肿胀法 、灭菌
棉球致大鼠蹊部肉芽组织增生法 、冰醋酸致小鼠腹腔内毛细血管通透性增高法以观察复方土牛膝糖浆剂的抗炎作
用。结果:复方土牛膝糖浆剂可明显降低大鼠足跖肿胀度 , 明显抑制棉球肉芽增生和降低毛细血管的通透性。结
论:复方土牛膝糖浆剂具有显著的抗炎作用。
关键词　复方土牛膝糖浆剂;小鼠腹腔毛细血管通透性;大鼠足跖肿胀;大鼠棉球肉芽肿
中图分类号:R285.5　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2007)05-0586-03
基金项目:广东省中医药局科技基金资助项目(NO.1040188)
　　广东土牛膝(RadixEupatoriChinensis)是广东
的地道药材 ,来自于菊科华泽兰 EupatoriumChinen-
sisL.的根 ,主要分布于广东 、海南 、广西等地 ,尤以
广东省分布最广 〔1〕 ,产量大 ,资源十分丰富。为充
分开发利用广东土牛膝 ,中山市中医院以此为主药
研制出的复方土牛膝糖浆剂 ,经多年的临床应用 ,在
治疗急性上呼吸道感染 、急慢性咽炎等方面临床疗
效确切 。为此我们开展复方土牛膝糖浆剂抗炎作用
的药效学研究 ,以期为临床用药提供科学依据 。
1 　材料
1.1 　仪器　UV-754紫外可见分光光度计(上海第
三分析仪器厂)、微量吸管 、离心机 、T500型电子天
平(常熟市双杰测试仪器厂)、解剖剪刀 、眼科镊 、平
镊 、足跖容积测量装置 、4号针头 、小烧杯 、电子秤 、
消毒外科手术器械一套。
1.2 　试药　复方土牛膝糖浆剂(0.92 g/ml)(取广
东土牛膝 、岗梅根 、山芝麻等煎煮两次 ,第一次煎煮
2 h,第二次煎煮 1.5 h,合并两次滤液 ,浓缩至密度
为 0.92g/ml,即可),由中山中医院制剂室提供 ,批
号:060213;阿司匹林 ,湖南洞庭药业股份有限公司
生产 ,批号 050807 ,规格 50 mg/片;冰醋酸 ,广州化
学试剂厂生产 ,批号:91C301-3,分析纯;伊文思兰 ,
广州化学试剂厂生产 ,批号 1641016分析纯;10%鸡
蛋清生理盐水溶液;酚红;肥皂水;乌来糖 ,化学纯 ,
上海化学试剂供应公司;青霉素 G钾盐及硫酸链霉
素混合液(每毫升含青霉素 800U,链霉素 650U);20
mg灭菌棉球。
1.3 　动物　昆明种小鼠 ,体重 18 ～ 22 g/只;SD大
鼠 ,体重 180 ～ 220 g/只 ,雌性。 (均购自广东省医学
实验动物中心 ,合格证号:省科委:2002A024,省医
学实验动管会:26-2003A003)。由中山市中医院动
物实验室饲养 ,室内温度控制在 15 ～ 20℃,湿度为
60%。
2　方法与结果
2.1　复方土牛膝糖浆剂对醋酸所致小鼠腹腔毛血
管通透性增高的影响〔2〕
2.1.1 　实验方法:取体重 18 ～ 22 g的健康小鼠 50
只 ,雌雄各半 ,随机分为五组 ,分别为复方土牛膝剂
量组(47.84g/kg、23.92 g/kg、11.96 g/kg)、阿司匹
林组(0.2 g/kg)和蒸馏水组 。连续灌胃给药 4天 ,
每天一次 ,每次给予等容量 0.9 ml/100 g。于末次
给药后 30 min,尾静注射 0.5%伊文思兰生理盐水
溶液 0.1 ml/10 g,随即腹腔注射 0.8%冰醋酸生理
盐水液 0.1 ml/10g, 20分钟后脱颈椎处死 ,剪开腹
部皮肤肌肉 ,用 6 ml生理盐水分数次洗涤腹腔 ,用
吸管吸出洗涤液 ,合并后加入生理盐水至 10 ml,
3000 r/min离心 15min;取上清液于 590nm比色测
定吸收度 。
2.1.2 　实验结果:结果用 x±SD表示 ,数据采用
SPSS10.0软件包进行分析 ,用 t检验(以下同),比
较阿司匹林组 、给药组与正常对照组之间吸收度的
差异显著性。实验结果见表 1。
由实验结果表明 ,复方土牛膝糖浆剂可明显抑
制醋酸所致的小鼠腹内炎性物质的渗出 ,各剂量组
均有显著的抑制小鼠腹腔内炎性物质渗出的作用 ,
与空白组相比有显著性差异 (P<0.05),并呈现较
好的量效关系 ,低中 、低高 、中高剂量组比较时均有
显著性差异(P<0.05)。且高剂量组明显优于阿司
匹林组(P<0.05),而低剂量和中剂量组与阿司匹
林组镇痛作用相近 。
·586· 中药材　JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 5期 2007年 5月DOI :10.13863/j.issn1001-4454.2007.05.031
　表 1　　　　对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管
通透性增高的影响( x±SD)
组别 动物数(n) 剂量(g/kg) OD值
空白组 8 9ml 0.32±0.08
复方土牛膝低剂量 10 11.96 0.24±0.04＊
复方土牛膝中剂量 10 23.92 0.20±0.05＊＊■
复方土牛膝高剂量 10 47.84 0.15±0.06＊＊■■#
阿司匹林 10 0.2 0.24±0.05＊
　　与空白组比 , ＊P<0.05, ＊＊P<0.01;各给药组间比 , ■P<
0.05, ■■P<0.01;与阿司匹林组比 , #P<0.05。下表皆同
2.2 　复方土牛膝糖浆剂对蛋清致大鼠足跖肿胀的
影响〔2〕
2.2.1　实验方法:选用健康大鼠 50只 ,雄性 ,随机
分为五组 ,分别为复方土牛膝的高 、中 、低剂量组
(33.12 g/kg、16.56 g/kg、8.28 g/kg)、蒸馏水正常
对照组 、阿司匹林阳性对照组(0.2g/kg体重)。在
每鼠左后足跖正面上端作一清晰横线 ,利用容积测
量装置采用排水法测定鼠爪体积(Vn),分别测两
次 ,取其平均值 ,即为该鼠给药前的足跖体积 。然后
分别给实验组按高 、中 、低三个剂量连续灌胃给药 4
天 ,容量均为 0.13ml/100g。于末次给药 1 h后 ,用
0.25 ml注射器吸取刚用生理盐水配制好的 10%蛋
清(0.1 ml/跖),用 4号针头注入大鼠左后脚跖皮
下 ,然后于注入后 1 h、2 h、3h、4 h各测大鼠足跖体
积 1次(Vt),计算鼠跖的肿胀度和抑制率。
肿胀度 =致炎后足跖体积 -致炎前足跖体积
抑制率(%)=(正常对照组平均肿胀度 -同时相给药
组平均肿胀度)/正常对照组平均肿胀度 ×100%
2.2.2　实验结果:比较同一时相内阿司匹林组 、给
药组与正常对照组之间的肿胀度和抑制率的差异显
著性 。实验结果见表 2。
　　表 2 　对蛋清所致大鼠足跖肿胀的影响(( x±s, n=10)
组别 剂量(g/kg) 炎前足跖体积(ml)
致炎后足爪肿胀度(ml)
1h 2h 3 h 4 h
空白组 1.30 1.27±0.10 0.74±0.11 0.64±0.07 0.48±0.13 0.31±0.10
复方土牛膝低剂量 8.28 1.29±0.16 0.50±0.09＊＊ 0.36±0.08＊＊ 0.25±0.08＊＊ 0.14±0.05＊＊
(32.43%) (43.75%) (47.92%) (54.84%)
复方土牛膝中剂量 16.56 1.30±0.12 0.37±0.13＊＊■ 0.26±0.10＊＊■ 0.21±0.07＊＊ 0.12±0.06＊＊
(50.00%) (59.38%) (56.25%) (61.29%)
复方土牛膝高剂量 33.12 1.28±0.14 0.35±0.12＊＊■■# 0.26±0.07＊＊■■ 0.18±0.04＊＊ 0.10±0.05＊＊
(52.70%) (59.38%) (62.50%) (67.74%)
阿司匹林 0.20 1.28±0.18 0.39±0.11＊＊ 0.29±0.08＊＊ 0.18±0.07＊＊ 0.11±0.05＊＊
(47.30%) (54.69%) (58.33%) (64.52%)
　　由实验结果表明 ,复方土牛膝糖浆剂可明显抑
制鸡蛋清所致的大鼠足跖肿胀 ,与空白组相比有显
著差异性(P<0.01);并呈现较好的量效关系 ,在给
药 1h至 2h时低中 、低高剂量组相比均有显著性差
异(P<0.05)。但在给药 1 h后低剂量组没有阿司
匹林组(P<0.05)效果好 ,这可能与中药的显效特
点有关 ,而在随后的时间内各给药组与阿司匹林组
的抑制作用相近 。但从肿胀抑制率来看 ,高剂量组
明显高于阿司匹林组 。
2.3 　复方土牛膝糖浆剂对棉球所致大鼠肉芽肿增
生的影响〔3〕
2.3.1　实验方法:选用体重 180 g～ 220 g左右大
鼠 50只 , 雄性。腹腔注射 25%乌来糖 (0.45 ml/
100g)进行麻醉后 ,在每只大鼠的左右腹股沟处先用
碘酒消毒 ,后用 75%酒精棉球脱碘后 ,各切开皮肤
约 1 cm长的纵切口 ,用眼科镊将两个灭菌棉球(每
个棉球 20 mg,高压灭菌 ,各加入氨苄青霉素每个 1
mg/0.1ml, 50℃烘箱烤干)分别植入大鼠两侧腹股
沟皮下 ,随即缝合皮肤 ,术后随机分为五组。从手术
当天开始灌胃给药 ,每天一次 ,药容量为 0.13 ml/
100g,复方土牛膝剂量组(33.12 g/kg、16.56 g/kg、
8.28 kg/kg),正常对照组给予同容量的蒸馏水 ,连
续 9天 ,阳性对照组给予阿司匹林(0.2 g/kg)。第
10天将大鼠颈椎脱臼处死 ,将棉球连同周围结缔组
织一起取出 ,剔除脂肪组织 ,在 70℃烘箱中放置 12
h后称重 ,减去原棉球重量即为肉芽肿净重 。统计
时剔除切口处发炎者 。以肉芽肿及其系数 ,用 t检
验 ,比较阿司匹林组 、给药组与正常对照组对肉芽肿
抑制的差异显著性 。
棉球肉芽抑制率(%)=(正常对照组棉球肉芽平均净
重 -给药组棉球肉芽平均净重)/正常对照组棉球肉芽平均
净重 ×100%
·587·中药材　JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 5期 2007年 5月
肉芽肿系数 =棉球肉芽肿净重(mg)/体重(100g)
2.3.2　实验结果:比较同一时相内阿司匹林组 、给
药组与正常对照组之间的肿胀度和抑制率的差异显
著性。实验结果见表 3。
　表 3　　对棉球所致大鼠肉芽增生的影响( x±SD)
组别 剂量(g/kg)动物数(n) 棉球肉芽净重(mg) 肉芽肿系数(mg/100g)
肉芽抑制率(%)
空白组 1.3 9 35.3±7.0 15.1±4.6 -
复方土牛膝低剂量 8.3 10 28.4±4.1＊ 13.6±2.5 19.6
复方土牛膝中剂量 16.6 9 27.9±7.5＊ 11.4±1.4＊ 21.0
复方土牛膝高剂量 33.1 10 24.7±2.9＊＊■ 11.4±1.4＊ 30.0
阿司匹林 0.2 10 23.4±6.8＊＊ 10.0±3.3＊＊ 33.7
　　实验结果表明:以棉球肉芽净重为指标时 ,与正
常组比各给药组均可抑制棉球肉芽肿的生长(P<
0.05);与阳性组比较二者无显著性差异 (P>
0.05);剂量组之间比较时可知低剂量组明显弱于
高剂量组(P<0.05)。但以棉球肉芽肿系数为评价
指标时 ,与正常组比低剂量组抑制棉球肉芽肿不明
显 ,中 、高剂量组对抑制小鼠肉芽肿有较显著的抑制
作用(P<0.05),这说明棉球肉芽肿系数排除了因
大鼠体重相差较大引起的差异 ,使实验结果更具有
可比性;中 、高剂量组与阿司匹林组无显著性差异
(P>0.05)。
无论按棉球肉芽肿净重还是按棉球肉芽肿系数
统计 ,二者统计结果基本一致 ,复方土牛膝糖浆剂有
抑制棉球所致的大鼠肉芽肿的作用 ,但从抑制率看 ,
复方土牛膝糖浆对棉球肉芽肿的抑制作用稍弱或接
近于阿司匹林 。
3　讨论
广东土牛膝是广东地区著名的喉科要药 ,自上
世纪 50年代发现其防治白喉有效以来 ,被广东各地
普遍应用于治疗咽喉疾病〔4〕 ,复方土牛膝糖浆剂就
是以广东土牛膝清热解毒 ,消肿利咽为主药 ,辅以清
热解毒 、利咽消肿 、散瘀止痛的岗梅根 、水杨梅根 ,以
增强其治疗咽喉肿痛的效力 。同时佐以一点红清热
凉血 、解毒 ,山芝麻清热燥湿解毒 ,加强其解毒疗效 ,
佐以淡竹叶 、菊花清热除烦 、疏风散热 ,以增加其清
热作用。故诸药合用 ,共奏良好的清热解毒 、利咽消
肿止痛作用〔5〕。本实验结果表明 ,复方土牛膝糖浆
有显著的抗炎作用 ,验证了本品的利咽消肿作用 ,为
临床的进一步广泛应用提供了科学依据 。
参 考 文 献
[ 1] 广东省食品药品监督管理局 .广东省中药材标准 .广
州:广东科技出版社 , 2004:21.
[ 2] 陈奇 .中药药理实验方法学 .北京:人民卫生出版社 ,
1993:112-115, 308-311, 305-307.
[ 3] 徐淑云 , 卞如濂 ,陈修主编 .药理实验方法学 .北京:人
民卫生出版社 , 2002:917.
[ 4] 梅全喜 ,吴惠妃.广东土牛膝的药用历史及现代研究概
况 .中医药学刊 , 2005, 23(11):1995-1997.
[ 5] 曾聪彦 , 梅全喜 ,孙一帆 , 等.复方土牛膝的制备与临床
应用 .中医药学刊 , 2005, 23(增刊):101-103.
(2006-07-31收稿)
基金项目:国家教育部博士点基金(20020558026);广州中医药大学创新基金(K0050035)作者简介:何建峰(1978-),男,湖南祁阳人 ,博士 ,讲师 , E-mail:syrinx@gzhtcm.edu.cn。
·制剂与质量·
槲皮素分子烙印聚合物的单体优化 、性能
评价及其在薄层色谱分离中的应用
何建峰 1 ,邓芹英 2
(1.广州中医药大学中药学院 ,广东广州 510006;2.中山大学化学与化学工程学院 ,广东广州 510275)
　　摘要　以黄酮类化合物槲皮素为模板 ,选用甲基丙烯酸(MAA)、丙烯酰胺(AM)、N, N-二乙基胺乙基甲基丙烯
酸酯(DEAEM)、2-乙烯吡啶(2-VP)为功能单体 , 制备对槲皮素具有特定亲和性和选择性的分子烙印聚合物 , 采用
平衡结合实验考察它们对底物的吸附特性 ,发现以离子作用结合的功能单体 2-VP和 DEAEM对槲皮素具有较好的
烙印效果。研究并将这种烙印聚合物作为薄层色谱的固定相 ,成功地分离了模板分子及其结构类似物。此外本文
还考察了聚合物的粒度和重复使用次数对吸附效果的影响。
关键词　槲皮素;分子烙印聚合物;结合实验;薄层色谱固定相
中图分类号:R286.02　　文献标识码:A　　文章编号:1001-4454(2007)05-0588-04
·588· 中药材　JournalofChineseMedicinalMaterials　　第 30卷第 5期 2007年 5月