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生物技术通报
BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2016, 32(1):149-155
牦牛是分布于海拔 2 000 m 以上，以我国青藏
高原为中心及其毗邻的高山亚高山地区的牛种之一，
为牧民提供奶、肉、毛、役力、染料等生产和生活
必需品［1］。牦牛肉属于半野生天然绿色食品，富含
蛋白质、氨基酸、铁元素以及胡萝卜素、钙等微量
元素，脂肪含量低，但牦牛肉的嫩度制约着其市场
的接受度，因此，影响牦牛肉嫩度的候选基因成为
当今研究的热点之一。
钙蛋白酶是一种存在于细胞内的非溶酶体性的
限制性蛋白水解酶，与肉的嫩度和风味等食用品质
密切相关。钙蛋白酶系统基因是理想的肉质嫩度分
子标记［2］。CAPN3 基因作为影响肉嫩度的候选基因，
其分子生物学特性和生理调控功能是近年来研究的
热点之一。CAPN3（Calpain3）是最典型的组织特异
收稿日期 ：2015-04-14
基金项目 ：西北民族大学研究生科研创新项目（ycx14165），国家科技支撑计划项目（2012BAD13B05）
作者简介 ：王英杰，女，硕士研究生，研究方向 ：分子育种 ；E-mail ：1124063095@qq.com
通讯作者 ：阎萍，女，研究员，博士生导师，研究方向 ：动物遗传育种 ；E-mail ：pingyanlz@163.com
牦牛 CAPN3 基因的克隆及组织表达特异性
王英杰1，2  阎萍1，2  潘和平2  吴晓云1，2  李明霞2
（1. 西北民族大学生命科学与工程学院，兰州 730030 ；2. 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 甘肃省牦牛繁育工程重点实验室，
兰州 730050）
摘 要 ： 以牦牛背最长肌为材料，采用 RT-PCR 法克隆了 CAPN3 基因的 CDs 区，并对其进行生物信息学分析。结果表明，
牦牛 CAPN3 基因的 CDs 区长 2 469 bp，编码 822 个氨基酸残基 ；生物信息学分析显示，其编码的蛋白属于非分泌表面蛋白，含有
35 个磷酸化位点，主要在细胞质和细胞核中发挥生物学作用。二级结构主要由 α-螺旋、无规则卷曲、伸展链和 β-转角组成，具有
CysPc、calpain- Ⅲ和 EFh 家族蛋白结构域，无信号肽。牦牛 CAPN3 基因与黄牛、绵羊和猪在系统发育树上的距离最近。运用实时
荧光定量分析 CAPN3 在不同组织中的表达量，CAPN3 基因在牦牛的 7 种组织中均有表达，但在背最长肌、胰脏中的表达量较高。
关键词 ： 牦牛 ；CAPN3 基因 ；克隆 ；生物信息学分析 ；表达模式
DOI ：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.01.025
Cloning and Tissue-specific Expression of CAPN3 Gene in Yak
WANG Ying-jie1，2 YAN Ping1，2 PAN He-ping2 WU Xiao-yun1，2 LI Ming-xia2
（1. College of Life Science and Engineering，Northwest University for Nationalities，Lanzhou 730030 ；2. Key Laboratory of Yak Breeding
Engineering of Gansu Province，Lanzhou Institute of Husbandry and Pharmaceutical Sciences，Chinese Academy of Agricultural Sciences，
Lanzhou 730050）
Abstract: Using the longissimus of yak（Bos grunniens）back as material, the CDs sequence of yak CAPN3 gene was cloned by RT-
PCR, and it was analyzed by bioinformatics. The results indicated that the length of CDs in yak CAPN3 gene was 2 469 bp and encoding 822
amino acid residues. Bioinformatics analysis showed that the protein encoded by CAPN3 was the non-secretory surface protein, containing 35
phosphorylation site, and mainly played a biological role in the cytoplasm and nuclei. The secondary structure was mainly composed of α-helices,
random coil, extended chain and β-turn, having the structure domains of CysPc, calpain-Ⅲ and EFh families and no signal peptide. The
CAPN3 of yak was the most similar with those of Bos taurus, Ovis aries and Sus scrofa in phylogenetic tree. Real-time PCR analysis revealed the
expressions of CAPN3 in varied tissues. There were expressions in all 7 tissues, and they were high in the muscle and pancreas.
Key words: Bos grunniens ；CAPN3 gene ；cloning ；bioinformatics ；expression pattern
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2016,Vol.32,No.1150
性钙蛋白酶，其在骨骼肌细胞中呈现高度表达特异
性［3］。Lian 等［4］的研究揭示了 CAPN3 的 mRNA 水
平和蛋白质水平与肉的嫩度之间存在显著相关性。
鸭骨骼肌发育过程中，CAPN3 基因与肌纤维类型和
肌纤维的生长发育密切相关。CAPN3 基因的变异影
响肉的品质［5］。侯冠彧等［6］对 CAPN3 基因的 5 区
域进行 SNP 检测和基因型分析，初步断定该基因本
座位有影响肉牛生长及牛肉嫩度的倾向。Kimberly
等［7］发现 CAPN3 的活性影响鼠肌肉的营养。延边
黄牛 CAPN3 在位点 5 556 发生 G → A 突变，导致该
位点的脂肪酸和氨基酸含量在不同基因型之间存在
差异［8］。CAPN3 的活性和表达水平影响肉质嫩度，
并且与肢带型肌营养不良密切相关，存在着很强的
遗传效应［9-11］。CAPN3 在组织中的表达具有特异性，
猪 CAPN3 和 CAST 基因在背最长肌中有较高的表达
量［20］。姚慧等［13］分析了 CAPN1 和 CAST 基因在牦
牛不同组织中的表达差异。CAPN3 基因在牦牛不同
组织中表达情况尚未见报道。
本实验克隆 CAPN3 基因的 CDs 区，并进行生
物信息学分析，以期为深入研究牦牛 CAPN3 基因的
定位与表达调控奠定基础。同时采用荧光定量 PCR
技术，检测 CAPN3 基因在牦牛不同组织的表达量，
为进一步揭示 CAPN3 基因的分子生物学功能提供理
论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 组织样、细菌菌株和载体 本实验选择 3 头
成年青海省大通牦牛，屠宰后分别采集心脏、肝脏、
脾脏、肺脏、肾脏、胰脏、背最长肌组织，放入液
氮保存。
1.1.2 主 要 试 剂 E.coli DH5α 购 于 宝 生 物 公 司 ；
pGEM-T easy 克隆载体购于 Promega 公司。TaKaRa
反转录试剂盒、Trizol 试剂、LA Taq DNA 聚合酶购
自宝生物工程有限公司，DNA Marker DL2000、DNA
纯化回收试剂盒、高纯度质粒小量提取试剂盒、
SYBR Green 荧光定量试剂盒购于 TIANGEN 公司。
1.1.3 引物的设计与合成 根据 GenBank 中普通牛
CAPN3 基因 cDNA 序列（登录号 ：149197.1）应用
Primer5 软件设计引物（表 1），由 Sangon 公司合成。
表 1 CAPN3 基因扩增引物序列
用途 名称 引物序列（5-3） 退火温度（Tm）/℃ 片段长度 /bp
PCR P1 F ：ACCCTCACTCTCTTTCTCTC 48.0 2064
R ：GATTGTATTCTCAACTTCCT
P2 F ：CATCGGTTTCGCCATCTA 54.0 1104
R ：GCTGGGAGGGAAGTGAGTA
P3 F ：TTCAGACCGAGCAAACAG 54.3 1057
R ：TCTAGCACCAGGAAGCAC
RTFQ PCR P4 F ：AGACTGGGTGGACGTGGTT 60.0 860
R ：TTGCGATGGTTGGATTTG
1.2 方法
1.2.1 总 RNA 的提取 以成年牦牛背最长肌为材
料， 参 照 RNA 提 取 试 剂 盒 说 明 书 提 取 RNA。 总
RNA 用无菌 DEPC 水溶解，用琼脂糖凝胶电泳检测
RNA 的完整性。
1.2.2 PCR 扩增与测序 RNA 反转录为 cDNA ：反
应总体系为 10 μL ：5×gDNA Eraser Buffer（2.0 μL），
gDNA Eraser（1.0 μL），Total RNA（1.0 μL），Rrime
Script RT Enzyme Mix（1.0 μL），RT Primer Mix（1.0
μL），5×RrimeScript Buffer（4.0 μL），RNase Free
H2O（10 μL）。PCR 反应条件为 ：42℃ 25 min，85℃
5 s，4℃保存。
PCR 扩增双链 ：总反应体系 25 μL ：LA Premix
12.5 μL，上下游引物各 0.5 μL，cDNA 模板 1.0 μL，
RNase Free H2O 10.5 μL。PCR 反应条件为 ：94℃预
变性 4 min ；94℃变性 30 s，55℃退火 40 s，72℃延
伸 3 min，共 30 个循环；72℃延伸 10 min，4℃保存。
PCR 产物用 1% 的琼脂糖凝胶电泳检测。
2016,32(1) 151王英杰等：牦牛 CAPN3基因的克隆及组织表达特异性
用 DNA 凝胶回收试剂盒回收 PCR 扩增产物，
连接到 pGEM-T easy 载体上，16℃过夜。转化 E.coli
DH5α 感受态细胞，接种转化后的 DH5α 于含有 Amp
的 LB 固体培养基上，37℃培养 12-16 h 后，挑取阳
性菌落接种于含有 Amp 的 LB 液体培养基中，37℃
条件下 220 r/min 振荡培养 8 h，对菌液进行 PCR 鉴
定后，送至 Sangon 公司测序。
1.2.3 实时荧光定量 PCR 反应体系和条件 根据
NCBI 中 下 载 的 牦 牛 CAPN3 基 因（ 登 录 号 ：NM-
174260.2）应用 Primer5.0 设计 1 对引物（表 1）。实
时 荧 光 定 量 PCR 反 应 体 系 为 10 μL，SYBRI Mix
5 μL， 模 板 cDNA 0.6 μL， 上 下 游 引 物 各 0.2 μL，
RNase Free H2O 4 μL。PCR 反应程序 ：95℃预变性
30 s ；95℃变性 15 s，60℃退火 30 s，40 个循环。
2 结果
2.1 CAPN3基因的克隆及理化性质分析
PCR 产物用 10 g/L 的琼脂糖凝胶电泳分析，可
见 3 条 DNA 片段（图 1），大小分别为 2 064、1 057
和 1 104 bp，与预期 DNA 片段大小一致。重组质
粒测序结果（图 2）表明，本研究克隆测序得到的
序列为 3 180 bp，通过 BLAST 比对确定该序列为牦
牛 CAPN3 基因，其中开放阅读框长 2 469 bp，编码
822 个氨基酸，起始密码子为 ATG，终止密码子为
TGA，CAPN3 基因编码的蛋白分子量约为 94.58 kD，
理论等电点为 5.70。含有 20 种基本氨基酸，其中含
量最高的是 Glu（7.5%），含量最低的是 His（1.9%）；
含有带负电荷的残基 122 个，正电荷残基 107 个，
酸性氨基酸为 14.84%，碱性氨基酸为 14.96%。
2.2 CAPN3基因编码蛋白的疏水性/亲水性预测和
分析
依据氨基酸分值越低亲水性越强和分值越高疏
水性越强的规律可知，牦牛 CAPN3 基因氨基酸序列
的第 491 位 Arg 具有最低的分值 -3.967，其亲水性
最强 ；第 481 位 Phe 具有最高分值 2.978，其疏水性
最强。可知，整个多肽链表现为亲水性（图 3）。
2.3 CAPN3基因编码蛋白信号肽和跨膜区分析
蛋白信号肽分析表明，CAPN3 编码的蛋白不存
在信号肽，属于非分泌蛋白。编码蛋白所有氨基酸
都位于膜表面，可知其是一种表面蛋白（图 4）。
2.4 CAPN3基因编码蛋白的亚细胞定位
牦牛 CAPN3 基因编码蛋白的亚细胞定位分析
结果可知，其分布在细胞质和细胞核中的可能性为
39.1%，分布在线粒体中的可能性为 8.7%，分布在
液泡、细胞外基质和细胞骨架的可能性为 4.3%。
2.5 牦牛CAPN3基因编码蛋白结构域和蛋白质功
能位点预测
用 Interpro 软件对 CAPN3 基因编码蛋白进行结
构域预测，结果（图 5）显示，该序列在 56-426 氨
基酸序列之间有 CysPc 家族蛋白功能域，在 429-
583 氨基酸序列之间有 calpain- Ⅲ家族蛋白功能域，
在 697-725、727-755、792-820 氨基酸序列之间有
EFh 家族蛋白功能域。运用 Netphos 软件对 CAPN3
基因编码蛋白分析，可知该蛋白有 25 个丝氨酸磷酸
化位点，2 个苏氨酸磷酸化位点，8 个酪氨酸磷酸化
位点（图 6）。
2.6 CAPN3基因编码蛋白的二级结构和三级结构
预测
用 SOPMA 服务器预测 CAPN3 基因编码蛋白的
二级结构，结果（图 7）表明，该蛋白包含 35.64% α-
螺旋、43.8% 无规则卷曲、15.33% 伸展链和 5.23% β-
转角。可推断 α-螺旋和无规则卷曲是牦牛 CAPN3 编
码蛋白主要的二级结构元件。采用同源建模法，结
果（图 8）显示，该蛋白主要由 α-螺旋、无规则卷
曲和 β-折叠组成，与二级结构预测结果基本一致。
2.7 CAPN3基因编码蛋白的系统发育分析
使用 MegAlign 软件进行同源性分析（图 9）发
现，牦牛 CAPN3 基因编码蛋白与其他物种 CAPN3
基因编码蛋白具有很高的同源性，均在 90% 以上。
1 2 3 M
bp
2000
1000
750
500
250
100
M ：DL2000 DNA Marker ；1-3 ：PCR 扩增产物
图 1 牦牛 CAPN3 基因 PCR 扩增产物的电泳图
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2016,Vol.32,No.1152
使用 MEGA5.1 中的 NJ 法构建 CAPN3 基因的系统发
育树，结果（图 10）表明，牦牛与黄牛、绵羊和猪
在系统发育树种距离较近，这与动物学分类一致。
2.8 CAPN3基因在不同组织中的表达水平检测
CAPN3 基因在所检测牦牛的心脏、肝脏、脾
脏、肺脏、肾脏、胰脏、背最长肌组织中均有表
达， 而 背 最 长 肌、 胰 脏 中 的 表 达 高 于 其 他 组 织
（图 11）。
3 讨论
CAPN3 作为影响肉质性状的候选基因，近年
图 2 牦牛 CAPN3 基因和编码蛋白序列
3
2
1
0
-1
-2
-3
-4
So
cr
e
5 100 200 300 400 500 600 700 800
Position
图 3 牦牛 CAPN3 基因编码蛋白的疏水性预测
1000
0
-1000
-2000
-3000
-4000
-5000
-6000
-7000
0 100
Position
200 300 400 500 600 700 800 900
i->o
o->i
图 4 牦牛 CAPN3 基因编码蛋白跨膜分析
2016,32(1) 153王英杰等：牦牛 CAPN3基因的克隆及组织表达特异性
100
CysPc calpain_III EF
h
EF
h
EF
h
200 400 500 600 700 8003000
图 5 牦牛 CAPN3 基因编码蛋白结构域预测
0
0
1
+
100 200 300 400 500 700 800
Serine
Threonine
Tyrosine
Threshold
600
图 6 牦牛 CAPN3 基因编码蛋白磷酸化位点预测
Sequence length : 822
10 20 30 40 50 60 70
0 100 200 300 400 500 600
红色 e ：伸展链 ；橘黄色 c ：无规则卷曲 ；蓝色 h ：α-螺旋 ；绿色 t ：β-转角
图 7 牦牛 CAPN3 基因编码蛋白的二级结构预测
生物技术通报 Biotechnology Bulletin 2016,Vol.32,No.1154
来得到了越来越广泛的重视，CAPN3 可通过自溶降
解肌联蛋白和伴肌动蛋白，在宰后肉的嫩化中扮演
重要角色［6］。本研究采用 RT-PCR 技术，克隆获得
CDs 区长 2 469 bp，其编码 822 个氨基酸，其编码的
蛋白质为亲水性蛋白质，说明该蛋白为水溶性蛋白。
亚细胞定位推断牦牛 CAPN3 基因编码蛋白可能主要
在细胞质和细胞核中发挥生物学作用。磷酸化是一
种重要的蛋白质翻译后修饰，蛋白磷酸化与多种生
物学过程密切相关［14］，该蛋白有 35 个磷酸化位点，
可推测 CAPN3 在行使生理化功能前或者与其他蛋白
互作时可能需要磷酸化的活化。二硫键可以使不同
区域的氨基酸靠拢并形成稳定的空间拓扑结构，同
时疏水氨基酸残基围绕着二硫键可形成局部疏水中
心，利于形成稳定的高级结构域［15］，这对 CAPN3
蛋白功能的发挥可以产生重要的影响。在一定的生
理条件下，氨基酸序列决定了它的二级结构和空间
构 象。 牦 牛 CAPN3 蛋 白 由 35.64% α-螺 旋、43.8%
无规则卷曲、15.33% 伸展链和 5.23% β-转角组成，
不同的二级结构元件构成了 CAPN3 蛋白特定的高
级结构，进而可以行使特定的生理生化功能。牦牛
与黄牛、绵羊和猪在系统发育树种距离最近，这与
Walder 等［16］研究结果相似。
据 Kinbara 等［17］ 报道，CAPN3 在成年动物中
几乎只在骨骼肌中表达，而 Missa 等［11］用免疫印迹
法分析小鼠的不同器官（骨骼肌、心脏、肝脏、子宫、
肾脏、小肠和肺脏）CAPN3 的表达量，发现其在骨
骼肌中的表达是受限的［18］。张增荣等［19］研究山地
乌骨鸡和商品鸡 CAPN3 基因在不同组织中的表达，
发现 CAPN3 基因在胸肌和腿肌中的表达量最高，且
CAPN3 基因在 10 周龄商品鸡中所有组织的表达量
高于 10 周龄的山地乌骨鸡。刘博洋等［20］研究发现
草原红牛脾脏中的 CAPN3 基因表达量显著高于其他
组织。本研究采用实时荧光定量 PCR 方法对牦牛不
同组织中 CAPN3 基因表达水平差异进行检测，结果
显示，CAPN3 基因在所检测牦牛的心脏、肝脏、脾
脏、肾脏、胰脏及背最长肌 7 种组织中均有表达，
不同组织中表达水平不同。本研究发现所检测的牦
牛的各组织中，胰脏、背最长肌中的 CAPN3 基因表
达量显著高于其他组织。因此，背最长肌中 CAPN3
基因表达量显著高于其他组织，为改良牦牛肉的嫩
度提供了理论依据。
图 8 牦牛 CAPN3 蛋白三级结构预测图
D
iv
er
ge
nc
e
Percent Identity/%
Sus scrofa
Mus musculus
Loxodonta africana
Equus caballus
Homo sapiens
Ovis aries
Bos taurus
Bos grunnies
图 9 不同物种 CAPN3 蛋白氨基酸序列同源性比较
Bos taurus哴⢋
Bos grannies⢖⢋
Ovis aries㔥㖺
Sus scrofa䟾⥚
Canis lupus⤬
Mus musculusሿᇦ啐
Loxodonta africana䶎⍢䊑
Equus caballus傜
Homo sapiensӪ
Macaca mulatta⥅⥤
图 10 CAPN3 基因的系统发育树
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0 㜠㜿 㛪㜿 ᗳ㜿 㛍㜿 㛼ᴰ䮯㚼 㝮㜿 㛮㜿⴨ሩ㺘䗮䟿
图 11 牦牛 CAPN3 基因在不同组织中的表达量
2016,32(1) 155王英杰等：牦牛 CAPN3基因的克隆及组织表达特异性
4 结论
牦 牛 CAPN3 基 因 的 CDs 区 长 2 469 bp， 其 编
码 822 个氨基酸，其编码的蛋白质为亲水性蛋白
质，说明该蛋白为水溶性蛋白。牦牛 CAPN3 蛋白由
35.64% α-螺旋、43.8% 无规则卷曲、15.33% 伸展链
和 5.23% β-转角组成，不同的二级结构元件构成了
CAPN3 蛋白特定的高级结构，进而可以行使特定的
生理生化功能。结果显示，所检测的牦牛的各组织
中，胰脏、背最长肌中的 CAPN3 基因表达量显著高
于其他组织。
参 考 文 献
［1］阎萍 . 牦牛遗传资源保护及综合开发利用［J］. 畜牧与兽医 ,
2005, 37（4）：21-22.
［2］邱莫寒 , 鲜凌瑾 , 张平 . 钙蛋白酶系统基因的研究进展［J］.
安徽农业科学 , 2009, 37（28）：13628-13631.
［3］ Nakajima T, Fukiage C, Azuma M, et al. Different expression patte-
rns for ubiquitous calpains and CAPN3 splice variants in monkey
ocular tissues［J］. Biochimica Biophysica Acta, 2001, 15（19）：
55-64.
［4］Lian MA, Bekhit AED, Stevenson B, et al. Up and down regulation
of longissimus tenderness parallels changes in the myofibril bound
calpain 3 protein［J］. Meat Science, 2004, 67（5）：433-455.
［5］朱文奇 , 徐文娟 , 束婧婷 , 等 . 鸭骨骼肌早期发育过程中钙蛋白
酶 3（CAPN3）基因的表达及其与肌纤维性状的关联［J］. 畜
牧兽医学报 , 2014, 45（3）：385-390.
［6］侯冠彧 , 曾鸿普 , 王东劲 , 等 . 钙蛋白酶 3（CAPN3）基因多态
性与牛胴体性状的关联分析［J］. 畜牧兽医学报 , 2010, 41（4）：
398-402.
［7］Kimberly A, Huebsche K, Christine MW. Mdmmuscular dystrophy ：
interactions with calpain 3 and a novel functional role for N2A
domain［J］. Human Mole Genet, 2005, 19（14）：2801-2811.
［8］金鑫 , 张立春 , 任春宇 , 等 . 延边黄牛 CAPN3 基因多态性与氨
基酸含量关系研究［J］. 安徽农业科学 , 2010, 38（7）：3485-
3487.
［9］Blzquez L, Azpitarte M, Senz A, et al. Characterization of calpain l3
transcripts in mammalian cells ：expression of alternatively-spliced
variants in non-muscle cell types［J］. Neurogenetics, 2008, 9（3）：
173-282.
［10］Geesink GH, Taylor RG, Koohmaraie M. Calpain 3/p94 is not
involved in postmortem proteolysis［J］. J Anim Sci, 2005, 83（7）：
1646-1652.
［11］Todorva A, Georgieva B, Tournev I, et al. A large deletion and novel
point mutations in the calpain 3（CAPN3）in Bulgarian LGMD2A
patients［J］. Neurogenetics, 2007, 8（5）：225-229.
［12］FelicioAM, Boschiero C, Balieiro JCC, et al. Identification
and association of polymorphisms in CAPN1 and CAPN3
candidate genes related to performance and meat quality traits in
chickens［J］. Genetics and Molecular Research, 2013, 12（1）：
47-482.
［13］姚慧 , 陈智华 , 钟金城 , 等 . CAPN1 和 CAST 基因在牦牛不
同组织中表达差异研究［J］. 河南农业科学 , 2014, 43（3）：
139-140.
［14］Nascimbeni AC, Fanin MTasca E, Angelini C. Transcriptional
and translational effects of intronic CAPN3 gene mutations［J］.
Human Mutation, 2010, 31（9）：1658-1669.
［15］Gandolfi G, Pomponio L, Ertbjerg P, et al. Investigation on CAST,
CAPN1 and CAPN3 porcine gene polymorphism and expression
in relation to post-mortem calpain activity in muscle and meat
quality［J］. Meat Science, 2011, 88（7）：694-700.
［16］Walder K, McMillan J, Lapsys N, et al. Calpain 3 gene expression
in skeletal muscle is associated with body fat content and measures
of insulin resistance-DRO［J］. Nature Publishing Group, 2002,
26（4）：442-449.
［17］Kinbara K, Sorimachi H, Ishiura S, et al. Skeletal musclespecific
calpain, p94［J］. Biochem Pharmacol, 1998, 56（9）：415-420.
［18］Krahn M, Lopez de Munain A, Streichenberger N, et al. CAPN3
mutations in patients with idiopathic eosinophilic myositis［J］.
Ann Neurol, 2006, 59（5）：905-911.
［19］ 张增荣 , 朱庆 , 蒋小松 , 等 . 鸡 CAPN3 基因表达特异性研究［J］.
畜牧兽医科学 , 2011, 24（5）：622-624.
［20］刘博洋 , 秦立红 , 廉传江 , 等 . CAPN3 基因在草原红牛不同组
织中的表达差异［J］. 中国畜牧兽医 , 2010, 37（10）：105-
107.
（责任编辑 马鑫）