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作 者 ：严慧玲;蓝东明;王永华;杨博;

期 刊 ：生物技术通报 2011年 0卷 06期 页码：175-181

关键词：南极假丝酵母脂肪酶A；毕赤酵母；组成型表达；纯化；酶学性质；

摘 要 ：将南极假丝酵母脂肪酶A(cala)基因克隆至组成型表达载体pGAPZαA中,电激转入X-33,获得高效表达的CALA酵母工程菌株。发酵液上清经超滤浓缩、硫酸铵沉淀和阴离子交换层析等步骤,获得纯化的重组CALA,其比酶活达384.90 U/mg。该酶最适温度为70℃,最适pH值为8.0。经50℃保温2 h,仍含有60%水解酶活力;在pH7.0和8.0溶液中比较稳定。经DMSO处理1 h,仍保持90%的活性;非离子型表面活性剂能提高CALA的酶活,金属离子在不同程度上抑制CA-LA的酶活。

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