菰物种专化DNA序列的克隆及其在检测菰DNA导入水稻中的应用
刘振兰 董玉柱 刘宝*（东北师范大学遗传与细胞研究所，长春130024）
摘要：根据两个植物抗病基因N和RPS 2中核酸结合位点(NBS)和富亮氨酸重复区(LRR)中的保守序列设计了一对特异引物，用PCR从具有水稻(Oryza sativa L.)改良所需要的许多优良性状的水稻近缘野生种菰(Zizania latifolia (Griseb.) Turcz. ex Stapf)的基因组DNA中扩增同源片段。PCR产物经克隆后，分别以菰和水稻的基因组DNA为探针，通过点杂交对所得克隆进行了分析。点杂交结果表明，在所分析的60个克隆中有2个克隆是菰专化的序列，即它们与水稻无杂交信号。基因组DNA的Southern杂交进一步证实了这2个克隆的专化性。为了验证一些可能的“水稻-菰”渐渗杂交系是否确实含有源自供体菰的DNA，以这2个克隆为探针，与经EcoRⅠ酶切的5个可能的渐渗杂交系进行了Southern杂交。结果表明，这2个克隆均能检测出其中的一个系含有其同源序列。这一结果为曾经报道的经一种非常规有性杂交方法将菰DNA导入水稻提供了确凿的证据。
关键词： 物种专化DNA序列；渐渗杂交系；菰；水稻
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