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Separation of lignin and glucose in solutions by ultrafiltration

溶液中木质素和葡萄糖的超滤分离



全 文 :第 12卷第 2期
2014年 3月
生  物  加  工  过  程
Chinese Journal of Bioprocess Engineering
Vol􀆰 12 No􀆰 2
Mar􀆰 2014
doi:10􀆰 3969 / j􀆰 issn􀆰 1672-3678􀆰 2014􀆰 02􀆰 011
收稿日期:2012-11-19
基金项目:国家重点基础研究发展计划(973计划)(2009CB724700)
作者简介:黄  洲(1986—),男,江苏常熟人,硕士研究生,研究方向:生物化工;缪冶炼(联系人),教授,E⁃mail:ylmiao@ njtech􀆰 edu􀆰 cn
溶液中木质素和葡萄糖的超滤分离
黄  洲1,缪冶炼1,陈介余2,李文莉1
(1􀆰 南京工业大学 食品与轻工学院,南京 211800; 2􀆰 日本秋田县立大学 生物资源学部,秋田 0100195)
摘  要:以木质素和葡萄糖的混合溶液为木质纤维素水解液模型,采用截留相对分子质量为 5 000的卷式聚醚砜膜
对葡萄糖和木质素进行全回流模式的分离,探讨了木质素和葡萄糖浓度、操作压力、错流速率对通量、木质素和葡
萄糖截留率的影响。 结果表明:在实验条件范围内,通量随葡萄糖浓度和木质素浓度的增加而降低,并随操作压
力、错流速率的增加而增加。 木质素截留率不受任何条件的影响,基本稳定在 97%。 葡萄糖截留率随木质素浓度
的增加而增加,并随错流速率的增加而减小。 在 0􀆰 8 g / L的木质素质量浓度条件下,当错流速率从 0􀆰 12 m / s 增加
到 0􀆰 17 m / s时,葡萄糖截留率从 14%减小到 7􀆰 3%。 由此可见,在混合溶液的超滤过程中,通过合理选择错流速
率,能够改善木质素和葡萄糖的分离。
关键词:酶解;葡萄糖;木质素;木质纤维素;膜分离
中图分类号:TK6        文献标志码:A        文章编号:1672-3678(2014)02-0056-07
Separation of lignin and glucose in solutions by ultrafiltration
HUANG Zhou1,MIAO Yelian1,CHEN Jieyu2,LI Wenli1
(1􀆰 College of Food and Light Industrial Engineering,Nanjing Tech University,Nanjing 211800,China;
2􀆰 Faculty of Bioresource Science,Akita Prefectural University,Akita 0100195,Japan)
Abstract:Solutions of lignin and glucose were used as models of lignocellulose hydrolysates, and the
lignin and the glucose were separated using a spiral⁃wound polyethersulfone membrane with a molecular
weight cut⁃off of 5 000􀆰 The effects of lignin concentration and glucose concentration,applied pressure and
crossflow velocity on solution flux, lignin retention and glucose retention were discussed􀆰 Under the
experimental conditions,the solution flux decreased with increasing of glucose concentration and lignin
concentration, and increased with increasing of applied pressure and crossflow velocity􀆰 The lignin
retention was almost constant at 97% 􀆰 The glucose retention increased with increasing of lignin
concentration, and decreased with increasing of crossflow velocity􀆰 Under the condition of a lignin
concentration at 0􀆰 8 g / L,the glucose retention decreased from 14% to 7􀆰 3% when the crossflow velocity
increased from 0􀆰 12 m / s to 0􀆰 17 m / s􀆰 A suitable crossflow velocity could improve the ultrafiltration
separation of the lignin and the glucose.
Key words:enzymatic hydrolysis;glucose;lignin;lignocellulose;membrane separation
    预处理和水解是以木质纤维素材料为原料生
产生物乙醇的主要操作步骤。 然而,在预处理和水
解过程中,可溶性木质素会进入水解液,对发酵微
生物产生毒性,影响木质纤维素水解液的发酵效
率[1]。 在发酵前需除去可溶性木质素的方法有活
性炭吸附法[1]、过量石灰澄清法[2-3]、离子交换树脂
法[4]及酶解法等[5]。 本研究中笔者提出通过膜分
离去除木质纤维素水解液中木质素,与现有方法相
比,膜分离法具有对木质素成分的依赖性低、不会
产生后续的毒性物质、处理能力强等特点。
造纸黑液呈强碱性,木质素和固形物含量高。
在对黑液的膜分离中,通量、固形物和木质素截留
率受到膜的材料和截留相对分子质量[6-7] 、黑液的
木质素[6] 和固形物含量[7-8] 、操作温度[8] 和压
力[7-8]等因素的影响。 而木质纤维素水解液与造
纸黑液的性质有很大区别。 首先,两者的主要成
分不同。 木质纤维素水解液主要含有葡萄糖、木
糖和阿拉伯糖等还原糖,而造纸黑液主要含有木
质素和固形物;其次,木质纤维素水解液与造纸黑
液中木质素的相对分子质量不同。 木质纤维素水
解液中的木质素质量浓度小于 1 g / L,而造纸黑液
中的木质素质量浓度可达到 5 ~ 60 g / L[9] 。 可溶性
木质素的相对分子质量随木质纤维素材料、提取
方法和条件不同而变化[10-12] 。 木质纤维素水解液
的性质必然影响其中还原糖和木质素的分离过程
和效果。
Toledano 等[11] 比较了截留相对分子质量为
5 000、10 000和 15 0000 的陶瓷膜对造纸黑液木质
素(重均相对分子质量和数均相对分子质量分别为
5 654、1 879)的分离性能。 木质纤维素水解液中的
还原糖主要为葡萄糖、木糖和阿拉伯糖,其质量浓
度分别为 8􀆰 9、4􀆰 7 和 0􀆰 3 g / L[13],相对分子质量分
别为 180、150和 150 。 木质素和还原糖的相对分子
质量相差较大,为膜分离提供了技术依据。
笔者为了把握木质纤维素水解液中木质素和
还原糖的膜分离特性,以木质素和葡萄糖的混合
溶液为木质纤维素水解液模型,采用截留相对分
子质量为 5 000 的卷式聚醚砜膜对葡萄糖和木质
素进行分离,以期探讨木质素和葡萄糖浓度、操作
压力、错流速率对通量、木质素和葡萄糖截留率的
影响。
1  材料与方法
1􀆰 1  木质素和葡萄糖的混合溶液
在 5 L纯水中加入一定量的木质素(日本关东
化学株式会社)和葡萄糖(分析纯,国药集团化学试
剂有限公司),制备木质素和葡萄糖的混合溶液。
混合溶液的木质素质量浓度为 0 ~ 1􀆰 6 g / L,葡萄糖
质量浓度为 2~15 g / L。
木质素的相对分子质量(Mr)采用凝胶渗透色
谱法测定[14]。 取木质素 0􀆰 1 g,用 0􀆰 1 mol / L 磷酸盐
缓冲液(pH 6􀆰 0)定容至 100 mL,制备出质量浓度为
1 g / L的木质素溶液。 取木质素溶液 1 mL,用 0􀆰 22
μm微滤膜过滤后,取 20 μL 上样分析。 利用上海
曦玉分析仪器科技有限公司 XY100 型 GPC 凝胶
渗透色谱系统及色谱仪进行分析。 检测器为 XY100
型 UV紫外检测器、检测波长为 220 nm,分离柱为凝
胶渗透色谱柱(7􀆰 8 mm×30 cm,SEC 150),流动相
为 0􀆰 1 mol / L 磷酸盐缓冲液,标准试样为聚氧化乙
烯,流动相流速为 0􀆰 6 mL / min,柱温为 40 ℃,柱压
为 0􀆰 2 MPa。
图 1表示木质素累积质量分数随相对分子质量
(lgMr)的变化。 由图 1可知:木质素的相对分子质量
分布范围为 350~34 000。 相对分子质量 5 000 时的
累积质量分数为 50􀆰 3%。 木质素的重均相对分子质
量、数均相对分子质量分别为 6 858、2 370,比文献
[10]中芒草木质素(通过 7􀆰 5% NaOH、90 ℃、90 min
处理得到)的重均相对分子质量 5 654、数均相对分子
质量1 879 稍大。 两者的多分散系数相近,在 3左右。
图 1  木质素累积质量分数随相对分子质量的变化
Fig􀆰 1  Change of the cumulative weight fraction
with molecular weight of lignin
1􀆰 2  膜分离实验装置
膜分离实验装置主要由不锈钢材质原料罐、高
压柱塞泵(HYDRA CELL,美国普菲克公司)、超滤
膜组件、温度表、压力表、流量计、截留液和渗透液
取样口等部分组成。 其中,原料罐的外径为 185
mm,内径为 155 mm,高度为 340 mm,高压柱塞泵的
最大流量为 8􀆰 4 m3 / h,最高压力为 7 MPa,超滤膜
(PT1812C型,美国 GE Osmosis 公司)的特性如表
1所示。
75  第 2期 黄  洲等:溶液中木质素和葡萄糖的超滤分离
表 1  超滤膜的特性
Table 1  Characteristics of the ultrafiltration membrane
参数 特性值
构型 卷式
外径 / m 0􀆰 047
内径 / m 0􀆰 016
长度 / m 0􀆰 30
有效膜面积 / m2 0􀆰 32
耐受 pH 3~10
截留相对分子质量 5 000
最大操作压力 / kPa 1 379
最高操作温度 / ℃ 50
    注:以上数据来源于美国 GE⁃osmosis公司。
操作温度会改变溶液的黏度,从而影响通量,
但对截留率的影响很小[8,15]。 本研究的主要讨论内
容为木质素和还原糖的超滤分离特性,因此选择在
室温条件下进行分离操作。 原料罐采用夹层结构。
在实验中,向原料罐夹层中通入自来水,以维持料
液温度在室温。
1􀆰 3  超滤
超滤前,首先测定膜的纯水通量。 向原料罐内
倒入纯水 5 L,在操作压力 0􀆰 6 MPa、室温、错流速率
0􀆰 12 m / s的条件下使纯水在分离装置内循环。 在
稳定运行的状态下,测定纯水的流量。 上述操作重
复 2次,取平均值。
排除原料罐中的纯水,加入木质素和葡萄糖的
混合溶液 5 L,采用全回流模式进行分离。 所谓全
回流分离操作模式,就是混合溶液经过高压柱塞泵
打入超滤膜组件中,流出的截留液和渗透液全部返
回原料罐中,以保证原料罐中的混合溶液处于浓度
稳定状态[16]。 使混合溶液在一定的操作压力和错
流速率条件下运行 10 min 后,测定渗透液和截留液
的流量,取出渗透液 5 mL 和截留液 5 mL 作为木质
素和葡萄糖分析试样。 超滤中,混合溶液温度一定
(室温),操作压力分别设定为 0􀆰 2、0􀆰 4、0􀆰 6、0􀆰 8 和
1 MPa,错流速率分别设定为 0􀆰 12、 0􀆰 13、 0􀆰 15、
0􀆰 17、0􀆰 20和 0􀆰 22 m / s。 每个条件的分离操作重复
2次,其测定取平均值。
超滤结束后,排出混合溶液,向料液罐内装入
清洗液(三聚磷酸钠 5 g / L,十二烷基苯磺酸钠 2
g / L)5 L,运行 15 min,再用纯水 5 L运行 15 min,反
复 4~5次,以冲洗分离装置。
通量(Jv)采用式(1)计算。
Jv =


(1)
式中:Q为渗透液流量,L / h;S为膜的有效面积,m2。
木质素或葡萄糖的截留率(R)采用式(2)计算。
R = 1 -
ρp
ρr
æ
è
ç
ö
ø
÷ × 100% (2)
式中:ρp为渗透液中木质素或葡萄糖的质量浓度,
g / L;ρr为截留液中木质素或葡萄糖的质量浓度,
g / L。
1􀆰 4  木质素浓度的测定
木质素浓度采用紫外分光光度法测定[1]。 取
测试液 2 mL,在 280 nm波长处测定溶液的吸光值,
并按照式(3)计算木质素质量浓度。
木质素测定的标准曲线制作方法如下。 准确
称取木质素 100 mg,用蒸馏水定容至 500 mL,然后
分别稀释至质量浓度 0􀆰 012、0􀆰 018、0􀆰 024、0􀆰 030、
0􀆰 036和 0􀆰 042 g / L,作为标准溶液。 采用紫外分光
光度计(752S型紫外分光光度计,上海棱光技术有
限公司)测定标准溶液在 280 nm 处的吸光值 A280。
吸光值与木质素质量浓度的关系见式(3):
A280 = 19􀆰 355ρL     (R2 = 0􀆰 997 4) (3)
式中:A280为吸光值;ρL为木质素质量浓度,g / L。
1􀆰 5  葡萄糖浓度的测定
葡萄糖浓度采用 DNS 法测定[17]。 取测试液 2
mL于试管中,加入 3,5 二硝基水杨酸(DNS 试剂)
(分析纯,国药集团化学试剂有限公司)2 mL,置于
沸水浴中加热 10 min,冷却后加蒸馏水 20 mL。 用
快速混匀器(SK 1 型,常州国华电器有限公司)将
试管中的液体充分混匀,静置 30 min,在波长 540
nm处测定吸光值,并按照式(4)计算葡萄糖质量
浓度。
葡萄糖标准曲线的制作方法如下:准确称取
干燥至恒质量后的葡萄糖 100 mg,加少量蒸馏水
溶解后,以蒸馏水定容至 100 mL,即含葡萄糖为
1􀆰 0 mg / mL。 分别取标准葡萄糖溶液 0、0􀆰 2、0􀆰 4、
0􀆰 6、0􀆰 8 和 1􀆰 0 mL 于试管中,用蒸馏水补足至 2
mL,加入 DNS 试剂 2 mL。 在沸水浴中加热 10
min,冷却后加蒸馏水 20 mL,用快速混匀器将试管
中的液体充分混匀,静置 30 min。 在波长 540 nm
下测定其吸光值 A540。 吸光值与葡萄糖质量浓度
的关系见式(4)。
85 生  物  加  工  过  程    第 12卷 
A540 = 1􀆰 407ρg     (R2 = 0􀆰 996 4) (4)
式中:A540为吸光值;ρg为葡萄糖质量浓度,g / L。
2  结果与讨论
2􀆰 1  膜通量的稳定性
每次对混合溶液进行超滤前,在操作压力 0􀆰 6
MPa、错流速率 0􀆰 12 m / s的条件下测定膜的纯水通
量,以检验膜通量的稳定性,结果见图 2。 由图 2 可
知:膜的纯水通量几乎不变,维持在 130 L / (m2·h)
左右。 这说明每次清洗能使膜通量恢复到初始水
平,从而保证实验数据的可比性。
图 2  实验前超滤膜的纯水通量
Fig􀆰 2  Pure⁃water flux of ultrafiltration
membrane before each test
2􀆰 2  分离过程中通量、截留率的变化
在操作压力 0􀆰 6 MPa、错流速率 0􀆰 12 m / s 的条
件下对混合溶液(木质素质量浓度为 0􀆰 8 g / L,葡萄
糖质量浓度为 6 g / L)进行分离,图 3 表示分离过程
中通量的变化。 由图 3 可知:通量初始值为 131
L / (m2·h),5~20 min后稳定在 108 L / (m2·h)。
图 3  分离过程中通量的变化
Fig􀆰 3  Changes of flux during separation
膜分离的操作压力和错流速率分别设定在 0􀆰 6
MPa、0􀆰 12 m / s。 图 4 表示分离过程中木质素和葡
萄糖截留率的变化。 由图 4 可知:木质素截留率随
时间的变化很小,基本稳定在 97%。 葡萄糖的初始
截留率为 3􀆰 4%,5 min 后基本稳定在 14%。 因此,
本研究在超滤 10 min 后取样,再测定通量、木质素
和葡萄糖的浓度。
图 4  分离过程中木质素和葡萄糖截留率的变化
Fig􀆰 4  Changes of retention of lignin and
glucose during separation
图 5  木质素和葡萄糖质量浓度对通量的影响
Fig􀆰 5  Effects of concentration of lignin
and glucose on flux
2􀆰 3  木质素和葡萄糖浓度的影响
图 5 表示木质素和葡萄糖浓度对通量的影响。
膜分离的操作压力和错流速率分别设定在 0􀆰 6
MPa、0􀆰 12 m / s。 由图 5可知:通量随葡萄糖和木质
素浓度的上升而下降。 葡萄糖质量浓度为 2 g / L、木
质素质量浓度为 0时,通量为 113 L / (m2·h)。 当葡
萄糖质量浓度上升到 15 g / L,木质素质量浓度上升
到 1􀆰 6 g / L时,通量下降到 89 L / (m2·h)。 通量下
降的主要原因在于驱动力降低和浓差极化。 在同
一操作压力下,木质素和葡萄糖浓度增加使膜两侧
的渗透压差增大,驱动力降低。 与此同时,木质素
浓度越高,在膜表面形成浓差极化阻力越大。 经预
实验发现,葡萄糖浓度对木质素和葡萄糖截留率影
响很小。 因此,在后续实验中,混合溶液的葡萄糖
质量浓度设定为 6 g / L。
95  第 2期 黄  洲等:溶液中木质素和葡萄糖的超滤分离
图 6表示木质素浓度对木质素和葡萄糖截留率
的影响。 膜分离的操作压力和错流速率分别设定
在 0􀆰 6 MPa、0􀆰 12 m / s。 由图 6可知:木质素截留率
不受木质素浓度影响,基本稳定在 97%。 本研究中
50􀆰 3%木质素的相对分子质量小于 5 000(图 1),而
大部分小于膜截留相对分子质量的木质素也被截
留,其原因在于木质素分子具有复杂的空间结构。
在秸秆的木质素结构中愈创木酚基团和紫丁基基
团含量最多。 而愈创木酚基团的空间结构松散,紫
丁香基基团的空间结构紧凑。 Toledano 等[11] 和
Alriols等[12]发现,用不同截留相对分子质量的膜对
木质素分级时,低相对分子质量组分中含有较多的
紫丁香基基团,高相对分子质量组分中含有较多的
愈创木酚基团。 此外,可溶性木质素含有大量的酚
羟基和醇羟基,通过氢键[17-18]结合,会形成更大的
聚合物。
葡萄糖截留率受木质素浓度的影响较大。 当
木质素质量浓度从 0 增加到 1􀆰 2 g / L 时,葡萄糖截
留率从 4%上升到 16%,但是当木质素质量浓度大
于 1􀆰 2 g / L 时,葡萄糖截留率基本稳定。 这是因为
部分木质素堵塞在膜孔内,使膜孔空隙变小,造成
部分葡萄糖被截留。 此外,膜表面形成木质素浓差
极化层,其厚度会随着木质素浓度的增加而增加,
使葡萄糖截留率增大。 当木质素浓度达到一定程
度后,浓差极化层厚度趋于稳定,葡萄糖的截留率
不再增加[18]。
图 6  木质素浓度对木质素和葡萄糖截留率的影响
Fig􀆰 6  Effects of lignin concentration on retention
of lignin and glucose
2􀆰 4  操作压力和错流速率的影响
因为超滤是一种压力驱动的过程,所以操作压
力在分离过程中扮演着重要的角色[17]。 本研究在
不同压力下对混合溶液(葡萄糖质量浓度为 6 g / L,
木质素质量浓度为 0􀆰 4 g / L)进行分离,考察了操作
压力对通量、木质素和葡萄糖截留率的影响。
图 7、图 8 分别表示操作压力对通量和截留率
的影响。 其中,葡萄糖质量浓度设定在 6 g / L,木质
素质量浓度设定在 0􀆰 4 g / L,错流速率设定在 0􀆰 12
m / s。 由图 7 可知:通量随操作压力的升高而呈线
性增加。 此时的膜分离中,渗透压基本不变,因此
驱动力的增加与操作压力的升高相一致[19]。 在错
流速率为 0􀆰 12 m / s 的条件下,当操作压力从 0􀆰 2
MPa增加到 1 MPa 时,通量从 33 L / (m2·h)增加到
186 L / (m2·h)。 由图 8可知:在 0􀆰 2~1 MPa的操作
压力范围内,木质素和葡萄糖的截留率基本不变,
分别稳定在 97%、10%左右。
图 7  操作压力对通量的影响
Fig􀆰 7  Effects of applied pressure on flux
图 8  操作压力对木质素和葡萄糖截留率的影响
Fig􀆰 8  Effects of applied pressure on retention
of lignin and glucose
在操作压力一定(0􀆰 6 MPa)、错流速率不同的
条件下对混合溶液(葡萄糖质量浓度为 6 g / L,木质
素质量浓度为 0􀆰 8 g / L)进行分离,测定通量、木质
素和葡萄糖的截留率。 图 9表示错流速率对通量的
影响。 由图 9可知:当错流速率从 0􀆰 12 m / s增加到
0􀆰 17 m / s 时,通量从 94 L / ( m2·h) 增加到 118
L / (m2·h)。 当错流速率大于 0􀆰 17 m / s 时,通量基
本不变。 由此可见,在一定范围内增加错流速率能
够减小膜表面的浓差极化,从而提高通量[17,20-21]。
06 生  物  加  工  过  程    第 12卷 
图 9  错流速率对通量的影响
Fig􀆰 9  Effect of crossflow velocity on flux
图 10 表示错流速率对木质素和葡萄糖截留率
的影响。 其中,葡萄糖质量浓度设定在 6 g / L,木质
素质量浓度设定在 0􀆰 8 g / L,操作压力设定在 0􀆰 6
MPa。 由图 10 可知:木质素截留率在错流速率为
0􀆰 12~ 0􀆰 22 m / s 范围内基本不变,稳定在 97%。 另
一方面,在错流速率范围 0􀆰 12 ~ 0􀆰 17 m / s 内,葡萄
糖截留率随错流速率的增加而逐渐降低。 在错流
速率为 0􀆰 12 m / s 时,葡萄糖截留率为 14%,当错流
速率大于 0􀆰 17 m / s时,截留率保持稳定在 7􀆰 3%。
图 10  错流速率对木质素和葡萄糖截留率的影响
Fig􀆰 10  Effects of crossflow velocity on
retention of lignin and glucose
一般来说,膜表面的浓差极化和膜孔堵塞是葡
萄糖被截留的主要原因。 错流速率的增加可以减
少浓差极化,从而降低葡萄糖截留率[17,20-21]。 很明
显,错流速率的增加有助于提高处理能力,改善木
质素和葡萄糖的分离。
3  结  论
以木质素和葡萄糖的混合溶液为木质纤维素
水解液模型,采用截留相对分子质量为 5 000 的卷
式聚砜膜对葡萄糖和木质素进行分离,在木质素质
量浓度 0 ~ 1􀆰 6 g / L、葡萄糖质量浓度 2 ~ 15 g / L、操
作压力 0􀆰 2~1 MPa、错流速率 0􀆰 12~0􀆰 22 m / s的范
围内,分别探讨了木质素和葡萄糖浓度、操作压力、
错流速率对通量、木质素和葡萄糖截留率的影响。
1) 通量随葡萄糖浓度和木质素浓度的增加而
降低,随操作压力、错流速率的增加而增加。 在葡
萄糖质量浓度 6 g / L、木质素质量浓度 0􀆰 8 g / L、操作
压力 0􀆰 6 MPa的条件下,当错流速率从 0􀆰 12 m / s增
加到 0􀆰 17 m / s 时,通量从 94 L / m2·h 增加到118
L / (m2·h)。 当错流速率大于 0􀆰 17 m / s 时,通量不
受错流速率的影响。
2)木质素截留率不受木质素和葡萄糖浓度、操
作压力、错流速率的影响,基本稳定在 97%。
3)葡萄糖截留率不受葡萄糖浓度、操作压力
的影响,随木质素浓度的增加而增加,并随错流速
率的增加而减小。 在 0􀆰 8 g / L 的木质素质量浓度
条件下,当错流速率从 0􀆰 12 m / s 增加到 0􀆰 17 m / s
时,葡萄糖截留率从 14%降到 7􀆰 3%。 当错流速率
大于 0􀆰 17 m / s时,葡萄糖截留率不受错流速率的
影响。
本研究通过实验证明了采用截留分子相对质
量为 5 000的卷式聚醚砜膜分离混合溶液中木质素
和葡萄糖的可行性,今后将以木质纤维素水解液为
对象,探讨其中各成分对木质素和还原糖分离的
影响。
参考文献:
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(责任编辑  周晓薇)
26 生  物  加  工  过  程    第 12卷