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Screening and production of γ-glutamyltranspeptidase by Bacillus subtilis NX-2

γ-谷氨酰转肽酶产生菌的筛选和培养条件的研究



全 文 : 万方数据
万方数据
2003年11月 她垦簟!王耸复够臻然堕鬯塑堕望塑塑量量壁塑堕窒 一二—竺
Nx一2菌发酵生成7,GTP,其中,葡萄糖、蔗糖为碳源
时,生成的7.c1P的活力最高。甘油为碳源时,菌体
生长良好,但酶活仅为1.02u,mL。以柠檬酸钠、乙
酸钠为碳源时,Nx一2几乎不合成7一G口酶,且柠檬
酸钠对菌的生长有-定抑制作用。
表1 Nx.2菌的生物学性质
TabJel‰【o∞而cIIa[∽k出6cs0fNX一2
试验项目 结果
革兰氏染色
菌体形态
芽孢大小
厌氧生长
硝酸盐还原
明胶液化
淀粉水解
酪蛋白水懈
甲幕红染色
vP试验
柠檬酸利用
吲哚生成
腮酶
铵盐利用
7%Nacl生长
表2碳源对占s曲£豇∞Nx.2产*c’Ⅱ1的影响
1址k2 -射酗0fdi踮陀ntc-ad啪洲L曲eon}G耵’州heses
2.3氮源对日.s如fi胁Nx.2产酶的影响
2.3.1单一氮源的对产酶的影响
以表3中所选的几种的化合物(含氮量3%)作
为培养基氮源,接入Nx一2菌,摇瓶培养30h,结果归
于表3中。在添加单一无机氮源的情况下,菌体生
长尚口f,但几乎都不合成y.cTP。采用酵母膏、蛋白
胨、玉米浆为氮源,菌体合成相当活力的7一c仲,其
中尤以酵母膏为最佳。但是,加入牛肉膏为氮源,菌
体生成极少量7一G1n这些数据表明酵母膏、蛋白
胨、玉米浆中一定存在某种诱导7一Gtll,合成的凶子,
这有待进一步研究。
表3氮源对口.s出船NX_2产*(m,的影响’
11ahle3 哺ctofdiⅡe陀ntiLm目ens㈣㈣卜(?l-Psy“t11eses
‘培养基其他成分:葡萄糖2%,M茚04·7Hl()o.05%,K1
HPn0.1%o
2.32复合氮源不同配比对产酶的影响
根据单·氮源实验结果,对其中产酶活力高的
3种氮源,即酵母膏、蛋白胨和玉米浆进行详细的浓
度条件试验和不同配比条件试验,结果如表4。酵
母膏为最佳的氮源,在浓度为1.5%~2.5%之间,菌
体均能产生较高的7一G口酶活,但浓度过高酶活有
所下降;酵母膏和玉米浆复合使用,取得了最佳的效
果,当酵母膏浓度为1.5%,玉米浆浓度为1.o%时,
菌体产卜c四酶活力达到32u/mL。
表4氮源及不同配比对产了.GrP的影响
1圳e4 E瞻c【Uf出踮rent“tID舭lsome0n*G砰symheses
氮源(%)序号——————
酵母膏蛋白胨玉水浆
1 5
25
35
l 5
1.5
1 5
25
2.5
1 5
1.5
1.O
2.0
05
1.0
20
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-


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. 1.0
— 20
吸光值T.GTP酶活力
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万方数据
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