全 文 :!9
"!
4
#
2011
$
7
%
R
S
Â
^
Ã
Ä
ChineseJournalofBioprocessEngineering
Vol.9No.4
Jul.2011
doi:10.3969/j.issn.1672-3678.2011.04.010
OPQI
:2011-01-11
KRS!
:
íÜCss¡ÊÍ
(10874108);
Ì÷ÜCÔ¾¿zhs¡ÊÍ
(SJ08A16)
TU.V
:
Í
Î
(1985—),
¥
,
Ïk)ìÔ
,¨
©¾¿R
,
¾¿½
:
pªRSS
;
mÐq
(
«CÔ
),
Ö×
,Email:sunrunguang@snnu.edu.cn
!abcy4© \»n¤
Å
Æ
,
IÇ^
,
È
,
ÉÊË
,
2ÌÍ
(
Î|)* ;9*XÏз¦*.
,
|±
710062)
7
h
:
6789:c °o;fHc
、
úp:µ¶
SAP3。
ZÝuÐ<=°>ÑYбúPùÏ
,
g?@
=
、
AÐ<=ãÈPÛ·B±YÊC½¾üDú?
。
ÊË4C
:
;fµ¶
SAP3
EöúüF·µ¶
,
GH+¶
、
*
¶
、
ÅI¶
、
gh¶
、
JK¶ö;
,
FüбúPùÏ
33×105。
g?@=ú?4C
:
;fµ¶ÙÚFLµ¶z{
ù·MMÜN[
,
0¶OæðPQR·STUä
。
ÈPÛ·BÛS;fµ¶¶VÙÚúWÊC
,
ÍXYS;R
¥ÊC
。
ä
02~12mg/mL
·ÈÉâôõ0
,
Z[µ¶ùÏâ·\Z
,
;fµ¶
SAP3
±
·OH
·w]¾^_
`
,
éw]¾
452%。
ijk
:
;f
;
µ¶
;
abÀ
lmnop
:TS20123
6qrst
:A
6u;p
:1672-3678(2011)04-0045-04
Structuralanalysisandantioxidationactivityof
bupleurumpolysaccharide
DUKe,SUNRunguang,ZHAOKai,LIUNanü,LILianqi
(ColegeofPhysicsandInformationTechnology,ShaanxiNormalUniversity,Xi′an710062,China)
Abstract:PolysaccharideSAP3wasextractedandisolatedfrombupleurumbyultrasonicassistedextrac
tion.Therelativemolecularweightwasdeterminedbyhighperformanceliquidchromatography.Its
chemicalstructurewasanalyzedbyinfraredspectrometry(FTIR)andatomicforcemicroscopy(AFM).
ExperimentalresultsshowedthatthemolecularweightofSAP3was33×105.FTIRshowedthereare
characteristicabsorptionpeaksonpolysaccharideSAP3anditsmonosaccharideresiduesexistedinthe
formsofpyranrings.AFMrevealedthatbupleurumpolysaccharidehadamultibranchedstructureand
ringstructureinlinkagesofadjacentmonosaccharides.Theirscavengingactivelyincreasedwiththein
creasingoftheconcentrationfrom02to12mg/mL,thehighestinhibitionratewas452%.
Keywords:bupleurum;polysaccharide;antioxidation
45x.µS6úûÛÜRS~pª
,
q¬×}
çS
、
AS¥RSm
,
Ý\!:;<=
、
.
、
´Î
、
-0GRSUN
[1-4]。
üÒÑ
、
Òd
,
ùÓ¢4$RdéAS
,
äå"Ýyo
、
ÔJ
、
1i
、
%i45G
,
ÝÕ¦.
,
0¦
N²G45
[5]。
456RSUN6CÔ
,
4567å6UN¶p_ú
,
e45
6¾¿Ý7å6ÄÅ*³H
。
hÍs
íÔeg6¾¿`eT5
,
³èª,¥Ö
(AFM)
egpª¢×ºT¡²6tjPQ4%
。
uv³ÎÏ|A¡\],gm\]4
5
,
ºTpqh.µL
SAP3,
Ò.³!Þ_`·
、
[ë
、
èª,¥ÖegºTp
,
ñ#
ùºú9¾¿456!
、
ÞBCñf
^À.X1Y³\
。
1
vw%xZ
1.1
vw%þÜ
,
Tç ØÙ2mÿ Ú
;H2SO4、
ÜÝ
、
Û`
、NaOH、
r`
、
ÍÈ"CzCÜ.
(CTAB)、NaCl
G[ùph
。
1.2
áâ
TU 1800
Eá%pëëÍz
(
ï½ÙI
³î¯Ý[AßÞ
);Water
!Þ_`·î
,Av
atar360ESP.FT IR
EÉl¤æ[ëî
(
ì
íÝ!ßÞ
);SPM 9500J3
Eèª,¥Ö
(
è
éÕÖßÞ
);RE 52AA
EðªÃ1¯
(
{
R.î¯ã
);FD 1A
ÒÞ¿À:
(
ï½òew
xî¯ßÞ
)。
1.3
xZ
1.3.1
45
SAP3
6bêfh.
É]zâí6¿Àâb
100g,
«
5
±;
¨6
95%
rJ
,80℃
\]
2h,
ÞÑ
,
7Ò
3
e
,
µÙ
âb
。
¿õ
[6]
6,ºT\]µLÂ
45
SAP,
Üfß亻
、SephadexG 150
dµL$·âb¹h5
SAP3。
1.3.2
á%ëp
}ëî
,190~900nm
^rÔºT
。
1.3.3
!Þ_`·p
[7]
·ù
ShodexOhpakSB_804HQ,
Ø`ù
7ü
,
جù
08mL/min,
º¬~ù
15μL,Ì
ù
30℃,
±²¯ùñÿºë±²¯
。
EÌý^5³Ø`Úab¶
1mg/mL
º
¬
,
µ½ÙQ6~§ûüaN×DÄ
:lgMr=
-06638tR+10113(R
2=09997)。
àm
:Mr
ù
ÌýÙ6ì[`epªy~
;tRùÌýÙ6~§û
ü
。
¤45Úç!h¼mb¶
1mg/mL
6Ú_
,
}
`Ó·9: º¬
,
àá~§ûü
,
W«×D
Äàµ`epªy~
。
1.3.4
[ë²¼
[8]
É]~"
1mg
6
SAP3,
³
KBr
0â,
,
}
[ëî²¼
4000~400cm-1
ôü6[
ë
。
1.3.5
A`·p
B¿õ
[9]
6,ºTA`·p
。
1.3.6
èª,¥Ö
(AFM)
²
ý=É]
SAP31mg,
©b¶
100μg/mL64
5Ú_
,
}Ù}~¯}~
4h,
(JÆ
25
μg/mL。³_ã]45Ú_5μL,ä}uåq
6õQâ
,
ýAm¿À~"
20min,
)¬¿À
f<áºTèª,¥Ö
(AFM)
²
[10]。
ïæ[
}
Tapping
pà qµ
,
²}Ì~Am
ºT
,
q¯ù
Si3N4(
¥§ç:
200μm;PNC©
012N/m)。
1.3.7
45;°ö
·OH
6ø³
B¿õ
[11]
6,ºT²¼
。
2
yz%{)
2.1
!ab
SAP3
cKLè\¨
Î\JºµÂ45
,
µÐù
23%。
pq
h.fµL645
SAP3
$·âb¹
,
c
,
nÚç¼
,
QÚçrJ
、
GH
、
{mGÝ:ÚV
。
ëp
(
ï
1)
1I45
SAP3
}|:
260
280nm
[L,®Q
,
SLV45Q"
>`#$y
。
m
1
!ab
SAP3
c¡¢Ì£¤
Fig.1 Ultravioletvisiblespectrumof
bupleurumpolysaccharideSAP3
2.2
!ab
SAP3
cnͨ
45
SAP3
6!Þ_`·ïîï
2
ð
ñ
。
ï
2
áò
:
Ý÷úQ6øI
,
TLpqh.
µL6
SAP3
6h45
。
ÌýNazÞµgì[
`epªy~ù
33×105。
2.3
!ab
SAP3
c10?Fn¤
[12]
SAP3
6[ëï
(
ï
3)
TIøúZ45x
Sy6M[®Q
:343078cm-1
\6èQùp
ªü
O—H
a6éãø
,
F9
,
SLÝea
64
R
S
Â
^
Ã
Ä
!
9
"
m2
!ab
SAP3
c¥ñF
Fig.2 HPLCchromatogramofbupleurum
polysaccharideSAP3
6×}
;291659cm-1
6®Qù45pª
C—H
6éãøð
;163439cm-1
ù45m
¼6®Qê&C C Oéãø,TL
45
SAP3
má5Ý
—COOH,
g¶pmá5×}
5ë`
;142577cm-1
6®Q6
C—H
a6¤
£ø
;106930cm-1
6®Q6Éì5Öa
íC6éãø
;92132cm-1
ùÉì6heÉ
éãø
;76715cm-1
6®ùÉì6eÉé
ãø
。
Wá%
,
45
SAP3
m6÷5ÈC
[ñÉì6¢à×}
。
m
3
!ab
SAP3
c10?F
Fig.3 FTIRspectrogramofbupleurumpolysaccharideSAP3
24
bpcn¤
A`·p÷5*¶
,
íîï
4、
ï
5
ð
ñ
。
ï
4
ï
5
áò
:
45
SAP3
"Ý}x
5
、
=5
、
cî5
、
5
、
½¶5
5
û÷5
。
2.5
¦ÍG§c¨©n¤
45
SAP3
6èª,¥Ö6Ñp
îï
6
ðñ
。
ï
6
áò
:
45~pªþIø4
pï¹Òm5þ`ðñò¢¶¹
。
÷þ6
!Íù
181~267nm,
èÍù
40~63nm,
¬~
ç÷þpª6eÞH
,
WáñSLêÜÒhù
1—
>5
;2—
}x5
;3—
í5
;4—
=5
;
5—
cî5
;6—
5
;7—
½¶5
m
4
rDbbª,«¬ËÛc
GC
n¤
Fig.4 Gaschromatogramofmixed
standardmonosaccharides
2—
}x5
;4—
=5
;5—
cî5
;6—
5
;7—
½¶5
m
5 SAP3
c
GC
n¤
Fig.5 Gaschromatogramofmonosaccharide
compositionsonSAP3
÷ë5þ
,
l64ë5þñò¶Ü
,
6·ß¢ó
G
[13]
¾¿6ôõÑ456öðÒh÷ë5
þ¶`úS
。
}5þüIÃ5÷2üQÓ6
àg¡
,`
ðñò¢¶æ
8
÷¢6¹
,
8Â
o6â¼N
。
5þ6í¯ÄÍñf5þñò
¢¶6¹63~QøçÓÍf
º¨LõQT+645pªþ6©Í
,
º¨6
45þI4
,
3I
。
26
!abò0®
·¯OH
cT
45
SAP3
e
·OH
6°öø³îï
7
ðñ
。
gï
7
áñ.ø
:
]^45y~ÓÍ60!
,
4
5
SAP3
e
·OH
6°öÐ568~
,
m}wxy~
ÓÍ^rÔ
(02~12mg/mL)
e
·OH
6°öз
y~ÓÍ.`B
。
8y~ÓÍù
12mg/mL
û
,
°öÐéL
452%。
3
y)
³ÎÏ|A¡\],gm\]Â45
,
74
!
4
# Í
ÎG
:
456.UNp
m6
!ab
SAP3
c
AFM
¨ç
Fig.6 AFM imagesofbupleurumpolysaccharideSAP3
m
7
!ab
SAP3
·OH
c®¯T
Fig.7 Scavengingefectofbupleurum
polysaccharideSAP3on·OH
pß亻
、SephadexG 150
Stdh
.µL
SAP3。SAP3
Q">`#$y
,
ì[`e
pªy~ù
33×105,
mÝúZ45xSy6M
[®Q
,
86÷5ÈCñÉì6¢à×}
。
Y
³èª,¥ÖÑ
SAP3
6T+¢×
,
1I45
~pªþI4pï6
,
Òm5þ_ü`ðñ
򢶹
。
}
02~12mg/mL
6^rÔ
,
45
SAP3
e
·OH
6°öзÓÍ.`B
,
m]^45ÓÍ60!
,
°öÐ8~
。
èª,¥Ö6\$1»J6Ñ45¥
¢×6^
,
456ýü6gRSUN
6CÔ
,
³
AFM
`a¾¿45þ6Í
,
áñº
e45456ºú9oaÂ<
,
Ý7å6
ÄÅ*³H
。
M¬6q
:
[1]
¨$
,
Iù
.
ÛÜÿS
:
456äåRSUNfpqh.
,
[J].
míÛÜÿS
,2007,5(5):338346.
[2] ItisamS,DipanjanG,SujitKB,etal.Antitumorandimmuno
modulatingefectsofPleurotusostreatusmyceliaderivedproteo
glycans[J].InternationalImmunopharmacology,2006,6(8):
12871297.
[3] IgorAS,MarkTQ.Botanicalpolysaccharides:macrophageim
munomodulationandtherapeuticpotential[J].InternationalIm
munopharmacology,2006,6(3):317333.
[4] LiYanqun,FangLu,ZhangKechang.Structureandbioactivities
ofagalactoserichextracelularpolysaccharidefromsubmergedly
culturedGanodermalucidum[J].CarbohydratePolymers,2007,
68(2):323328.
[5]
É
,
ú7û
.
6.¶pfÿø³¾¿*f
[J].
üxgÿ
,2006,19(3):216218.
[6]
xý
,
z
,
mÐq
.
ÎÏ|e45\]Ð
、
¥¢×M
[fRSUN6})
[J].
RSÂ^ÃÄ
,2009,7(2):2934.
[7]
¢@
,
<þÿ
,
¢
,
G
.
8D!ÿ¦¦§0$#"#6S
yCÔ·ø³:¾¿
VFBD
456*¶
[J].
míwx
V
,2005,11(4):2023.
[8] ParkJK,KhanT,JungJY.Structuralstudiesoftheglucuronic
acidoligomersproducedbyGluconacetobacterhansenistrain[J].
CarbohydratePolymers,2006,63(4):482486.
[9]
{ìì
,
mÐq
,
z
,
G
.
¥Hª456èª,¥Ö
¾¿
[J].
ôª,¥t
,2009,28(2):157161.
[10]
mÐq
,
z
.
cd45öð6èª,¥Ö¾¿
[J].
.t
,2006,64(24):24672472.
[11]
$[
,
z
.
ö%45ËRS6bêfg.¾¿
[J].
R
SÂ^ÃÄ
,2008,6(4):4044.
[12]
&O
.
5ÒµSR.¾¿`a
[M].
ó
:
fg~ø
Ç
,1999.
[13]
ᛢ
,
mð(
,
)*
.
ôõÑ45
(SPFS2B1)
6èª,
¥ÖÑ
[J].
ç)ÿ
,2008,4(10):1214.
84
R
S
Â
^
Ã
Ä
!
9
"