全 文 ：
摇 摇 摇 摇 摇 生 态 学 报
摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 (SHENGTAI XUEBAO)
摇 摇 第 33 卷 第 13 期摇 摇 2013 年 7 月摇 (半月刊)
目摇 摇 次
前沿理论与学科综述
强度干扰后退化森林生态系统中保留木的生态效应研究综述 缪摇 宁,刘世荣,史作民,等 (3889)……………
AM真菌对重金属污染土壤生物修复的应用与机理 罗巧玉,王晓娟,林双双,等 (3898)………………………
个体与基础生态
东灵山不同林型五角枫叶性状异速生长关系随发育阶段的变化 姚摇 婧,李摇 颖,魏丽萍,等 (3907)…………
不同温度下 CO2 浓度增高对坛紫菜生长和叶绿素荧光特性的影响 刘摇 露,丁柳丽,陈伟洲,等 (3916)……
基于 LULUCF温室气体清单编制的浙江省杉木林生物量换算因子 朱汤军,沈楚楚,季碧勇,等 (3925)………
土壤逐渐干旱对菖蒲生长及光合荧光特性的影响 王文林,万寅婧,刘摇 波,等 (3933)…………………………
一株柠条内生解磷菌的分离鉴定及实时荧光定量 PCR检测 张丽珍,冯利利,蒙秋霞,等 (3941)……………
一个年龄序列巨桉人工林植物和土壤生物多样性 张丹桔,张摇 健,杨万勤,等 (3947)…………………………
不同饵料和饥饿对魁蚶幼虫生长和存活的影响 王庆志,张摇 明,付成东,等 (3963)……………………………
禽畜养殖粪便中多重抗生素抗性细菌研究 祁诗月,任四伟,李雪玲,等 (3970)…………………………………
链状亚历山大藻赤潮衰亡的生理调控 马金华,孟摇 希,张摇 淑,等 (3978)………………………………………
基于环境流体动力学模型的浅水草藻型湖泊水质数值模拟 李摇 兴,史洪森,张树礼,等 (3987)………………
种群、群落和生态系统
干旱半干旱地区围栏封育对甘草群落特征及其分布格局的影响 李学斌,陈摇 林,李国旗,等 (3995)…………
宁夏六盘山三种针叶林初级净生产力年际变化及其气象因子响应 王云霓,熊摇 伟,王彦辉,等 (4002)………
半干旱黄土区成熟柠条林地土壤水分利用及平衡特征 莫保儒,蔡国军,杨摇 磊,等 (4011)……………………
模拟酸沉降对鼎湖山季风常绿阔叶林地表径流水化学特征的影响 丘清燕,陈小梅,梁国华,等 (4021)………
基于改进 PSO的洞庭湖水源涵养林空间优化模型 李建军,张会儒,刘摇 帅,等 (4031)………………………
外来植物火炬树水浸液对土壤微生态系统的化感作用 侯玉平,柳摇 林,王摇 信,等 (4041)…………………
崇明东滩抛荒鱼塘的自然演替过程对水鸟群落的影响 杨晓婷,牛俊英,罗祖奎,等 (4050)……………………
三峡水库蓄水初期鱼体汞含量及其水生食物链累积特征 余摇 杨,王雨春,周怀东,等 (4059)…………………
元江鲤种群遗传多样性 岳兴建,邹远超,王永明,等 (4068)………………………………………………………
景观、区域和全球生态
中国西北干旱区气温时空变化特征 黄摇 蕊,徐利岗,刘俊民 (4078)……………………………………………
集水区尺度下东北东部森林土壤呼吸的模拟 郭丽娟,国庆喜 (4090)……………………………………………
增氮对青藏高原东缘高寒草甸土壤甲烷吸收的早期影响 张裴雷,方华军,程淑兰,等 (4101)…………………
基于生态系统服务的广西水生态足迹分析 张摇 义, 张合平 (4111)……………………………………………
深圳市景观生态安全格局源地综合识别 吴健生,张理卿,彭摇 建,等 (4125)……………………………………
庐山风景区碳源、碳汇的测度及均衡 周年兴,黄震方,梁艳艳 (4134)……………………………………………
气候变化对内蒙古中部草原优势牧草生长季的影响 李夏子,韩国栋,郭春燕 (4146)…………………………
民勤荒漠区典型草本植物马蔺的物候特征及其对气候变化的响应 韩福贵,徐先英,王理德,等 (4156)………
血水草生物量及碳贮量分布格局 田大伦,闫文德,梁小翠,等 (4165)……………………………………………
5 种温带森林生态系统细根的时间动态及其影响因子 李向飞,王传宽,全先奎 (4172)………………………
资源与产业生态
干旱胁迫下 AM真菌对矿区土壤改良与玉米生长的影响 李少朋,毕银丽,陈昢圳,等 (4181)…………………
城乡与社会生态
上海环城林带保健功能评价及其机制 张凯旋,张建华 (4189)……………………………………………………
研究简报
北京山区侧柏林林内降雨的时滞效应 史摇 宇,余新晓,张佳音 (4199)…………………………………………
采伐剩余物管理措施对二代杉木人工林土壤全碳、全氮含量的长期效应
胡振宏,何宗明,范少辉,等 (4205)
………………………………………
……………………………………………………………………………
期刊基本参数:CN 11鄄2031 / Q*1981*m*16*326*zh*P* ￥ 90郾 00*1510*35*
室室室室室室室室室室室室室室
2013鄄07
封面图说: 岳阳附近的水源涵养林及水系鸟瞰———水源涵养林对于调节径流,减缓水、旱灾害,合理开发利用水资源具有重要
的生态意义。 洞庭湖为我国第二大淡水湖,南纳湘、资、沅、澧四水,北由岳阳城陵矶注入长江,是长江上最重要的水
量调节湖泊。 因此,湖周的水源涵养林建设对于恢复洞庭湖调节长江中游地区洪水的功能,加强湖区生物多样性的
保护是最为重要的举措之一。 对现有防护林采取人为干扰的调控措施,改善林分空间结构,将有利于促进森林生态
系统的正向演替,为最大程度恢复洞庭湖水源林生态功能和健康经营提供重要支撑。
彩图及图说提供: 陈建伟教授摇 北京林业大学摇 E鄄mail: cites. chenjw@ 163. com
第 33 卷第 13 期
2013 年 7 月
生 态 学 报
ACTA ECOLOGICA SINICA
Vol. 33,No. 13
Jul. ,2013
http: / / www. ecologica. cn
基金项目:国家自然科学基金项目(31070555);山西省农业科技攻关项目(20100311001鄄7)
收稿日期:2012鄄10鄄18; 摇 摇 修订日期:2013鄄03鄄01
*通讯作者 Corresponding author. E鄄mail: lizhen@ sxu. edu. cn
DOI: 10. 5846 / stxb201210181450
张丽珍1,*,冯利利2,蒙秋霞3,牛宇4,牛伟,樊晶晶,鹿茸.一株柠条内生解磷菌的分离鉴定及实时荧光定量 PCR 检测. 生态学报,2013,33(13):
3941鄄3946.
Zhang L Z, Feng L L,Meng Q X,Niu Y, Niu W,Fan J J,Lu R. Isolation,identification,real鄄time PCR investigation of an endophytic phosphate鄄solubilizing
bacteria from Caragana korshinskii Kom. roots. Acta Ecologica Sinica,2013,33(13):3941鄄3946.
一株柠条内生解磷菌的分离鉴定及
实时荧光定量 PCR检测
张丽珍1,*,冯利利2,蒙秋霞3,牛摇 宇4,牛摇 伟5,樊晶晶1,鹿摇 茸1
(1. 山西大学生命科学学院, 太原摇 030006; 2. 山西大学生物技术研究所, 太原摇 030006;
3. 山西省农业科学院环境与资源研究所, 太原摇 030006; 4.山西省农业科学院农业资源与经济研究所, 太原摇 030006;
5. 山西省农业科学院, 太原摇 030006)
摘要:结合形态观察与 16S rDNA序列测定对柠条根系内分离筛选得到的解磷细菌 C9 进行鉴定,Blast比对结果表明 C9 为泛菌
(Pantoea vagans)。 在无机磷液体培养基培养条件下,用钼锑抗比色法研究它的解磷能力。 结果表明,随着时间的延长,培养液
中速效磷含量逐渐增加到 4. 45mg / L,溶液 pH可降至 4. 2。 进一步利用实时荧光定量 PCR 检测柠条根系中、柠条根际土壤与柠
条根围土壤中该细菌存在的相对基因拷贝数,结果发现该基因在 3 种样品中的数量为:柠条根系>柠条根际土壤>柠条根围土
壤,表明泛菌解磷细菌能聚集生长在柠条根系内,随着与根系接触距离的增加而呈逐级递减趋势。
关键词:柠条;内生菌;解磷能力;实时荧光定量 PCR
Isolation,identification,real鄄time PCR investigation of an endophytic phosphate鄄
solubilizing bacteria from Caragana korshinskii Kom. roots
ZHANG Lizhen1,*, FENG Lili2,MENG Qiuxia3,NIU Yu4, NIU Wei5,FAN Jingjing1,LU Rong1
1 College of Life Science, Shanxi University, Taiyuan 030006, China
2 Institute of Biotechnology,Shanxi University, Taiyuan 030006,China
3 Institute of Agricultural Environment and Resources, Shanxi Academy of Agricultural Sciences, Taiyuan 030006, China
4 Institute of Agricultural Resources and Economy, Shanxi Academy of Agricultural Sciences, Taiyuan 030006, China
5 Shanxi Academy of Agricultural Sciences; Taiyuan 030006,China
Abstract: The microbiota colonizing the rhizophere ( immediately surrounding the root) and the endophytic microbiota
(within the root) contribute to plant growth, productivity and phytoremediation. The microbiota inhibiting the rhizosphere
can both benefit and undermine the plant health, whereas mutualistic andophytic microbiota may provide physiologically
accessible nutrients and phytohormones to improve the plant growth, or help the plant withstand salt and drought. In this
study, one phosphate鄄solubilizing bacterium C9 was isolated from within the root system of Caragana Korshinskii Kom. It
was identificated by morphology and 16S rDNA sequencing. Using BLAST software, C9 was identified as Pantoea. The
phosphate鄄solubilizing capacity of C9 was assayed by molydenum鄄antimony鄄D鄄iso鄄ascorbic鄄acid鄄colorimetry (MADAC) in
inorganic phosphorus liquid culture. The results showed that the available phosphorus content in culture increased to
4郾 45mg / L and the pH value dropped to 4. 22. These data indicate that the strain C9 from Caragana Korshinskii Kom. root
system is able to utilize the insoluble phosphate and transform insoluble phosphorus into available form for the plants. At the
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same time, the possible relationship among pH level and phosphate dissolving ability was discussed. Futhermore, real鄄time
PCR method was developed for quantifying gene copy number of C9 in roots and soil. PCR results demonstrated that the
copy number of C9 follows the sequence of Caragana Korshinskii Kom. root > rhizosphere soil > soil around rhizosphere.
Results indicate that Caragana Korshinskii Kom. exertspositive effects on the existent environment of C9 and helps improve
salinity鄄alkalinity ecological environment gradually.
Key Words: Caragana korshinskii Kom. ; endophytic bacteria; phosphate solubilization; real鄄time PCR.
磷是植物生长发育必需的矿质元素之一,以多种方式参与植物体内的光合作用和生理生化过程,对促进
植物的生长发育和新陈代谢具有重要的作用。 一般农田土壤中全磷含量很高,但是有效磷含量很低[1]。 解
磷微生物产生的植酸酶、核酸酶和磷酸酶等加速了植酸、核酸、磷脂等含磷有机化合物的分解,促进了磷素释
放,可以提高植物磷素营养;解磷微生物分泌的有机酸与 Ca鄄P、Fe鄄P 和 A1鄄P 等进行螯合[2],使难溶磷转化成
为有效磷。 因此,利用微生物解磷作用弥补土壤磷素营养的不足,成为当前的一个研究热点。
紧贴根部定殖的根际菌和根系内的内生菌对植物的生长、生物量累积、碳汇、生物修复等功能发挥着重要
作用[3鄄5]。 内生菌存在于植物的根茎叶果实和种子中,在长期生物进化过程中与宿主植物形成了互利共生,
相互作用的关系。 根际微生物可能促进植物的生长也可能损坏植物的健康。 研究人员关于根际微生物对土
壤养分的分解和转化作用以及促进植物生长和对植物病害的生防作用的研究较为深入[6鄄7]。 与植物互利共
生的内生菌通过提供可利用的养分和生长激素来促进植物生长,帮助植物抵御高温、高盐和干旱等逆境胁迫。
现有研究认为内生菌可通过自身的代谢产物或借助于信号传导作用对植物体施加影响[8]。 M佗rquez 等[9]研
究发现内生真菌能提高植物抗逆能力。 目前关于植物内生解磷菌的报道还不多见。 因此寻找发现并进一步
探索植物内生解磷细菌在磷素循环吸收利用中的作用具有重要意义。
柠条是锦鸡儿属植物栽培种的通称,为豆科灌木类植物,具有抗盐碱、抗旱、耐寒、耐瘠薄等特点。 本实验
研究材料来源于山西大同,该地区土壤质地板结,环境条件恶劣,柠条在该地区的盐碱滩地改良中发挥了重要
作用[10]。 前期研究[16]发现柠条根围土壤分离获得的黑曲霉具有解磷能力,本文进一步探讨柠条根系内生细
菌的解磷能力,为全面理解柠条增加贫瘠土壤环境的养分来源途径,具有重要意义。
实时荧光定量技术作为一种核酸定量的手段,以其高灵敏性、高特异性、高精确度、实时性、污染少等优点
在微生物生态学中逐渐得到广泛的应用[11]。 本文采用 Real鄄time PCR 法对柠条根系组织及柠条根际土壤与
柠条根围土壤中的特定解磷细菌存在的相对基因拷贝数进行相对定量检测,确定具有解磷生物学功能的泛菌
属细菌的丰度,为探讨柠条内生解磷菌在盐碱土壤中的存在状态及在土壤生物改良中发挥的作用提供理论
依据。
1摇 材料与方法
1. 1摇 材料
1. 1. 1摇 材料
柠条根系组织及土壤取自山西大同盆地的毛皂试验站柠条林。 样品采集于 2009 年 9 月份,将柠条根样
品装入保鲜袋,放入冰盒带回 4益保藏。
无机磷培养基组份[12]:葡萄糖 10g,(NH4) 2SO4 0. 5 g,MgSO4·7H2O 0. 3g,NaCl 0. 3 g,KCl 0. 3g,FeSO4·
7H2O 0. 03 g,MnSO4·7H2O 0. 03 g,Ca3(PO4) 2 5 g,蒸馏水 1000 mL,pH7. 0—7. 5,121 益灭菌 30 min,固体培
养基中加入 20g / L琼脂。
1. 2摇 方法
1. 2. 1摇 柠条根系内生解磷细菌的分离和筛选
将柠条的主根和须根在自来水下冲洗干净,吸干表面的水分后,先使用 75%的酒精冲洗 1min,然后用无
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菌水冲洗,重复 3 次后用灭菌的滤纸吸干,最后剪成小段,放入研钵,加入适量的蒸馏水后用力研碎,系列稀释
后涂布到无机磷固体培养基上,37益,培养 5d,选择在无机培养基出现透明圈的菌株进行纯化后接至斜面
保存。
1. 2. 2摇 16S rDNA序列测定
细菌基因组 DNA提取:将保藏的 C9 菌株在 LB 培养基上活化后,接种于无机磷固体培养基上培养 3—
5d,按照试剂盒操作步骤提取基因组 DNA,取样进行 1%琼脂糖凝胶电泳检测,所得产物-20益保存备用。
16S rDNA序列分析参照 Toru Shigematsu[13]等的方法进行。 引物采用原核微生物 16S rDNA 序列通用引
物:引物 A (5忆鄄AGTTTGATCCTGGCTCA鄄3忆),引物 B (5忆鄄ATCCTTGTTACGACTTGA鄄3忆)。 PCR 扩增条件为:
95益预变性 5min,94益下变性 30s,55益退火 30s,72益延伸 1min,循环 30 次,72益延伸 10min。 产物的纯化用
TAKARA 琼脂糖凝胶 DNA 回收试剂盒进行。 PCR 产物经 pGEM鄄T Easy 载体连接到 JM109 感受态细胞上。
挑取阳性克隆子,依据质粒提取试剂盒说明抽提重组质粒 DNA。
测序送华大基因公司进行。
1. 2. 3摇 柠条根系内生解磷细菌的解磷能力测定
对柠条根内生解磷细菌进行无机磷液体培养基培养,将加 Ca3(PO4) 2 的液体培养基 50mL分装于 100mL
的三角瓶中,121益,灭菌 30min。 将 C9 制成菌悬液,调节浓度约为 107 个 / mL,取 1mL接种,37益160r / min,摇
床培养,每隔 12h周期取样,3 个重复,采用钼锑钪比色法测定解磷能力。
图 1摇 内生解磷细菌 C9 的解磷效果
摇 Fig. 1 摇 Colonial morphology of the endogenous phosphate -
solubilizing bacteria C9
1. 2. 4摇 实时荧光定量 PCR检测
目的菌株 C9 的荧光定量 PCR 引物由上海生工生物工程技术服务有限公司设计并合成:引物 F(5忆鄄
GTTCCCTTGAGGAGTGGCTTC鄄3忆),引物 R(5忆鄄CGAATTAAACCACATGCTCCAC鄄3忆)。
柠条根系 DNA提取,柠条根际土壤和柠条根围土壤总基因组 DNA提取利用 Omega 总基因组 DNA 抽提
试剂盒。 将提取的 cDNA稀释为 100ng / 滋L,取 2滋L 作为荧光定量 PCR 模板,荧光定量 PCR 的反应体系为:
SybrGreen qPCR Master Mix12. 5滋L,引物 F (10滋mol / L)0. 5滋L,引物 R (10滋mol / L)0. 5滋L,ddH209. 5滋L,样品
cDNA2滋L,总体积为 25滋L。 PCR 的反应程序设为:95益预变性 10min,95益变性 15s,60益退火 1min,循环
40 次。
2摇 结果
2. 1摇 内生解磷细菌的分离
无机磷固体培养基上分离筛选到的 C9 菌株为白
色、表面光滑、半透明,边缘整齐。 可以溶解培养基中的
不溶性磷酸钙,菌落周围成透明圈(图 1),据此初步确
定该菌株具有一定的解磷能力。
2. 2摇 16S rDNA序列测定
提取 C9 菌株的基因组 DNA,进行 PCR 扩增,
1郾 0%琼脂糖凝胶电泳检测(图 2)。 割胶回收目的基因
片段后,将纯化后的产物与 pGEM鄄T Easy 载体连接,蓝
白斑筛选得到重组克隆子,提取重组质粒,电泳检测连
接效果,将目的质粒送至华大基因进行序列测定,将序
列结果与 NCBI数据库中已知序列进行 BLAST 比对分
析,具体结果为:所获得的片段序列长度为 1532 bp,该
片段与 Pantoea vagans有 99%的同源性,初步将其判断
为泛菌(Pantoea vagans)。
3493摇 13 期 摇 摇 摇 张丽珍摇 等:一株柠条内生解磷菌的分离鉴定及实时荧光定量 PCR检测 摇
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图 2摇 内生解磷细菌 C9 的 PCR扩增结果
摇 Fig. 2 摇 PCR amplification of the endogenous phosphate鄄
solubilizing bacterias C9
2. 3摇 内生解磷细菌的解磷能力
解磷标准曲线方程为 y = 0. 5245x -0. 0178,R2 =
0郾 99,可以根据吸光度值来测定磷含量。
内生细菌 C9 的溶磷趋势是先升而后逐渐趋于平
稳,其 pH 值是先降后有波动最后趋于平稳。 分析发
现,随着其解磷能力的提高,pH 先降后升,当解磷能力
最后趋于平稳的时候,pH也趋于平稳。 C9 菌株的解磷
能力最高可达 4. 45mg / L,其溶液 pH 可降至最低值为
4. 2(图 3)。
图 3摇 C9 的解磷曲线和溶液 pH
Fig. 3摇 Phosphate solubilization capacity and pH of C9
2. 4摇 荧光定量检测结果
利用实时荧光定量 PCR 对具有解磷功能细菌 C9
基因的检测显示,C9 在柠条根内的平均基因拷贝数为
9139883 个,在柠条根际土壤中是 721399. 7 个,在柠条
根围土中是 142815. 5 个(图 4)。 由图 4 可以看出,目
的基因在柠条根中的含量最多,远远大于其在柠条根系
土壤和多年生柠条根围土壤中的含量,并且呈递减趋
势,从而可以说明,本文中所得目的菌株在柠条根系内
可以大量繁殖生长,并形成一定的规模体系。
3摇 讨论
解磷微生物的分离与研究覆盖了多个类群,包括细
菌[14],真菌[15鄄16]。 本文研究的这株解磷细菌分离自柠
条根系内部。 内生菌作为植物的共生体,对植物的生长
发育和功能效应有一定的潜在影响。 研究认为[17鄄18]植物内生菌可以通过溶磷能力而促进植物在逆境中的生
长。 植物内生菌可以通过调节细胞渗透压,改变气孔响应机制,调节根的形态和长短,影响氮素累积和代谢过
程,增加矿物质的吸收等机制来促进植物的生长[19]。 本研究获得的这株解磷细菌在实验室离体条件下具有
较强的解磷能力。 在自然生态条件下,内生解磷细菌能否促进柠条吸收磷元素,以及如何促进都需要进一步
的研究探索。 Son[20]等从大豆根际分离得到的解磷泛菌,其可溶性磷含量可达 900 mg / L。 Chung[21]等从朝鲜
农作物根际分离到的解磷泛菌,其可溶性磷含量为 113. 7 mg / L。 姚庆智[22]等人从油松菌根根际筛选出的优
良解磷细菌可使培养基中可溶性磷增量达 591. 82 mg / L。 解磷能力均强于本研究获得的 C9,这可能需要进一
4493 摇 生摇 态摇 学摇 报摇 摇 摇 33 卷摇
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图 4摇 不同样品中 C9 基因实时荧光定量 PCR结果
Fig. 4摇 Real time PCR of C9 in different samples
步从柠条根系的生存环境和生理功能来探究它们的差异,
并从定殖能力和田间实际解磷效果来比较它们的应用
潜力。
解磷菌的解磷机制是多样的, Rashid 等[23] 和
Ponmurugan等人[24]对此作过探讨。 其中解磷菌通过产生
有机酸来溶解难溶磷是最常见的一种机制。 本文通过对
C9 菌株解磷能力的研究发现该菌株的解磷能力与菌株生
长过程中酸性物质的产生有关。 C9 菌株影响培养基质中
有机酸的产生能力,进而影响培养基 pH大小,最终影响难
溶性磷酸盐的溶解量。
Fenchel[27]认为可以单纯从栖息的生境来理解微生物的分布。 植物根系生活在植物鄄土壤鄄微生物组成的
生态系统中。 根系内生菌在植物体内的定殖是一个主动过程,其长期生活在根系内的特殊环境中并与宿主协
同进化,可以通过自身的代谢产物或借助于信号转导对植物体产生作用。 在植物代谢过程中有部分物质以根
系分泌物的形式释放到根系根际,根系分泌物为土壤微生物提供大量的营养和能源物质,因而根际微生物的
种类和数量均高于非根际土壤,而且代谢活性也比非根际微生物高[26]。 本研究应用实时荧光定量 PCR 定量
检测了柠条内生菌株 C9 在柠条根系内及柠条根际和根围土壤中的数量。 结果显示柠条根系内部含量远远
大于根际和根围的数量,随着与根系接触距离的增加而呈逐级递减趋势。 Hallmann[28]等人的研究表明根际
微生物群落能通过渗透作用与寄主相互作用从而影响寄主体内的内生菌组成,部分微生物甚至能进入寄主体
内成为暂时的内生菌。 内生菌如何从根内扩散到柠条根际土壤再到柠条根围土壤,需要进一步通过标记技术
来跟踪研究内生菌的生态行为。 从泛菌 C9 的数量变化来看,表明植物内生菌在植物鄄土壤反馈机制中扮演着
重要的角色。 其本身又具有解磷能力,在一定程度上可以驱动对盐碱土壤的改良,为理解柠条改良盐碱土壤
提供了理论依据。 柠条内生菌株 C9 如何逐级定殖到周围土壤环境,发挥改善盐碱生态环境的作用将是下一
步研究的方向。
References:
[ 1 ]摇 Peix A,Rivas R,Mateos P F. Pseudomonas rhizosphaerae sp. nov,a novel species that actively solubilizes phosphate in vitro. Intenational Journal of
Systematic and Evolutionary Microbiology,2003,53:2067鄄2072.
[ 2 ] 摇 Lin Q M,Zhao X Y,Sun Y X,Yao J. Community characters of soil phosphobacteria in four ecosystems. Soil and Environmental Scieces,2000, 9
(1):34鄄37.
[ 3 ] 摇 Rodriguez R J,Henson J,Volkenburgh E V,Hoy M,Wright L,Beckwith F,Kim Y O,Redman R S. Stress tolerance in plants via habitat鄄adapted
symbiosis. ISME J,2008, 2, 404鄄416.
[ 4 ] 摇 de Deyn G B,Cornelissen J H C,Bardgett R D. Plant functional traits and soil carbon sequestration in contrasting biomes. Ecology Letters,2008,
11, 516鄄531.
[ 5 ] 摇 van der Lelie D,Taghavi S,Monchy S,Schwender J,Miller L,Ferrieri R,Rogers A,Wu X,Zhu W,Weyens N,Vangronsveld J,Newman L. Poplar
and its bacterial endophytes: coexistence and harmony. Critical Reviews in Plant Sciences,2009,28, 346鄄358.
[ 6 ] 摇 Mendes, R,Kruijt M,de Bruiji I,Dekkers E,van der Voort M,Schneider J H M,Piceno Y M,DeSantis T Z,Andersen G L,Bakker P A H M,
Raaijmakers J M. Deciphering the rhizosphere microbiome for disease鄄suppressive bacteria. Science,2011,332, 1097鄄1100.
[ 7 ] 摇 Fir佗kov佗 S,譒turd侏kov佗 M,M俨c姚kov佗 M. Bioactive secondary metabolites produced by microorganisms associated with plants. Biologia,2007,62,
251鄄257.
[ 8 ] 摇 Behie S W, Zelisko P M, Bidochka M J. Endophytic insect鄄parasitic fungi translocate nitrogen directly from insects to plants. Science, 2012, 22:
1576鄄1577.
[ 9 ] 摇 M佗rquez L M,Redman R S,Rodriguez R J, Roossinck M J. A virus in a fungus in a plant: three鄄way symbiosis required for thermal tolerance.
Science,2007,315:513鄄515.
[10] 摇 Zhang L Z,Niu W,Niu Y,Niu X W. Impact of Caragana Fabr. plantation on plant community and soil properities of saline鄄alkali wasteland. Acta
Ecologica Sinica, 2009, 29 ( 9): 4693鄄 4699.
5493摇 13 期 摇 摇 摇 张丽珍摇 等:一株柠条内生解磷菌的分离鉴定及实时荧光定量 PCR检测 摇
http: / / www. ecologica. cn
[11]摇 Zhang J,Zhang H W,Zhang C G. Real鄄time fluorescent quantitative PCR and its application in microbial ecology. Acta Ecologica Sinica. 2005, 25
(6):1445鄄1449.
[12] 摇 Shi J,Liu Z H,Jiang L H,Qiu H Z,Wang L,Zheng F L,Lin H T. Study on phosphate鄄dissolving ability of one phosphate solubilizing fungi and its
growth curve. Journal of Anhui Agricultural Sciences, 2008, 36(22):9363鄄9364.
[13] 摇 Toru S, Yueqin T, Hiromi K. Effect of dilution rate on structure of a mesophilic acetate鄄degrading methanogenic community during continuous
cultivation. Appl Environ Microbiol, 2003, 6(96): 6488鄄6496.
[14] 摇 Zhao X R,Lin Q M,Li B G. Community characters of soil phosphobacteria in four ecosystems. Soil and Environmental Scieces, 2002,42(2):
36鄄241.
[15] 摇 Kang Y J, Hu J,Shan J,He F,Pu Z,Yin S X. Solubilization capacity of insoluble phosphates and its mechanism by two phosphate solubilizing
fungi. Microbiology,2006,33:22鄄27.
[16] 摇 Zhang L Z, Fan J J,Niu W,Li T,Wu R H,Jing Y J,Lu R. Isolation of phosphate solubilizing fungus (Aspergillus niger) from Caragana rhizosphere
and its potential for phosphate solubilization. Acta Ecologica Sinica, 2011, 31( 24) : 7571鄄7578.
[17] 摇 Verma S C,Ladha J K,Tripathi A K. Evaluation of plant growth promoting and colonization ability of endophytic diazotrophs from deep water rice.
Journal of Biotechnology, 2001, 91, 127鄄141.
[18] 摇 Wakelin S A, Warren R A,Harvey P R,Ryder, M H. Phosphate solubilization by Penicillium spp. closely associated with wheat roots. Biology and
Fertility of Soils, 2004,40, 36鄄43.
[19] 摇 Rashid S, Charles T C, Glick B R. Isolation and characterization of new plant growth鄄promoting bacterial endophytes. Applied Soil Ecology,2012,
61:217鄄224.
[20] 摇 Son H J,Park G T,Cha M S,Heo M S. Solubilization of insoluble inorganic phosphates by a novel salt鄄 and pH鄄tolerant Pantoea agglomerans R鄄42
isolated from soybean rhizosphere. Bioresource Technology,2006,2(97): 204鄄210.
[21] 摇 Chung H Y,Park M,Madhaiyan M,Seshadri S,Song J,Cho H,Sa T. Isolation and characterization of phosphate solubilizing bacteria from the
rhizosphere of crop plants of Korea. Soil Biology and Biochemistry, 2005,10(37): 1970鄄1974.
[22] 摇 Yao Q Z, Yan W,Gao X L,Hou T. Study on culture characteristics of an effective phosphobacteria Isolated from Chinese pine mycorrhizal
rhizosphere. Journal of Anhui Agricultural Sciences,2009,17(18):8337鄄8340.
[23] 摇 Rashid M,Khalil S,Ayub N. Organic acids production and phosphate solubilization by phosphate solubilizing microorganisms(PSM)under in vitro
conditions. Pakistan Journal of Biological Sciences, 2004,7(2):187鄄196.
[24] 摇 Ponmurugan P,Gopi C. In vitro production of growth regulators and phosphatase activity by phosphate solubilizing bacteria. Afican Joural of
Biotechnology,2006,5(4):348鄄350.
[25] 摇 Guo H,Mao Z Q,Liu X L. Research progress of interaction between plant and microorganism. Chinese Agricultural Science Bulletin,2011,27(9):
28鄄33.
[26] 摇 Xiong M B,He J P,Song G Y. Effect of root exudations on ecological distribution of rhizospheric microorganisms. Chinese Journal of Soil Science,
2002,33(2):145鄄148.
[27] 摇 Fenchel, T. Biogeography for bacteria. Science, 2003,301: 925鄄926.
[28] 摇 Hallmann J, Quadt鄄Hallmann A, Mahaffee W F, Kloepper J. W. Bacterial endophytes in agricultural crops. Canadian Journal of Microbiology,
1997, 43, 895鄄914.
参考文献:
[ 2 ]摇 林启美,赵小蓉,孙炎鑫,姚军.四种不同生态系统的土壤解磷细菌数量及种群分布.土壤与环境,2000,9(1):34鄄37.
[10] 摇 张丽珍,牛伟,牛宇,牛西午.柠条对盐碱地植被组成及土壤特性的影响.生态学报,2009,29(9):4693鄄4699.
[11] 摇 张晶, 张惠文, 张成刚.实时荧光定量 PCR及其在微生物生态学中的应用.生态学报,2005, 25(6): 1445鄄1449.
[12] 摇 石璟,刘兆辉,江丽华,邱慧珍,王舻,郑福丽,林海涛. 一株解磷真菌的解磷能力及其生长曲线研究. 安徽农业科学,2008, 36 (22):
9363鄄9364.
[14] 摇 赵小蓉,林启美,李保国.溶磷菌对 4 种难溶性磷酸盐溶解能力的初步研究.微生物学报,2002,42(2):236鄄241.
[15] 摇 康贻军,胡健,单君,何芳,朴哲,殷士学.两株解磷真菌的解磷能力及其解磷机理的初步研究.微生物学通报,2006,33(5):22鄄27.
[16] 摇 张丽珍,樊晶晶,牛伟,李涛,吴荣海,金益杰,鹿茸.盐碱地柠条根围土中黑曲霉的分离鉴定及解磷能力测定. 生态学报, 2011,31(24):
7571鄄7578.
[22] 摇 姚庆智,闫伟,高学良,侯婷.油松菌根根际一株高效磷细菌培养条件的研究.安徽农业科学,2009,17(18):8337鄄8340.
[25] 摇 国辉,毛志泉,刘训理.植物与微生物互作的研究进展.中国农学通报,2011,27(9):28鄄33.
[26] 摇 熊明彪,何建平,宋光煜.根分泌物对根际微生物生态分布的影响.土壤通报,2002,33(2):145鄄148.
6493 摇 生摇 态摇 学摇 报摇 摇 摇 33 卷摇
ACTA ECOLOGICA SINICA Vol. 33,No. 13 Jul. ,2013(Semimonthly)
CONTENTS
Frontiers and Comprehensive Review
A review of ecological effects of remnant trees in degraded forest ecosystems after severe disturbances
MIAO Ning,LIU Shirong, SHI Zuomin,et al (3889)
………………………………
………………………………………………………………………………
Mechanism and application of bioremediation to heavy metal polluted soil using arbuscular mycorrhizal fungi
LUO Qiaoyu, WANG Xiaojuan, LIN Shuangshuang, et al (3898)
…………………………
…………………………………………………………………
Autecology & Fundamentals
Changes of allometric relationships among leaf traits in different ontogenetic stages of Acer mono from different types of
forests in Donglingshan of Beijing YAO Jing, LI Ying,WEI Liping,et al (3907)…………………………………………………
The combined effects of increasing CO2 concentrations and different temperatures on the growth and chlorophyll fluorescence in
Porphyra haitanensis (Bangiales, Rhodophyta) LIU Lu, DING Liuli, CHEN Weizhou, et al (3916)……………………………
Research on biomass expansion factor of chinese fir forest in Zhejiang Province based on LULUCF greenhouse gas Inventory
ZHU Tangjun,SHEN Chuchu,JI Biyong,et al (3925)
………
………………………………………………………………………………
Influence of soil gradual drought stress on Acorus calamus growth and photosynthetic fluorescence characteristics
WANG Wenlin, WAN Yinjing, LIU Bo, et al (3933)
……………………
………………………………………………………………………………
Isolation,identification,real鄄time PCR investigation of an endophytic phosphate鄄solubilizing bacteria from Caragana korshinskii
Kom. roots ZHANG Lizhen, FENG Lili,MENG Qiuxia,et al (3941)……………………………………………………………
Plant忆s and soil organism忆s diversity across a range of Eucalyptus grandis plantation ages
ZHANG Danju, ZHANG Jian, YANG Wanqin, et al (3947)
……………………………………………
………………………………………………………………………
Effects of diet and starvation on growth and survival of Scapharca broughtonii larvae
WANG Qingzhi, ZHANG Ming, FU Chengdong, et al (3963)
…………………………………………………
……………………………………………………………………
Multidrug鄄resistant bacteria in livestock feces QI Shiyue, REN Siwei, LI Xueling, et al (3970)………………………………………
Physiological regulation related to the decline of Alexandrium catenella MA Jinhua, MENG Xi, ZHANG Shu, et al (3978)…………
Numerical simulation of water quality based on environmental fluid dynamics code for grass鄄algae lake in Inner Mongolia
LI Xing, SHI Hongsen,ZHANG Shuli,et al (3987)
……………
…………………………………………………………………………………
Population, Community and Ecosystem
Influence of enclosure on Glyeyrrhiza uralensis community and distribution pattern in arid and semi鄄arid areas
LI Xuebin, CHEN Lin, LI Guoqi, et al (3995)
………………………
……………………………………………………………………………………
The interannual variation of net primary productivity of three coniferous forests in Liupan Mountains of Ningxia and its responses
to climatic factors WANG Yunni, XIONG Wei, WANG Yanhui, et al (4002)……………………………………………………
Soil water use and balance characteristics in mature forest land profile of Caragana korshinskii in Semiarid Loess Area
MO Baoru, CAI Guojun, YANG Lei,LU Juan,et al (4011)
………………
………………………………………………………………………
Effect of simulated acid deposition on chemistry of surface runoff in monsoon evergreen broad鄄leaved forest in Dinghushan
QIU Qingyan, CHEN Xiaomei,LIANG Guohua,et al (4021)
…………
………………………………………………………………………
A space optimization model of water resource conservation forest in Dongting Lake based on improved PSO
LI Jianjun, ZHANG Huiru, LIU Shuai, et al (4031)
…………………………
………………………………………………………………………………
Allelopathic effects of aqueous extract of exotic plant Rhus typhina L. on soil micro鄄ecosystem
HOU Yuping, LIU Lin, WANG Xin, et al (4041)
………………………………………
…………………………………………………………………………………
The impact of natural succession process on waterbird community in a abandoned fishpond at Chongming Dongtan, China
YANG Xiaoting, NIU Junying, LUO Zukui, et al (4050)
…………
…………………………………………………………………………
Mercury contents in fish and its biomagnification in the food web in Three Gorges Reservoir after 175m impoundment
YU Yang, WANG Yuchun, ZHOU Huaidong, et al (4059)
………………
………………………………………………………………………
Microsatellite analysis on genetic diversity of common carp,Cyprinus carpio,populations in Yuan River
YUE Xingjian, ZOU Yuanchao, WANG Yongming, et al (4068)
………………………………
…………………………………………………………………
Landscape, Regional and Global Ecology
Research on spatio鄄temporal change of temperature in the Northwest Arid Area HUANG Rui,XU Ligang,LIU Junmin (4078)………
Simulation of soil respiration in forests at the catchment scale in the eastern part of northeast China
GUO Lijuan, GUO Qingxi (4090)
…………………………………
……………………………………………………………………………………………………
The early effects of nitrogen addition on CH4 uptake in an alpine meadow soil on the Eastern Qinghai鄄Tibetan Plateau
ZHANG Peilei, FANG Huajun, CHENG Shulan, et al (4101)
………………
……………………………………………………………………
Analysis of water ecological footprint in guangxi based on ecosystem services ZHANG Yi, ZHANG Heping (4111)…………………
The integrated recognition of the source area of the urban ecological security pattern in Shenzhen
WU Jiansheng,ZHANG Liqing,PENG Jianet al (4125)
……………………………………
……………………………………………………………………………
Carbon sources and storage sinks in scenic tourist areas: a Mount Lushan case study
ZHOU Nianxing, HUANG Zhenfang, LIANG Yanyan (4134)
…………………………………………………
………………………………………………………………………
Impacts of climate change on dominant pasture growing season in Central Inner Mongolia
LI Xiazi,HAN Guodong,GUO Chunyan (4146)
……………………………………………
……………………………………………………………………………………
Phenological Characteristics of Typical Herbaceous Plants(Lris lacteal) and Its Response to Climate Change in Minqin Desert
HAN Fugui,XU Xianying,WANG Lide,et al (4156)
………
………………………………………………………………………………
Biomass and distribution pattern of carbon storage in Eomecon chionantha Hance
TIAN Dalun,YAN Wende,LIANG Xiaocui, et al (4165)
………………………………………………………
……………………………………………………………………………
Temporal dynamics and influencing factors of fine roots in five Chinese temperate forest ecosystems
LI Xiangfei, WANG Chuankuan, QUAN Xiankui (4172)
…………………………………
…………………………………………………………………………
Resource and Industrial Ecology
Effects of AMF on soil improvement and maize growth in mining area under drought stress
LI Shaopeng, BI Yinli, CHEN Peizhen, et al (4181)
……………………………………………
………………………………………………………………………………
Urban, Rural and Social Ecology
Health function evaluation and exploring its mechanisms in the Shanghai Green Belt, China
ZHANG Kaixuan, ZHANG Jianhua (4189)
…………………………………………
…………………………………………………………………………………………
Research Notes
Time lag effects of rainfall inside a Platycladus Orientalis plantation forest in the Beijing Mountain Area, China
SHI Yu,YU Xinxiao,ZHANG Jiayin (4199)
……………………
…………………………………………………………………………………………
Long鄄term effects of harvest residue management on soil total carbon and nitrogen concentrations of a replanted Chinese fir
plantation HU Zhenhong, HE Zongming, FAN Shaohui, et al (4205)……………………………………………………………
4124 摇 生摇 态摇 学摇 报摇 摇 摇 33 卷摇
《生态学报》2013 年征订启事
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争鸣冶的方针,依靠和团结广大生态学科研工作者,探索生态学奥秘,为生态学基础理论研究搭建交流平台,
促进生态学研究深入发展,为我国培养和造就生态学科研人才和知识创新服务、为国民经济建设和发展服务。
《生态学报》主要报道生态学及各分支学科的重要基础理论和应用研究的原始创新性科研成果。 特别欢
迎能反映现代生态学发展方向的优秀综述性文章;研究简报;生态学新理论、新方法、新技术介绍;新书评价和
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