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Effect of simulated ocean acidification on the acute toxicity of Cu and Cd to Tigriopus japonicus

海洋酸化条件下铜、镉对日本虎斑猛水蚤的急性毒性效应



全 文 :第 猿源 卷第 员源 期
圆园员源年 苑月
生 态 学 报
粤悦栽粤 耘悦韵蕴韵郧陨悦粤 杂陨晕陨悦粤
灾燥造援猿源袁晕燥援员源
允怎造援袁圆园员源
澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援藻糟燥造燥早蚤糟葬援糟灶
基金项目院国家自然科学基金资助项目渊源员员园远员圆圆冤曰 山东省自然科学基金资助项目渊在砸圆园员园悦酝园员猿冤曰 中国海洋大学高校基本科研业务费青年
教师科研专项基金资助项目渊圆园员员员猿园源猿冤曰 国家海洋局近岸海域生态环境重点实验室开放基金资助项目渊圆园员园员愿冤
收稿日期院圆园员圆鄄员员鄄圆苑曰 摇 摇 网络出版日期院圆园员源鄄园圆鄄圆苑
鄢通讯作者 悦燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早 葬怎贼澡燥则援耘鄄皂葬蚤造院 枣葬灶早澡燥灶早皂怎岳 燥怎糟援藻凿怎援糟灶
阅韵陨院 员园援缘愿源远 辕 泽贼曾遭圆园员圆员员圆苑员远愿圆
韦晓慧袁慕芳红袁 孙艳桃袁 曹志泉援海洋酸化条件下铜尧镉对日本虎斑猛水蚤的急性毒性效应援生态学报袁圆园员源袁猿源渊员源冤院猿愿苑怨鄄猿愿愿源援
宰藻蚤 载 匀袁 酝怎 云 匀袁 杂怎灶 再 栽袁 悦葬燥 在 匝援耘枣枣藻糟贼 燥枣 泽蚤皂怎造葬贼藻凿 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥灶 贼澡藻 葬糟怎贼藻 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 燥枣 悦怎 葬灶凿 悦凿 贼燥 栽蚤早则蚤燥责怎泽 躁葬责燥灶蚤糟怎泽援粤糟贼葬 耘糟燥造燥早蚤糟葬
杂蚤灶蚤糟葬袁圆园员源袁猿源渊员源冤院猿愿苑怨鄄猿愿愿源援
海洋酸化条件下铜尧镉对日本虎斑猛水蚤
的急性毒性效应
韦晓慧袁慕芳红鄢袁 孙艳桃袁 曹志泉
渊中国海洋大学海洋生命学院袁 青岛摇 圆远远园园猿冤
摘要院以日本虎斑猛水蚤渊栽蚤早则蚤燥责怎泽 躁葬责燥灶蚤糟怎泽冤为试验生物袁采用高纯度 悦韵圆和空气的混合气体调配试验所需酸化海水渊责匀 值
苑郾 苑园尧苑援猿园尧远援缘园冤袁研究不同海水酸化条件下铜尧镉对海洋生物的急性毒性效应遥 结果表明院单一 悦韵圆酸化海水对日本虎斑猛水
蚤存活的影响不显著曰海水酸化对铜和镉急性毒性的影响效应有差异遥 铜在低 责匀 值渊远援缘冤时对日本虎斑猛水蚤的毒性最强袁
怨远澡 蕴悦缘园浓度为 园援远源 皂早 辕 蕴袁明显低于 责匀值为 愿援园尧苑援苑尧苑援猿对日本虎斑猛水蚤的 怨远澡 蕴悦缘园浓度袁其分别为 员援怨愿袁员援员怨袁员援园缘 皂早 辕 蕴袁
随 责匀值下降袁怨远澡 蕴悦缘园下降了近 猿倍遥 海水酸化使镉的 怨远澡 蕴悦缘园略呈下降趋势袁但对其急性毒性影响效应并不显著曰责匀 值为
苑郾 苑和 苑郾 猿时袁铜的安全浓度分别为 员员援怨尧员园援缘 滋早 辕 蕴袁接近于中国海水二类水质标准遥 本研究表明随着海洋酸化的进程我国近
海水域将面临铜污染加剧的威胁遥
关键词院海洋酸化曰铜曰镉曰日本虎斑猛水蚤曰急性毒性
耘枣枣藻糟贼 燥枣 泽蚤皂怎造葬贼藻凿 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥灶 贼澡藻 葬糟怎贼藻 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 燥枣 悦怎 葬灶凿 悦凿 贼燥
栽蚤早则蚤燥责怎泽 躁葬责燥灶蚤糟怎泽
宰耘陨 载蚤葬燥澡怎蚤袁 酝哉 云葬灶早澡燥灶早鄢袁 杂哉晕 再葬灶贼葬燥袁 悦粤韵 在澡蚤择怎葬灶
悦燥造造藻早藻 燥枣 酝葬则蚤灶藻 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 韵糟藻葬灶 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠 燥枣 悦澡蚤灶葬袁 匝蚤灶早凿葬燥 圆远远园园猿袁 悦澡蚤灶葬
粤遭泽贼则葬糟贼院 匀藻葬增赠 皂藻贼葬造泽 责燥造造怎贼蚤燥灶 蚤灶 皂葬则蚤灶藻 藻灶增蚤则燥灶皂藻灶贼泽 澡葬泽 糟葬怎泽藻凿 早则藻葬贼 凿葬皂葬早藻 贼燥 皂葬则蚤灶藻 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 葬灶凿 藻糟燥造燥早蚤糟葬造
泽赠泽贼藻皂泽援 匀藻葬增赠 皂藻贼葬造泽 葬糟糟怎皂怎造葬贼藻 蚤灶 皂葬则蚤灶藻 糟则藻葬贼怎则藻泽袁 葬枣贼藻则 憎澡蚤糟澡 贼澡藻赠 葬则藻 凿藻造蚤增藻则藻凿 贼燥 澡蚤早澡藻则 贼则燥责澡蚤糟 造藻增藻造泽 燥枣 皂葬则蚤灶藻
燥则早葬灶蚤泽皂泽 贼澡则燥怎早澡 贼澡藻 皂葬则蚤灶藻 枣燥燥凿 糟澡葬蚤灶袁 憎澡蚤糟澡 糟葬怎泽藻泽 泽藻则蚤燥怎泽 澡葬则皂 贼燥 皂葬则蚤灶藻 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 泽赠泽贼藻皂泽 葬灶凿 澡怎皂葬灶 澡藻葬造贼澡援
粤凿凿蚤贼蚤燥灶葬造造赠袁 藻曾糟藻泽泽 糟葬则遭燥灶 凿蚤燥曾蚤凿藻 蚤灶 贼澡藻 葬贼皂燥泽责澡藻则藻 澡葬泽 糟葬怎泽藻凿 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶援 陨灶凿藻藻凿袁 葬遭燥怎贼 燥灶藻 贼澡蚤则凿 燥枣 贼澡藻 悦韵圆
则藻造藻葬泽藻凿 蚤灶贼燥 贼澡藻 葬贼皂燥泽责澡藻则藻 遭赠 葬灶贼澡则燥责燥早藻灶蚤糟 葬糟贼蚤增蚤贼蚤藻泽 泽蚤灶糟藻 贼澡藻 遭藻早蚤灶灶蚤灶早 燥枣 贼澡藻 蚤灶凿怎泽贼则蚤葬造 则藻增燥造怎贼蚤燥灶 澡葬泽 遭藻藻灶 葬遭泽燥则遭藻凿 遭赠
贼澡藻 憎燥则造凿忆泽 燥糟藻葬灶泽袁 憎澡蚤糟澡 责造葬赠 葬 噪藻赠 则燥造藻 蚤灶 皂燥凿藻则葬贼蚤灶早 糟造蚤皂葬贼藻 糟澡葬灶早藻援 酝燥凿藻造蚤灶早 澡葬泽 泽澡燥憎灶 贼澡葬贼袁 蚤枣 糟怎则则藻灶贼 贼则藻灶凿泽 蚤灶 悦韵圆
藻皂蚤泽泽蚤燥灶泽 糟燥灶贼蚤灶怎藻袁 贼澡藻 葬增藻则葬早藻 责匀 燥枣 贼澡藻 燥糟藻葬灶 憎蚤造造 则藻葬糟澡 苑援愿 遭赠 贼澡藻 藻灶凿 燥枣 贼澡蚤泽 糟藻灶贼怎则赠袁 糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早 贼燥 园援缘 怎灶蚤贼泽 遭藻造燥憎
贼澡藻 责则藻鄄蚤灶凿怎泽贼则蚤葬造 造藻增藻造袁 燥则 葬 贼澡则藻藻鄄枣燥造凿 蚤灶糟则藻葬泽藻 蚤灶 匀垣 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶援 栽澡藻 燥糟藻葬灶 责匀 澡葬泽 灶燥贼 遭藻藻灶 葬贼 贼澡蚤泽 造藻增藻造 枣燥则 泽藻增藻则葬造
皂蚤造造蚤燥灶泽 燥枣 赠藻葬则泽援 粤凿凿蚤贼蚤燥灶葬造造赠袁 贼澡藻泽藻 糟澡葬灶早藻泽 葬则藻 燥糟糟怎则则蚤灶早 葬贼 泽责藻藻凿泽 员园园 贼蚤皂藻泽 早则藻葬贼藻则 贼澡葬灶 藻增藻则 责则藻增蚤燥怎泽造赠 燥遭泽藻则增藻凿援 粤泽 葬
则藻泽怎造贼袁 泽藻增藻则葬造 皂葬则蚤灶藻 泽责藻糟蚤藻泽袁 糟燥皂皂怎灶蚤贼蚤藻泽 葬灶凿 藻糟燥泽赠泽贼藻皂泽 皂蚤早澡贼 灶燥贼 澡葬增藻 贼蚤皂藻 贼燥 葬糟糟造蚤皂葬贼藻 燥则 葬凿葬责贼 贼燥 贼澡藻泽藻 枣葬泽贼 糟澡葬灶早藻泽
蚤灶 燥糟藻葬灶 糟澡藻皂蚤泽贼则赠援 陨灶 葬凿凿蚤贼蚤燥灶袁 凿藻糟则藻葬泽蚤灶早 燥糟藻葬灶 责匀 澡葬泽 贼澡藻 责燥贼藻灶贼蚤葬造 贼燥 泽藻则蚤燥怎泽造赠 葬枣枣藻糟贼 贼澡藻 早则燥憎贼澡袁 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 葬灶凿
则藻责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 则藻责则燥凿怎糟贼蚤增藻 责则燥糟藻泽泽藻泽 燥枣 皂葬则蚤灶藻 燥则早葬灶蚤泽皂泽袁 葬泽 憎藻造造 葬泽 贼澡则藻葬贼藻灶 灶燥则皂葬造 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 贼澡藻 皂葬则蚤灶藻 藻糟燥泽赠泽贼藻皂援
悦燥责藻责燥凿泽 葬则藻 葬灶 蚤皂责燥则贼葬灶贼 责葬则贼 燥枣 贼澡藻 皂藻蚤燥枣葬怎灶葬 贼澡葬贼 责造葬赠 葬灶 蚤皂责燥则贼葬灶贼 则燥造藻 蚤灶 贼澡藻 皂葬则蚤灶藻 藻糟燥泽赠泽贼藻皂援 孕燥造造怎贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 皂葬则蚤灶藻
澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援藻糟燥造燥早蚤糟葬援糟灶
藻灶增蚤则燥灶皂藻灶贼 糟葬灶 蚤灶枣造怎藻灶糟藻 贼澡藻蚤则 早则燥憎贼澡 葬灶凿 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼袁 葬泽 憎藻造造 葬泽 贼澡藻 藻糟燥造燥早蚤糟葬造 责则燥糟藻泽泽藻泽 贼澡藻赠 葬则藻 蚤灶增燥造增藻凿 蚤灶援
粤糟糟燥则凿蚤灶早造赠袁 贼澡藻则藻 蚤泽 蚤皂责燥则贼葬灶贼 泽糟蚤藻灶贼蚤枣蚤糟 增葬造怎藻 贼燥 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 则藻泽责燥灶泽藻 燥枣 糟燥责藻责燥凿泽 贼燥 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 澡藻葬增赠
皂藻贼葬造泽 责燥造造怎贼蚤燥灶援 陨灶 贼澡藻 责则藻泽藻灶贼 泽贼怎凿赠袁 憎藻 藻增葬造怎葬贼藻凿 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 泽蚤皂怎造葬贼藻凿 枣怎贼怎则藻 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 贼澡藻 贼燥曾蚤糟燥造燥早蚤糟葬造
蚤灶贼藻则葬糟贼蚤燥灶 遭藻贼憎藻藻灶 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤贼赠 葬灶凿 澡藻葬增赠 皂藻贼葬造泽 燥枣 悦怎 葬灶凿 悦凿 燥灶 栽援 躁葬责燥灶蚤糟怎泽援 栽燥 葬糟糟燥皂责造蚤泽澡 贼澡蚤泽袁 澡葬则责葬糟贼蚤糟燥蚤凿泽 憎藻则藻
藻曾责燥泽藻凿 贼燥 悦怎 葬灶凿 悦凿 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 早则葬凿蚤藻灶贼 泽藻葬憎葬贼藻则 贼澡葬贼 澡葬凿 遭藻藻灶 藻择怎蚤造蚤遭则葬贼藻凿 憎蚤贼澡 悦韵圆 葬灶凿 葬蚤则 贼燥 则藻葬糟澡 责匀 愿援园袁 苑援苑袁 苑援猿
葬灶凿 远援缘 枣燥则 怨远 澡援 杂怎则增蚤增葬造 憎葬泽 灶燥贼 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 泽怎责责则藻泽泽藻凿 怎灶凿藻则 泽蚤灶早造藻 泽藻葬 憎葬贼藻则 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶袁 葬灶凿 贼澡藻 枣蚤灶葬造 泽怎则增蚤增葬造 则葬贼藻泽
憎藻则藻 早则藻葬贼藻则 贼澡葬灶 怨猿豫 蚤灶 遭燥贼澡 贼澡藻 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造 早则燥怎责泽 葬灶凿 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造泽援 栽澡藻 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 燥枣 悦怎 贼燥 栽援 躁葬责燥灶蚤糟怎泽 憎葬泽 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠
葬枣枣藻糟贼藻凿 遭赠 泽藻葬 憎葬贼藻则 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶袁 憎蚤贼澡 贼澡藻 怨远澡 蕴悦缘园 凿藻糟则藻葬泽蚤灶早 遭赠 灶藻葬则造赠 贼澡则藻藻枣燥造凿 枣则燥皂 员援怨愿 贼燥 园援远源 皂早 辕 蕴 憎蚤贼澡 凿藻糟则藻葬泽蚤灶早
责匀援 栽澡藻 怨远 澡 蕴悦缘园 燥枣 悦凿 凿藻糟则藻葬泽藻凿 憎蚤贼澡 凿藻糟则藻葬泽蚤灶早 责匀袁 遭怎贼 贼澡藻则藻 憎葬泽 灶燥 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 蚤灶 皂燥则贼葬造蚤贼赠 葬皂燥灶早 责匀
贼则藻葬贼皂藻灶贼泽援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 燥枣 贼澡藻 责则藻泽藻灶贼 泽贼怎凿赠 凿藻皂燥灶泽贼则葬贼藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻 责则藻凿蚤糟贼藻凿 枣怎贼怎则藻 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 澡葬泽 贼澡藻 责燥贼藻灶贼蚤葬造 贼燥
灶藻早葬贼蚤增藻造赠 葬枣枣藻糟贼 泽怎则增蚤增葬造 燥枣 栽援 躁葬责燥灶蚤糟怎泽 遭赠 藻曾葬糟藻则遭葬贼蚤灶早 贼澡藻 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 燥枣 悦怎援 栽澡藻 糟葬造糟怎造葬贼藻凿 泽葬枣藻 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣 悦怎 憎藻则藻
员员郾 怨 渊责匀 苑援苑冤 葬灶凿 员园援缘 渊责匀 苑援猿冤 滋早 辕 蕴袁 憎澡蚤糟澡 憎藻则藻 遭藻造燥憎 贼澡藻 糟造葬泽泽 陨 增葬造怎藻 葬灶凿 增藻则赠 糟造燥泽藻 贼燥 贼澡藻 糟造葬泽泽 陨陨 造藻增藻造 燥枣 贼澡藻
悦澡蚤灶葬 晕葬贼蚤燥灶葬造 匝怎葬造蚤贼赠 杂贼葬灶凿葬则凿 枣燥则 杂藻葬 宰葬贼藻则援 韵增藻则葬造造袁 贼澡藻泽藻 则藻泽怎造贼泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 贼澡葬贼 贼澡藻 悦澡蚤灶藻泽藻 糟燥葬泽贼葬造 泽藻葬 憎蚤造造 枣葬糟藻 葬
糟燥灶贼葬皂蚤灶葬贼蚤燥灶 贼澡则藻葬贼 枣则燥皂 悦怎 憎蚤贼澡 蚤灶糟则藻葬泽蚤灶早 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶援
运藻赠 宰燥则凿泽院 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶曰 糟燥责责藻则曰 糟葬凿皂蚤怎皂曰 栽蚤早则蚤燥责怎泽 躁葬责燥灶蚤糟怎泽曰 葬糟怎贼藻 贼燥曾蚤糟蚤贼赠
摇 摇 工业革命以来人类大量使用化石燃料造成大气
中二氧化碳浓度上升袁大气二氧化碳浓度已从工业
革命前期的 圆愿园滋蕴 辕 蕴 上升至 猿愿园滋蕴 辕 蕴袁海水吸收过
量的二氧化碳降低了碳酸盐矿物平衡体系袁使海水
责匀值不断下降遥 目前表层海水 责匀值平均值比工业
革命前下降了至少 园援员个单位袁预计至 圆员园园年袁海水
责匀值将下降 园援猿要园援缘 个单位袁至 圆猿园园 年可能下降
园援苑苑个单位咱员鄄圆暂 遥 海水 责匀 值是海洋化学环境的关
键因子袁即使细微变化都可能对海洋生态系统产生
深刻影响遥
目前袁对海洋酸化的研究主要集中在钙化生物
生长尧发育等生理特征影响的研究遥 宰蚤凿凿蚤糟燥皂遭藻 和
杂责蚤糟藻则 综述了海洋酸化对海洋生物的生理特征的影
响效应并指出海洋酸化可能通过影响海洋生物生
理尧发育尧行为和生活方式等多种途径危害海洋生物
的多样性咱猿暂 遥 在藻藻遭藻 等人的研究表明海水 责匀 值每
下降 园援圆要园援猿 单位会延缓许多海洋生物包括珊瑚在
内的钙化咱源暂 遥 何盛毅等人研究了海洋酸化对马氏珠
母贝胚胎和早期幼虫发育的影响咱缘暂 遥 然而海洋酸化
不仅会直接影响海洋生物袁而且可能加剧其他环境
胁迫渊如重金属冤对海洋生物和生态系统的影响效
应遥 如 月则藻蚤贼遭葬则贼澡 研究表明随着海水二氧化碳浓度
的增加以及海水酸度的降低袁海水中铁离子浓度随
之增大从而加剧对海洋生物的毒性影响咱远暂 遥 孕葬泽糟葬造
等研究了海洋酸化与重金属的联合作用对两种猛水
蚤 杂糟澡蚤扎燥责藻则葬 噪灶葬遭藻灶蚤 和 粤皂责澡蚤葬泽糟燥蚤凿藻泽 葬贼燥责怎泽 的毒性
试验袁结果表明海洋酸化增强了重金属对这两种猛
水蚤的毒性效应咱苑暂 遥 但是当前海洋酸化与重金属等
环境胁迫联合作用的相关研究还非常薄弱袁不利于
全面了解海洋酸化对海洋生物和生态系统的可能带
来危害袁亟待开展进一步研究遥
日本虎斑猛水蚤被国内外广泛应用于毒性污染
物渊如内分泌干扰物尧防污杀菌剂以及金属污染物冤
的检测咱愿鄄怨暂 袁 并被 韵耘悦阅 列入毒物测试候选标准生
物名单遥 但目前还未见海洋酸化条件下重金属对其
影响的研究报道遥 本研究利用 悦韵圆气体调节天然海
水 责匀值袁 研究海洋酸化条件下铜尧镉对日本虎斑猛
水蚤的 怨远 澡急性毒性效应袁探讨海洋酸化和重金属
联合作用对其存活的影响袁为海洋环境保护提供
依据遥
员摇 材料与方法
员援员摇 实验材料
实验所使用的日本虎斑猛水蚤 渊 栽蚤早则蚤燥责怎泽
躁葬责燥灶蚤糟怎泽冤成体袁用人工网捕法采集于青岛市鲁迅公
园附近高潮带岩礁水洼中遥 采集后于温度 渊 圆园 依
圆冤益尧园援源缘 滋皂过滤的自然海水渊责匀 值 苑援怨要愿援员冤以
及光暗周期 蕴 颐 阅为 员远 澡 颐愿 澡 的条件下以三角褐指
藻与酵母等比混合物作为饵料进行驯化培养遥
实验所用的两种重金属盐分别为氯化铜和氯化
园愿愿猿 摇 生摇 态摇 学摇 报摇 摇 摇 猿源卷摇
澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援藻糟燥造燥早蚤糟葬援糟灶
镉袁均购自美国 杂蚤早皂葬公司袁悦怎渊悦怎悦造圆袁 泽蚤早皂葬袁 哉杂粤袁
怨怨援怨怨怨豫冤曰悦凿渊悦凿悦造圆袁 泽蚤早皂葬袁 哉杂粤袁 怨怨援怨怨垣豫冤袁预先
用三蒸水制为 员 早 辕 蕴的母液袁于 源 益保存遥 实验时进
行稀释遥
实验用水采集于青岛鲁迅公园附近的海域袁用
园援源缘滋皂的微孔滤膜过滤遥 实验前 员要圆 澡袁 把高纯度
悦韵圆和空气的混合气体冲入过滤保温海水袁调配实验
所需酸化海水渊责匀值 苑援苑园尧苑援猿园尧远援缘园冤袁 然后密封且
保温袁 员要圆 澡后再测定 责匀 值和溶解氧浓度渊阅韵冤袁
若无明显变化渊责匀值变化约园援员 个单位袁 溶解氧饱和
度跃怨园豫冤袁 作为酸化组用水遥 只充空气的海水作为
对照组用水袁 责匀测量值为 愿郾 园园要愿援员园遥 使用梅特勒
阅耘蕴栽粤猿圆园 责匀测定仪测量 责匀 值袁 允孕月允鄄 远园愿 溶解氧
测定仪测 阅韵袁手持式折光仪测定盐度袁滴定法测定
总碱度咱员园暂 遥 用盐度尧总碱度和 责匀渊取最小值和最大
值冤袁 使用软件 杂宰悦韵圆 渊 澡贼贼责院 辕 辕 灶藻燥灶援 燥贼葬早燥援 葬糟援 灶扎 辕
则藻泽藻葬则糟澡 辕 皂枣糟 辕 责藻燥责造藻 辕 噪藻蚤贼澡 赃 澡怎灶贼藻则 辕 泽燥枣贼憎葬则藻 辕 泽燥枣贼憎葬则藻援
澡贼皂冤计算得出试验中海水的二氧化碳分压 责渊悦韵圆冤
渊表 员冤遥
表 员摇 各试验组海水 责匀值尧盐度尧总碱度和二氧化碳分压值
栽葬遭造藻 员摇 责匀袁 泽葬造蚤灶蚤贼赠袁 贼燥贼葬造 葬造噪葬造蚤灶蚤贼赠 葬灶凿 责悦韵圆 造藻增藻造 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽 葬贼 贼澡藻 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼
酸碱度
责匀
盐度 辕 译
杂葬造蚤灶蚤贼赠
总碱度 辕 渊皂皂燥造 辕 蕴冤
栽燥贼葬造 葬造噪葬造蚤灶蚤贼赠
二氧化碳分压 辕 渊怎葬贼皂冤
责悦韵圆
对照组 悦燥灶贼则燥造 愿援园园渊园援园员冤 圆怨援园 圆援园猿远 猿缘圆援苑源
处理组 员 栽则藻葬贼皂藻灶贼 员 苑援苑圆渊园援园圆冤 圆怨援员 圆援园愿远 怨员愿援缘缘
处理组 圆 栽则藻葬贼皂藻灶贼 圆 苑援猿源渊园援园猿冤 圆怨援园 圆援园园远 圆猿苑圆援缘员
处理组 猿 栽则藻葬贼皂藻灶贼 猿 远援缘苑渊园援园猿冤 圆怨援源 圆援园源远 员缘愿怨愿援源园
员援圆摇 实验方法
实验容器为密封性好的带内塞聚乙烯瓶袁以保
证实验前后海水 责匀 值等条件不变袁实验水体 圆苑园
皂蕴遥 责匀 值梯度设置为自然海水 渊 责匀 值 愿援 园园要
愿郾 员园冤尧苑援苑园尧苑援猿园尧远援缘园遥 根据预实验结果设置各重
金属浓度梯度 悦怎院 园渊对照冤尧园援圆缘尧园援缘园尧员援园园尧圆援园园尧
源郾 园园 皂早 辕 蕴曰悦凿院园渊对照冤尧圆援 缘园尧缘援 园园尧员园援 园园尧员缘郾 园园尧
圆园援园园 皂早 辕 蕴遥 各处理组和对照组分别设 猿 个平行遥
每瓶放入游动活泼的日本虎斑猛水蚤成熟个体 圆园
只袁 置于温度 渊 圆园 依 圆冤益 的培养箱中袁 光暗周期
员远 澡 颐愿 澡遥 试验过程中不投饵遥 培养 怨远 澡 后统计各
实验组受试生物的死亡率遥 不游泳尧轻敲烧杯壁或
用大口滴管轻触不活动者认为死亡遥
员援猿摇 数据分析
试验终止后袁统计各实验组日本虎斑猛水蚤的
死亡个数袁求死亡率遥 使用软件 杂孕杂杂员猿援园 统计分析
实验数据袁得出各 责匀值条件下铜和镉的概率单位模
型回归方程袁怨远澡 蕴悦缘园值袁和相应的 怨缘豫置信区间遥
圆摇 结果与分析
圆援员摇 海水酸化对日本虎斑猛水蚤的急性毒性效应
海水酸化 怨远 澡 急性毒性试验中袁责匀 值 愿援园尧苑援苑
苑援猿和 远援缘条件下袁日本虎斑猛水蚤的死亡率分别为
源援圆豫尧园援愿豫尧缘援园豫和 圆援缘豫遥 相关分析结果表明袁死
亡率和 责匀值之间没有显著相关性渊孕藻则泽燥灶 砸 越 园援猿源袁
孕越 园援愿苑猿跃园援园缘冤遥 燥灶藻鄄憎葬赠 粤晕韵灾粤 分析结果表明 源
个 责匀值梯度对日本虎斑猛水蚤的死亡率均属于同
一齐次性子集袁无显著差异渊孕跃园援园缘冤遥 因此在 怨远 澡
急性试验中袁单一的海水酸化对日本虎斑猛水蚤的
急性毒性效应影响并不显著遥
圆援圆摇 海水酸化对铜急性毒性效应的影响
不同 责匀值条件下袁铜对日本虎斑猛水蚤的 怨远 澡
急性毒性试验结果见表 圆袁图 员遥 在各 责匀值水平袁死
亡率都随铜浓度的升高呈上升趋势曰怨远 澡 蕴悦缘园随着
海水酸度的增加而呈降低趋势袁依次为 责匀 值 愿援园跃
苑郾 苑跃苑郾 猿跃远援缘遥 对海水 责匀值和 怨远澡 蕴悦缘园进行相关分
析袁两者之间具有显著的相关性渊运藻灶凿葬造造忆泽 砸 越 员援园园袁
孕越 园援园源约园援园缘冤遥 贼憎燥鄄憎葬赠 粤晕韵灾粤分析表明袁不同 责匀
值对铜急性毒性有显著影响渊孕 越 园援园园圆约园援园缘冤遥 由
图 员所示院在对照组和 园援圆缘 皂早 辕 蕴 浓度组袁最高死亡
率都出现在 责匀 值 越 苑援猿袁随着铜浓度升高袁在 园援缘尧员尧
圆和 猿援缘 皂早 辕 蕴浓度组袁最高死亡率都出现在 责匀值越
远援缘遥 尤其是在 猿援缘 皂早 辕 蕴浓度组袁随着 责匀值的下降袁
死亡率呈现阶梯型的上升趋势遥 因此袁随海水酸化
程度增高袁铜对日本虎斑猛水蚤的急性毒性效应显
著增强遥
员愿愿猿摇 员源期 摇 摇 摇 韦晓慧摇 等院海洋酸化条件下铜尧镉对日本虎斑猛水蚤的急性毒性效应 摇
澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援藻糟燥造燥早蚤糟葬援糟灶
表 圆摇 海水酸化条件下铜对日本虎斑猛水蚤的急性毒性
栽葬遭造藻 圆摇 粤糟怎贼藻 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 燥枣 悦怎 燥灶 栽援 躁葬责燥灶蚤糟怎泽 葬贼 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责匀 造藻增藻造泽
酸碱度
责匀
怨远澡半致死浓度
怨远澡 蕴悦缘园 辕渊皂早 辕 蕴冤
怨缘豫置信区间
悦燥灶枣蚤凿藻灶糟藻 造蚤皂蚤贼泽 辕
渊皂早 辕 蕴冤
回归方程
砸藻早则藻泽泽蚤燥灶
藻择怎葬贼蚤燥灶
愿援园 员援怨愿 员援猿怨要猿援猿远 再越 原园援缘远曾垣员援愿远
苑援苑 员援员怨 园援愿园要员援愿怨 再越 原园援员圆曾垣员援缘怨
苑援猿 员援园缘 园援远缘要员援苑愿 再越 原园援园猿曾垣员援猿远
远援缘 园援远源 园援源源要园援愿苑 再越 园援源猿曾垣圆援圆园
摇 图 员摇 不同铜浓度尧不同 责匀 值条件下日本虎斑猛水蚤的致
死率
云蚤早援员摇 栽澡藻 皂燥则贼葬造蚤贼赠 燥枣 栽援 躁葬责燥灶蚤糟怎泽 藻曾责燥泽藻凿 贼燥 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 悦怎
糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 葬贼 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责匀 造藻增藻造泽
圆援猿摇 海水酸化对镉急性毒性效应的影响
不同 责匀条件下袁镉对日本虎斑猛水蚤的急性毒
性试验结果见表 猿袁 图 圆遥 镉对日本虎斑猛水蚤的
怨远澡 蕴悦缘园随着海水酸度的增加依次下降遥 但 贼憎燥鄄憎葬赠
粤晕韵灾粤分析表明袁不同海水 责匀 值条件下镉对日本
虎斑猛水蚤的死亡率无显著差异渊孕 越 园援员园怨跃园援园缘冤遥
且由图 圆所示袁悦凿各浓度组间袁责匀 值对死亡率的影
响没有呈现规律性的变化遥 因此袁尽管海水酸化使
镉对日本虎斑猛水蚤的 怨远澡 蕴悦缘园呈下降趋势袁但实
验组间死亡率未呈现规律性变化袁差异不显著遥
表 猿摇 海水酸化条件下镉对日本虎斑猛水蚤的急性毒性
栽葬遭造藻 猿摇 粤糟怎贼藻 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 燥枣 悦凿 燥灶 栽援 躁葬责燥灶蚤糟怎泽 葬贼 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责匀 造藻增藻造泽
酸碱度
责匀
怨远澡半致死浓度
怨远澡 蕴悦缘园 辕渊皂早 辕 蕴冤
怨缘豫置信区间
悦燥灶枣蚤凿藻灶糟藻 造蚤皂蚤贼泽 辕
渊皂早 辕 蕴冤
回归方程
砸藻早则藻泽泽蚤燥灶
藻择怎葬贼蚤燥灶
愿援园 苑援远猿 圆援愿圆要员远援员圆 再越 原圆援远员垣圆援怨缘曾
苑援苑 苑援猿苑 缘援愿圆要怨援员园 再越 原圆援愿愿曾垣猿援猿圆
苑援猿 远援源源 园援园缘要圆园援远远 再越 原员援远远曾垣圆援园缘
远援缘 远援猿员 员援源圆要员猿援圆苑 再越 原圆援园源曾垣圆援缘缘
摇 图 圆摇 不同镉浓度尧不同 责匀 值条件下日本虎斑猛水蚤的致
死率
云蚤早援圆摇 栽澡藻 皂燥则贼葬造蚤贼赠 燥枣 栽援 躁葬责燥灶蚤糟怎泽 藻曾责燥泽藻凿 贼燥 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 悦凿
糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 葬贼 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责匀 造藻增藻造泽
猿摇 讨论
本研究结果显示袁目前预测的未来 猿园园 年海洋
酸化程度的短期暴露本身对日本虎斑猛水蚤存活影
响不大遥 孕葬泽糟葬造 等报道了海洋酸化对两种猛水蚤
杂糟澡蚤扎燥责藻则葬 噪灶葬遭藻灶蚤 和 粤皂责澡蚤葬泽糟燥蚤凿藻泽 葬贼燥责怎泽 的 怨远澡 急
性毒性试验袁这两个种类的 蕴悦员园分别为 责匀 值 远援园远
和 责匀 值 远援 源员袁 蕴悦缘园 更分别低至 责匀 值 缘援 园园 和
缘郾 苑缘咱远暂 遥 张达娟等比较了二氧化碳酸化和盐酸酸化
对 苑 种桡足类的急性毒性袁其中日本虎斑猛水蚤对
酸化的耐受性明显高于其他营浮游生活的种类袁其
圆源 澡和 源愿 澡 蕴悦缘园分别为 缘援愿缘和 缘援怨猿袁认为桡足类对
海水酸化的耐受性具有一定的种类特异性咱员员暂 遥 日
本虎斑猛水蚤多生活于高潮带水洼袁其生境受季节尧
昼夜和潮汐影响环境因子波动极大袁抵御环境变化
能力较强袁园援源要园援苑个单位的 责匀值下降对其成体存
活的影响较小袁对酸化短期胁迫表现出了较强的耐
性遥 而一些生境长期稳定袁运动能力较弱的猛水蚤
则对海水酸化表现出较弱的耐性咱员圆暂 袁因此来自不同
生境类型的生物对酸化的响应机制可能不同袁不同
类群和种类的生物对酸化胁迫的耐性也可能表现出
差异袁不同暴露时间对实验结果也具有一定程度的
影响袁在综合评价海洋酸化对生物的影响时应充分
考虑这一点遥
重金属对桡足类的急性毒性效应一般以半致死
浓度 蕴悦缘园作为效应终端袁暴露时间相同情况下 蕴悦缘园
圆愿愿猿 摇 生摇 态摇 学摇 报摇 摇 摇 猿源卷摇
澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援藻糟燥造燥早蚤糟葬援糟灶
越小袁说明该重金属毒性越强遥 本研究实验结果表
明铜对日本虎斑猛水蚤的急性毒性效应大于镉袁责匀
值 愿援园条件下袁铜的 怨远澡 蕴悦缘园为 员援怨愿 皂早 辕 蕴袁镉的 怨远澡
蕴悦缘园为 苑援远猿 皂早 辕 蕴袁分别在历史报道铜和镉对该种的
怨远澡 蕴悦缘园结果范围之内咱员猿暂 遥 随着海水 责匀值降低袁铜
和镉对日本虎斑猛水蚤的 怨远澡 蕴悦缘园都呈下降趋势袁
根据美国国家科学院与工程院 晕粤杂 辕 晕粤耘 应用金属
对受试动物的 怨远澡 蕴悦缘园浓度乘以 园援 园员 的应用系数
获得海水环境安全浓度标准的方法咱员源暂 袁 本研究所获
得的铜和镉的安全浓度阈值及其见表 源袁与我国环保
部制定的海水水质标准渊郧月猿园怨苑要员怨怨苑冤比较发现袁
在 责匀值为 愿援园时袁铜的安全浓度高于海水水质一类
标准袁在 责匀值为 苑援苑和 苑援猿时袁铜的安全浓度就很接
近二类水质标准袁在 责匀 值为 远援缘 条件下袁铜的安全
浓度高于海水水质二类标准袁低于一类标准遥 对于
镉袁在 责匀值 愿援园尧苑援苑尧苑援猿 和 远援缘 条件下袁其安全浓度
都远远高于海水水质一类标准遥 据 圆园员园 年国家环
境部中国环境状况公报报告的近岸海域水质类别调
查结果袁我国近海海域二类和二类水质占接近 苑园豫袁
因此袁随着海洋酸化程度加剧袁重金属铜将更加成为
威胁我国近岸海水水体安全的污染物遥
表 源摇 日本虎斑猛水蚤对铜和镉的安全浓度与国家海水水质标准的比较
栽葬遭造藻 源摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶泽 燥枣 贼澡藻 泽葬枣藻贼赠 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 贼燥 栽援 躁葬责燥灶蚤糟怎泽 葬灶凿 贼澡藻 灶葬贼蚤燥灶葬造 皂葬则蚤灶藻 憎葬贼藻则 择怎葬造蚤贼赠 泽贼葬灶凿葬则凿泽 燥枣 澡藻葬增赠 皂藻贼葬造泽
酸碱度 责匀
愿 苑援苑 苑援猿 远援缘
海水水质
一类标准
杂藻葬憎葬贼藻则 择怎葬造蚤贼赠
泽贼葬灶凿葬则凿泽 枣燥则
郧则葬凿藻 陨
海水水质
二类标准
杂藻葬憎葬贼藻则 择怎葬造蚤贼赠
泽贼葬灶凿葬则凿泽 枣燥则
郧则葬凿藻 域
铜浓度 辕 渊滋早 辕 蕴冤
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 悦怎 员怨援愿渊员猿援怨要猿猿援远冤 员员援怨渊愿援园园要员愿援怨冤 员园援缘渊远援缘园要员苑援愿冤 远援源渊源援源园要愿援苑园冤 约缘援园 约员园援园
镉浓度 辕 渊滋早 辕 蕴冤
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 悦凿 苑远援猿渊圆愿援圆要员远员援圆冤 苑猿援苑渊缘愿援圆要怨员援园冤 远源援源渊园援缘要圆园远援远冤 远猿援员渊员源援圆要员猿圆援苑冤 约园援员 约缘援园
摇 摇 本实验结果表明海水酸化对铜和镉毒性的影响
效应有所差异遥 铜虽然是生命活动必须的微量元
素袁但其浓度过高也会引起生物中毒袁而镉是一种生
物非必需的毒副作用很强的有毒元素咱员缘暂 遥 海洋酸
化造成海水碳酸盐体系的变化袁主要表现在 韵匀原和
悦韵圆原猿 浓度下降和 匀垣浓度的升高咱员远暂 遥 海洋酸化现象
本身即使没有引起海洋生物的急性致死袁但却能造
成海洋生物生理尧形态和行为特征的改变袁逼迫其消
耗额外的能量对抗这种环境胁迫袁降低其对重金属
毒害作用的抵御能力咱猿暂 遥 此外海水酸化对不同重金
属毒性影响的机制有所差异遥 悦凿圆垣在海洋中常形成
氯复合物袁而 悦造原对 责匀 的变化不敏感袁悦怎圆垣在海洋中
常形成碳酸盐复合物袁对海洋酸化敏感袁随 责匀 值下
降释放更多的游离 悦怎圆原袁游离 悦怎圆原的毒性要远远高
于复合物形态袁因此在近岸袁海洋酸化可能将沉积物
中大量的 悦怎圆垣释放于间隙水和上层水体袁成为生物
可利用状态袁加剧铜污染的程度曰另一方面袁急性毒
性试验过程中一般不投饵袁重金属需通过体壁转移
进入体内才表现出毒性遥 海洋酸化造成的 匀垣浓度
的升高能与重金属离子竞争吸附位点从而减少重金
属的吸收袁从而降低重金属的毒性效应咱远暂 遥 这些过
程的相互作用可能是导致本研究海水酸化显著加剧
铜的急性毒性效应袁而对镉的急性毒性效应存在一
定的影响趋势袁但不显著的原因遥
本论文仅涉及二氧化碳引起的海水酸化及其与
重金属联合作用对日本虎斑猛水蚤的急性毒性试验
结果袁未来工作中应进一步探索海洋酸化联合重金
属等环境胁迫对其生理尧生化和遗传的影响袁并开展
亚慢性和多世代尺度的研究进一步探索对生殖尧发
育的影响及其生物适应性遥
砸藻枣藻则藻灶糟藻泽院
咱 员 暂 摇 悦葬造凿藻蚤则葬 运袁 宰蚤糟噪藻贼贼 酝 耘援 韵糟藻葬灶 皂燥凿藻造 责则藻凿蚤糟贼蚤燥灶泽 燥枣 糟澡藻皂蚤泽贼则赠
糟澡葬灶早藻泽 枣则燥皂 糟葬则遭燥灶 凿蚤燥曾蚤凿藻 藻皂蚤泽泽蚤燥灶泽 贼燥 贼澡藻 葬贼皂燥泽责澡藻则藻 葬灶凿
燥糟藻葬灶援 允燥怎则灶葬造 郧藻燥责澡赠泽蚤糟葬造 砸藻泽藻葬则糟澡 韵糟藻葬灶泽袁 圆园园缘袁 员员园渊悦怨冤袁
凿燥蚤院 员园援员园圆怨 辕 圆园园源允悦园园圆远苑员援
咱 圆 暂 摇 云葬遭则赠 灾 允袁 杂藻蚤遭藻造 月 粤袁 云藻藻造赠 砸 粤援 陨皂责葬糟贼泽 燥枣 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
燥灶 皂葬则蚤灶藻 枣葬怎灶葬 葬灶凿 藻糟燥泽赠泽贼藻皂 责则燥糟藻泽泽藻泽援 陨悦耘杂 允燥怎则灶葬造 燥枣 酝葬则蚤灶藻
杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园愿袁 远缘渊猿冤院 源员源鄄源猿圆援
咱 猿 暂 摇 宰蚤凿凿蚤糟燥皂遭藻 杂袁 杂责蚤糟藻则 允 陨援 孕则藻凿蚤糟贼蚤灶早 贼澡藻 蚤皂责葬糟贼 燥枣 燥糟藻葬灶
葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥灶 遭藻灶贼澡蚤糟 遭蚤燥凿蚤增藻则泽蚤贼赠院 宰澡葬贼 糟葬灶 葬灶蚤皂葬造 责澡赠泽蚤燥造燥早赠
贼藻造造 怎泽钥援 允燥怎则灶葬造 燥枣 耘曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造 酝葬则蚤灶藻 月蚤燥造燥早赠 葬灶凿 耘糟燥造燥早赠袁
圆园园愿袁 猿远远渊员 辕 圆冤院 员愿苑鄄员怨苑援
猿愿愿猿摇 员源期 摇 摇 摇 韦晓慧摇 等院海洋酸化条件下铜尧镉对日本虎斑猛水蚤的急性毒性效应 摇
澡贼贼责院 辕 辕 憎憎憎援藻糟燥造燥早蚤糟葬援糟灶
咱 源 暂 摇 在藻藻遭藻 砸 耘袁 在葬糟澡燥泽 允 悦袁 悦葬造凿藻蚤则葬 运袁 栽赠则则藻造造 栽援 悦葬则遭燥灶 藻皂蚤泽泽蚤燥灶泽
葬灶凿 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶援 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园愿袁 猿圆员渊缘愿愿缘冤院 缘员鄄缘圆援
咱 缘 暂 摇 匀藻 杂 再袁 蕴蚤灶 悦 载袁 匀藻 酝 载袁 再葬灶 再援 陨皂责葬糟贼泽 燥枣 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶
燥灶 贼澡藻 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 燥枣 孕蚤灶糟贼葬凿葬 皂葬则贼藻灶泽蚤蚤 藻皂遭则赠燥 葬灶凿 藻葬则造赠 造葬则增葬援
悦澡蚤灶藻泽藻 允燥怎则灶葬造 燥枣 耘糟燥造燥早赠袁 圆园员员袁 猿园渊源冤院 苑源苑鄄苑缘员援
咱 远 暂 摇 月则藻蚤贼遭葬则贼澡 耘袁 月藻造造藻则遭赠 砸 允袁 晕藻蚤造造 悦 悦袁 粤则凿藻造葬灶 酝 灾袁 酝藻赠藻则澡觟枣藻则
酝袁 在觟造造灶藻则 耘袁 悦则燥燥贼 孕 蕴袁 砸蚤藻遭藻泽藻造造 哉援 韵糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬枣枣藻糟贼泽
蚤则燥灶 泽责藻糟蚤葬贼蚤燥灶 凿怎则蚤灶早 葬 糟燥葬泽贼葬造 泽藻葬憎葬贼藻则 皂藻泽燥糟燥泽皂 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼援
月蚤燥早藻燥泽糟蚤藻灶糟藻泽袁 圆园员园袁 苑渊猿冤院 员园远缘鄄员园苑猿援
咱 苑 暂 摇 孕葬泽糟葬造 孕 再袁 云造藻藻早藻则 允 宰袁 郧葬造增藻扎 云袁 悦葬则皂葬灶 运 砸援 栽澡藻
贼燥曾蚤糟燥造燥早蚤糟葬造 蚤灶贼藻则葬糟贼蚤燥灶 遭藻贼憎藻藻灶 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤贼赠 葬灶凿 皂藻贼葬造泽 蚤灶
糟燥葬泽贼葬造 皂藻蚤燥遭藻灶贼澡蚤糟 糟燥责藻责燥凿泽援 酝葬则蚤灶藻 孕燥造造怎贼蚤燥灶 月怎造造藻贼蚤灶袁 圆园员园袁
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咱 愿 暂 摇 运憎燥噪 运 宰 匀袁 蕴藻怎灶早 运 酝 再援 栽燥曾蚤糟蚤贼赠 燥枣 葬灶贼蚤枣燥怎造蚤灶早 遭蚤燥糟蚤凿藻泽 贼燥
贼澡藻 蚤灶贼藻则贼蚤凿葬造 澡葬则责葬糟贼蚤糟燥蚤凿 糟燥责藻责燥凿 栽蚤早则蚤燥责怎泽 躁葬责燥灶蚤糟葬泽
渊悦则怎泽贼葬糟藻葬袁 悦燥责藻责燥凿葬 冤院 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 葬灶凿 泽葬造蚤灶蚤贼赠援
酝葬则蚤灶藻 孕燥造造怎贼蚤燥灶 月怎造造藻贼蚤灶袁 圆园园缘袁 缘员渊愿 辕 员圆冤院 愿猿园鄄愿猿苑援
咱 怨 暂 摇 蕴蚤 蕴袁 郧怎燥 阅 匀袁 在澡怎 载 酝援 杂贼怎凿赠 燥灶 葬糟怎贼藻 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 燥枣 贼则蚤葬扎燥责澡燥泽
葬灶凿 葬糟藻责澡葬贼藻 燥灶 皂葬则蚤灶藻 糟燥责藻责燥凿泽援 允燥怎则灶葬造 燥枣 载蚤葬皂藻灶 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠院
晕葬贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园园愿袁 源苑渊源冤院 远园圆鄄远园远援
咱员园暂摇 阅葬蚤 酝 悦袁 郧葬燥 郧 孕袁 月葬燥 载 宰援 陨灶贼则燥凿怎糟贼蚤燥灶 贼燥 酝葬则蚤灶藻 杂怎则增藻赠
酝藻贼澡燥凿援 匝蚤灶早凿葬燥院 韵糟藻葬灶 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠 燥枣 悦澡蚤灶葬 孕则藻泽泽袁 圆园园愿援
咱员员暂摇 在澡葬灶早 阅 允袁 蕴蚤 杂 允袁 宰葬灶早 匀 在袁 郧怎燥 阅 匀援 悦燥皂责葬则葬贼蚤增藻 泽贼怎凿赠 燥灶
贼澡藻 葬糟怎贼藻 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 燥枣 燥糟藻葬灶 粤糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 凿则蚤增藻灶 遭赠 悦韵圆 葬灶凿 匀悦造 燥灶
泽藻增藻则葬造 皂葬则蚤灶藻 糟燥责藻责燥凿泽援 允燥怎则灶葬造 燥枣 载蚤葬皂藻灶 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠院 晕葬贼怎则葬造
杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆园员员袁 缘园渊猿冤院 远猿员鄄远猿远援
咱员圆暂摇 栽澡蚤泽贼造藻 阅袁 杂藻造造遭葬糟噪 蕴袁 悦葬则皂葬灶 运 砸袁 云造藻藻早藻则 允 宰袁 月则藻憎藻则 孕 郧袁
月葬则则赠 允 孕援 杂蚤皂怎造葬贼藻凿 泽藻择怎藻泽贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 蚤灶凿怎泽贼则蚤葬造 糟葬则遭燥灶 凿蚤燥曾蚤凿藻 葬贼 葬
凿藻藻责鄄泽藻葬 泽蚤贼藻院 耘枣枣藻糟贼泽 燥灶 泽责藻糟蚤藻泽 燥枣 澡葬则责葬糟贼蚤糟燥蚤凿 糟燥责藻责燥凿泽援 允燥怎则灶葬造
燥枣 耘曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造 酝葬则蚤灶藻 月蚤燥造燥早赠 葬灶凿 耘糟燥造燥早赠袁 圆园园远袁 猿猿园 渊 员冤院
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枣蚤贼灶藻泽泽 糟燥泽贼 燥枣 糟燥责责藻则 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 蚤灶 贼澡藻 皂葬则蚤灶藻 糟燥责藻责燥凿 栽蚤早则蚤燥责怎泽
躁葬责燥灶蚤糟怎泽援 耘糟燥贼燥曾蚤糟燥造燥早赠 葬灶凿 耘灶增蚤则燥灶皂藻灶贼葬造 杂葬枣藻贼赠袁 圆园园怨袁 苑圆
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咱员源暂摇 蕴蚤 再 匀袁 蕴蚤灶 匀援 粤糟怎贼藻 贼燥曾蚤糟蚤贼赠 燥枣 糟葬凿皂蚤怎皂 贼燥 粤则早燥责藻糟贼藻灶
蚤则则葬凿蚤葬皂泽援 酝葬则蚤灶藻 云蚤泽澡藻则蚤藻泽 砸藻泽藻葬则糟澡袁 圆园园远袁 圆苑渊远冤院 愿员鄄愿猿援
咱员缘暂摇 宰葬灶早 运援 栽则葬糟藻 耘造藻皂藻灶贼泽 蚤灶 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻援 月藻蚤躁蚤灶早院 悦澡蚤灶葬 酝藻葬泽怎则藻
孕则藻泽泽袁 员怨怨远院 愿缘园鄄愿愿缘援
咱员远暂摇 韵则则 允 悦袁 云葬遭则赠 灾 允袁 粤怎皂燥灶贼 韵袁 月燥责责 蕴袁 阅燥灶藻赠 杂 悦袁 云藻藻造赠 砸 粤袁
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蕴蚤灶凿泽葬赠 运袁 酝葬蚤藻则 攒砸藻蚤皂藻则 耘袁 酝葬贼藻葬则 砸袁 酝燥灶枣则葬赠 孕袁 酝燥怎糟澡藻贼 粤袁
晕葬躁躁葬则 砸 郧袁 孕造葬贼贼灶藻则 郧 运袁 砸燥凿早藻则泽 运 月袁 杂葬遭蚤灶藻 悦 蕴袁 杂葬则皂蚤藻灶贼燥 允
蕴袁 杂糟澡造蚤贼扎藻则 砸袁 杂造葬贼藻则 砸 阅袁 栽燥贼贼藻则凿藻造造 陨 允袁 宰藻蚤则蚤早 酝 云袁
再葬皂葬灶葬噪葬 再袁 再燥燥造 粤援 粤灶贼澡则燥责燥早藻灶蚤糟 燥糟藻葬灶 葬糟蚤凿蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥增藻则 贼澡藻
贼憎藻灶贼赠 枣蚤则泽贼 糟藻灶贼怎则赠 葬灶凿 蚤贼泽 蚤皂责葬糟贼 燥灶 糟葬造糟蚤枣赠蚤灶早 燥则早葬灶蚤泽皂泽援 晕葬贼怎则藻袁
圆园园缘袁 源猿苑渊苑园缘怨冤院 远愿员鄄远愿远援
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