全 文 ：　 核 农 学 报　 ２０１４，２８（６）：０９５５ ～ ０９６０
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
收稿日期：２０１３⁃０８⁃２６　 接受日期：２０１３⁃１２⁃３０
基金项目：国家“８６３ 计划”（２０１２ＡＡ１０１２０２），国家自然基金青年基金（３１１０１１７８），山东省自然基金（ＺＲ２０１２ＣＭ０１４），山东省农业良种工程
作者简介：乔利仙，女，副教授，主要从事作物生物技术与遗传育种研究。 Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｌｘｑｉａｏ７３＠ １６３． ｃｏｍ
通讯作者：王晶珊，女，教授，主要从事作物遗传育种与生物技术研究。 Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｊｓｗａｎｇ３１９＠ １２６． ｃｏｍ
文章编号：１０００⁃８５５１（２０１４）０６⁃０９５５⁃０６
平阳霉素离体诱变花生 Ｍ２ 农艺性状分析
乔利仙１　 隋炯明１　 赵丽兰２　 雷萍萍３　 孙世孟１　 郭宝太１　 王晶珊１
（ １ 青岛农业大学生命科学学院 ／山东省高校植物生物技术重点实验室，山东 青岛　 ２６６１０９；
２山东省农业广播电视学校蓬莱市分校， 山东 蓬莱　 ２６５６００；３ 中泰宝石学院，山东 昌乐　 ２６２４００）
摘　 要：以花生（Ａｒａｃｈｉｓ ｈｙｐｏｇａｇｅ Ｌ． ）品种花育 ２２ 号成熟种子胚小叶为诱变材料，培养在添加平阳霉素
的体胚诱导培养基中进行诱变处理，将成活的形成体胚的外植体转移到添加 ＮａＣｌ的体胚萌发培养基中
进行耐盐定向筛选。 对获得的再生植株 Ｍ２ 的部分农艺性状进行观察测定，结果显示，花生胚小叶经平
阳霉素离体诱变和 ＮａＣｌ定向筛选获得的再生植株后代表现型存在广泛变异，如主茎高、侧枝长、分枝
数、单株结果数、荚果形状和大小、种皮颜色等均发生明显的变异。 从后代变异规律可以看出，利用高效
低毒的平阳霉素作为诱变剂与组织培养结合可作为创造花生新种质的一种有效手段。
关键词：花生；平阳霉素；离体诱变；农艺性状
ＤＯＩ：１０􀆰 １１８６９ ／ ｊ． ｉｓｓｎ． １００⁃８５５１􀆰 ２０１４􀆰 ０６． ０９５５
　 　 花生（Ａｒａｃｈｉｃ ｈｙｐｏｇａｇｅ Ｌ． ）是我国重要的油料作
物和经济作物之一，由于花生遗传基础狭窄、多样性
差，通过杂交手段选育有突破性的花生新品种越来越
困难［１］。 诱变技术的利用可诱导产生自然界不存在
或极为罕见的新性状、新类型、新种质［２］。 与常规诱
变育种相比，利用诱变与组织培养相结合，可以得到丰
富的变异体，提高变异频率，增加选择概率；大大降低
嵌合体的比例，尤其通过胚胎发生途径再生的植株，一
般起源于单个细胞；利用组织培养材料进行诱变不受
季节限制；培养阶段进行定向选择可节省人力、物力、
财力［３］。 研究者们已经在多种植物上开展了离体诱
变研究，并获得了各种各样的优良突变体［３ － ６］，有的突
变体直接应用或作为亲本材料育成了新品种［７ － ８］。 近
年来 研 究 者 们 开 展 了 花 生 离 体 诱 变 研 究，
Ｖｅｎｋａｔａｃｈａｌａｍ等［９］利用离体诱变和定向筛选获得了
抗黑斑病的花生再生植株。 Ｍｕｔｈｕｓａｍｙ 等［１０］在花生
离体诱变中获得了叶片形状变化及单株结果数和荚果
重提高的突变体。 王莉莉等［１１］和王晶珊等［１２］利用快
中子辐照花生种子，取种子胚小叶进行培养，研究了辐
照剂量对胚胎发生及植株再生的影响，于新玲等［１］研
究了高能混合粒子场辐照对种子胚小叶再生植株的影
响。 本研究前期报道［１３］利用平阳霉素作为诱变剂添
加于诱导培养基中，研究了平阳霉素浓度对花生胚小
叶外植体褐化率、体胚诱导率的影响，确立了花生适宜
的平阳霉素离体诱变浓度。 在此基础上利用羟脯氨酸
作为筛选压进行了抗逆突变体的筛选［３］。
本研究在前期确立的适宜的平阳霉素诱变浓度及
植株再生体系基础上，进行了花生离体诱变和 ＮａＣｌ定
向筛选，对获得的 ＮａＣｌ 耐性植株 Ｍ２ 农艺性状的变异
和分离进行了研究，以期为花生离体诱变创造新种质
提供依据［１４］。
１　 材料和方法
１􀆰 １　 材料
选择主栽花生品种花育 ２２ 号为诱变材料。
１􀆰 ２　 方法
１􀆰 ２􀆰 １　 诱变处理、筛选及植株再生　 将种子去子叶，
取出种胚进行表面消毒。 分离胚小叶，接种到添加
１０ｍｇ·Ｌ － １２，４ － Ｄ和 ４ｍｇ·Ｌ － １平阳霉素的诱导培养基
中进行培养，诱变和体胚诱导同时进行。 诱变培养 ４
周后，将成活的形成体胚的外植体转移到添加 ４ｍｇ·
５５９
核　 农　 学　 报 ２８ 卷
Ｌ － １ＢＡＰ和 １５ｇ·Ｌ － １ＮａＣｌ 的体胚萌发培养基中，耐盐
筛选和诱导体胚萌发同时进行。 当体胚萌发后，ＮａＣｌ
浓度提高至 ２０ｇ·Ｌ － １。 当体胚萌发长成的小苗高达
１􀆰 ５ｃｍ以上时，从基部切下作为接穗，以苗龄约 １２ｄ 的
花育 ２３ 号为砧木，在超净台内进行无菌嫁接。 将嫁接
苗无菌培养 ２ｄ 后，驯化移栽（嫁接移栽参照郝世俊
等［１５］的方法）。
１􀆰 ２􀆰 ２　 诱变再生植株 Ｍ２ 的观测　 嫁接苗 ２０１１ 年移
栽大田，按田间种植方式管理，成熟后分单株收获荚
果。 ２０１２ 年 Ｍ２ 按单株种植，起垄覆膜，垄距 ９０ｃｍ，每
垄播种 ２ 行，株距 １６ｃｍ，单粒播种，以诱变亲本花育 ２２
号作对照。 生育期进行观察和记载，成熟收获后进行
田间和室内考种。
表 １　 花育 ２２ 号离体诱变再生植株Ｍ２ 主茎高变化
Ｔａｂｌｅ １　 Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｓｔｅｍ ｈｅｉｇｈｔ ｏｆ Ｍ２ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ⁃ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｐｌａｎｔｓ ｏｆ ｍｕｔａｇｅｎｉｚｅｄ Ｈｕａｙｕ ２２
主茎高
Ｍａｉｎ ｓｔｅｍ ｈｅｉｇｈｔ ／ ｃｍ ≤２９ ３０ ～ ３９ ４０ ～ ４９ ５０ ～ ５９ ６０ ～ ６９ ７０ ～ ７９ ８０ ～ ８８ ９０ ～ ９９ ≥１００
株数
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｌａｎｔ ３ １２ １０１ ６７ ５ ２ １ １ ２
　 　 注：花育 ２２ 号主茎高平均为 ４４ｃｍ（４３ ～ ４９ｃｍ）。
Ｎｏｔｅ：Ａｖｅｒａｇｅ ｍａｉｎ ｓｔｅｍ ｈｅｉｇｈｔ ｏｆ Ｈｕａｙｕ ２２ ｗａｓ ４４ ｃｍ（４３ ～ ４９ｃｍ）．
表 ２　 花育 ２２ 号离体诱变再生植株Ｍ２ 侧枝长变化
Ｔａｂｌｅ ２　 Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｌａｔｅｒａｌ ｂｒａｎｃｈ ｌｅｎｇｔｈ ｏｆ Ｍ２ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ⁃ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ
ｐｌａｎｔｓ ｏｆ ｍｕｔａｇｅｎｉｚｅｄ Ｈｕａｙｕ ２２
侧枝长
ｌａｔｅｒａｌＬａｔｅｒａｌ ｂｒａｎｃｈ ｌｅｎｇｔｈ ／ ｃｍ ≤２９ ３０ ～ ３９ ４０ ～ ４９ ５０ ～ ５９ ６０ ～ ６９ ７０ ～ ７９ ８０ ～ ８８ ９０ ～ ９９ ≥１００
株数
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｌａｎｔ ２ １１ ４７ ９９ ２６ ６ ４ ０ １
　 　 注：花育 ２２ 号侧枝长平均 ４７􀆰 １ｃｍ（４４ ～ ５０ｃｍ）。
Ｎｏｔｅ： Ａｖｅｒａｇｅ ｌａｔｅｒａｌ ｂｒａｎｃｈ ｌｅｎｇｔｈ ｏｆ Ｈｕａｙｕ ２２ ｗａｓ ４７􀆰 １ ｃｍ（４４ ～ ５０ｃｍ）．
２　 结果与分析
２􀆰 １　 离体诱变和 ＮａＣｌ 定向筛选再生植株生后代
（Ｍ２）田间性状的变异
花育 ２２ 号胚小叶经平阳霉素离体诱变和 ＮａＣｌ定
向筛选获得的再生植株，嫁接后移栽大田，２６ 株获得
了种子。 Ｍ２ 苗期、生育期及收获后对植株性状、荚果
性状等调查结果显示，２３ 个再生植株后代明显发生变
异和分离。 将所有再生植株 Ｍ２ 单株进行田间和室内
考种，分析性状变异。
再生植株 Ｍ２ 单株主茎高变异幅度列于表 １，诱变
亲本花育 ２２ 号主茎高平均为 ４４ｃｍ（４３ ～ ４９ｃｍ），由表
１ 可见，Ｍ２ 单株主茎高变异幅度很大，从不足 ２９ｃｍ 到
１００ｃｍ以上。 与亲本相比，大部分单株（１０１ 个单株）
主茎高在 ４０ ～ ４９ｃｍ，与亲本类似；６７ 个单株在 ５０ ～
５９ｃｍ范围；１１ 个单株的主茎高超过 ６０ｃｍ，其中 ２ 株达
１００ｃｍ以上；主茎高低于 ３９ｃｍ共有 １５ 株，其中 ３ 株在
２９ｃｍ以下。
　 　 再生植株 Ｍ２ 单株侧枝长变异幅度列于表 ２，诱变
亲本花育 ２２ 号侧枝长平均为 ４７􀆰 １ｃｍ（４４ ～ ５０ｃｍ），Ｍ２
单株侧枝长变异幅度很大，从不足 ２９ｃｍ 到 １００ｃｍ 以
上，并且呈增加趋势。 与亲本相比，大部分单株侧枝变
长，４７ 个单株侧枝长为 ４０ ～ ４９ｃｍ，与亲本类似；９９ 个
单株侧枝长在 ５０ ～ ５９ｃｍ 范围；３７ 株在 ６０ｃｍ 以上，其
中 １ 株超过 １００ｃｍ；低于 ３９ｃｍ共有 １３ 株，其中 ２ 株在
２９ｃｍ以下。
　 　 有效枝长也称为结实范围，代表结果集中程度。
再生植株 Ｍ２ 单株有效侧枝长变异幅度列于表 ３，诱变
亲本花育 ２２ 号有效枝长平均为 ３􀆰 ５ｃｍ（３ ～ ４ｃｍ）；Ｍ２
单株有效侧枝长变异幅度很大，从 １ｃｍ到 １５ｃｍ 以上。
５４ 个单株有效枝长为 ３ ～ ４ｃｍ，类似亲本；５２ 个单株为
５ ～ ６ｃｍ；３２ 个单株为 ７ ～ ８ｃｍ；１１ 个单株为 ９ ～ １０ｃｍ；
１４ 个单株有效枝长在 １１ｃｍ 以上，其中 ４ 个单株超过
１５ｃｍ；３３ 个单株有效枝长变短，为 １ ～ ２ｃｍ。
　 　 再生植株 Ｍ２ 单株总分枝数变异幅度列于表 ４，诱
变亲本花育 ２２ 号总分枝数平均为 １１ 条（１０ ～ １２ 条），
６５９
　 ６ 期 平阳霉素离体诱变花生 Ｍ２ 农艺性状分析
表 ３　 花育 ２２ 号离体诱变再生植株Ｍ２ 代有效侧枝长变化
Ｔａｂｌｅ ３　 Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｐｏｄｄｉｎｇ ｂｒａｎｃｈ ｌｅｎｇｔｈ ｏｆ Ｍ２ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ⁃ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ
ｐｌａｎｔｓ ｏｆ ｍｕｔａｇｅｎｉｚｅｄ Ｈｕａｙｕ２２
有效枝长
Ｐｏｄｄｉｎｇ ｂｒａｎｃｈ ｌｅｎｇｔｈ ／ ｃｍ １ ～ ２ ３ ～ ４ ５ ～ ６ ７ ～ ８ ９ ～ １０ １１ ～ １２ １３ ～ １４ ≥１５
株数
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｌａｎｔ ３３ ５４ ５２ ３２ １１ ７ ３ ４
　 　 注：花育 ２２ 号效侧枝长平均 ３􀆰 ５ ｃｍ（３ ～ ４ｃｍ）。
Ｎｏｔｅ：Ａｖｅｒａｇｅ ｐｏｄｄｉｎｇ ｂｒａｎｃｈ ｌｅｎｇｔｈ ｏｆ Ｈｕａｙｕ ２２ ｗａｓ ３􀆰 ５ ｃｍ（３ ～ ４ｃｍ）．
表 ４　 花育 ２２ 号离体诱变再生植株Ｍ２ 总分枝数变化
Ｔａｂｌｅ ４　 Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｌａｔｅｒａｌ ｂｒａｎｃｈ ｐｅｒ ｐｌａｎｔ ｏｆ Ｍ２ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ⁃ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ
ｐｌａｎｔｓ ｏｆ ｍｕｔａｇｅｎｉｚｅｄ Ｈｕａｙｕ ２２
总分枝数
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｌａｔｅｒａｌ ｂｒａｎｃｈ ｐｅｒ ｐｌａｎｔ ≤５ ６ ～ ７ ８ ～ ９ １０ ～ １１ １２ ～ １３ １４ ～ １５ １６ ～ １７ １８ ～ １９ ≥２０
株数
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｌａｎｔ ８ ２８ ６０ ６８ １７ ６ ４ ２ ２
　 　 注：花育 ２２ 号总分枝数平均 １１ 条（１０ ～ １２ 条）。
Ｎｏｔｅ：Ａｖｅｒａｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｌａｔｅｒａｌ ｂｒａｎｃｈ ｐｅｒ ｐｌａｎｔ ｏｆ Ｈｕａｙｕ ２２ ｗａｓ １１（１０ ～ １２）．
表 ５　 花育 ２２ 号离体诱变再生植株Ｍ２ 有效分枝数变化
Ｔａｂｌｅ ５　 Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｏｄｄｉｎｇ ｂｒａｎｃｈｅｓ ｐｅｒ ｐｌａｎｔ ｏｆ Ｍ２ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ
ｉｎ ｖｉｔｒｏ⁃ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｐｌａｎｔｓ ｏｆ ｍｕｔａｇｅｎｉｚｅｄ Ｈｕａｙｕ ２２
有效分枝数
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｏｄｄｉｎｇ ｂｒａｎｃｈｅｓ ｐｅｒ ｐｌａｎｔ ≤３ ４ ～ ５ ６ ～ ７ ８ ～ ９ １０ ～ １１ １２ ～ １３
株数
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｌａｎｔ １７ ７２ ４８ ４０ １３ ５
　 　 注：花育 ２２ 号有效分枝数平均 ７􀆰 ６ 条（７ ～ ９ 条）。
Ｎｏｔｅ：Ａｖｅｒａｇｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｏｄｄｉｎｇ ｂｒａｎｃｈ ｐｅｒ ｐｌａｎｔ ｏｆ Ｈｕａｙｕ ２２ ｗａｓ ７􀆰 ６（７ ～ ９）．
Ｍ２８５ 个单株总分枝数为 １０ ～ １３ 条（６８ 个单株 １０ ～ １１
条，１７ 个单株 １２ ～ １３ 条），类似花育 ２２ 号；６０ 个单株
８ ～ ９ 条；２８ 个单株 ６ ～ ７ 条；８ 个单株 ５ 条以下；１４ 个
单株总分枝数超过 １４ 条，其中 ２ 个单株超过 ２０ 条。
　 　 有效分枝数也即结果枝数，再生植株 Ｍ２ 单株有
效分枝数变异范围列于表 ５，诱变亲本花育 ２２ 号有效
分枝数平均为 ７􀆰 ６ 条（７ ～ ９ 条），Ｍ２ 单株有效分枝数
在 ６ ～ ９ 条范围内共 ８８ 个单株，类似亲本；７２ 个单株 ４
～ ５ 条，１７ 个单株在 ３ 条以下；而有效分枝数多于 １０
条的有 １８ 个单株，其中 ５ 个单株超过 １２ 条。
　 　 开花习性方面，花育 ２２ 号为连续开花，再生植株
Ｍ２ 绝大多数单株为连续开花，但有 ４ 个单株突变为交
替开花。
２􀆰 ２　 离体诱变和 ＮａＣｌ定向筛选再生植株后代（Ｍ２）
荚果性状的变异
再生植株 Ｍ２ 单株结果的荚果形状变异情况列于
表 ６，一半以上单株的荚果形状发生变异，有的突变为
葫芦形（５３ 个单株）、有的突变为蚕茧形（３８ 个单株），
还有的突变为串珠形（８ 个单株）、斧头形（３ 个单株）
或蜂腰形（２ 个单株），另有 ３ 株荚果形状不规则，而诱
变亲本花育 ２２ 号荚果形状为普通形（图 １；表 ６）。
突变为串珠形的荚果，其种皮颜色全部突变为紫
红色，而诱变亲本花育 ２２ 号种皮颜色为粉红色。
再生植株 Ｍ２ 单株结果数变异幅度列于表 ７，从表
７ 可以看出，单株结果数变异幅度很大，从单株结果数
不足 １０ 个到 ４６ 个以上，而大部分集中在 １６ 到 ３０ 个，
与诱变亲本花育 ２２ 号相比，单株结果数有增加，也有
７５９
核　 农　 学　 报 ２８ 卷
减少。
表 ８为再生植株 Ｍ２ 单株十果重变异幅度，诱变亲
本花育 ２２号十果重平均为 ２５􀆰 １ｇ（２３􀆰 ４ ～２６􀆰 ７ｇ），从表 ８
可以看出，７４个单株十果重在 ２３ ～ ２６􀆰 ９ｇ，与花育 ２２ 号
类似，其它大部分单株十果重变轻，即荚果变小；３１个单
株十果重增加，有 ２个单株十果重超过 ３１ｇ。
注：ａ：普通形；ｂ：葫芦形；ｃ：串珠形；ｄ：蚕茧形；ｅ：单仁果；ｆ：诱变亲本花育 ２２ 号（普通形）。
Ｎｏｔｅ： ａ：ｃｏｍｍｏｎ⁃ｓｈａｐｅｄ；ｂ：ｇｏｕｒｄ⁃ｓｈａｐｅｄ；ｃ：ｂｅａｄ⁃ｓｈａｐｅｄ；ｄ：ｃｏｃｏｏｎ － ｓｈａｐｅｄ；ｅ：ｓｉｎｇｌｅ⁃ｓｅｅｄ⁃ｐｏｄ；ｆ：Ｈｕａｙｕ ２２（ｃｏｍｍｏｎ⁃ｓｈａｐｅｄ） ．
图 １　 花育 ２２ 号离体诱变再生植株Ｍ２ 特殊荚果形状（单株结果）
Ｆｉｇ． １　 Ｐｏｄｓ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ｓｉｎｇｌｅ Ｍ２ ｐｌａｎｔｓ ａｎｄ ｔｈｅ ｗｉｌｄ ｔｙｐｅ Ｈｕａｙｕ２２ （ｐｏｄｓ ｆｒｏｍ ｏｎｅ ｐｌａｎｔ）
表 ６　 花育 ２２ 号离体诱变再生植株Ｍ２ 代荚果形状变化
Ｔａｂｌｅ ６　 Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｐｏｄ ｓｈａｐｅ ｏｆ Ｍ２ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ⁃ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｐｌａｎｔｓ ｏｆ ｍｕｔａｇｅｎｉｚｅｄ Ｈｕａｙｕ ２２
荚果形状
Ｐｏｄ ｓｈａｐｅ
普通形
Ｃｏｍｍｏｎ⁃
ｓｈａｐｅｄ
葫芦形
Ｇｏｕｒｄ⁃
ｓｈａｐｅｄ
蚕茧形
Ｃｏｃｏｏｎ⁃
ｓｈａｐｅｄ
串珠形
Ｂｅａｄ⁃
ｓｈａｐｅｄ
斧头形
Ｈａｔｃｈｅｔ⁃
ｓｈａｐｅｄ
蜂腰形
Ｗａｓｐ ｗａｉｓｔ⁃
ｓｈａｐｅｄ
不规则形
Ｉｒｒｅｇｕｌａｒ
株数
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｌａｎｔ ８８ ５３ ３８ ８ ３ ２ ３
　 　 注：花育 ２２ 号荚果为普通形。
Ｎｏｔｅ：Ｐｏｄ ｓｈａｐｅ ｏｆ Ｈｕａｙｕ ２２ ｂｅｌｏｎｇ ｔｏ Ｖｉｒｇｉｎｉａ ｔｙｐｅ．
表 ７　 花育 ２２ 号离体诱变再生植株Ｍ２ 单株结果数变化
Ｔａｂｌｅ ７　 Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｐｏｄ ｎｕｍｂｅｒｓ ｐｅｒ ｐｌａｎｔ ｏｆ Ｍ２ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｉｎ ｖｉｔｒｏ⁃ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｐｌａｎｔｓ ｏｆ ｍｕｔａｇｅｎｉｚｅｄ Ｈｕａｙｕ ２２
单株结果数
Ｐｏｄ ｎｕｍｂｅｒｓ ｐｅｒ ｐｌａｎｔ ≤１０ １１ ～ １５ １６ ～ ２０ ２１ ～ ２５ ２６ ～ ３０ ３１ ～ ３５ ３６ ～ ４０ ４１ ～ ４５ ≥４６
株数
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｌａｎｔｓ ６ １９ ２９ ４８ ４３ ２３ １６ ８ ３
　 　 注：花育 ２２ 号单株结果数平均 ２３（２０ ～ ２５ 个）。
Ｎｏｔｅ：Ａｖｅｒａｇｅ ｐｏｄ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ Ｈｕａｙｕ ２２ ｉｓ ２３ （２０ ～ ２５）．
表 ８　 花育 ２２ 号离体诱变再生植株Ｍ２ 代十果重变化
Ｔａｂｌｅ ８　 Ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅ ｏｆ ｗｅｉｇｈｔ ｏｆ １０ ｐｏｄｓ ｏｆ Ｍ２ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｅｄ ｐｌａｎｔｓ ｉｎ Ｈｕａｙｕ２２
十果重
Ｗｅｉｇｈｔ ｏｆ １０ ｐｏｄｓ ／ ｇ ≤１５ １５ ～ １８􀆰 ９ １９ ～ ２２􀆰 ９ ２３ ～ ２６􀆰 ９ ２７ ～ ３０􀆰 ９ ≥３１
株数
Ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｐｌａｎｔ ４ ２７ ５３ ７４ ２９ ２
　 　 注：花育 ２２ 号 １０ 果重平均 ２５􀆰 １ ｇ（２３􀆰 ４ ～ ２６􀆰 ７ ｇ）。
Ｎｏｔｅ：Ａｖｅｒａｇｅ ｗｅｉｇｈｔ ｏｆ １０ ｐｏｄｓ ｏｆ Ｈｕａｙｕ ２２ ｗａｓ ２５􀆰 １ｇ（２３􀆰 ４ ～ ２６􀆰 ７ｇ） ．
８５９
　 ６ 期 平阳霉素离体诱变花生 Ｍ２ 农艺性状分析
３　 讨论
平阳霉素是一种抗生素，属于博莱霉素的一类，是
博莱霉素的 Ａ５ 组分。 平阳霉素作为一种诱变剂应用
到植物诱变育种中已有几十年的历史，通过对小
麦［１６］、大豆［１７］、大麦［１８］、水稻［１９ － ２０］及观赏植株［２１］等
诱变效应的研究，肯定了其效用和应用价值。 与其他
化学诱变剂相比，平阳霉素作为诱变剂具有安全、高
效、诱变频率高、范围大等特点［２０］。 本研究中利用平
阳霉素作为诱变剂添加于体胚诱导培养基中诱变培养
４ 周，成活的形成体胚的外植体转移到添加 ＮａＣｌ 的体
胚萌发培养基上，促使体胚萌发成苗，同时进行耐盐筛
选。 获得的耐性苗经嫁接移栽田间，次年按单株播种，
成熟收获后进行田间和室内考种。 Ｍ２ 主茎高（１９ ～
１０１ｃｍ）、侧枝长（２３ ～ １０３ｃｍ）、有效枝长（１ ～ １８ｃｍ）、
总分枝数（４ ～ ２８）、有效分枝数（２ ～ １３）、荚果形状（除
曲棍形之外，其他花生荚果的各种形状均有）、荚果大
小（１０ 果重 １３􀆰 ９ ～ ３１􀆰 ３ｇ）、单株结果数（７ ～ ４８ 个）等
均存在广泛的变异，变幅很大。 诱变亲本花育 ２２ 号属
于中间型，普通形荚果，每果 ２ 仁，种皮粉红色，开花习
性为连续开花、疏枝。 而 ＮａＣｌ耐性再生植株后代中有
的突变为密枝、交替开花；有的单株后代荚果形状明显
突变，有的突变为串珠形，每果 ３ ～ ４ 仁，种皮颜色突变
为紫红色；还有荚果数明显增多的单株等。 这说明突
变可能在多个位点上发生，所以产生了不同类型的变
异。 这些变异是否与嫁接砧木有关，我们利用花育 ２０
号和花育 ２３ 号再生植株作为接穗，分别用花育 ２０ 号、
花育 ２２ 号作砧木进行嫁接，均未发现接穗发生变
异［１５］，说明这些突变是平阳霉素诱变作用的结果，与
嫁接所选用的砧木无关。 将获得的突变体 Ｍ３ 种子在
０􀆰 ７％ＮａＣｌ溶液中进行催芽试验，６ 个再生植株的后代
发芽率极显著高于诱变亲本花育 ２２ 号［２２］，初步表明
所获得的突变体具有一定的耐盐性，在盐碱田的耐盐
性仍有待于进一步鉴定。
Ｇｏｗｄａ等［２３］通过 ＥＭＳ 诱变获得了大量花生突变
体，发现每一个类群中均可产生其它类群的突变体。
在本研究中也发现类似的现象。 Ｗｙｎｎｅ 等［２４］曾报道
不同类群或亚种间的形态差异是由少量基因控制的，
因此容易产生其它类型的突变。 笔者对突变体后代进
行了 ＳＳＲ分析，结果表明突变体出现了染色体重排现
象，主要是染色体片段的缺失和重复，笔者推测这可能
是花生种间分化的重要原因之一。
４　 结论
本研究以花生品种花育 ２２ 号成熟种子胚小叶为
诱变材料，培养在添加 １０ｍｇ·Ｌ － １ ２，４ － Ｄ和 ４ｍｇ·Ｌ － １
平阳霉素的诱导培养基中进行诱变处理和体胚诱导。
将成活的形成体胚的外植体转移到添加 ４ｍｇ ·Ｌ － １
ＢＡＰ 和 １５ｇ·Ｌ － １ ＮａＣｌ，之后 ＮａＣｌ 浓度提高至 ２０ｇ·
Ｌ － １，进行体胚萌发培养和耐盐定向筛选。 获得的再生
植株 Ｍ２ 农艺性状发生广泛的变异，表明平阳霉素作
为诱变剂与组织培养结合进行离体诱变是一种花生种
质创新的有效途径。
参考文献：
［ １ ］ 　 于新玲，刘录祥，乔利仙，隋炯明，郭宝太，徐丽娟，王晶珊． 高能
混合离子场辐照对花生胚小叶组织培养及植株再生的影响［Ｊ］ ．
核农学报，２０１２，２６（３）：４３３ － ４３８
［ ２ ］　 刘进平，郑成木． 诱变结合植物组织培养在植物育种中的应用
［Ｊ］ ． 上海农业学报，２００４，２０（１）：１９ － ２２
［ ３ ］　 赵明霞，孙海燕，隋炯明，乔利仙，范乾程，王晶珊． 离体筛选花
生抗逆突变体及其后代特征特性研究［ Ｊ］ ． 核农学报，２０１２，２６
（８）：１１０６ － １１０７
［ ４ ］　 Ｌａｔａｄｏ Ｒ Ｒ， Ａｄａｍｅｓ Ａ Ｈ， ａｎｄ Ｎｅｔｏ Ａ Ｔ． Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍｕｔａｔｉｏｎ ｏｆ
ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ （ Ｄｅｎｄｒａｎｔｈｅｍａ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ Ｔｚｖｅｌｅｖ ） ｗｉｔｈ
ｅｔｈｙｌｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｐｈｏｎａｔｅ （ ＥＭＳ） ｉｎ ｉｍｍａｔｕｒｅ ｆｌｏｒａｌ ｐｅｄｉｃｅｌｓ ［ Ｊ］ ．
Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌ， Ｔｉｓｓｕｅ ａｎｄ Ｏｒｇａｎ Ｃｕｌｔｕｒｅ， ２００４， ７７：１０３ － １０６
［ ５ ］　 李 卫，孙中海，章文才，刘道宏． 柑桔原生质体辐射诱变筛选抗
寒再生植株［Ｊ］ ． 植物学报，１９９８，４０（８）：７２９ － ７３３
［ ６ ］　 姜长阳，宁淑香，杨文新，肖荣俊． 愈伤组织辐射诱变选育玉兰
新品系［Ｊ］ ． 园艺学报，２００２，２９（５）：４７３ － ４７６
［ ７ ］　 杨保安． 辐射与组培复合育成“霞光”等 ４ 个菊花新品种［ Ｊ］ ．
河南科学，１９９６，１４（１）：５７ － ６０
［ ８ ］　 高明尉． 世界上第一个小麦离体诱变新品种—核组 ８ 号［Ｊ］ ． 核
物理动态，１９９２，９（４）：４５ － ４６
［ ９ ］　 Ｖｅｎｋａｔａｃｈａｌａｍ Ｐ， Ｊａｙａｂａｌａｍ Ｎ． Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ
ｇｒｏｕｎｄｎｕｔ ｐｌａｎｔｓ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｔｏ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｔｏｘｉｃ ｃｕｌｔｕｒｅ ｆｉｌｔｒａｔｅ ｏｆ
Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｓｏｎａｔｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｉｓｓｕｅ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ［ Ｊ］ ．
Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， １９９７， ６１（３）： ３５１ － ３６４
［１０］　 Ｍｕｔｈｕｓａｍｙ Ａ， Ｖａｓａｎｔｈ Ｋ， Ｓｉｖａｓａｎｋａｒｉ Ｄ， Ｃｈａｎｄｒａｓｅｋａｒ Ｂ Ｒ，
Ｊａｙａｂａｌａｎ Ｎ． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｕｔａｇｅｎｓ ｏｎ ｓｏｍａｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ
ｐｌａｎｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｇｒｏｕｎｄｎｕｔ［ Ｊ］ ． Ｂｉｏｌｏｇｉａ Ｐｌａｎｔａｒｕｍ， ２００７， ５１
（３）：４３０ － ４３５
［１１］　 王莉莉，赵明霞，乔利仙，王晶珊，隋炯明，刘录祥． 快中子辐射
对花生胚小叶体细胞胚胎发生的影响［ Ｊ］ ． 核农学报，２０１１，２５
（４）：６５２ － ６５６
［１２］　 王晶珊，赵明霞，乔利仙，隋炯明，孔福全，王潇，刘录祥． 快中子
辐照对花生种子胚小叶植株再生的影响［ Ｊ］ ． 中国油料作物学
报， ２０１３，３５（２）：１４８ － １５２
［１３］　 赵明霞，王晓杰，乔利仙，隋炯明，郭宝太，王晶珊． 平阳霉素对
花生体细胞胚胎发生的影响［Ｊ］ ． 核农学报，２０１１，２５（２）：２４２ －
９５９
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
２０１４，２８（６）：０９５５ ～ ０９６０
２４６
［１４］　 Ｚｈａｏ Ｍ， Ｑｉａｏ Ｌ， Ｓｕｉ Ｊ， Ｔａｎ Ｌ， Ｗａｎｇ Ｊ． Ａｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｐｅａｎｕｔ： ｓｏｍａｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ ｆｒｏｍ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｌｅａｆｌｅｔｓ
［Ｊ］ ． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｆｏｏｄ， Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ＆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ． ２０１２，１０ （２）：
５２７ － ５３１
［１５］　 郝世俊，隋炯明，乔利仙，王晓杰，王晶珊． 花生组培苗嫁接技术
的研究［Ｊ］ ． 青岛农业大学学报，２０１０，２７（２）：１１０ － １１３
［１６］　 孙德全，孙光祖，李忠杰，张月学，闫文义，王广金，唐凤兰． 平阳
霉素对小麦诱变效果的研究［Ｊ］ ． 麦类作物学报，１９９８，１８ （４ ）：
５ － ９
［１７］　 原亚萍，陈学军，许耀奎，李国全，朴铁夫． 平阳霉素在大豆育种
中的应用［Ｊ］ ． 核农学通报，１９９６，１７（４）：１５７ － １５９
［１８］　 赵丽梅，许耀奎． 平阳霉素 ｐｉｎｇｙａｎｇｍｙｃｉｎ 对大麦的诱变效应
［Ｊ］ ． 核农学报，１９９０，４（４）：１９９ － ２０１
［１９］　 夏英武，吴关庭，舒庆尧． 平阳霉素对水稻诱变效应的研究［ Ｊ］ ．
核农学报，１９９７，１１（１）：２６ － ３０
［２０］　 吴关庭，夏英武，舒庆尧，王贤裕，周志远． 平阳霉素对不同水稻
品种的生物学效应［Ｊ］ ． 浙江农业大学学报，１９９７，２３（１）：１ － ６
［２１］　 王红． 平阳霉素对盆栽意大利红的诱变效应［Ｊ］ ． 南京农业大学
学报，２００７，３０（１）：３９ － ４２
［２２］　 Ｚｈａｏ Ｍ， Ｓｕｎ Ｈ， Ｊｉ Ｒ， Ｈｕ Ｘ，Ｓｕｉ Ｊ，Ｑｉａｏ Ｌ，Ｃｈｅｎ Ｊ，Ｗａｎｇ Ｊ． Ｉｎ
Ｖｉｔｒｏ Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ Ｄｉｒｅｃｔｅｄ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ Ｓａｌｔ⁃ｔｏｌｅｒａｎｔ Ｍｕｔａｎｔｓ ｉｎ
Ｐｅａｎｕｔ ［Ｊ］ ． Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ，２０１３， １９３： ８９ － ９９
［２３］　 Ｇｏｗｄａ Ｍ Ｖ Ｃ， Ｎａｄａｆ Ｈ Ｌ， Ｓｈｅｓｈａｇｉｒｉ Ｒ． Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ
ｉｎｔｒａｓｐｅｃｉｆｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒｏｕｎｄｎｕｔ （ Ａｒａｃｈｉｓ ｈｙｐｏｇａｅａ Ｌ． ）
［Ｊ］ ． Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ， １９９６， ９０： １０５ － １１３
［２４］　 Ｗｙｎｎｅ Ｊ Ｃ， Ｃｏｆｆｅｌｔ Ｔ Ａ． Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ｏｆ Ａｒａｃｈｉｓ ｈｙｐｏｇａｅａ Ｌ． Ｉｎ： Ｐａｔｔｅｅ
ＨＥ， Ｙｏｕｎｇ ＣＴ （ ｅｄｓ ） Ｐｅａｎｕｔ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ［ Ｍ ］．
ＡＰＲＥＳ， Ｙｏａｋｕｍ ／ Ｔｙ， １９８２， ５０ － ９４
Ａｇｒｏｎｏｍｉｃ Ｔｒａｉｔｓ ｏｆ Ｍ２ Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｉｎ ｖｉｔｒｏ
Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ ｗｉｔｈ Ｐｉｎｇｙａｎｇｍｙｃｉｎ ｉｎ Ｐｅａｎｕｔ
ＱＩＡＯ Ｌｉ⁃ｘｉａｎ１ 　 ＳＵＩ Ｊｉｏｎｇ⁃ｍｉｎｇ１ 　 ＺＨＡＯ Ｌｉ⁃ｌａｎ２ 　 Ｌｅｉ Ｐｉｎｇ⁃ｐｉｎｇ３ 　 ＳＵＮ Ｓｈｉ⁃ｍｅｎｇ１
ＧＵＯ Ｂａｏ⁃ｔａｉ１ 　 ＷＡＮＧ Ｊｉｎｇ⁃ｓｈａｎ１
（ １ Ｋｅｙ Ｌａｂ ｏｆ Ｐｌａｎｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｓｈａｎｄｏｎｇ ／ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ， Ｑｉｎｇｄａｏ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｑｉｎｇｄａｏ Ｓｈａｎｄｏｎｇ　 ２６６１０９；
２ Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｂｒｏａｄｃａｓｔｉｎｇ ａｎｄ Ｔｅｌｅｖｉｓｉｏｎ Ｓｃｈｏｏｌ， Ｐｅｎｇｌａｉ， Ｓｈａｎｄｏｎｇ　 ２６５６００；
３ Ｚｈｏｎｇｔａｉ Ｇｅｍ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｃｈａｎｇｌｅ， Ｓｈａｎｄｏｎｇ　 ２６２４００）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｌｅａｆｌｅｔｓ ｆｒｏｍ ｍａｔｕｒｅ ｐｅａｎｕｔ ｓｅｅｄ （ ｃｖ． Ｈｕａｙｕ ２２） ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｏｎ ｓｏｍａｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｇｅｎｅｓｉｓ⁃
ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｐｉｎｇｙａｎｇｍｙｃｉｎ （ＰＹＭ）， ｔｈｅ ｓｕｒｖｉｖｉｎｇ ｅｘｐｌａｎｔｓ ｗｉｔｈ ｓｏｍａｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｓ ｗｅｒｅ ｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄ ｔｏ ａ
ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｄｉｕｍ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ＮａＣｌ ｆｏｒ ｄｉｒｅｃｔ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ． Ｔｈｅ ｐｌａｎｔｌｅｔｓ ｆｒｏｍ ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ ｓｏｍａｔｉｃ ｅｍｂｒｙｏｓ ｗｅｒｅ ｇｒａｆｔｅｄ
ａｎｄ ｔｈｅｎ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｆｉｅｌｄ． Ｉｎ ｎｅｘｔ ｙｅａｒ， ａｌｌ ｓｅｅｄｓ ｆｒｏｍ ｅａｃｈ ｐｌａｎｔ ｗｅｒｅ ｓｏｗｎ ｉｎ ｔｈｅ ｆｉｅｌｄ． Ｔｈｅ ｍｕｔａｇｅｎｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ
ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ ｗｉｔｈ ＰＹＭ ｏｎ ｐｅａｎｕｔ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ ａｎａｌｙｚｉｎｇ ｔｈｅ Ｍ２ ａｇｒｏｎｏｍｉｃ ｔｒａｉｔｓ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ
ｔｈｅ ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ ｗａｓ ｅｘｔｅｎｓｉｖｅ ｏｎ ｍａｉｎ ｓｔｅｍ ｈｅｉｇｈｔ， ｌｅｎｇｔｈ ｏｆ ｌａｔｅｒａｌ ｂｒａｎｃｈ， ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｌａｔｅｒａｌ ｂｒａｎｃｈ ｐｅｒ ｐｌａｎｔ， ｐｏｄ
ｓｈａｐｅ， ｐｏｄ ｓｉｚｅ ａｎｄ ｐｏｄ ｎｕｍｂｅｒ ｐｅｒ ｐｌａｎｔ， ｅｔｃ． Ｔｈｅ ｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙ ｉｎ Ｍ２ ｏｆｆｓｐｒｉｎｇ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ ｔｈａｔ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ
ｗｉｔｈ ＰＹＭ ｗａｓ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｉｎ ｐｅａｎｕｔ ｇｅｒｍｐｌａｓｍ ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐｅａｎｕｔ （Ａｒａｃｈｉｓ ｈｙｐｏｇａｅａ Ｌ． ）； Ｐｉｎｇｙａｎｇｍｙｃｉｎ； Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ； Ａｇｒｏｎｏｍｉｃ ｔｒａｉｔｓ
０６９