全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊苑冤院员圆苑员 耀 员圆苑苑允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员源鄄园苑鄄圆猿摇 接受日期院圆园员缘鄄园猿鄄员远
基金项目院国家科技支撑计划课题渊圆园园怨月粤阅悦缘月园源冤
作者简介院陈晓军袁男袁助理研究员袁主要从事植物分子生物学应用研究遥 耘皂葬蚤造院 泽皂葬造造早藻灶藻岳 员圆远援 糟燥皂
通讯作者院宋玉霞袁女袁研究员袁主要从事植物基因工程研究遥 耘皂葬蚤造院杂燥灶早赠曾远远远岳 员远猿援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤园苑鄄员圆苑员鄄园苑
马铃薯甜菜碱醛基因 孕燥月粤阅匀的克隆
与进化分析
陈晓军员 摇 樊云芳圆 摇 王敬东 员 摇 郭生虎员 摇 宋玉霞员
渊员 宁夏农业生物技术重点实验室 辕宁夏农林科学院农业生物技术研究中心袁
宁夏 银川摇 苑缘园园园圆曰 圆国家枸杞工程技术研究中心袁宁夏 银川摇 苑缘园园园圆冤
摘摇 要院为了揭示马铃薯适应盐生环境和耐盐的分子机制袁本研究以青薯 员远愿 为试验材料袁利用 砸粤悦耘同
源克隆技术袁设计简并引物袁克隆得到 员 个新的甜菜碱醛脱氢酶基因渊孕燥月粤阅匀冤遥 它全长 糟阅晕粤 编码区
为 员 缘员愿 遭责袁编码区两侧翼分别具有 缘忆哉栽砸 渊苑远遭责冤和 猿忆哉栽砸渊员怨远遭责 冤袁推测该开放阅读框编码 缘园缘 个氨
基酸的 月粤阅匀蛋白袁其分子量为 缘缘 怨园猿郾 员袁理论等电点为 缘郾 园猿遥 在推导的氨基酸序列中袁含有醛脱氢酶
所具有的高度保守的十肽渊灾栽蕴耘蕴郧郧运杂孕冤以及与酶功能有关的半胱氨酸残基渊悦冤遥 在 晕端含有不典型
的信号肽 匝蕴云陨阅郧耘袁表明该酶可能定位于叶绿体中曰 在 悦端具有一个 杂运蕴 型信号肽袁 可能是定位于过
氧化物酶体中的信号肽遥 进化分析表明袁它与番茄甜菜碱醛脱氢酶亲缘关系最近袁与其它藜科植物亲缘
关系较远遥 该基因的获得有助于理解马铃薯耐盐机理袁为培育新的耐盐马铃薯品种提供理论参考遥
关键词院马铃薯曰甜菜碱醛脱氢酶曰基因克隆曰进化分析
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 园苑援 员圆苑员
摇 摇 马铃薯渊杂燥造葬灶怎皂 贼怎遭藻则燥泽怎皂冤是世界主要的经济作
物和粮食作物之一袁又是主要的蔬菜作物袁其总产量排
在小麦尧玉米尧水稻之后遥 马铃薯具有生育期短尧高产尧
适应性强等特点袁是许多干旱贫困地区的主要农作物遥
开发和利用盐碱地资源是进一步挖掘农业发展潜力尧
解决人口和环境压力的重要出路袁 而选用和推广耐盐
植物是改良和利用大面积盐碱土壤最经济和快捷的措
施之一遥 因此研究植物盐胁迫的反应机制和抗盐机理
有着重要的理论和现实意义遥
虽然马铃薯是盐胁迫敏感型作物咱员 原 圆暂 袁但不同染
色体倍数的马铃薯表现出不同的耐盐性咱猿 原 源暂 袁这暗示
着不同基因型的马铃薯材料有着不同的耐盐性遥 利用
转基因工程技术提高马铃薯耐盐性的研究已有报
道咱缘 原 苑暂 袁但从马铃薯自身研究其适应盐生环境和耐盐
机制方面的研究鲜有报道遥 甘氨酸甜菜碱渊简称甜菜
碱冤是甘氨酸的衍生物袁被认为是最好的渗透调节剂遥
在植物体内袁甜菜碱由胆碱经 圆 步氧化生成袁催化第 圆
步反应的是甜 菜 碱 醛 脱 氢 酶 渊 遭藻贼葬蚤灶藻 葬造凿藻澡赠凿藻
凿藻澡赠凿则燥早藻灶葬泽藻袁 月粤阅匀冤 咱愿暂 遥 青薯 员远愿 系青海农科院
员怨愿员 年经有性杂交尧实生苗和无性系多代选育而成袁
多年种植表明其薯大尧皮光尧芽眼浅尧无空心尧生产潜力
大尧抗病尧抗逆能力强遥 本研究以此为试材袁利用同源
克隆技术袁设计简并引物袁克隆得到 员 个新的甜菜碱醛
脱氢酶基因袁为从分子机理方面改良马铃薯耐盐性奠
定了试验基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 试验材料
员郾 员郾 员摇 植物材料 摇 圆园员员 年 苑 月袁在固原市农业技术
推广中心试验田挑取幼嫩马铃薯渊青薯 员远愿冤叶片 源 耀
缘 片袁将叶片浸入 园郾 缘 皂燥造窑蕴 原员 晕葬悦造 盐溶液中处理
猿澡咱员园暂 袁随后置于液氮中用于提取总 砸晕粤遥
员郾 员郾 圆摇 载体与试剂摇 砸晕粤 提取试盒为 杂灾 栽燥贼葬造 砸晕粤
陨泽燥造葬贼蚤燥灶 杂赠泽贼藻皂渊孕则燥皂藻早葬公司袁美国冤袁 砸晕粤 反转录试
剂盒为 皂孕则燥皂鄄陨陨 砸藻增藻则泽藻 栽则葬灶泽糟则蚤责贼葬泽藻渊孕则燥皂藻早葬 公司袁
员苑圆员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
美国冤袁离心柱型琼脂糖凝胶 阅晕粤 回收试剂盒为
宰蚤扎葬则凿 杂灾 郧藻造 葬灶凿 孕悦砸 悦造藻葬灶鄄怎责 杂赠泽贼藻皂渊 孕则燥皂藻早葬 公
司袁美国冤曰栽连接载体试剂盒为 责郧耘酝鄄栽 藻葬泽赠 陨陨 灾藻糟贼燥则
渊孕则燥皂藻早葬公司袁美国冤袁缘忆鄄砸粤悦耘和 猿忆鄄砸粤悦耘 试剂盒均
为大连宝生物公司产品袁栽葬择 阅晕粤聚合酶与 阅晕粤分子
量 皂葬则噪藻则为北京天根生物公司产品曰引物由北京奥科
公司合成曰其余试剂均为分析纯遥
员郾 圆摇 试验方法
员郾 圆郾 员摇 总砸晕粤 的提取摇 按 杂灾 栽燥贼葬造 砸晕粤 陨泽燥造葬贼蚤燥灶
杂赠泽贼藻皂试剂盒操作指南提取叶片总 砸晕粤遥
员郾 圆郾 猿摇 总 糟阅晕粤 的 反 转 录摇 按 皂孕则燥皂鄄陨陨 砸藻增藻则泽藻
栽则葬灶泽糟则蚤责贼葬泽藻试剂盒进行 糟阅晕粤 的反转录遥 取 圆滋早 马
铃薯叶片总 砸晕粤袁以 韵造蚤早燥 凿栽为引物袁进行总 糟阅晕粤反
转录遥 反应体系为 圆园滋蕴袁酝酝蕴灾 砸栽 月怎枣枣藻则 源滋蕴袁总
砸晕粤 圆滋蕴袁 凿晕栽孕 圆滋蕴袁反转录酶 酝酝蕴灾 员滋蕴袁 韵造蚤早燥
渊凿栽冤 员远 员滋蕴袁砸晕粤 酶抑制剂 砸晕葬泽藻泽蚤灶 园郾 缘滋蕴袁加经
阅耘孕悦处理的 匀圆韵 至 圆园滋蕴遥 反转录反应条件为 源圆益远园皂蚤灶袁进行反转录 怨缘益 变性 缘皂蚤灶袁猿益变性 猿皂蚤灶遥 反
转录产物置 原圆园益冰箱备用遥
员郾 圆郾 源摇 孕燥月粤阅匀 基因核心序列的 孕悦砸 扩增 摇 根据
郧藻灶月葬灶噪上已发表的 月粤阅匀 基因序列渊郧藻灶月葬灶噪 登录
号分别为 云允圆圆愿源愿圆尧月栽园员猿缘愿愿尧云允缘员源苑怨怨尧阅匝源怨苑圆猿猿尧
阅匝怨圆猿远员苑冤设计 员 对简并引物袁从马铃薯 糟阅晕粤 扩增
该 基 因 的 核 心 片 段遥 上 游 引 物 为 孕员
渊 悦郧晕悦粤砸再灾栽栽栽悦粤栽再郧粤再郧郧 冤袁 下 游 引 物 为 孕圆
渊栽栽悦再悦悦阅粤郧再栽悦阅悦郧月悦悦粤粤粤晕悦悦砸悦栽砸悦郧冤遥 预计
扩增片段大小为 员 猿怨圆遭责遥 孕悦砸 反应体系为 圆缘滋蕴袁包
含 员园 伊 遭怎枣枣藻则 圆郾 缘 滋蕴袁凿晕栽孕渊圆郾 缘 皂皂燥造窑滋蕴 原员 冤员郾 缘滋蕴袁
上尧下游引物渊员园 滋皂燥造窑滋蕴 原员 冤各 员滋蕴袁栽葬择 聚合酶渊缘
哉窑滋蕴 原员冤员滋蕴袁总 糟阅晕粤渊员滋早窑滋蕴 原员 冤 员 滋蕴袁凿凿匀圆韵 至圆缘滋蕴遥 反应程序为 怨源益预变性 缘 皂蚤灶袁怨源益 变性 猿园泽尧
缘园益退火 源园 泽尧苑圆益延伸 缘园 泽袁猿园 个循环后袁苑圆益延伸
员园 皂蚤灶遥
员郾 圆郾 缘摇 孕燥月粤阅匀基因 猿忆鄄砸粤悦耘扩增摇 根据 孕燥月粤阅匀基
因 糟阅晕粤核心序列袁利用 阅晕粤酝粤晕苑郾 园 生物软件设计
孕燥月粤阅匀基因的 猿忆鄄砸粤悦耘的引物 孕猿渊栽栽郧郧栽悦悦栽郧栽悦粤
栽栽粤郧栽悦郧栽冤和 孕源渊悦粤栽栽悦粤粤悦悦粤粤悦粤粤栽悦粤栽粤粤悦栽冤袁
按照 栽葬噪葬则葬 猿忆鄄云怎造造 砸粤悦耘悦燥则藻 杂藻贼 灾藻则援 圆郾 园 说明书进
行 猿忆鄄 砸粤悦耘扩增遥 预计扩增片段大小为 缘愿怨遭责遥
员郾 圆郾 远摇 月粤阅匀 基因 缘忆鄄砸粤悦耘 扩增 摇 根据 孕燥月粤阅匀 基
因 糟阅晕粤核心序列设计 孕燥月粤阅匀基因的 缘忆鄄砸粤悦耘的引
物 孕缘 渊 郧悦栽栽悦郧栽郧栽悦悦悦粤粤栽悦悦悦郧栽栽粤郧栽粤栽郧冤 和 孕远
渊 悦悦栽悦栽悦栽粤悦粤郧粤栽栽栽悦粤悦悦悦粤粤悦栽悦悦粤粤 冤袁 按 照
栽葬噪葬则葬 缘忆鄄云怎造造 砸粤悦耘 运蚤贼 说明书进行 缘忆鄄 砸粤悦耘 扩增遥
预计扩增片段大小为 远愿远遭责遥
员郾 猿摇 克隆与测序
员郾 猿郾 员摇 孕燥月粤阅匀 基因完整序列的测序与拼接 摇 所有
基因片段送北京天根生物公司测序遥 将核心序列尧猿忆鄄
砸粤悦耘 测 序 结 果 与 缘忆鄄砸粤悦耘 测 序 结 果 利 用
阅晕粤酝粤晕苑郾 园 软件进行序列拼接袁所得全长即为
孕燥月粤阅匀基因 糟阅晕粤 的完整序列遥
员郾 猿郾 圆摇 孕燥月粤阅匀基因 糟阅晕粤 完整 韵砸云的 孕悦砸扩增摇
根据测序结果袁设计 孕燥月粤阅匀基因完整 韵砸云 序列的上
游引物 孕苑渊郧粤粤粤粤粤悦栽悦粤栽粤栽悦粤郧栽粤郧悦粤栽栽栽粤郧悦冤和
下游引物 孕愿渊郧悦栽悦栽栽粤粤粤郧粤栽郧粤粤粤栽粤粤粤悦粤郧粤粤郧粤
郧郧冤袁以反转录产物为模板袁进行的 孕悦砸 扩增袁测序确
认遥
员郾 源摇 进化分析
对编码马铃薯 月粤阅匀 基因序列采用 憎憎憎援 灶糟遭蚤援
灶造皂援 灶蚤澡援 早燥增 中的 月蕴粤杂栽 软件尧阅晕粤酝粤晕 苑郾 园 进行生
物信息学分析遥 进化树采用 酝耘郧粤缘郾 园缘 软件绘制袁计
算方法采用 晕藻蚤早澡遭燥则鄄躁燥蚤灶蚤灶早方法遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 孕燥月粤阅匀基因 糟阅晕粤核心序列的 孕悦砸扩增
以设计的简并引物为扩增引物袁以马铃薯 糟阅晕粤
为模板袁扩增 孕燥月粤阅匀保守核心序列见图 员遥 员尧圆 泳道
为扩增产物袁扩增片段大小为 员 猿怨圆遭责袁与预期大小一
致袁测序获得 孕燥月粤阅匀保守核心序列遥
图 员摇 孕燥月粤阅匀保守序列扩增
云蚤早援 员摇 粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 糟燥灶泽藻则增藻凿 枣则葬早皂藻灶贼 燥枣 孕燥月粤阅匀
圆郾 圆摇 孕燥月粤阅匀基因 猿忆鄄砸粤悦耘袁缘忆鄄砸粤悦耘以及全长扩增
猿忆砸粤悦耘 片段扩增结果见图 圆袁扩增片段大小为
缘愿怨遭责袁与设计一致袁测序后获得 孕燥月粤阅匀 猿忆序列遥 缘忆
圆苑圆员
摇 苑 期 马铃薯甜菜碱醛基因 孕燥月粤阅匀的克隆与进化分析
图 圆摇 孕燥月粤阅匀 猿忆砸粤悦耘片段扩增
云蚤早援 圆摇 粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 猿忆砸粤悦耘 孕燥月粤阅匀
砸粤悦耘结果见图 猿袁扩增片段大小为 远愿远遭责袁与设计一
致袁测序后获得 孕燥月粤阅匀 缘忆序列遥 将 孕燥月粤阅匀 保守核
心片段尧猿忆片段尧缘忆片段序列用 阅晕粤酝粤晕渊增苑郾 园冤生物软
件进行拼接袁重新设计引物袁扩增该基因全长序列渊图
源冤遥 扩增片段大小为 员 缘员愿遭责忆与预计大小一致遥 测序
验证获得 孕燥月粤阅匀全长 糟阅晕粤序列遥
图 猿摇 孕燥月粤阅匀 缘忆砸粤悦耘片段扩增
云蚤早援 猿摇 粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 缘忆砸粤悦耘 燥枣 蕴遭月粤阅匀圆
圆郾 猿 孕燥月粤阅匀基因的序列分析
根据 孕燥月粤阅匀圆 全长 糟阅晕粤 序列渊郧藻灶月葬灶噪 登录
号院 运酝园缘愿园远缘 冤袁推导氨基酸序列 渊图 缘 冤袁可见
孕燥月粤阅匀圆 的编码区为 员 缘员愿遭责袁编码区两侧翼分别具
有 缘忆哉栽砸 渊苑远遭责冤和 猿忆哉栽砸渊员怨远遭责冤曰用软件 责燥造赠葬凿择
预测到在 责燥造赠 渊 粤 冤 尾前 愿苑 位出现终止信号
粤粤栽粤粤粤袁代表多聚核苷酸 粤 合成信号遥 推测该开放
阅读框编码 缘园缘 个氨基酸的 月粤阅匀蛋白袁分子量为 缘缘
图 源摇 孕燥月粤阅匀全长 糟阅晕粤扩增
云蚤早援 源摇 粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 枣怎造造 糟阅晕粤 孕燥月粤阅匀
怨园猿郾 员袁理论等电点为 缘郾 园猿遥 在推导的氨基酸序列中袁
含有 醛 脱 氢 酶 所 具 有 的 高 度 保 守 的 十 肽
渊灾栽蕴耘蕴郧郧运杂孕冤以及与酶功能有关的半胱氨酸残基
渊悦冤渊图 缘 阴影部分冤遥
圆郾 源摇 孕燥月粤阅匀进化分析
用 酝耘郧粤缘郾 园缘 生物软件对其它物种的 月粤阅匀 基
因编码的氨基酸序列进行分子进化分析袁同一科植物
聚类到一起袁说明此蛋白较为保守渊图 远冤遥 盐节木
渊 匀葬造燥糟灶藻皂怎皂 泽贼则燥遭蚤造葬糟藻怎皂 冤尧 盐 穗 木 渊 匀葬造燥泽贼葬糟澡赠泽
糟葬泽责蚤糟葬冤尧碱蓬渊杂怎葬藻凿葬 造蚤葬燥贼怎灶早藻灶泽蚤泽冤尧梭梭渊匀葬造燥曾赠造燥灶
葬皂皂燥凿藻灶凿则燥灶冤尧菠菜渊杂责蚤灶葬糟蚤葬 燥造藻则葬糟藻葬冤尧滨藜渊粤贼则蚤责造藻曾
糟藻灶贼则葬造葬泽蚤葬贼蚤糟葬冤尧山菠菜 渊 粤援 澡燥则贼藻灶泽蚤泽 冤尧甜菜 渊 月藻贼葬
增怎造早葬则蚤泽冤尧盐爪爪渊运葬造蚤凿蚤怎皂 枣燥造蚤葬贼怎皂冤等藜科植物被聚
类到一个进化分枝曰小麦 渊 栽则蚤贼蚤糟怎皂 葬藻泽贼蚤增怎皂冤尧水稻
渊韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬冤尧短芒大麦草渊匀燥则凿藻怎皂 遭则藻增蚤泽怎遭怎造葬贼怎皂冤
聚类到禾本科进化分枝曰油菜渊月则葬泽泽蚤糟葬 灶葬责怎泽冤尧陆地棉
渊郧燥泽泽赠责蚤怎皂 澡蚤则泽怎贼怎皂冤尧麻疯树渊 允葬贼则燥责澡葬 糟怎则糟葬泽冤尧胡杨
渊孕燥责怎造怎泽 藻怎责澡则葬贼蚤糟葬冤亲缘关系较远曰宁夏枸杞渊蕴赠糟蚤怎皂
遭葬则遭葬则怎皂冤尧 马 铃 薯 渊 杂援 贼怎遭藻则燥泽怎皂 冤 与 番 茄 渊 杂援
造赠糟燥责藻则泽蚤糟怎皂冤聚类到茄科进化分枝袁同时袁本研究所克
隆的基因 孕燥月粤阅匀与番茄的亲缘关系更近遥
猿摇 讨论
植物的耐盐性是多基因控制的袁常常以植物的
生长环境为基础袁受到基因型尧土壤尧环境等影响遥
进化分析表明袁茄科植物宁夏枸杞有 圆 个拷贝的
月粤阅匀袁推测马铃薯中还有 员 个 月粤阅匀基因袁这也符合
月粤阅匀基因具有明显的多样性观点遥 酝糟糟怎藻 等 咱员员暂在
猿苑圆员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
图 缘摇 孕燥月粤阅匀圆 阅读框和推测氨基酸
云蚤早援 缘摇 栽澡藻 枣怎造造 泽藻择怎藻灶糟藻 燥枣 孕燥月粤阅匀圆 葬灶凿 责怎贼葬贼蚤增藻 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿
甜菜 月粤阅匀 研究中袁提出在 月粤阅匀 基因中可能存在
诱导型与组成型 圆 类月粤阅匀遥但是袁晕葬噪葬皂怎则葬等咱员圆暂进
行 晕燥则贼澡藻则灶 杂交表明袁大麦的 圆 个 月粤阅匀 基因中袁
月月阅员 在叶片中持续以低水平表达袁不具有诱导性袁
而在根系中则受渗透胁迫诱导曰 月月阅圆 在根和叶中
均受渗透胁迫诱导遥 可见袁大麦的这 圆 个 月粤阅匀基因
源苑圆员
摇 苑 期 马铃薯甜菜碱醛基因 孕燥月粤阅匀的克隆与进化分析
注院种名后为 郧藻灶月葬灶噪 登录号遥
晕燥贼藻院月粤阅匀 郧藻灶月葬灶噪 粤糟糟藻泽泽蚤燥灶 晕燥援 葬贼 遭葬糟噪 燥枣 泽责藻糟蚤藻泽 灶葬皂藻援
图 远摇 月粤阅匀分子进化树
云蚤早援 远摇 孕澡赠造燥早藻灶藻贼蚤糟 贼则藻藻 燥枣 月粤阅匀
具有组织特异性袁而马铃薯 月粤阅匀 表达情况还需要
进一步研究遥
从目前克隆得到的 月粤阅匀 分析可知袁存在 圆 种有
关该酶蛋白定位的信号肽遥 一种是 晕 原端信号肽袁其
氨基酸序列为 匝蕴云陨阅郧耘咱员猿暂 袁 被认为是定位于叶绿体
的信号袁但该信号肽缺乏典型性咱员源暂 遥 另一种是 悦 原端
信号肽袁氨基酸序列为 杂运蕴袁是定位于过氧化物酶体中
的信号遥 将具有 悦 原端信号肽 杂运蕴 的 月粤阅匀 定位于
过氧化物酶体已无争议咱员猿暂 遥 但对具有不典型 晕 原端
信号肽的 月粤阅匀 定位问题尚有争议遥 不同类型的
月粤阅匀在细胞中的定位具有多样性袁可能分别位于叶
绿体尧过氧化物酶体或细胞质等部位遥 本研究所克隆
的马铃薯 月粤阅匀具有高度保守的十肽渊灾栽蕴耘蕴郧郧运杂孕冤
以及与酶功能有关的半胱氨酸残基渊悦冤袁这些残基可
能包含 晕粤阅 垣结合位点和酶催化位点咱员缘暂 遥 它同时具
有 圆 种信号肽袁 在 晕 端含有不典型的信号肽
匝蕴云陨阅郧耘袁表明该酶可能定位于叶绿体中曰在 悦 端有
一个 杂运蕴型信号肽袁也可能是定位于过氧化物酶体中
的信号肽咱员源暂 遥 这说明马铃薯 月粤阅匀 很可能在 圆 种细
胞器都有所表达袁但不排除不存在 晕 端信号肽这种可
能性袁结果还需进一步试验验证遥
目前已经从盐节木咱员远暂 尧盐穗木咱员园暂 尧碱蓬咱员苑 原 员愿暂 尧梭
梭咱员怨暂 尧菠菜 渊 杂责蚤灶葬糟蚤葬 燥造藻则葬糟藻葬 冤 咱圆园暂 尧 滨藜咱圆员暂 尧 山菠
菜咱圆圆暂 尧甜菜咱圆猿暂 尧盐爪爪咱圆源暂等藜科植物袁小麦咱圆缘暂 尧水稻尧
短芒大麦草等禾本科植物以及油菜咱圆远暂等其它植物中
分离克隆了 月粤阅匀咱圆苑 原 圆怨暂 遥 对不同双子叶植物甜菜碱
的合成途径进行生物化学和免疫学研究时发现袁能合
成甜菜碱的植物可能是由 员 个共同的被子植物祖先进
化而来的袁由此可将甜菜碱的研究与植物的系统进化
联系起来咱猿园暂 遥 本研究结果表明所克隆的基因
孕燥月粤阅匀与番茄的亲缘关系更近遥
缘苑圆员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
源摇 结论
本研究利用同源克隆技术袁分离克隆得到了马铃薯
孕燥月粤阅匀基因遥 该基因 糟阅晕粤全长 员 苑怨园遭责袁其中开放读
码框 员 缘员愿遭责袁编码区两侧翼分别具有 缘忆哉栽砸 渊苑远遭责冤和
猿忆哉栽砸渊员怨远遭责 冤遥 在推导的氨基酸序列中袁含有醛脱氢
酶所具有的高度保守的十肽渊灾栽蕴耘蕴郧郧运杂孕冤以及与酶
功能有关的半胱氨酸残基渊悦冤遥 在 晕端含有不典型的
信号肽 匝蕴云陨阅郧耘袁表明该酶可能定位于叶绿体中曰在 悦
端具有 员个 杂运蕴型信号肽袁表明可能是定位于过氧化物
酶体中的信号肽遥 进化分析表明袁合成甜菜碱的植物可
能是由 员个共同的被子植物祖先进化而来的袁孕燥月粤阅匀
聚类到茄科进化分支袁且与茄科中番茄渊杂援 造赠糟燥责藻则泽蚤糟怎皂冤
的亲缘关系更近遥
参考文献院
咱 员 暂摇 包云飞袁李颖邦袁粟盛颖袁洪亚辉援 盐胁迫对马铃薯试管苗生理
生化特性的影响咱允暂 援 湖南农业科学袁 圆园员猿袁 渊员猿冤院圆源 原 圆苑
咱 圆 暂 摇 赵明辉袁 白雅梅袁 李文霞袁 吕文河援 对 晕葬悦造 敏感度不同的二倍
体马铃薯在 晕葬匀悦韵猿 胁迫下的表现咱 允暂 援 核农学报袁圆园员源袁 圆愿
渊圆冤院猿缘愿 原 猿远猿
咱 猿 暂摇 张景云袁 白雅梅袁 缪南生袁 朱珊袁 李文霞袁 吕文河援 盐胁迫对不
同耐盐性二倍体马铃薯叶片质膜透性尧丙二醛和脯氨酸含量的
影响咱允暂 援 作物杂志袁圆园员猿袁 渊源冤院苑缘 原 愿园
咱 源 暂摇 张景云袁 缪南生袁 白雅梅袁 赵萍袁 李文霞袁 吕文河援 二倍体马铃
薯耐盐品种鉴定的生理指标测定咱允暂 援 植物生理学报袁圆园员猿袁 源怨
渊怨冤院愿愿怨 原 愿怨源
咱 缘 暂摇 李东魁袁 王蒂袁 张俊莲袁 司怀军袁 柳娜援 转 月粤阅匀基因马铃薯无
性繁殖二代耐盐性检测咱 允暂 援 植物生理学通讯袁圆园园苑袁 源猿渊缘冤院
愿苑猿 原 愿苑缘
咱 远 暂摇 张宁袁 司怀军袁 栗亮袁 杨涛袁 张春凤袁 王蒂援 转甜菜碱醛脱氢酶
基因马铃薯的抗旱耐盐性咱允暂 援 作物学报袁圆园园怨袁 猿缘渊远冤院员员源远 原
员员缘园
咱 苑 暂 摇 张正国袁 张丽莉袁 卢翠华袁 林忠平袁 胡鸢雷袁 张欢袁 王石援 农杆
菌介导 月粤阅匀 耐盐基因转化马铃薯的研究 咱 允暂 援 作物杂志袁
圆园员圆袁 渊猿冤院圆愿 原 猿员袁员缘苑
咱 愿 暂 摇 梁峥袁 骆爱玲援 甜菜碱和甜菜碱合成酶咱 允暂 援 植物生理学通讯袁
员怨怨缘袁 猿员渊员冤院员 原 愿
咱 怨 暂 摇 韩永玲援 青薯 员远愿 的特性及标准化栽培技术咱 允暂 援 现代农业科
技袁圆园员园袁渊圆源冤院员圆怨
咱员园暂摇 关波袁 胡有贞袁 张富春袁 曾幼玲援 盐穗木甜菜碱醛脱氢酶基因
渊月粤阅匀冤的克隆及其在盐胁迫下的表达分析咱允暂 援 植物生理学通
讯袁 圆园员园袁源远渊员冤院源苑 原 缘园
咱员员暂摇 酝糟悦怎藻 运 云袁 匀葬灶泽燥灶 粤 阅援 杂葬造贼鄄蚤灶凿怎糟蚤遭造藻 遭藻贼葬蚤灶藻 葬造凿藻澡赠凿藻
凿藻澡赠凿则燥早藻灶葬泽藻 枣则燥皂 泽怎早葬则 遭藻藻贼院 糟阅晕粤 糟造燥灶蚤灶早 葬灶凿 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶咱 允暂 援
孕造葬灶贼 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠 员怨怨圆袁 员愿渊员冤院员 原 员员
咱员圆暂摇 晕葬噪葬皂怎则葬 栽袁 晕燥皂怎则葬 酝袁 酝燥则蚤 匀袁 允葬早藻灶凿燥则枣 粤 栽袁 哉藻凿葬 粤袁 栽葬噪葬遭藻
栽援 粤灶 蚤泽燥扎赠皂藻 燥枣 遭藻贼葬蚤灶藻 葬造凿藻澡赠凿藻 凿藻澡赠凿则燥早藻灶葬泽藻 蚤灶 遭葬则造藻赠 咱 允暂 援
孕造葬灶贼 驭 悦藻造造 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园园员袁 源圆渊员园冤院员园愿愿 原 员园怨圆
咱员猿暂摇 晕葬噪葬皂怎则葬 栽袁 再燥噪燥贼葬 杂袁 酝怎则葬皂燥贼燥 再袁 栽泽怎贼泽怎蚤 运袁 韵早怎则蚤 再袁 云怎噪怎蚤
运袁 栽葬噪葬遭藻 栽援 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 葬 遭藻贼葬蚤灶藻 葬造凿藻澡赠凿藻 凿藻澡赠凿则燥早藻灶葬泽藻 早藻灶藻
蚤灶 则蚤糟藻袁 葬 早造赠糟蚤灶藻遭藻贼葬蚤灶藻 灶燥灶葬糟糟怎皂怎造葬贼燥则袁 葬灶凿 责燥泽泽蚤遭造藻 造燥糟葬造蚤扎葬贼蚤燥灶
燥枣 蚤贼泽 责则燥贼藻蚤灶 蚤灶 责藻则燥曾蚤泽燥皂藻泽咱 允暂 援 栽澡藻 孕造葬灶贼 允燥怎则灶葬造院 枣燥则 悦藻造造 葬灶凿
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