全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊圆冤院园员缘圆 耀 园员缘苑
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄园猿鄄员缘摇 接受日期院圆园员圆鄄园缘鄄员愿
基金项目院现代农业产业技术体系建设专项资金渊悦粤砸杂鄄员源冤袁青岛市科技计划项目渊员圆鄄员鄄源鄄员员鄄渊员冤鄄躁糟澡袁员圆鄄员鄄源鄄员员 渊猿冤鄄躁糟澡冤袁吉林省自然科学金基
金渊 圆园员圆员缘员怨缘冤
作者简介院王秀贞渊 员怨苑苑鄄冤袁女袁山东枣庄人袁山东省花生研究所助理研究员袁主要从事花生生化及抗逆研究遥 栽藻造院园缘猿圆鄄愿苑远圆远远远圆曰 耘鄄皂葬蚤造院
曾扎澡憎圆园园园岳 员圆远援 糟燥皂
通讯作者院王传堂渊 员怨远愿鄄冤袁男袁山东莱阳人袁研究员袁主要从事花生分子育种和化学诱变研究遥 栽藻造院园缘猿圆鄄愿苑远圆远远远圆曰耘鄄皂葬蚤造院糟澡蚤灶葬责藻葬灶怎贼岳 员圆远援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤园圆鄄园员缘圆鄄园远
花生种子芽期耐低温相关基因克隆
王秀贞员 摇 唐月异员 摇 吴摇 琪员 摇 高华援圆 摇 胡东青猿 摇 张树伟源
陈殿绪员 摇 戚永春缘 摇 王传堂员
渊员山东省花生研究所袁山东 青岛摇 圆远远员园园曰圆吉林省农业科学院经济植物研究所袁吉林 公主岭摇 员猿远员园缘曰猿青岛出入境检验检
疫局袁山东 青岛摇 圆远远园园圆曰源山东农业大学袁山东 泰安摇 圆苑员园员愿曰缘胶州市农业局袁山东 胶州摇 圆远远猿园园冤
摘摇 要院利用 郧藻灶藻云蚤泽澡蚤灶早技术获得耐低温花生品种花育 源源 号种子在常温与低温诱导下的差异表达基因
渊凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造造赠 藻曾责则藻泽泽藻凿 早藻灶藻泽袁 阅耘郧泽冤粤悦孕圆园 和 粤悦孕圆遥 月蕴粤杂栽比对后发现 粤悦孕圆园 基因与花生油质蛋白
基因同源性达 怨怨豫 袁粤悦孕圆 基因与花生 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻渊铁硫簇蛋白冤蛋白 皂砸晕粤同源性达 怨怨豫 袁说明油质蛋白
和 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻蛋白可能与花生对低温逆境胁迫的抗性有关遥 通过 砸粤悦耘技术从该品系获得相关基因的完
整编码区袁对其进行生物学功能预测袁为探讨花生耐低温分子机制乃至培育耐低温花生新品种奠定了基
础遥
关键词院花生曰耐低温曰相关基因曰差异表达
悦造燥灶蚤灶早 葬灶凿 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 阅蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造造赠 耘曾责则藻泽泽藻凿 郧藻灶藻泽
枣则燥皂 孕藻葬灶怎贼 蚤灶 砸藻泽责燥灶泽藻 贼燥 悦澡蚤造造蚤灶早 杂贼则藻泽泽
宰粤晕郧 载蚤怎鄄扎澡藻灶员 摇 栽粤晕郧 再怎藻鄄赠蚤员 摇 宰哉 匝蚤员 摇 郧粤韵 匀怎葬鄄赠怎葬灶圆 摇 匀哉 阅燥灶早鄄择蚤灶早猿
在匀粤晕郧杂澡怎鄄憎藻蚤源 摇 匝陨 再燥灶早鄄糟澡怎灶缘 摇 宰粤晕郧 悦澡怎葬灶鄄贼葬灶早员
渊员杂澡葬灶凿燥灶早 孕藻葬灶怎贼 砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻袁 匝蚤灶早凿葬燥袁 杂澡葬灶凿燥灶早摇 圆远远员园园曰 圆 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 耘糟燥灶燥皂蚤糟 孕造葬灶贼泽袁 允蚤造蚤灶 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁
郧燥灶早扎澡怎造蚤灶早袁 允蚤造蚤灶摇 员猿远员园缘曰猿援 匝蚤灶早 凿葬燥 耘灶贼则赠鄄耘曾蚤贼 陨灶泽责藻糟贼蚤燥灶 葬灶凿 匝怎葬则葬灶贼蚤灶藻 月怎则藻葬怎袁 匝蚤灶早凿葬燥袁 杂澡葬灶凿燥灶早摇 圆远远园园圆曰
源杂澡葬灶凿燥灶早 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 栽葬蚤葬灶袁 杂澡葬灶凿燥灶早摇 圆苑员园员愿曰 缘 允蚤葬燥扎澡燥怎 粤早则蚤援 月怎则藻葬怎袁 允蚤葬燥在澡燥怎袁 杂澡葬灶凿燥灶早摇 圆远远猿园园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院阅蚤枣枣藻则藻灶糟藻泽 蚤灶 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 遭藻贼憎藻藻灶 泽藻藻凿泽 燥枣 匀怎葬赠怎 源源袁 葬 造葬则早藻 贼赠责藻 责藻葬灶怎贼 造蚤灶藻 憎蚤贼澡 糟澡蚤造造蚤灶早 贼燥造藻则葬灶糟藻 蚤皂遭蚤遭藻凿 蚤灶 圆益 憎葬贼藻则
葬灶凿 泽藻藻凿泽 燥枣 贼澡藻 泽葬皂藻 糟怎造贼蚤增葬则 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 员缘益 憎葬贼藻则 渊 糟燥灶贼则燥造冤袁 憎藻则藻 泽贼怎凿蚤藻凿 怎泽蚤灶早 贼澡藻 郧藻灶藻云蚤泽澡蚤灶早栽酝 贼藻糟澡灶燥造燥早赠援 栽憎燥 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造造赠
藻曾责则藻泽泽藻凿 早藻灶藻泽 粤悦孕圆园 葬灶凿 粤悦孕圆 憎藻则藻 蚤泽燥造葬贼藻凿援 月蕴粤杂栽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 贼澡藻赠 澡葬凿 澡蚤早澡 澡燥皂燥造燥早赠 贼燥 贼澡藻 早藻灶藻泽 藻灶糟燥凿蚤灶早 燥造藻燥泽蚤灶 葬灶凿 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻
责则燥贼藻蚤灶袁 则藻泽责藻糟贼蚤增藻造赠援 耘曾责则藻泽泽蚤燥灶泽 燥枣 遭燥贼澡 早藻灶藻泽 憎藻则藻 泽贼怎凿蚤藻凿 遭赠 则藻葬造 贼蚤皂藻 砸栽鄄孕悦砸袁 葬灶凿 糟燥皂责造藻贼藻 糟燥凿蚤灶早 泽藻择怎藻灶糟藻泽 燥枣 遭燥贼澡 早藻灶藻泽 憎藻则藻
燥遭贼葬蚤灶藻凿 遭赠 则葬责蚤凿 葬皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 糟阅晕粤 藻灶凿泽援 孕则藻造蚤皂蚤灶葬则赠 遭蚤燥造燥早蚤糟葬造 枣怎灶糟贼蚤燥灶泽 燥枣 贼澡藻 贼憎燥 早藻灶藻泽 憎藻则藻 枣怎则贼澡藻则 责则藻凿蚤糟贼藻凿援 栽澡藻 泽贼怎凿赠 糟葬灶 澡藻造责 怎泽
贼燥 怎灶凿藻则泽贼葬灶凿 贼澡藻 皂燥造藻糟怎造葬则 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂 怎灶凿藻则造赠蚤灶早 则藻泽蚤泽贼葬灶糟藻 葬灶凿 枣葬糟蚤造蚤贼葬贼藻 遭则藻藻凿蚤灶早 责则燥糟藻泽泽援
运藻赠 憎燥则凿泽院孕藻葬灶怎贼曰 悦澡蚤造造蚤灶早 贼燥造藻则葬灶糟藻曰 砸藻造葬贼藻凿 早藻灶藻曰 阅蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶
摇 摇 低温是影响植物生长发育和地理分布的重要生态
因子咱员暂 遥 作为世界上主要的经济作物袁花生是食用植
物油和蛋白质的重要来源咱圆暂 遥 生产实践表明袁花生对
低温的生理反应比较明显袁无论我国北方还是南方产
区均存在花生冷害问题遥 芽期对冷害较敏感袁遇低温
则不能正常萌发或发生烂芽曰苗期则主要表现为死
圆缘员
摇 圆 期 花生种子芽期耐低温相关基因克隆
苗咱圆暂 曰花期气温低于 圆圆益影响开花尧传粉和受精咱猿暂 袁结
荚期平均气温低于 圆园益袁茎叶枯萎尧脱落袁不利于光合
产物转移咱源暂 曰后期低温常会造成茎叶早衰尧荚果不饱
满尧百果重下降等问题遥 开展耐低温研究对于确保花
生高产稳产尧扩大花生种植面积尧保证国家食用油脂安
全具有重要意义遥 花生低温相关研究近年在国内外得
到重视袁并取得一定进展袁但主要集中于低温胁迫下花
生种子生理生化指标变化和花生出苗后对低温胁迫的
反应袁有关花生种子耐低温分子基础方面的研究甚
少咱缘 原 员员暂 遥
郧藻灶藻云蚤泽澡蚤灶早技术是近几年国际上兴起的一项用
来检测不同样品间差异表达基因的分子手段袁该技术
在其他植物上已有应用咱员圆袁员猿暂 袁但在花生上的应用还未
见报道遥 相对于 杂杂匀渊抑制性消减杂交冤袁该技术因无
假阳性尧无需放射性或荧光尧无需特殊技术以及快速尧
经济的优点逐渐受到研究者的青睐遥 本研究利用
郧藻灶藻云蚤泽澡蚤灶早技术研究花育 源源 号种子芽期常温与低温
诱导下差异表达基因袁获得芽期耐低温相关特异表达
基因片段及完整编码区袁分析其生物学功能袁为探讨花
生芽期耐低温分子机制乃至培育耐低温花生新品种奠
定基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
试验所用花生材料为山东省花生研究所分子育种
课题组通过芽期低温逆境筛选获得的耐低温花生品种
花育 源源 号渊原代号 园怨 测 蕴猿远冤 咱苑暂 遥 该品种是花生不亲
和野生种 粤则葬糟澡蚤泽 早造葬遭葬则葬贼葬 月藻灶贼澡 与栽培种经杂交尧回
交育成的杂种衍生系遥
员郾 圆摇 方法
员郾 圆郾 员摇 材料预处理摇 参照唐月异等咱员源暂的方法袁选取
饱满的花生种子分别置于盛有预冷至 圆尧员缘益双蒸水
的培养皿中袁于相应温度的层析柜中浸泡处理遥 以
员缘益处理的种子作为对照遥
员郾 圆郾 圆摇 砸晕粤 提取和 糟阅晕粤 合成 摇 分别于种子浸泡
员郾 缘澡和 远澡时取样袁按 砸晕粤责则藻责 责怎则藻植物总 砸晕粤提取
试剂盒 渊 栽蚤葬灶早藻灶冤说明书进行总 砸晕粤 提取遥 按 酝鄄
酝蕴灾 糟阅晕粤合成试剂盒渊栽葬运葬砸葬冤操作说明进行第一
链 糟阅晕粤合成遥 所用 燥造蚤早燥 凿渊栽冤灶 选用 郧藻灶藻云蚤泽澡蚤灶早 试
剂盒渊杂藻藻早藻灶藻冤中的 凿栽鄄粤悦孕员遥
员郾 圆郾 猿摇 孕悦砸 扩增及扩增差异片段的克隆测序摇 孕悦砸
反应体系和程序均按 郧藻灶藻云蚤泽澡蚤灶早栽酝 阅耘郧 孕则藻皂蚤曾 运蚤贼说
明书进行袁孕悦砸 产物用 圆豫琼脂糖凝胶电泳检测并拍
照记录遥 差异片段用琼脂糖凝胶 阅晕粤 回收试剂盒
渊栽蚤葬灶早藻灶冤回收纯化后袁用 栽粤克隆试剂盒渊栽葬运葬砸葬冤克
隆遥 阳性克隆送南京金斯瑞生物有限公司测序遥
员郾 圆郾 源摇 耐低温相关基因序列分析摇 测序结果去除载
体和引物序列后用 阅晕粤酝粤晕软件翻译成氨基酸序列袁
采用 晕悦月陨 的 月造葬泽贼 程序在 郧藻灶月葬灶噪 中进行同源性检
索遥
员郾 圆郾 缘摇 差异表达基因荧光定量 孕悦砸 验证及 糟阅晕粤 完
整编码区克隆摇 根据差异片段序列袁应用荧光定量引
物专业设计软件 月藻葬糟燥灶 阅藻泽蚤早灶藻则 苑郾 怨 设计荧光定量
孕悦砸引物袁以不同处理的 糟阅晕粤 为模板袁茁鄄葬糟贼蚤灶 为内
参袁采用荧光定量 孕悦砸 试剂盒 渊 杂再月砸 郧则藻藻灶 冤
渊栽葬运葬砸葬冤袁按 蕴蚤早澡贼 悦赠糟造藻则渊砸燥糟澡藻 阅蚤葬早灶燥泽贼蚤糟泽冤使用说
明书进行 孕悦砸 扩增遥 反应结束后分析荧光值变化曲
线和熔解曲线袁并采用 圆 原吟吟悦贼的方法计算荧光定量
孕悦砸的相对表达差异值咱员缘暂 遥 反应每重复 猿 次袁取平均
值遥
根据差异片段测序结果及 砸粤悦耘试剂盒说明书设
计基因特异性引物进行 糟阅晕粤 缘忆和 猿忆端快速扩增遥 选
取阳性克隆测序遥 用 杂藻择酝葬灶 进行序列拼接袁获得目
的基因完整编码区遥
利用 阅晕粤杂贼葬则 软件预测拼接序列的开放阅读框
渊韵砸云冤遥 使用 孕则蚤皂藻则 孕则藻皂蚤藻则 缘郾 园 软件在预测的开放
阅读框两侧设计特异引物进行 孕悦砸扩增袁验证拼接结
果遥 孕悦砸 体系院模板 圆滋蕴袁圆 伊 栽葬择 酝蚤曾 员圆郾 缘滋蕴袁引物
员滋蕴袁凿凿匀圆韵 愿郾 缘滋蕴遥 孕悦砸 扩增程序院怨源益 猿皂蚤灶曰怨源益
员皂蚤灶袁缘缘益 员皂蚤灶袁苑圆益 怨园泽袁猿园 个循环曰苑圆益 员园皂蚤灶咱员远暂 遥
员郾 圆郾 远摇 蛋白质理化性质预测摇 用 孕则燥贼责葬则葬皂 渊澡贼贼责院 辕 辕
憎憎憎援 藻曾责葬泽赠援 糟澡 辕 贼燥燥造泽 辕 责则燥贼责葬则葬皂援 澡贼皂造冤进行咱员远暂 遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 花生种子耐低温相关基因片段的获得
提取不同处理花生种子 砸晕粤袁反转录为 糟阅晕粤
后袁利用 郧藻灶藻云蚤泽澡蚤灶早 试剂盒中提供的随机引物
粤悦孕圆园尧粤悦孕圆 分别与 凿栽鄄粤悦孕圆 配对进行 孕悦砸 扩增遥
圆豫琼脂糖凝胶电泳检测结果见图 员渊员郾 缘澡 筛选到的
差异片段命名为 粤悦孕圆园尧远澡筛选到的差异片段命名为
粤悦孕圆冤遥
圆郾 圆摇 差异片段的 栽粤克隆与测序
差异片段测序后袁用 晕悦月陨 的 月造葬泽贼 程序进行同源
性比较袁发现 粤悦孕圆园 基因与花生油质蛋白基因同源性
达 怨怨豫 袁粤悦孕圆 基因与花生 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻 蛋白 皂砸晕粤 同源
性达 怨怨豫 遥
猿缘员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
图 员摇 种子经 圆益与 员缘益处理后的
郧藻灶藻云蚤泽澡蚤灶早结果渊箭头示差异条带冤
云蚤早援 员摇 郧藻灶藻云蚤泽澡蚤灶早 则藻泽怎造贼泽 燥枣 责藻葬灶怎贼 泽藻藻凿泽
贼则藻葬贼藻凿 遭赠 圆益渊粤冤 葬灶凿 员缘益渊月冤
渊凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 遭葬灶凿泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 遭赠 葬则则燥憎泽冤
葬院粤悦孕圆园 辕 员郾 缘澡曰 遭院粤悦孕圆 辕 远澡曰 酝员院 员园园遭责 造葬凿凿藻则曰 酝圆院阅蕴圆园园园
圆郾 猿摇 荧光定量 孕悦砸 检测 粤悦孕圆园 和 粤悦孕圆 在不同处
理花生种子中的表达情况
对获得的差异表达基因 粤悦孕圆园 和 粤悦孕圆 进行荧光
定量分析袁结果如图 圆 所示遥 粤悦孕圆园 的相对表达量差
异达 猿郾 员缘袁而 粤悦孕圆 差异达 苑郾 猿园遥 低温逆境胁迫下上
述 圆 个基因在花生中的表达量明显提高袁说明这 圆 个
基因可能与花生耐低温性有关遥
图 圆摇 粤悦孕圆园渊圆益处理 员郾 缘澡冤与 粤悦孕圆
渊圆益处理 远澡冤相对表达量差异
云蚤早援 圆摇 阅蚤枣枣藻则藻灶糟藻 燥枣 则藻造葬贼蚤增藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶
燥枣 粤悦孕圆园 葬灶凿 粤悦孕圆 蚤灶 责藻葬灶怎贼 泽藻藻凿泽
圆郾 源摇 差异基因完整编码区的获得
通过 砸粤悦耘 试剂盒得到基因的 缘忆端和 猿忆端序列袁
与原序列拼接后得到全长 糟阅晕粤遥 在拼接后序列的开
放阅读框两侧设计引物进行 孕悦砸扩增袁获得长度分别
为 缘园员 和 缘猿员遭责的两个片段袁其大小与预期片段长度
一致渊图 猿冤遥
圆郾 缘摇 糟阅晕粤序列分析
通过测序和序列拼接得到的 粤悦孕圆园 基因完整编
码区 糟阅晕粤 为 远猿苑遭责遥 包含 远圆遭责 的 缘忆非编码序列尧
源源遭责的 猿忆非编码序列和 缘猿员遭责完整的开放阅读框渊包
图 猿摇 砸粤悦耘产物电泳图
云蚤早援 猿摇 粤皂责造蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 则藻泽怎造贼泽 燥枣
枣怎造造鄄造藻灶早贼澡 糟阅晕粤 遭赠 砸粤悦耘
酝院 阅蕴圆园园园曰员院 粤悦孕圆曰圆院 粤悦孕圆园
括终止密码子冤袁编码 员苑远 个氨基酸 渊图 源 冤遥 用
孕则燥贼责葬则葬皂分析该蛋白质分子量为 员愿郾 源缘噪阅袁理论等电
点为 怨郾 缘苑遥 提交 郧藻灶月葬灶噪 进行 月造葬泽贼 比对袁确认该
糟阅晕粤序列为花生油质蛋白完整编码区序列遥
拼接后的 粤悦孕圆 基因的完整编码区 糟阅晕粤 为
愿怨圆遭责遥 包括 缘苑遭责的 缘忆非编码序列尧猿猿源遭责 的 猿忆非编
码序列和 缘园员遭责的完整开放阅读框渊含终止密码子冤袁
编码 员远远 个氨基酸渊图 缘冤遥 用 孕则燥贼责葬则葬皂 预测分析该
蛋白质分子量为 员苑郾 缘愿噪阅袁理论等电点为 愿郾 怨怨遥 提交
郧藻灶月葬灶噪进行比对袁确认该 糟阅晕粤序列为花生 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻
蛋白完整编码区序列遥
圆郾 远摇 粤悦孕圆 及 粤悦孕圆园 编码的氨基酸序列同源性分析
将本研究获得的油质蛋白的氨基酸序列与其他植
物袁包括拟南芥尧甘蓝型油菜尧油橄榄及胡麻等的相关
蛋白的氨基酸序列进行 月造葬泽贼责 同源性比对渊图 远冤袁结
果显示同源性均达 缘园豫以上袁将获得的 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻 蛋白
的氨基酸序列与其他植物袁包括拟南芥尧巨桉尧水稻尧玉
米等的相关蛋白的氨基酸序列进行 月造葬泽贼责同源性比对
渊图 苑冤袁结果显示同源性达 愿园豫以上遥
圆郾 苑摇 蛋白质结构域分析
在 粤悦孕圆园 中检测到 员 个油质蛋白的保守结构域袁
在 粤悦孕圆 中检测到 员 个铁硫原子簇支架蛋白的保守结
构域渊图 愿冤遥
猿摇 讨论
油质蛋白是与油体特异结合的一种碱性蛋白质袁
一般覆盖于油体表面袁只存在于植物中遥 不同植物种
子中油质蛋白的分子量范围在 员缘 耀 圆远噪阅葬袁本研究获
得的花生基因预测的油质蛋白分子量约为 员愿噪阅葬遥 蕴怎
等咱员苑暂发现油质蛋白在转基因拟南芥中过量表达能够
改变拟南芥整个脂肪酸的组成袁杂澡蚤皂葬凿葬 等咱员愿暂研究发
源缘员
摇 圆 期 花生种子芽期耐低温相关基因克隆
图 源摇 花生油质蛋白基因的全长序列及其推导的氨基酸序列
云蚤早援 源摇 晕怎糟造藻燥贼蚤凿藻 泽藻择怎藻灶糟藻 葬灶凿 凿藻凿怎糟藻凿 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 泽藻择怎藻灶糟藻 燥枣 燥造藻燥泽蚤灶 蚤灶 责藻葬灶怎贼
图 缘摇 花生 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻蛋白基因的完整编码区及其推导的氨基酸序列
云蚤早援 缘摇 悦燥皂责造藻贼藻 悦阅杂 燥枣 责藻葬灶怎贼 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻 早藻灶藻 葬灶凿 蚤贼泽 凿藻凿怎糟藻凿 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 泽藻择怎藻灶糟藻
缘缘员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
图 远摇 几种植物中油质蛋白氨基酸序列比对
云蚤早援 远摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 燥造藻燥泽蚤灶 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 泽藻择怎藻灶糟藻 葬皂燥灶早 责藻葬灶怎贼 葬灶凿 燥贼澡藻则 泽责藻糟蚤藻泽
序列登录号院拟南芥渊晕孕赃员愿远愿园远冤袁油菜渊粤悦郧远怨缘园源冤袁油橄榄渊粤粤蕴怨圆源苑怨冤袁亚麻渊粤粤月园员远圆源冤
杂藻择怎藻灶糟藻 葬糟糟藻泽泽蚤燥灶 晕燥援 院 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬渊晕孕赃员愿远愿园远冤袁 月则葬泽泽蚤糟葬 灶葬责怎泽渊粤悦郧远怨缘园源冤袁 韵造藻葬 藻怎则燥责葬藻葬渊粤粤蕴怨圆源苑怨冤袁 蕴蚤灶怎皂 怎泽蚤贼葬贼蚤泽泽蚤皂怎皂渊粤粤月园员远圆源冤
图 苑摇 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻蛋白氨基酸序列比对分析
云蚤早援 苑摇 悦燥皂责葬则蚤泽燥灶 燥枣 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻 早藻灶藻 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 泽藻择怎藻灶糟藻 葬皂燥灶早 责藻葬灶怎贼 葬灶凿 燥贼澡藻则 泽责藻糟蚤藻泽
序列登录号院拟南芥渊粤粤酝远远员员源冤袁巨桉渊粤悦陨源苑缘员怨冤袁水稻渊晕孕赃园园员园缘远猿缘缘冤袁玉米渊晕孕赃园园员员源远怨猿猿冤
杂藻择怎藻灶糟藻 葬糟糟藻泽泽蚤燥灶 晕燥援 院 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬渊粤粤酝远远员员源冤袁 耘怎糟葬造赠责贼怎泽渊粤悦陨源苑缘员怨冤袁 韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬渊晕孕赃园园员园缘远猿缘缘冤袁 在藻葬 皂葬赠泽渊晕孕赃园园员员源远怨猿猿冤
现油质蛋白基因与拟南芥的耐寒性有关袁杂澡蚤皂葬凿葬 和
匀葬则葬鄄晕蚤泽澡皂怎则葬咱怨暂发现油质蛋白具有保持核结构稳定
的分子功能袁使种子能够在低温胁迫下正常萌发遥 本
研究亦表明袁该蛋白可能与花生的低温萌发有关遥
铁硫簇 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻是铁硫蛋白的重要组成成分袁广
泛参与电子传递尧氧气和铁离子的响应尧氧化还原势与
酶的活性调节及基因的表达调控等过程遥 目前关于铁
硫簇生物合成的研究主要集中于细菌和酵母袁而植物
中相关的研究刚刚起步咱圆园暂 遥 前人研究结果表明袁植物
中至少存在 杂哉云渊皂燥遭蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 泽怎造枣怎则冤尧陨杂悦渊蚤则燥灶鄄枣怎造枣怎则
糟造怎泽贼藻则冤和 悦陨粤渊糟赠贼燥泽燥造蚤糟 蚤则燥灶鄄泽怎造枣怎则 责则燥贼藻蚤灶 葬泽泽藻皂遭造赠冤三
大咱云藻鄄杂暂生物合成系统咱圆员暂 遥 陨杂哉 是 陨杂悦 系统中的关
键因子袁它作为铁硫簇装配的支架袁可接受 陨杂悦杂 从 蕴鄄
半胱氨酸脱下来的硫进而形成过渡态 咱圆云藻鄄圆杂暂或
咱源云藻鄄源杂暂簇袁并能将组装好的铁硫簇传递给目标蛋
白咱圆圆暂 遥 本试验获得了可能与花生耐低温相关的 灶蚤枣哉鄄
造蚤噪藻蛋白基因袁这是以前研究没有报道的遥
本研究利用耐低温花生品种花育 源源 号袁通过
郧藻灶藻云蚤泽澡蚤灶早技术获得了在常温和低温下差异表达的 圆
个基因要油质蛋白和 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻 蛋白基因袁并通过 砸栽鄄
远缘员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员猿袁圆苑渊圆冤院园员缘圆 耀 园员缘苑
图 愿摇 蛋白中的保守结构域
云蚤早援 愿摇 悦燥灶泽藻则增藻凿 凿燥皂葬蚤灶 燥枣 责则燥贼藻蚤灶
粤援油质蛋白中的保守结构域曰 月援 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻蛋白中的保守结构域
粤援 悦燥灶泽藻则增藻凿 凿燥皂葬蚤灶 燥枣 燥造藻燥泽蚤灶曰 月援 悦燥灶泽藻则增藻凿 凿燥皂葬蚤灶 燥枣 灶蚤枣哉鄄造蚤噪藻
择孕悦砸确认遥 但这 圆 个基因与花生耐低温特性的关系
尚需进一步通过转基因技术进行过表达和抑制表达加
以验证遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 韦善君袁 孙振元袁 巨关升袁韩摇 蕾袁余龙江援 冷诱导基因转录因
子 悦月云员 的组成型表达对植物的抗寒性及生长发育的影响
咱酝暂援 核农学报袁 圆园园缘袁员怨 渊远冤 院源远缘 原 源远愿
咱 圆 暂 摇 禹山林援 中国花生品种及其系谱咱酝暂援 上海院上海科学技术出版
社袁圆园园愿袁员圆院员
咱 猿 暂 摇 车摇 毅袁 史大臣袁 王树钿援 花生高产栽培咱酝暂援 北京院 中国农业
出版社袁员怨怨远院 员 原 员猿
咱 源 暂 摇 孙彦浩援 花生高产栽培咱酝暂援 北京院 金盾出版社袁 员怨怨员院 员苑 原 员愿
咱 缘 暂摇 封海胜援 花生种子在吸胀间耐低温性鉴定咱允暂 援 中国油料袁员怨怨员袁
员院远苑 原 苑园
咱 远 暂 摇 王晶珊袁 封海胜袁栾文琪援 低温对花生出苗的影响及耐低温种质
的筛选咱允暂 援中国油料袁员怨愿缘袁猿院圆愿 原 猿圆
咱 苑 暂 摇 唐月异袁 王传堂袁 高华援袁 凤摇 桐袁 张树伟袁 王秀贞袁 张建成袁
禹山林援 花生种子吸胀期间耐低温性及其与品质性状的相关研
究咱允暂 援核农学报袁圆园员员袁 圆缘渊猿冤院园源猿远 原 园源源圆
咱 愿 暂 摇 哉责葬凿澡赠葬赠葬 匀 阅袁 晕蚤早葬皂 杂 晕袁 杂蚤灶早澡 杂援 耘增葬造怎葬贼蚤燥灶 燥枣 早则燥怎灶凿灶怎贼 糟燥则藻
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