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Proteomics Analysis of Ram Sperm by Heavy Ion Radiation

重离子辐照对绵羊精子的蛋白质组学影响研究


本研究为了分析由重离子辐照引起的绵羊精子蛋白质组学变化,用二维凝胶电泳分离精子蛋白,凝胶用考马斯亮蓝染色。PDQuest8.0软件检测分析差异表达蛋白斑点并经高效液相色谱串联离子阱质谱鉴定。结果显示:辐照后的精子凝胶图谱上有4个蛋白质斑点表达上调,1个蛋白质斑点缺失,这5个蛋白质斑点经鉴定后,在国际生物信息学中心数据库搜索到相对应的2种蛋白质:烯醇酶和烯醇酶1,在辐照后的精子中这2种蛋白质表达上调。研究表明: 重离子辐照会引起绵羊精子蛋白质组学变化,通过对差异蛋白质的研究探索重离子辐照对绵羊精子生理功能的影响,为重离子辐照绵羊育种提供理论依据。


全 文 :摇 核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊员园冤院员源苑猿 耀 员源苑愿允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄园苑鄄员圆摇 接受日期院圆园员圆鄄员员鄄圆愿
基金项目院农业部转基因生物新品种培育重大专项渊圆园园愿在载园愿园园愿鄄园园猿冤袁甘肃省重大科技专项渊员员园圆晕运阅粤园圆圆冤袁国家重点基础研究发展计划
渊怨苑猿 计划冤渊圆园员园悦月愿猿源圆园圆冤袁国家自然科学基金渊圆园园愿月粤阅月圆月园源袁 圆园园愿月粤阅月圆月员园鄄苑冤袁甘肃省农业生物技术研究与应用渊郧晕杂宰鄄
圆园园愿鄄员缘冤援
作者简介院贺钰烜袁女袁主要从事临床兽医学研究遥 耘鄄皂葬蚤造院澡藻赠怎曾怎葬灶员圆圆远岳 员圆远援 糟燥皂
通讯作者院李鸿岩袁男袁主要从事辐射生物学与辐射医学研究遥 耘鄄皂葬蚤造院蕴蚤澡赠藻凿怎岳 员远猿援 糟燥皂
张勇袁男袁主要从事动物繁殖生物技术研究遥 耘鄄皂葬蚤造院扎澡赠糟澡赠岳 员远猿援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤园缘鄄员源苑猿鄄园远
重离子辐照对绵羊精子的蛋白质组学影响研究
贺钰烜员 摇 李鸿岩圆袁猿袁源袁缘 摇 张摇 红圆袁猿袁源 摇 张摇 勇员 摇 贺建华远 摇 李润红苑 摇 赵兴绪员
张摇 晶员 摇 张小宇员 摇 阚摇 威员 摇 李摇 展员 摇 王朝凤员 摇 马艳粉员
渊员甘肃农业大学动物医学院袁甘肃 兰州摇 苑猿园园苑园曰圆中国科学院近代物理研究所重离子辐射
医学研究室袁甘肃 兰州摇 苑猿园园园园曰猿中国科学院重离子束辐射生物医学重点实验室袁甘肃 兰州摇 苑猿园园园园曰
源甘肃省重离子束辐射医学应用基础重点实验室袁甘肃 兰州摇 苑猿园园园园曰缘中国科学院大学袁 北京摇 员园园园源怨曰
远甘肃省兰州市农业科学技术研究推广中心袁 甘肃 兰州摇 苑猿园园猿园曰苑甘肃省定西师范高等专科学校生化系袁甘肃 定西摇 苑源源园园园冤
摘摇 要院本研究为了分析由重离子辐照引起的绵羊精子蛋白质组学变化袁用二维凝胶电泳分离精子蛋白袁
凝胶用考马斯亮蓝染色遥 孕阅匝怎藻泽贼愿郾 园 软件检测分析差异表达蛋白斑点并经高效液相色谱串联离子阱
质谱鉴定遥 结果显示院辐照后的精子凝胶图谱上有 源 个蛋白质斑点表达上调袁员 个蛋白质斑点缺失袁这 缘
个蛋白质斑点经鉴定后袁在国际生物信息学中心数据库搜索到相对应的 圆 种蛋白质院烯醇酶和烯醇酶
员袁在辐照后的精子中这 圆 种蛋白质表达上调遥 研究表明院 重离子辐照会引起绵羊精子蛋白质组学变
化袁通过对差异蛋白质的研究探索重离子辐照对绵羊精子生理功能的影响袁为重离子辐照绵羊育种提供
理论依据遥
关键词院绵羊曰二维凝胶电泳分析曰蛋白质组曰重离子辐射
摇 摇 重离子束与 曾 射线尧酌 射线尧电子束相比袁传能线
密度渊蕴蚤灶藻葬则 耘灶藻则早赠 栽则葬灶泽枣藻则袁 简称 蕴耘栽冤和诱变效率
高袁重离子束辐照诱变育种已经应用于水稻咱员暂 尧小
麦咱圆暂 尧玉米咱猿暂等农作物的诱变选育袁但该技术在哺乳
动物的遗传育种研究中应用较少袁原因在于样本量的
局限和不同组织阈剂量的不稳定遥 要达到植物遗传选
育的样本量需要消耗巨大的人力和物力袁此外袁对于哺
乳动物而言袁很小的辐照剂量就会产生不利的变异遥
该技术与转基因技术相结合袁改变了辐照哺乳动物育
种的局限性袁为研究人员提供了更广阔的研究思路遥
精子是一种终末分化的极性细胞咱源暂 袁精子经历一
些必要的激活过程袁包括从附睾释放后的运动激活尧获
能及顶体发生袁使精子获得与卵母细胞结合的能
力咱缘暂 遥 低剂量重离子辐射能够显著引起小鼠睾丸和
人精子的适应性应答反应遥 将小鼠睾丸预先暴露于低
剂量重离子辐照可以明显缓和随后高剂量辐照所造成
的损伤效应咱远暂 遥 精子的强适应性使其在辐照过程中
不易突变袁最大限度的维持了亲代基因组稳定性遥 同
时精子较其他细胞容易获得袁而且可以完成体外受精
培育子代遥 因此袁精子是本研究的最佳试验材料遥
蛋白质组学是发现差异表达蛋白质袁用于阐明动
物生殖品质的生物化学和生物物理机制的强有力工
具咱苑暂 遥 本研究作为项目的前期工作袁利用双向电泳技
术分析 圆 郧赠 碳离子辐照绵羊精子后的差异表达蛋白
质袁并对差异表达蛋白质与辐照过程中精子功能改变
的关系作了分析袁探讨碳离子辐射对绵羊精子生理功
能的影响袁为后期研究做准备遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 供试材料
主要试剂院员苑糟皂 固相非线性 责匀 值梯度胶条 责匀
猿苑源员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
值 猿 耀 员园渊悦葬贼援 晕燥援 员远猿 原 圆园园怨冤为 月蚤燥鄄砸葬凿 公司产品曰
陨孕郧 月怎枣枣藻则 责匀 猿 耀 员园 孕则燥贼藻葬泽藻 陨灶澡蚤遭蚤贼燥则 渊悦葬贼援 晕燥援 愿园 原
远缘园员 原 圆猿冤为 粤皂藻则泽澡葬皂 月蚤燥泽糟蚤藻灶糟藻泽 公司产品曰阅酝耘酝
培养液尧悦匀粤孕杂尧矿物油尧二硫苏糖醇渊阅栽栽冤尧栽则蚤扎燥造 和
低熔点琼脂糖为 粤皂则藻泽糟燥 公司产品曰三渊羟甲基冤氨基
甲烷渊栽则蚤泽冤尧甘氨酸尧四甲基乙二胺渊栽耘酝耘阅冤尧丙烯酰
胺尧甲叉双丙烯酰胺尧过硫酸胺尧硫脲尧碘乙酰胺尧尿素尧
考马斯亮蓝 郧 原圆缘园尧十二烷基硫酸钠渊杂阅杂冤和溴酚蓝
为 杂蚤早皂葬公司产品曰蛋白质 酝葬则噪藻则 为 枣藻则皂藻灶贼葬泽 公司曰
其余药品均为国产分析纯试剂遥
主要设备院孕砸韵栽耘粤晕 陨耘云 悦藻造造系统尧孕砸韵鄄栽耘粤晕域
曾蚤系统及 孕阅匝怎藻泽贼 愿郾 园 图像分析软件渊月蚤燥鄄砸葬凿 公司冤袁
酝蚤造造蚤鄄匝 超 纯 水 系 统 渊 酝蚤造造蚤责燥则藻 公 司 冤袁 耘责责藻灶凿燥则枣
悦藻灶贼则蚤枣怎早藻 缘源员苑砸高速低温离心机袁哉圆愿园园 紫外可见分
光光度计 渊匀陨栽粤悦匀陨 公司冤袁倒置显微镜 渊 陨载 原 苑员袁
韵造赠皂责怎泽袁 日本冤袁哉酝粤载 扫描仪渊台湾冤和涡旋仪渊北
京六一公司冤遥
员郾 圆摇 方法
员郾 圆郾 员摇 精液标本采集摇 采用假阴道法咱愿暂人工采集 缘
头性成熟并健康的得克赛尔公羊精液袁加等量精子稀
释液咱怨 原 员园暂 渊每 员园园皂蕴稀释液中含 栽则蚤泽 圆郾 源圆圆 早袁柠檬酸
钠 圆郾 远愿 早袁果糖 园郾 缘 早袁青霉素尧链霉素各 缘 万 陨哉冤混
匀袁在 猿苑益水温的保温桶避光液化 猿园皂蚤灶遥 在净化工
作台袁按每组 圆皂蕴 等分为 圆 组袁即对照组和辐照组遥
每组均吸取 缘 滋蕴样本分别与 怨缘 滋蕴生理盐水混合袁滴
于细胞计数板上袁置于 圆园园 倍倒置显微镜下袁评定精子
成活率遥
员郾 圆郾 圆摇 照射摇 重离子束辐照实验在中国科学院近代
物理研究所的重离子研究装置渊匀藻葬增赠 陨燥灶 砸藻泽藻葬则糟澡
云葬糟蚤造蚤贼赠 蚤灶 蕴葬灶扎澡燥怎袁 匀陨砸云蕴冤辐照终端进行袁束流为
员圆悦远 垣离子束袁能量为 圆园园 酝藻灾窑怎 原员袁蕴耘栽 为 圆愿 噪藻灾窑
滋皂 原员袁吸收剂量率约 园郾 缘 郧赠窑皂蚤灶 原员袁吸收剂量为 圆 郧赠遥
用空气电离室监测剂量袁计算机控制剂量数据获取袁所
有样品照射都在室温下进行遥 照完后用 猿苑益水温的
保温桶迅速带回实验室遥
员郾 圆郾 猿摇 精子蛋白制备摇 辐照后 猿园皂蚤灶 内提取精子蛋
白袁采用改进的上游法咱员员暂分离高活力精子院两组精液
经 源园园早尧源益离心 员缘皂蚤灶袁上清精浆分别标号置于 源益冰
箱备用遥 精子团用 圆郾 缘皂蕴 的 阅酝耘酝培养液重悬浮袁置
于 缘豫 悦韵圆尧猿苑益孵育 员 澡遥 收集悬浮液袁并取 员园 滋蕴置
于显微镜下进行精子计数尧检测精子成活率遥 精子悬
浮液经 远园园园早尧源益离心 缘皂蚤灶袁弃上清遥 用 园郾 圆缘皂燥造窑蕴 原员
蔗糖渊含 缘皂皂燥造窑蕴 原员 栽则蚤泽冤溶液重悬沉淀袁缘园园园早尧源益离
心 员园皂蚤灶袁沉淀重复洗涤 猿 次遥 采用改进的热 栽则蚤扎燥造 法
制备精子蛋白咱员圆暂 遥 精子蛋白沉淀溶解于约 员园 滋蕴 裂
解液 渊愿皂燥造窑蕴 原员尿素袁圆皂燥造窑蕴 原员硫脲袁源豫 悦匀粤孕杂袁
远缘皂皂燥造窑蕴 原员 阅栽栽冤遥 采用 月则葬凿枣燥则凿 法定量蛋白质咱员猿暂 袁
根据定量结果调整上样量遥
员郾 圆郾 源摇 精浆蛋白制备摇 改进的丙酮沉淀法咱员源暂制备精
浆蛋白质院将标号的精浆与 源 倍体积的冰丙酮混合过
夜袁用 怨园 豫冰丙酮洗沉淀物 猿 次袁员园园园园早尧源益离心
缘皂蚤灶沉淀蛋白袁最后用无水乙醇洗涤蛋白 猿 次袁自然
晾干 缘皂蚤灶遥 晾干后的精浆蛋白沉淀溶解于约 员园 滋蕴
裂解液 渊愿皂燥造窑蕴 原员 尿素袁 源豫 悦匀粤孕杂袁 远缘皂皂燥造窑蕴 原员
阅栽栽冤遥 采用 月则葬凿枣燥则凿 法定量蛋白质咱员猿暂 袁根据定量结
果调整上样量遥
员郾 猿摇 双向电泳
员郾 猿郾 员摇 等电聚焦渊 陨泽燥藻造藻糟贼则蚤糟 云燥糟怎泽蚤灶早袁 陨耘云冤电泳摇 等
电聚焦程序院先 缘园灾主动水化 员猿 澡袁然后 圆缘园灾尧员园园园灾
分别线性除盐 员澡袁线性升压 缘 澡 至 员园园园园灾 后袁线性聚
焦到 远园袁园园园灾澡袁最后 缘园园灾保持 圆源 澡遥 将 猿缘园 滋早精子
蛋白尧 远缘园 滋早 精浆蛋白样品分别与上样缓冲液
渊愿皂燥造窑蕴 原员尿素袁圆皂燥造窑蕴 原员硫脲袁源豫 悦匀粤孕杂袁远缘皂皂燥造窑
蕴 原员 阅栽栽袁园郾 缘豫 陨孕郧 月怎枣枣藻则袁痕量溴酚蓝冤均匀混合袁总
体积为 猿缘园 滋蕴袁然后将混合液缓慢加入聚焦盘中遥 胶
条朝下按正负极覆盖在样品之上袁盖上矿物物油遥 最
后将聚焦盘置于 孕砸韵栽耘粤晕 陨耘云 悦藻造造 电泳仪中进行等
电聚焦遥
员郾 猿郾 圆摇 杂阅杂鄄孕粤郧耘电泳及染色摇 等电聚焦结束袁将胶
条分别置于 远皂蕴平衡 粤 液渊缘园皂皂燥造窑蕴 原员 栽则蚤泽鄄匀悦造袁责匀
值 愿郾 愿袁远皂燥造窑蕴 原员尿素袁圆园豫甘油袁圆豫 杂阅杂袁圆豫 阅栽栽冤
和 远皂蕴 平衡 月 液渊缘园皂皂燥造窑蕴 原员 栽则蚤泽鄄匀悦造袁责匀 值 愿郾 愿袁
远皂燥造窑蕴 原员尿素袁圆园豫甘油袁圆豫 杂阅杂袁圆郾 缘豫碘乙酰胺冤袁
在水平摇床上各平衡 员缘皂蚤灶袁然后进行第二向垂直电
泳遥
员郾 猿郾 猿摇 凝胶染色和图像分析摇 凝胶采用考马斯亮蓝
染色咱员缘暂 遥 考染后的凝胶图谱用 孕阅匝怎藻泽贼愿郾 园 软件分
析遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 精子蛋白质 圆阅 电泳图谱结果 摇 利用 孕阅匝怎藻泽贼
愿郾 园 软件在精子 圆阅 凝胶上检测到 员远苑 依 员园 个蛋白质
斑点袁对照与辐照精子 圆阅 凝胶的匹配率为 远怨豫 遥 差
异标准是以 孕阅匝怎藻泽贼 愿郾 园 软件分析为基础袁软件系统
自动检测匹配袁以蛋白表达谱上野斑点染色强度和面
积 猿 倍量的变化冶为标准进行差异分析袁检测差异表
达的蛋白斑点遥 软件分析结合人工确定袁辐照组与对
源苑源员
摇 员园 期 重离子辐照对绵羊精子的蛋白质组学影响研究
照组差异蛋白质斑点共有 缘 个袁在辐照精子凝胶上袁源
个蛋白质斑点表达上调袁员 个蛋白质斑点缺失渊图 员尧
图 圆冤遥
圆郾 圆摇 精浆蛋白质 圆阅电泳图谱结果
利用 孕阅匝怎藻泽贼 愿郾 园 软件在精浆 圆阅 凝胶上检测到
员愿苑 依 缘 蛋个白质斑点袁对照与辐照精浆 圆阅 凝胶的匹
配率为 远猿豫 遥 差异标准是以 孕阅匝怎藻泽贼 愿郾 园 软件分析为
基础袁软件系统自动检测匹配袁以蛋白表达谱上野斑点
染色强度和面积 猿 倍量的变化冶为标准进行差异分
析遥 经检测和分析袁在对照和辐照精浆 圆阅 凝胶上没
有检测到差异表达蛋白质斑点渊图 猿冤遥
注院粤院对照精子曰月院辐照精子遥 蛋白质点序号与表 员 对应遥 酝憎院分子量曰杂阅杂院杂阅杂聚丙烯凝胶电泳遥
晕燥贼藻院 粤院 悦澡藻糟噪曰 月院 陨则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶曰 酝葬则噪藻凿 泽责燥贼 灶怎皂遭藻则泽 则藻枣藻则 贼燥 灶怎皂遭藻则泽 蚤灶 贼葬遭造藻 员援 酝憎院 酝燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 皂葬则噪藻则曰
杂阅杂袁 泽燥凿蚤怎皂 凿燥凿藻糟赠造援 泽怎造责澡葬贼藻 责燥造赠葬糟则赠造葬皂蚤凿藻 早藻造 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽援
图 员摇 精子蛋白质 圆阅 电泳结果
云蚤早援 员摇 圆 原 阅耘 早藻造泽 燥枣 泽责藻则皂责则燥贼藻蚤灶
表 员摇 差异蛋白点质谱鉴定结果
栽葬遭造藻 员摇 陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬造 责则燥贼藻蚤灶泽 遭赠 皂葬泽泽 泽责藻糟贼则燥皂藻贼则赠
蛋白质
斑点
孕则燥贼藻蚤灶
泽责燥贼
蛋白质名称
孕则燥贼藻蚤灶 灶葬皂藻
登录号
粤糟糟藻泽泽蚤燥灶
等电点曰
分子量
责陨曰 酝憎
氨基酸序列
杂藻择怎藻灶糟藻
得分
杂糟燥则藻
覆盖率
悦燥增藻则葬早藻 辕 豫
圆 耘灶燥造葬泽藻咱韵增蚤泽 葬则蚤藻泽暂 苑猿猿员员员猿 缘郾 圆愿 辕 员员怨缘怨郾 缘远
匀粤郧晕运蕴粤酝匝耘云酝陨蕴孕灾郧粤杂杂云砸耘粤酝砸陨郧粤耘灾再匀匀蕴运郧鄄
灾陨运粤运再郧运阅粤栽晕灾郧阅耘郧郧云粤孕晕陨蕴耘晕晕耘粤蕴耘蕴蕴运栽粤陨匝鄄
粤粤郧再孕阅运灾灾陨郧酝阅灾粤粤杂耘云再砸晕郧运再阅蕴阅云运杂孕阅阅孕
猿园郾 圆 员圆郾 苑猿豫
猿 耘灶燥造葬泽藻 员咱韵增蚤泽 葬则蚤藻泽暂 圆园愿源圆苑园苑圆 怨郾 怨怨 辕 猿圆猿远郾 苑圆 再晕匝陨蕴砸 陨耘耘耘 蕴郧杂运粤运云粤郧砸 杂云砸晕孕蕴粤运 远园郾 圆 苑愿郾 缘苑豫
摇 摇 注院划线部分显示匹配肽段遥 责陨院等电点曰酝憎院分子量遥
晕燥贼藻院栽澡藻 怎灶凿藻则造蚤灶藻泽 泽贼葬灶凿 枣燥则 贼澡藻 责葬则贼蚤葬造 责藻责贼蚤凿藻泽 燥枣 泽责燥贼泽 皂葬贼糟澡藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 葬皂蚤灶燥 葬糟蚤凿泽援 责陨院 陨泽燥藻造糟贼则蚤糟 责燥蚤灶贼曰 酝憎院 酝燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼援
圆郾 猿摇 差异蛋白的分析和鉴定
缘 个差异蛋白质斑点经高效液相色谱串联离子阱
质谱渊蕴悦鄄酝杂 辕 酝杂冤分析袁用质谱仪上的 月蚤燥憎燥则噪泽 软件
中的检索软件 杂耘匝哉耘杂栽 搜索 晕悦月陨灶则 蛋白质数据库袁
有 圆 个蛋白质斑点渊点 圆尧猿冤可搜索到相应的匹配结果
渊表 员冤袁点 圆 鉴定为烯醇酶袁点 猿 鉴定为烯醇酶 员袁这 圆
种蛋白质在辐照绵羊精子中均表达上调遥
猿摇 讨论
猿郾 员 剂量选择
缘苑源员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
注院葬院辐照后表达上调的蛋白质斑点曰遭院辐照后缺失的蛋白质斑点曰玉院对照组 圆 原 阅胶上的目标蛋白质点曰
域院辐照组 圆 原 阅胶上相应位置的目标蛋白质点遥
晕燥贼藻院葬院 哉责 则藻早怎造葬贼藻凿 责则燥贼藻蚤灶 泽责燥贼泽 葬枣贼藻则 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶曰 遭院 粤遭泽藻灶贼 责则燥贼藻蚤灶 泽责燥贼 葬枣贼藻则 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶曰 玉院 栽葬则早藻贼 责则燥贼藻蚤灶 泽责燥贼泽 蚤灶 圆 原 阅 早藻造 燥枣 糟澡藻糟噪曰
域院栽澡藻 责则燥贼藻蚤灶 泽责燥贼泽 蚤灶 糟燥则则藻泽责燥灶凿蚤灶早 责燥泽蚤贼蚤燥灶葬造 蚤灶 圆 原 阅 早藻造 葬枣贼藻则 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶援
图 圆摇 差异表达蛋白质点
云蚤早援 圆摇 阅蚤枣枣藻则藻灶贼造赠 藻曾责则藻泽泽藻凿 责则燥贼藻蚤灶 泽责燥贼泽援
注院悦院对照精浆曰阅院辐照精浆遥 蛋白质点序号与表 员 对应遥 酝憎院分子量曰杂阅杂院杂阅杂聚丙烯凝胶电泳遥
晕燥贼藻院悦院 悦澡藻糟噪曰 阅院 陨则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶曰 酝憎袁 酝燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 皂葬则噪藻则曰 杂阅杂袁 泽燥凿蚤怎皂 凿燥凿藻糟赠造 泽怎造责澡葬贼藻 责燥造赠葬糟则赠造葬皂蚤凿藻 早藻造 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽援
图 猿摇 精浆蛋白质 圆阅电泳结果
云蚤早援 猿摇 圆 原 阅耘 早藻造泽 燥枣 泽藻皂蚤灶葬造 责造葬泽皂葬责则燥贼藻蚤灶
辐照剂量对本研究很重要袁本研究就剂量的选取
做了很多相关工作袁同时也研究了选取的最高剂量渊猿
郧赠冤与低剂量渊园郾 缘 郧赠冤辐照精子后的蛋白质变化袁结
果发现袁与对照组精子相比袁猿 郧赠 与 园郾 缘 郧赠 辐照组精
子共同表达的差异蛋白质有 愿 个咱员远暂 遥 云燥扎蚤葬等咱员苑暂在研
究小鼠精子对 载 射线辐照后的恢复能力时选用了 员
郧赠剂量袁本研究选用 圆 郧赠剂量袁是为了从较大范围探
讨绵羊精子对重离子辐射的耐受性遥
远苑源员
摇 员园 期 重离子辐照对绵羊精子的蛋白质组学影响研究
猿郾 圆摇 分析精浆的目的
悦葬燥等咱员愿暂研究发现人的精子在冷冻过程中热休
克蛋白 怨园 的表达明显减少袁但减少的热休克蛋白 怨园
却没在精浆中发现遥 说明热休克蛋白 怨园 没有从精子
外流袁可能在冷冻过程中被降解或修饰遥 研究精浆是
为了分析缺失的蛋白是否从辐照精子外流袁可以间接
的反应辐照对精子质膜的影响遥 在精浆中没有发现缺
失的蛋白质袁表明该缺失蛋白质在辐照过程中被降解
或修饰遥
猿郾 猿摇 烯醇酶和烯醇酶 员
烯醇酶是由 蕴燥澡皂葬灶 和 酝葬赠藻则澡燥枣 于 员怨猿源 共同发
现袁它是一种糖酵解酶袁催化 圆 原磷酸甘油酸脱水产生
磷酸烯醇式丙酮酸咱员怨暂 遥 灾藻则燥灶蚤噪葬 等咱圆园暂研究发现在成
熟精子里烯醇酶含量丰富袁而在初级精母细胞和圆头
精子里含量较少遥 烯醇酶有 圆 种亚基袁耘晕韵 原 琢琢 与异
形尧未成熟精子有关袁而 耘晕韵鄄杂 与成熟尧正常的精子有
关咱圆员暂 遥 尽管烯醇酶 员 是细胞质内的糖酵解酶袁但在单
核细胞表面同样可以检测到袁烯醇酶 员 与细胞表面的
纤维蛋白溶酶原结合能够促进产生血纤维蛋白溶解
酶咱圆圆暂 遥 李鸿岩等咱员远暂研究了两种剂量重离子辐照渊园郾 缘
郧赠和 猿 郧赠冤对绵羊精子蛋白质组学的影响袁结果发现
在这 圆 种剂量辐照后的绵羊精子中烯醇酶表达均上
调曰他们对绵羊精子冻融前后差异蛋白质组学分析发
现袁烯醇酶和烯醇酶 员 在冻融精子中表达下调袁推测烯
醇酶和烯醇酶 员 可能与冷冻使精子的活力改变有
关咱圆猿暂 遥 烯醇酶和烯醇酶 员 在 圆 郧赠 重离子辐照绵羊精
子高表达袁可能是一种有利的作用袁因为烯醇酶使精子
产生足量的 粤栽孕袁增加精子活力袁从而免受重离子辐射
损伤遥 本试验与此前研究结果共同说明袁重离子辐射
会引起精子能量代谢的改变袁影响精子活力遥
源摇 结论
重离子辐照会引起绵羊精子蛋白质组学变化袁在
今后的试验中将进一步结合其他试验技术袁研究和探
讨烯醇酶与烯醇酶 员 在重离子辐照绵羊精子过程中的
功能袁揭示它们与精子活力的关系袁并进一步细化辐照
剂量对绵羊精子蛋白质组学的影响袁为重离子辐照绵
羊精子差异蛋白质组学研究和辐照绵羊育种提供理论
依据遥
参考文献院
咱 员 暂摇 庄楚雄袁胡维民袁梅曼彤援 高能重离子辐射诱导水稻半矮生突变
株系的 砸云蕴孕分析咱允暂 援 核农学报袁 员怨怨苑袁员员渊圆冤 院苑源 原 苑愿
咱 圆 暂摇 颉红梅袁卫增泉袁李兴林袁王浩瀚袁赵莲芝袁谢忠奎援 重离子束注
入小麦胚乳诱发的突变效应咱 允暂 援 核农学报袁圆园园源袁员愿渊圆冤院怨猿 原
怨远援
咱 猿 暂 摇 罗红兵袁赵葵袁周文新袁倪媚楠袁屠乃美袁孔福全援 重离子辐射诱
导玉米雄性不育突变系的遗传研究咱允暂 援 核农学报袁圆园园愿袁圆圆渊猿冤
院圆怨远 原 圆怨怨援
咱 源 暂 摇 杂藻造增葬则葬躁 灾袁 粤泽葬灶燥 粤袁 月怎贼贼噪藻 阅 耘袁 杂藻灶早怎责贼葬 孕袁 宰藻蚤泽泽 砸 杂袁 栽则葬增蚤泽
粤 允援 酝藻糟澡葬灶蚤泽皂葬 怎灶凿则藻造赠蚤灶早 贼澡藻 皂蚤糟则燥灶鄄泽糟葬造藻泽藻早则藻早葬贼蚤燥灶 燥枣 泽贼藻则燥造泽
葬灶凿 郧 酝员 蚤灶 造蚤增藻 皂葬皂皂葬造蚤葬灶 泽责藻则皂 咱 允 暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 悦藻造造怎造葬则
孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园园怨袁 圆员愿渊猿冤院 缘圆圆 原 缘猿远援
咱 缘 暂 摇 耘泽责燥泽蚤贼燥 郧袁 允葬蚤泽憎葬造 月 杂袁 载蚤藻 云袁 运则葬躁灶糟鄄云则葬灶噪藻灶 酝 粤袁 砸燥遭遭藻灶 栽 允袁
杂贼则蚤噪 粤 酝袁 运怎蚤造 悦袁 孕澡蚤造蚤责泽藻灶 砸 蕴袁 增葬灶 阅怎蚤灶 酝袁 悦燥灶贼蚤 酝袁 郧燥泽泽藻灶 允
粤援 酝蚤糟藻 凿藻枣蚤糟蚤藻灶贼 枣燥则 泽燥造怎遭造藻 葬凿藻灶赠造赠造 糟赠糟造葬泽藻 葬则藻 蚤灶枣藻则贼蚤造藻 遭藻糟葬怎泽藻 燥枣
葬 泽藻增藻则藻 泽责藻则皂鄄皂燥贼蚤造蚤贼赠 凿藻枣藻糟贼 咱 允 暂 援 孕则燥糟藻藻凿蚤灶早泽 燥枣 贼澡藻 晕葬贼蚤燥灶葬造
粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 圆园园源袁员园员渊怨冤院 圆怨怨猿 原 圆怨怨愿援
咱 远 暂 摇 在澡葬灶早 匀袁 蕴蚤 宰 允袁 在澡藻灶早 砸 蕴援 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 造燥憎鄄凿燥泽藻 澡藻葬增赠 蚤燥灶
蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 燥灶 皂葬造藻 早藻则皂 糟藻造造 葬凿葬责贼葬贼蚤燥灶 葬灶凿 早藻灶藻贼蚤糟泽 咱 允暂 援 晕怎糟造藻葬则
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