全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊愿冤院员缘猿怨 耀 员缘源远允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员源鄄园愿鄄员怨摇 接受日期院圆园员缘鄄园圆鄄园猿
基金项目院福建省财政专项要福建省农业科学院科技创新团队重点科研项目渊悦载栽阅圆园员员 原 员远冤
作者简介院赖谱富袁男袁助理研究员袁主要从事农产品加工技术的研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 造葬蚤责怎枣怎岳 员远猿援 糟燥皂
通讯作者院陈君琛袁男袁研究员袁主要从事农产品加工及功能营养研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 躁怎灶糟澡藻灶糟糟岳 泽蚤灶葬援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤园愿鄄员缘猿怨鄄园愿
多年生藤本豆总黄酮纯化及抑菌活性研究
赖谱富摇 赖锋连摇 陈君琛摇 沈恒胜
渊福建省农业科学院农业工程技术研究所 辕福建省农业科学院农产品加工研究中心 辕
国家食用菌加工技术研发分中心袁福建 福州摇 猿缘园园园猿冤
摘摇 要院本研究以脱脂多年生藤本豆粉为原料袁采用 缘园豫乙醇浸提法提取多年生藤本豆总黄酮袁研究树
脂纯化多年生藤本豆总黄酮的工艺条件及其抑菌活性遥 以吸附率和解吸率为指标袁通过考察 粤月 原 愿尧
匀孕阅员园园 圆 种大孔树脂及聚酰胺树脂对多年生藤本豆总黄酮的吸附解吸性能袁筛选出适合多年生藤本豆
总黄酮分离纯化的树脂为聚酰胺曰结合静态与动态吸附解吸试验袁得出聚酰胺树脂分离纯化多年生藤本
豆总黄酮的最佳工艺为院上样浓度 园郾 猿员 皂早窑皂蕴 原员尧责匀值 缘尧流速 员郾 缘 月灾窑澡 原员袁此条件下吸附量为 猿源郾 园员
皂早窑皂蕴 原员袁解吸时宜选用 苑园豫乙醇溶液遥 多年生藤本豆总黄酮粗提物和纯化物对大肠杆菌尧金黄色葡
萄球菌及枯草芽孢杆菌均具有明显的抑制作用袁抑菌活性随着浓度的增大而增强袁但同浓度下藤本豆总
黄酮粗提物对大肠杆菌尧枯草芽孢杆菌的抑菌活性高于纯化物曰浓度低于 猿园 皂早窑皂蕴 原员时袁藤本豆总黄酮
粗提物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性高于纯化物曰高于 猿园 皂早窑皂蕴 原员时则相反遥 研究结果为多年生藤本
豆总黄酮活性成分的综合开发利用提供了一定的实践依据遥
关键词院多年生藤本豆曰总黄酮曰纯化曰抑菌活性曰聚酰胺
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 园愿援 员缘猿怨
摇 摇 多年生藤本豆渊蕴葬遭造葬遭 泽责援 冤是利用野生藤豆母本
雄性不育与大油豆杂交而培育出的一种高效农业蔬菜
新物种咱员暂 遥 其产量高咱圆暂 袁含有优质的卵磷脂尧蛋白质
及纤维咱猿暂 袁是一种 猿 色高档森林食品袁兼具粮尧菜尧林尧
花尧药于一体袁具有很好的综合优良特性袁是营养价值
高的食品原料咱源 原 远暂 遥 目前袁对于多年生藤本豆的研究
主要针对其蛋白质尧多糖等活性物质及栽培技术等方
面遥 研究表明袁多年生藤本豆多糖尧蛋白质对小白鼠均
具有提高机体免疫防御能力咱苑 原 愿暂 曰多肽具有降低血清
胆固醇尧抗氧化作用咱怨暂 曰裂解肽具有显著抗氧化尧抗疲
劳和免疫功能咱缘暂 袁在医药保健及美容等方面具有重要
利用价值和发展前景咱员园暂 遥 在已有的报道中袁陈君琛
等咱员员暂发明了一种采用速冻与脉冲技术提高藤本豆总
黄酮提取率的方法袁赵丹丹等咱猿暂开展了多年生藤本豆
总黄酮抗氧化的研究袁但目前尚未见关于多年生藤本
豆总黄酮分离纯化及抑菌活性的报道遥 为此袁本文在
选用乙醇振荡浸提法对多年生藤本豆总黄酮进行提
取袁通过正交试验研究藤本豆总黄酮的分离纯化工艺袁
并比较藤本豆总黄酮粗提物及纯化物的抑菌效果袁以
期为进一步开发多年生藤本豆资源提供依据遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料与试剂
多年生藤本豆取自福建省永泰县塘前乡栽培基
地袁远园益烘干尧粉碎后过 员圆 目筛遥 芦丁标准品渊成都曼
思特生物科技有限公司冤尧盐酸尧氢氧化钠尧无水乙醇尧
硝酸铝尧亚硝酸钠均为分析纯遥
聚酰胺树脂尧粤月 原 愿 树脂及 匀孕阅员园园 均来自天津
南开大学化工厂袁其基本特性如表 员 所示遥
员郾 圆摇 仪器与设备
杂孕 原 苑缘远孕型紫外分光光度计渊上海光谱仪器有限
公司冤曰月杂圆园园园杂型电子天平渊北京赛多利斯天平有限
公司冤曰杂匀月 原芋型循环水式多用真空泵渊郑州长城科
怨猿缘员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
摇 摇 摇 摇 表 员摇 猿 种吸附树脂的物理性能
栽葬遭造藻 员摇 孕澡赠泽蚤糟葬造 责则燥责藻则贼蚤藻泽 燥枣 贼澡则藻藻 噪蚤灶凿泽 燥枣 皂葬糟则燥责燥则燥怎泽 则藻泽蚤灶泽
型号
酝燥凿藻造
极性
孕燥造葬则蚤贼赠
比表面积
杂责藻糟蚤枣蚤糟 泽怎则枣葬糟藻 葬则藻葬 辕 渊皂圆窑早 原员 冤
平均孔径
粤增藻则葬早藻 责燥则藻 辕 灶皂
外观
粤责责藻葬则葬灶糟藻
粤月 原 愿 弱极性 源愿园 耀 缘圆园 员猿园 耀 员源园 乳白色不透明小球
聚酰胺 极性 缘 耀 员园 猿园 耀 远园 米色不透明小球
匀孕阅员园园 非极性 远缘园 耀 苑园园 愿缘 耀 怨园 乳白色不透明小球
工贸有限公司冤曰杂孕匀 原员园猿月型恒温培养振荡器渊上海
世平实验设备有限公司冤曰玻璃层析柱渊上海沪西分析
仪器厂冤曰砸耘 原缘园员 型旋转蒸发仪渊上海亚荣生化仪器
厂冤遥
员郾 猿摇 试验方法
员郾 猿郾 员摇 多年生藤本豆总黄酮粗提液的制备摇 准确称
取多年生藤本豆粉 缘园园 早袁按料液比为 员颐 猿缘 的比例加
入 缘园豫的乙醇袁远园益条件下振荡提取 猿 澡袁提取液减压
抽滤袁滤液在 源园 益下旋转蒸发浓缩至无醇味得藤本豆
总黄酮粗提液遥
员郾 猿郾 圆摇 多年生藤本豆总黄酮的测定摇 采用芦丁比色
法咱员圆暂测定多年生藤本豆总黄酮含量遥 根据测定结果袁
用最小二乘法进行线性回归袁得芦丁标准曲线回归方
程 粤 越远郾 猿远愿猿悦 原 园郾 园园圆渊砸圆 越 园郾 怨怨怨愿冤遥 式中袁悦 为芦
丁标准品浓度横坐标袁粤为吸光度值遥
精密吸取多年生藤本豆总黄酮样品溶液 圆郾 园 皂蕴
至 员园 皂蕴带塞玻璃管中袁按上述方法进行显色后袁根据
芦丁标准曲线计算多年生藤本豆总黄酮的含量遥
员郾 猿郾 猿摇 树脂的预处理及装柱方法
员援 猿援 猿援 员 摇 树脂的预处理咱员猿暂 摇 树脂用 怨缘豫的乙醇浸
泡袁淋洗至洗脱液与水混合不呈白色浑浊为止袁蒸馏水
洗至无醇味曰然后用 缘豫的盐酸溶液淋洗浸泡 源 澡袁蒸
馏水冲洗至中性曰再用 缘豫的氢氧化钠溶液淋洗浸泡 源
澡袁蒸馏水冲洗至中性曰最后沥干水分袁备用遥
员援 猿援 猿援 圆摇 装柱方法咱员源暂 摇 将层析柱垂直固定在铁架台
上袁关闭活塞袁先加入一定量蒸馏水袁接着将吸附树脂
水溶液均匀的倒入吸附柱中袁边倒入边用玻棒搅拌曰并
不断往柱中加入蒸馏水袁直到所有的大孔树脂全部转
移到柱中曰最后用蒸馏水淋洗 猿园 皂蚤灶遥
员郾 猿郾 源摇 树脂的筛选
员郾 猿郾 源郾 员摇 静态吸附动力学试验摇 准确称取已经处理
好的 猿 种渊粤月 原 愿尧匀孕阅员园园尧聚酰胺冤树脂 圆郾 园园 早 于三
角瓶中袁分别加入 缘园 皂蕴浓度为 园郾 猿员 皂早窑皂蕴 原员的藤本
豆总黄酮粗提液袁加塞袁置于振荡器上袁猿园 益尧员圆园
则窑皂蚤灶 原员振荡条件下吸附袁定时从上清液中取样袁测定
溶液中总黄酮的浓度袁计算吸附量及吸附率咱员缘暂 遥
员郾 猿郾 源郾 圆摇 静态解析动力学试验摇 用去离子水洗上述
充分吸附藤本豆总黄酮粗提液的 猿 种树脂袁过滤后用
滤纸吸干水分后装入三角瓶中袁分别加入 愿园豫的乙醇
缘园 皂蕴袁置振荡器上 猿园 益尧员圆园 则窑皂蚤灶 原员振荡袁定时从上
清液中取样袁测定溶液中总黄酮的浓度袁计算解吸量及
解吸率咱员缘暂 遥
员郾 猿郾 缘摇 聚酰胺树脂纯化工艺动态吸附条件优化
员郾 猿郾 缘郾 员摇 上柱速率的选择摇 将对藤本豆总黄酮吸附
及解析效果最佳的聚酰胺大孔树脂装柱袁分 源 份袁每份
缘园 皂蕴袁分别以藤本豆总黄酮浓度为 园郾 猿员 皂早窑皂蕴 原员尧
责匀值为 苑 的粗提液上柱袁调节不同的流速吸附袁考察
上柱速率对聚酰胺吸附藤本豆总黄酮的影响遥
员郾 猿郾 缘郾 圆摇 料液浓度的选择摇 取处理过的聚酰胺大孔
树脂湿法装柱袁每份 缘园 皂蕴袁分别以不同的浓度尧责匀 值
为 苑 的藤本豆黄酮粗提液上柱袁控制流速为 圆 月灾窑
澡 原员袁考察料液浓度对聚酰胺树脂吸附藤本豆总黄酮的
影响遥
员郾 猿郾 缘郾 猿摇 料液 责匀 的选择摇 取处理过的聚酰胺大孔
树脂湿法装柱袁 缘园 皂蕴 每份袁分别以浓度为 园郾 猿员
皂早窑皂蕴 原员尧不同 责匀值的藤本豆黄酮粗提液上柱袁控制
流速为 圆 月灾窑澡 原员袁考察料液 责匀 对聚酰胺树脂吸附藤
本豆黄酮的影响遥
员郾 猿郾 缘郾 源摇 正交设计方案摇 在单因素试验确定的数据
范围基础上袁设计四因素三水平的正交试验袁以动态吸
附量作为考察的指标袁按照 蕴怨 渊猿源 冤正交表安排实验袁
确定最佳动态吸附条件遥 因素水平表如表 圆 所示遥
表 圆摇 正交试验因素设计
栽葬遭造藻 圆摇 砸藻造葬贼蚤燥灶 燥枣 泽葬贼怎则葬贼蚤燥灶 泽燥造怎贼蚤燥灶 葬灶凿
则藻造葬贼蚤增藻 澡怎皂蚤凿蚤贼赠
水平
蕴藻增藻造
流速 粤
云造燥憎 辕
渊月灾窑澡 原员 冤
浓度 月
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕
渊皂早窑皂蕴 原员 冤
责匀值 悦
责匀 增葬造怎藻
员 员郾 缘 园郾 圆园 缘
圆 圆郾 园 园郾 圆缘 远
猿 圆郾 缘 园郾 猿员 苑
园源缘员
摇 愿 期 多年生藤本豆总黄酮纯化及抑菌活性研究
员郾 猿郾 远摇 聚酰胺树脂纯化工艺解吸特性摇 准确称取已
经处理好的聚酰胺树脂 圆郾 园园 早于三角瓶中袁分别加入
缘园 皂蕴浓度为 园郾 猿员 皂早窑皂蕴 原员的藤本豆总黄酮粗提液袁
加塞袁置于振荡器上袁猿园 益尧员圆园 则窑皂蚤灶 原员振荡条件下吸
附 圆源 澡袁用去离子水洗上述充分吸附藤本豆黄酮粗提
液的树脂袁并过滤袁用滤纸吸干水分后装入三角瓶中袁
然后加入不同浓度的乙醇溶液各 缘园 皂蕴袁置振荡器上
于上述条件下振荡解析 圆源 澡袁取上清液袁测定溶液中总
黄酮的浓度袁计算解吸量及解吸率袁优选出最佳乙醇浓
度遥
员郾 猿郾 苑摇 多年生藤本豆总黄酮抑菌活性的测定
员郾 猿郾 苑郾 员摇 菌悬液的制备摇 在无菌条件下袁取活化培养
好的菌株袁用接种环分别挑取适量菌体袁分别接入 怨
皂蕴无菌水中袁摇匀袁配制成含菌数为 造园远悦云哉窑皂蕴 原员的
菌悬液遥
员郾 猿郾 苑郾 圆摇 抑菌活性测定 摇 采用滤纸片法咱员远暂 袁根据抑
菌圈直径大小来判断抑菌能力遥 选择适宜浓度的菌悬
液 园郾 缘 皂蕴转移至之前倒好的平板培养基表面袁均匀涂
布遥 无菌镊子取滤纸片渊水分相对滤干冤袁贴于含菌培
养皿中袁每皿等距离的放置两片袁每个样品重复 猿 皿袁
倒置放于 猿苑益培养箱中培养遥 圆源澡 后取出袁观察抑菌
圈大小袁并用游标卡尺测量每个培养皿中抑菌圈的直
径袁取平均值遥 用无菌生理盐水做空白对照遥
员援 源摇 数据处理分析
采用 阅孕杂 苑援 缘缘 和 酝蚤糟则燥泽燥枣贼 韵枣枣蚤糟藻 耘曾糟藻造 圆园园猿 进行
统计分析遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 树脂的筛选
圆郾 员郾 员摇 静态吸附性能的结果比较摇 本试验比较了 粤月
原愿尧匀孕阅员园园 圆 种大孔树脂及聚酰胺树脂对多年生藤
本豆总黄酮的静态吸附性能袁结果见图 员遥
图 员 表明袁吸附树脂的吸附速率随着时间的延长
而急剧下降袁而后缓慢趋向饱和袁员员 澡 后吸附基本达
到平衡袁这说明多年生藤本豆总黄酮与吸附树脂之间
属于慢性吸附的类型袁主要以物理吸附为主遥 聚酰胺
的吸附量最大袁粤月 原 愿 次之袁匀孕阅员园园 最小袁三者之间
吸附量差异显著遥
圆郾 员郾 圆摇 静态解吸性能的结果比较摇 本试验比较了 粤月
原愿尧匀孕阅员园园 圆 种大孔树脂及聚酰胺树脂对多年生藤
本豆总黄酮的静态解吸性能袁结果见图 圆遥
图 圆 表明袁聚酰胺相对 粤月 原 愿 及 匀孕阅员园园 的解吸
效果更好袁其解吸能力最强遥 缘 澡后 猿 种树脂吸附的多
图 员摇 不同树脂对多年生藤本豆总黄酮的静态吸附曲线
云蚤早援 员摇 杂贼葬贼蚤糟 葬遭泽燥则责贼蚤燥灶 糟怎则增藻泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼赠责藻泽 燥枣
则藻泽蚤灶 枣燥则 责藻则藻灶灶蚤葬造泽 蕴葬遭造葬遭 泽责援 贼燥贼葬造 枣造葬增燥灶燥蚤凿泽
图 圆摇 不同树脂对多年生藤本豆总黄酮的静态解吸曲线
云蚤早援 圆摇 杂贼葬贼蚤糟 凿藻泽燥则责贼蚤燥灶 糟怎则增藻泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼赠责藻泽 燥枣
则藻泽蚤灶 枣燥则 责藻则藻灶灶蚤葬造泽 蕴葬遭造葬遭 泽责援 贼燥贼葬造 枣造葬增燥灶燥蚤凿泽
年生藤本豆总黄酮都已基本被解吸袁此时聚酰胺的解
吸率达到了 愿愿郾 苑豫 袁 粤月 原 愿 为 远缘郾 园豫 袁 匀孕阅员园园 为
缘源郾 远豫 遥
综合比较 猿 种树脂对多年生藤本豆总黄酮的吸附
及解吸性能袁选择聚酰胺树脂为多年生藤本豆总黄酮
分离纯化的树脂遥
圆郾 圆摇 聚酰胺树脂纯化工艺动态吸附条件优化结果
圆郾 圆郾 员摇 不同上样液流速对吸附量的影响摇 由图 猿 可
知袁上柱流速较慢时袁有利于多年生藤本豆总黄酮从液
员源缘员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
相扩散到聚酰胺树脂内部袁增加其与聚酰胺的接触时
间袁从而可提高吸附率曰而当上柱流速过快时袁样品中
的黄酮未被吸附就会流出来袁不利于吸附的进行遥 所
以上柱速率越大袁聚酰胺对多年生藤本豆总黄酮的吸
附量逐渐减少袁考虑到实际袁选择上柱速率为 猿 月灾窑
澡 原员遥
图 猿摇 不同上样液流速对聚酰胺树脂吸附量的影响
云蚤早援 猿摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 枣造燥憎 增藻造燥糟蚤贼蚤藻泽 燥枣
泽葬皂责造藻 泽燥造怎贼蚤燥灶 燥灶 葬凿泽燥则责贼蚤燥灶 燥枣 责燥造赠葬皂蚤灶藻 则藻泽蚤灶
图 源摇 不同上样液浓度对聚酰胺树脂吸附量的影响
云蚤早援 源摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥枣
泽葬皂责造藻 泽燥造怎贼蚤燥灶 燥灶 葬凿泽燥则责贼蚤燥灶 燥枣 责燥造赠葬皂蚤灶藻 则藻泽蚤灶
圆郾 圆郾 圆摇 不同上样液浓度对吸附量的影响摇 从图 源 可
知袁料液浓度在 园郾 员 耀 园郾 圆缘 皂早窑皂蕴 原员时袁多年生藤本豆
总黄酮的吸附量呈明显上升趋势曰而在 园郾 圆缘 耀 园郾 猿员
皂早窑皂蕴 原员时袁多年生藤本豆总黄酮的吸附量趋于平缓袁
故选择多年生藤本豆总黄酮的质量浓度为 园郾 猿员 皂早窑
皂蕴 原员袁此时聚酰胺树脂对藤本豆总黄酮的吸附效果
好遥
圆郾 圆郾 猿摇 不同上样液 责匀 对吸附量的影响 摇 由图 缘 可
知袁料液的酸碱度对聚酰胺树脂的吸附量有一定的影
响袁责匀值在 缘 耀 远 时袁聚酰胺对多年生藤本豆总黄酮的
吸附效果最好遥 这是因为随着 责匀 值的增大袁黄酮类
化合物在弱酸性条件下袁较多的保持了分子的形态袁容
易被聚酰胺树脂吸附遥
图 缘摇 不同上样液 责匀对聚酰胺树脂吸附量的影响
云蚤早援 缘摇 耘枣枣藻糟贼泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 责匀 增葬造怎藻泽 燥枣 泽葬皂责造藻
泽燥造怎贼蚤燥灶 燥灶 葬凿泽燥则责贼蚤燥灶 燥枣 责燥造赠葬皂蚤灶藻 则藻泽蚤灶
圆郾 圆郾 源摇 动态吸附条件正交试验结果摇 根据前面单因
素试验结果袁本试验选择流速尧浓度尧责匀值为主要影响
因素袁以吸附量为指标袁选取 蕴怨渊猿源冤正交设计方案袁探
讨各动态吸附因素对聚酰胺树脂吸附藤本豆黄酮粗提
液的影响袁正交试验方案与结果见表 猿袁方差分析结果
见表 源遥
摇 摇 表 猿 的极差分析结果表明袁影响聚酰胺动态吸附
多年生藤本豆总黄酮的主次因素依次为上样浓度渊月冤
跃 责匀渊悦冤 跃上样流速渊粤冤遥 最佳水平组合为 粤员月猿悦员袁
即上样流速 员郾 缘 月灾窑澡 原员尧上样浓度 园郾 猿员 皂早窑皂蕴 原员尧责匀
值 缘 时的吸附效果最好遥
由表 源 的方差分析可知袁因素 月 对聚酰胺动态吸
附多年生藤本豆总黄酮的影响显著袁因素 粤尧悦 的影响
不显著遥 在上述最佳条件下吸附量为 猿源郾 园员 皂早窑
皂蕴 原员袁高于表 猿 中的所有试验设计袁说明优化结果正
确遥
圆郾 猿摇 聚酰胺树脂纯化工艺解吸特性
除了树脂对洗脱效果有影响之外袁洗脱剂的性
质对洗脱效果影响也较大袁一般洗脱剂极性越大其
洗脱能力越弱袁而洗脱剂极性越弱其洗脱能力越强遥
常用的洗脱剂中袁水为最弱的洗脱剂袁常常用作上柱
料液的溶剂袁甲醇次之袁乙醇的洗脱能力较强袁而乙
酸乙酯及丙酮的洗脱能力更强遥 考虑到乙醇对人体
圆源缘员
摇 愿 期 多年生藤本豆总黄酮纯化及抑菌活性研究
摇 摇 摇 摇 表 猿摇 正交试验方案与结果
栽葬遭造藻 猿摇 栽澡燥早燥灶葬造 凿藻泽蚤早灶 葬灶凿 则藻泽怎造贼泽
试验号
晕燥援
流速 粤
云造燥憎 辕 渊月灾窑澡 原员 冤
浓度 月
悦燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕 渊皂早窑皂蕴 原员 冤
责匀值 悦
责匀 增葬造怎藻
空列 阅
晕怎造造 糟燥造怎皂灶
吸附量
粤凿泽燥则责贼蚤燥灶 葬皂燥怎灶贼 辕
渊皂早窑皂蕴 原员 冤
员 员 员 员 员 圆怨郾 缘缘
圆 员 圆 圆 圆 猿猿郾 员猿
猿 员 猿 猿 猿 猿缘郾 圆苑
源 圆 员 圆 猿 圆猿郾 苑愿
缘 圆 圆 猿 员 猿园郾 圆猿
远 圆 猿 员 圆 猿愿郾 缘远
苑 猿 员 猿 圆 员怨郾 愿猿
愿 猿 圆 员 猿 猿员郾 源圆
怨 猿 猿 圆 员 猿源
运员 怨苑郾 怨缘 苑猿郾 员远 怨怨郾 缘猿 怨猿郾 苑愿
运圆 怨圆郾 缘苑 怨源郾 苑愿 怨园郾 怨员 怨员郾 缘圆
运猿 愿缘郾 圆缘 员园苑郾 愿猿 愿缘郾 猿猿 怨园郾 源苑
噪员 猿圆郾 远缘 圆源郾 猿怨 猿猿郾 员愿 猿员郾 圆远
噪圆 猿园郾 愿远 猿员郾 缘怨 猿园郾 猿园 猿园郾 缘员
噪猿 圆愿郾 源圆 猿缘郾 怨源 圆愿郾 源源 猿园郾 员远 粤员月猿悦员
砸 源郾 圆猿 员员郾 缘远 源郾 苑猿 员郾 员园 月 跃 悦 跃 粤
摇 摇 注院表中数据均为 圆 次重复实验测定值的平均数遥
晕燥贼藻院 耘增藻则赠 增葬造怎藻 蚤灶 贼澡藻 贼葬遭造藻 蚤泽 贼澡藻 葬增藻则葬早藻 燥枣 贼憎燥援
表 源摇 正交试验方差分析
栽葬遭造藻 源摇 灾葬则蚤葬灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 燥则贼澡燥早燥灶葬造 藻曾责藻则蚤皂藻灶贼
来源
杂燥怎则糟藻
均方和
杂怎皂 燥枣 泽择怎葬则藻泽
自由度
阅藻早则藻藻 燥枣 枣则藻藻凿燥皂
均方
酝藻葬灶 泽择怎葬则藻
云值
云 增葬造怎藻
显著水平
杂蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 藻枣枣藻糟贼
粤 圆苑郾 园怨园愿 圆 员猿郾 缘缘 员源郾 圆园
月 圆园源郾 源员缘员 圆 员园圆郾 圆员 员园苑郾 员苑 鄢鄢
悦 猿源郾 员圆园员 圆 员苑郾 园远 员苑郾 愿怨
阅 员郾 怨园苑源 圆 园郾 怨缘
误差 耘则则燥则 员郾 怨园苑源 圆
总和 栽燥贼葬造 圆远苑郾 缘猿猿猿
摇 摇 注院云园郾 园缘 渊圆袁圆冤 越 员怨曰云园郾 园员 渊圆袁圆冤 越 怨怨曰 鄢鄢表示差异达 园郾 园员 显著水平遥
晕燥贼藻院 云园郾 园缘 渊圆袁圆冤 越 员怨援 云园郾 园员 渊圆袁圆冤 越 怨怨援 鄢鄢皂藻葬灶泽 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻泽 葬贼 园郾 园员 造藻增藻造援
具有安全尧无毒等特点袁且价廉易得袁因此选择乙醇为
洗脱剂遥
由图 远 可知袁乙醇溶液浓度对聚酰胺洗脱多年生
藤本豆总黄酮有一定影响袁但总体上差别不大遥 乙醇
溶液浓度 缘园豫时袁解吸率 苑源郾 愿豫 曰乙醇溶液浓度 苑园豫
时袁解吸率最大袁为 愿愿郾 怨豫 曰而当乙醇溶液浓度为 怨园豫
时袁解吸率为 远愿郾 怨豫 遥 因此选择 苑园豫乙醇溶液作为解
吸液遥
猿源缘员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
圆郾 源摇 多年生藤本豆总黄酮抑菌活性的测定
由表 缘可知袁多年生藤本豆总黄酮粗提物尧纯化物
对大肠杆菌尧金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌这 猿种菌
均有抑制效果袁且抑菌圈大小均随着其质量浓度的增大
而增大遥 同浓度下藤本豆总黄酮粗提物对大肠杆菌尧枯
草芽孢杆菌的抑菌活性高于纯化物曰浓度低于 猿园 皂早窑
皂蕴 原员时藤本豆总黄酮粗提物对金黄色葡萄球菌的抑菌
活性高于纯化物袁高于 猿园 皂早窑皂蕴 原员时则相反遥
表 缘摇 不同质量浓度多年生藤本豆总黄酮的抑菌直径渊抑菌直径院皂皂冤
栽葬遭造藻 缘摇 月葬糟贼藻则蚤燥泽贼葬贼蚤糟 藻枣枣藻糟贼 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 皂葬泽泽 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 枣燥则 责藻则藻灶灶蚤葬造泽 蕴葬遭造葬遭 泽责援 贼燥贼葬造 枣造葬增燥灶燥蚤凿泽 辕 皂皂
菌种
杂贼则葬蚤灶泽
对照
悦燥灶贼则葬泽贼
粗提物质量浓度
酝葬泽泽 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕 渊皂早窑皂蕴 原员 冤
纯化物质量浓度
酝葬泽泽 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 辕 渊皂早窑皂蕴 原员 冤
员园 圆园 猿园 源园 缘园 员园 圆园 猿园 源园 缘园
大肠杆菌
耘援 糟燥造蚤
园 圆郾 缘愿 源郾 园园 缘郾 员员 缘郾 怨猿 远郾 缘圆 圆郾 员愿 猿郾 圆园 源郾 缘员 缘郾 员园 缘郾 猿源
金黄色葡萄球菌
杂贼援 葬怎则藻怎泽
园 园郾 园园 圆郾 猿源 猿郾 怨愿 源郾 愿园 缘郾 远园 员郾 远怨 圆郾 员缘 猿郾 苑愿 缘郾 员远 远郾 员园
枯草芽孢杆菌
月援 泽怎遭贼蚤造蚤泽
园 圆郾 苑远 源郾 园怨 缘郾 圆缘 远郾 员猿 苑郾 园圆 员郾 苑远 圆郾 圆怨 猿郾 远缘 源郾 圆圆 缘郾 缘源
摇 摇 注院对照为无菌生理盐水渊即藤本豆总黄酮为 园 皂早窑皂蕴 原员 冤袁园 表示无抑菌圈形成遥
晕燥贼藻院 悦燥灶贼则葬泽贼 蚤泽 泽贼藻则蚤造藻 泽葬造蚤灶藻 渊责藻则藻灶灶蚤葬造泽 蕴葬遭造葬遭 泽责援 贼燥贼葬造 枣造葬增燥灶燥蚤凿泽 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 蚤泽 园 皂早窑皂蕴 原员 冤袁 园鄢 泽澡燥憎 灶燥 蚤灶澡蚤遭蚤贼蚤燥灶 扎燥灶藻 枣燥则皂藻凿
图 远摇 乙醇溶液浓度对树脂解吸量的影响
云蚤早援 远摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 藻贼澡葬灶燥造 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶泽 燥灶
凿藻泽燥则责贼蚤燥灶 择怎葬灶贼蚤贼蚤藻泽 燥枣 皂葬糟则燥责燥则燥怎泽 则藻泽蚤灶泽
猿摇 讨论
树脂吸附法分离天然产物中的活性成分具有分离
效率高尧操作简单尧不影响被分离物质活性等特
点咱员苑 原 员怨暂 遥 聚酰胺尧大孔吸附树脂是分离黄酮类物质的
常用材料咱圆园暂 袁由于极性尧孔径尧比表面积尧孔容等不同袁
理化性质存在一定的差异袁吸附分离的效果也不
同咱圆员 原 圆猿暂 遥 一般认为树脂极性和比表面积对溶质的吸
附能力起重要作用袁但具体哪种因素占主导一直没有
定论袁且对不同的吸附树脂袁其主导因素应该是不同
的咱圆源暂 遥 本试验中聚酰胺是极性树脂袁虽然比表面积较
小袁但其对多年生藤本豆总黄酮的吸附能力比其它树
脂有明显优势袁这是因为聚酰胺分子内存在着很多酰
胺基袁可与酚类尧酸类尧醌类尧硝基化合物等形成氢键袁
因而对黄酮产生吸附作用咱圆缘 原 圆远暂 曰而本试验中的多年生
藤本豆总黄酮是用 缘园豫的乙醇溶液渊碱性稀醇冤提取
的袁提取的黄酮类物质大多含酚羟基遥 这说明对于多
年生藤本豆总黄酮的吸附分离袁树脂极性的重要性远
远超过比表面积的重要性袁这与银杏黄酮苷在室温和
责匀臆缘 吸附分离时的结果刚好相反咱圆源暂 遥
本研究选择几种食品工业中常见污染致病菌袁无
论是发达国家还是发展中国家袁由大肠杆菌尧金黄色葡
萄球菌及枯草芽孢杆菌等引起的食物中毒均占有较大
比例咱圆苑暂 遥 研究结果表明袁多年生藤本豆总黄酮粗提物
和纯化物对上述 猿 种食品中病原微生物均具有明显的
抑制作用袁抑菌活性随着浓度的增大而增强袁但同浓度
下藤本豆总黄酮粗提物对大肠杆菌尧枯草芽孢杆菌的
抑菌活性高于纯化物袁这与竹叶尧香蕉片黄酮经纯化后
抑菌活性明显提高结果刚好相反咱圆愿 原 圆怨暂 曰而浓度低于
猿园 皂早窑皂蕴 原员时藤本豆总黄酮粗提物对金黄色葡萄球
菌的抑菌活性高于纯化物袁浓度高于 猿园 皂早窑皂蕴 原员时则
相反袁对其具体原因还需进一步试验袁同时对其抑菌的
作用机制也还待进一步研究遥
大豆异黄酮因具有明显的生物学活性因而引起社
会和学术界的普遍关注袁是近年来世界各国学者研究
源源缘员
摇 愿 期 多年生藤本豆总黄酮纯化及抑菌活性研究
的热点咱猿园暂 遥 其对枯草芽孢杆菌和黑曲霉没有抑制作
用袁对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌和米根霉有明显抑
制作用袁抑菌效果与浓度正相关袁已被广泛应用于生产
生活咱猿员 原 猿圆暂 遥 在 源园 皂早窑皂蕴 原员浓度下袁藤本豆总黄酮对
金黄色葡萄球菌的抑菌活性渊抑菌直径 源郾 愿园皂皂冤略低
于大豆异黄酮渊抑菌直径 远皂皂冤袁但对大肠杆菌的抑菌
活性渊抑菌直径 缘郾 怨猿皂皂冤高于大豆异黄酮渊抑菌直径
缘郾 远皂皂冤咱猿猿暂 遥 藤本豆总黄酮具有良好的应用前景袁可
作为相关抑菌制剂的优良替代物和功能多效的新食
品遥
源摇 结论
聚酰胺树脂对多年生藤本豆总黄酮表现出良好的
吸附性能袁可有效纯化多年生藤本豆总黄酮袁其最佳吸
附条件为上样浓度 园郾 猿员 皂早窑皂蕴 原员尧责匀 值 缘尧流速 员郾 缘
月灾窑澡 原员袁此条件下吸附量为 猿源郾 园员 皂早窑皂蕴 原员遥 苑园豫乙
醇溶液为多年生藤本豆总黄酮纯化的较适宜解吸液遥
多年生藤本豆总黄酮粗提物和纯化物对大肠杆菌尧金
黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌均具有明显的抑制作
用袁抑菌活性随着浓度的增大而增强袁但同浓度下藤本
豆总黄酮粗提物对大肠杆菌尧枯草芽孢杆菌的抑菌活
性高于纯化物袁而浓度低于 猿园 皂早窑皂蕴 原员时藤本豆总黄
酮粗提物对金黄色葡萄球菌的抑菌活性高于纯化物袁
高于 猿园 皂早窑皂蕴 原员时则相反遥 研究结果为多年生藤本
豆总黄酮活性成分的综合开发利用提供了一定的实践
依据遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 周玉文援 一种多年生藤本豆及其栽培法院 中国袁 悦晕园圆员圆员员猿园郾 圆
咱孕暂援 圆园园圆 原 员员 原 圆苑
咱 圆 暂 摇 范百成援 藤本豆特性及高产栽培技术咱 允暂 援 农业技术与装备袁
圆园员猿 渊员愿冤院 圆苑 原 圆愿
咱 猿 暂 摇 赵丹丹袁 郑鸿雁援 多年生藤本豆与大豆中黄酮类化合物体外抗
氧化活性比较研究咱 允暂 援 食品工业科技袁 圆园员猿袁 猿源渊愿冤院 员缘源 原
员缘苑
咱 源 暂摇 邙巍袁 郑鸿雁袁 孔凡鹏袁 赵仁杰袁 张小奇援 多年生藤本豆多糖尧
蛋白质对小白鼠免疫功能的调节作用研究咱允暂 援 吉林农业袁 圆园员圆
渊员冤院 猿猿 原 猿源
咱 缘 暂 摇 邙巍援 多年生藤本豆裂解肽的制备及保健功能的研究咱阅暂援 长
春院 吉林农业大学袁 圆园员圆
咱 远 暂 摇 王骈臻援 永泰藤本豆产业化发展研究咱阅暂援 福州院 福建农林大
学袁 圆园员圆
咱 苑 暂摇 孙秀娥袁 昌友权袁 吴润娇袁 任保国袁 陈立阁袁 郑鸿雁援 多年生藤
本豆多糖对小鼠免疫功能的影响 咱 允暂 援 食品科学袁 圆园园远袁 圆苑
渊员圆冤院 苑猿怨 原 苑源员
咱 愿 暂 摇 郑鸿雁袁 昌友权袁 孙秀娥袁 曹柏营袁 孙树欣援 多年生藤本豆蛋白
对小鼠免疫功能的影响咱 允暂 援 食品科学袁 圆园园苑袁 圆愿渊怨冤院 缘圆远 原
缘圆愿
咱 怨 暂摇 吴润娇袁 昌友权袁任保国袁 陈立阁袁 郑鸿雁援 多年生藤本豆多肽
保健功能的研究咱允暂 援 食品科学袁 圆园园远袁 圆苑渊员圆冤院 苑猿猿 原 苑猿源
咱员园暂摇 刘国坤袁 肖顺袁 张绍升袁 张敦富袁 吴秋月援 藤本豆根结线虫病的
病原鉴定及其侵染特性的研究咱 允暂 援 热带作物学报袁 圆园员圆袁 猿猿
渊圆冤院 猿源远 原 猿缘圆
咱员员暂摇 陈君琛袁 沈恒胜袁 赖谱富袁 翁敏劼袁 赖锋连援 一种采用速冻与脉
冲技 术 提 高 藤 本 豆 总 黄 酮 提 取 率 的 方 法院 中 国袁
悦晕圆园员猿员园员员苑猿缘员郾 远咱孕暂援 圆园园猿 原 园源 原 园愿
咱员圆暂摇 汪晓鸣袁刘超袁曹磊袁 李珂昕援 山楂黄酮提取物对辐照肉糜脂肪
氧化的抑制能力咱允暂 援 核农学报袁 圆园员员袁 圆缘渊猿冤院 缘员源 原 缘员苑
咱员猿暂摇 杨乐袁 王洪新袁 秦晓娟援 大孔树脂纯化笋壳中的黄酮物质咱 允暂 援
食品与生物技术学报袁 圆园员员袁 猿园渊圆冤院 圆员愿 原 圆圆猿
咱员源暂摇 刘硕谦袁 水皂角活性黄酮提取尧纯化与检测技术的研究咱阅暂援 长
沙院 湖南农业大学袁 圆园园猿
咱员缘暂摇 汤建萍袁 周春山袁 丁立稳援 大孔吸附树脂分离纯化荔枝核黄酮
类化合物的研究咱 允暂 援 离子交换与吸附袁 圆园园远袁 圆圆渊远冤院 缘缘员 原
缘缘愿
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源圆缘 原 源源员
咱员苑暂摇 欧阳玉祝袁 李雪峰袁 魏燕袁 邓佑林援 阅 原 员园员 大孔树脂对连翘中
黄酮类成分的吸附特性研究咱 允暂 援 核农学报袁 圆园员猿袁 圆苑 渊员园冤院
员缘猿源 原 员缘猿愿
咱员愿暂摇 云怎 再袁 在怎 再袁 蕴蚤怎 宰袁 耘枣枣藻则贼澡 栽袁 在澡葬灶早 晕袁 蕴蚤怎 载袁 运燥灶早 再援
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咱员怨暂摇 徐晓云袁 潘思轶袁 谢笔钧袁 杨尔宁袁 陈然援 树脂法精制沙棘籽原
花色素的研究咱允暂 援 农业工程学报袁 圆园园缘袁 圆员渊员冤院 员缘圆 原 员缘源
咱圆园暂摇 丁艳霞袁郭洋静袁 曾令连袁李钦援 聚酰胺 原大孔树脂联用富集杜
仲雄花总黄酮咱允暂 援 河南大学学报院 医学版袁 圆园员猿袁 猿圆渊源冤院 圆源圆
原 圆源远
咱圆员暂摇 李颖畅袁马勇袁樊严袁 刘丽萍援 大孔树脂吸附薯蔓黄酮条件优化
及其清除氧自由基能力咱允暂 援 中国粮油学报袁 圆园员员袁 圆远渊圆冤院 员园猿
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咱圆源暂摇 庄玲华援 银杏黄酮苷在吸附树脂上的吸附尧解吸行为研究咱阅暂援
成都院 四川大学袁 圆园园猿
咱圆缘暂摇 王克勤袁严志慧袁 罗军武袁郝翻援 聚酰胺树脂分离纯化芹菜黄酮
的工艺研究咱允暂 援 食品与机械袁 圆园园怨袁 圆缘渊猿冤院 源远 原 缘园
咱圆远暂摇 徐颖袁 董文宾袁 张建华援 聚酰胺薄层色谱法分离鉴定异黄酮
咱允暂 援 中国粮油学报袁 圆园园缘袁 圆园渊缘冤院 员圆苑 原 员圆怨
咱圆苑暂摇 黄建锋援 智舌快速检测食源性致病细菌的研究咱阅暂援 杭州院 浙
江工商大学袁 圆园园怨
缘源缘员
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圆园员缘袁圆怨渊愿冤院员缘猿怨 耀 员缘源远
咱圆愿暂摇 倪向梅援 从竹叶中提取化妆品用防腐剂的研究咱阅暂援 无锡院 江
南大学袁 圆园员员
咱圆怨暂摇 顾采琴袁 谢琳琳袁 张织芬袁 朱冬雪袁 刘鹏袁 赖雅平袁 曾庆祝援 香
蕉皮黄酮的分离纯化及抑茵活性研究咱允暂 援 食品科学袁 圆园员猿袁 猿源
渊员远冤院 怨愿 原 员园圆
咱猿园暂摇 王海涛援 大豆异黄酮的抑菌活性及其机制的研究咱阅暂援 大连院
辽宁师范大学袁 圆园园怨
咱猿员暂摇 梅忠袁 孙健袁 孙恺袁 舒小丽袁 吴殿星援 大豆异黄酮的保健功效尧
生物合成及种质发掘与遗传育种咱允暂 援 核农学报袁 圆园员源袁 圆愿渊苑冤院
员圆园愿 原 员圆员猿
咱猿圆暂摇 石治强袁 吴雨珊袁 杨文钰袁 万燕袁 伍江波援 大豆异黄酮抑菌的研
究进展咱允暂 援 大豆科学袁 圆园员员袁 猿园渊远冤院 员园源苑 原 员园缘园
咱猿猿暂摇 周建芹援大豆异黄酮提取工艺优化及其活性研究咱允暂 援大豆科学袁
圆园园苑袁圆远渊圆冤院圆苑远 原 圆苑怨
杂贼怎凿赠蚤灶早 燥灶 孕怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 栽燥贼葬造 云造葬增燥灶燥蚤凿泽 云则燥皂 孕藻则藻灶灶蚤葬造
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栽澡蚤泽 憎燥则噪 皂蚤早澡贼 责则燥增蚤凿藻 贼澡藻 蚤灶枣燥则皂葬贼蚤燥灶 枣燥则 枣怎则贼澡藻则 泽贼怎凿蚤藻泽 蚤灶 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 葬灶凿 糟燥皂责则藻澡藻灶泽蚤增藻 怎贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 贼燥贼葬造
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运藻赠憎燥则凿泽院责藻则藻灶灶蚤葬造泽 蕴葬遭造葬遭 泽责援 袁 贼燥贼葬造 枣造葬增燥灶燥蚤凿泽袁 责怎则蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶袁 葬灶贼蚤遭葬糟贼藻则蚤葬造 葬糟贼蚤增蚤贼赠袁 责燥造赠葬皂蚤凿藻
远源缘员