全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员缘袁圆怨渊员园冤院员怨远猿 耀 员怨远怨允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员缘鄄园圆鄄园源摇 接受日期院圆园员缘鄄园愿鄄园圆
基金项目院福建省种业创新与产业化工程专项渊圆园员源杂员源苑苑 原 圆员冤
作者简介院汤坤鹏袁男袁主要从事食用菌遗传育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院怨远园缘员圆怨远缘岳 择择援 糟燥皂
通讯作者院吴小平袁男袁教授袁主要从事食用菌遗传与育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院枣躁憎曾责岳 员圆远援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员缘冤员园鄄员怨远猿鄄园苑
灰色关联度法筛选适合液体深层发酵灵芝菌株
汤坤鹏员 摇 刘盛荣圆 摇 吴小平员 摇 仇志恒员 摇 张亚楠员
渊员 福建农林大学菌物研究中心袁福建 福州摇 猿缘园园园圆曰 圆福建宁德师院袁福建 宁德摇 猿缘圆员园园冤
摘摇 要院为筛选灵芝液体深层发酵专用型菌株袁以菌丝生物量尧三萜尧胞内及胞外多糖为评价指标袁采用灰
色关联度法综合评价遥 结果表明袁圆源 株灵芝菌株中 匀杂 原 圆 生物量最高袁达 员远郾 源源 早窑蕴 原员曰三萜含量以菌
株 允 原 员远 辕 粤蕴 原 员源 最高渊园郾 猿猿豫 冤曰胞内多糖以菌株 匀渊韩芝冤含量最高渊员园郾 员猿豫 冤袁胞外多糖以菌株 园园远
渊员远郾 怨远 早窑蕴 原员冤和 杂 原 员渊员远郾 员员早窑蕴 原员冤最高曰此外袁灵芝菌丝检测到灵芝酸 悦 和 云遥 以权重分别为生物量
园郾 源尧三萜 园郾 圆尧胞内多糖 园郾 圆 以及胞外多糖 园郾 圆 进行灰色关联分析袁显示菌株 园园远 与参考菌株关联度最
高袁适合作为灵芝液体深层发酵菌株遥 本研究将灰色关联度法应用于灵芝液体深层发酵菌株筛选袁对灵
芝工业化液体发酵生产具有参考价值遥
关键词院灵芝曰液体深层发酵曰生物量曰三萜曰多糖曰灰色关联度曰灵芝酸
阅韵陨院员园郾 员员愿远怨 辕 躁援 蚤泽泽灶援 员园园鄄愿缘缘员郾 圆园员缘郾 员园援 员怨远猿
摇 摇 灵芝渊郧葬灶燥凿藻则皂葬 造怎糟蚤凿怎皂冤为担子菌纲伞菌目多孔
菌科灵芝属渊郧葬灶燥凿藻则皂葬冤大型药用真菌袁又称不老草尧
瑞草尧仙草遥 传统中医学认为灵芝具有补中益气尧滋补
强体尧扶正固本尧延年益寿等功效袁因此袁被视为我国宝
贵中药材袁具有 圆 园园园 多年的药用历史咱员暂 遥 药理研究
表明袁灵芝具有提高机体免疫力尧抗癌尧改善高血压尧高
血糖尧高血脂症尧抗辐射尧防止动脉硬化尧促进中枢神经
保持平衡尧抗氧化尧消除人体内的自由基尧可抑制肿瘤尧
抗艾滋以及延缓衰老等功效咱圆 原 源暂 遥 其保健和药用价值
越来越受到人们的重视袁具有极大的发展潜力遥
现代化学分析表明袁灵芝含有丰富的生物活性物
质袁如多糖尧三萜尧蛋白质尧多肽尧核酸类尧不饱和脂肪
酸尧生物碱尧甾醇类物质尧微量元素和维生素等咱缘暂 遥 灵
芝多糖和灵芝三萜是灵芝的关键药性成分袁已知存在
超过 员员怨 种灵芝三萜物质以及多种具有不同化学组
成尧结构和生物活性的灵芝多糖咱远暂 遥 灵芝多糖具有降
血糖尧降血脂尧抗癌尧免疫调节作用以及抗氧化等活
性咱苑暂 曰灵芝三萜具有保肝尧抑制肿瘤细胞尧抗癌以及抗
艾滋病毒等活性咱愿暂 遥 目前袁灵芝产品主要以灵芝子实
体尧子粉或菌丝为原料制备而成咱怨暂 遥
由于野生灵芝资源极其匮乏袁难以满足人们日益
增长的需求袁因此人工栽培成为灵芝生产的主要方法袁
目前成功开发了灵芝的段木栽培尧短段木栽培尧代料栽
培等栽培技术遥 但是人工栽培有周期长尧易受外界环
境条件影响以及不同批次活性成分波动大等不足咱员园暂 遥
近年来食药用菌的液体深层发酵由于周期短以及易工
业化生产而受到人们关注袁具有极大的发展潜力袁并在
虫草尧牛樟芝尧长根菇尧白灵菇等食药用菌中已得到应
用咱员员 原 员源暂 遥 本研究为选育专用型适合液体深层发酵灵
芝菌株袁采用 圆源 株灵芝菌株为对象袁以生物量尧三萜尧
胞内多糖和胞外多糖作为评价指标袁并应用灰色关联
度分析法进行筛选袁旨在提高灵芝液体深层发酵效益遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
员郾 员郾 员摇 供试菌株摇 所有菌株均由福建农林大学菌物
研究中心提供袁菌株来源及编号见表 员遥
员郾 员郾 圆摇 培养基 摇 孕阅粤 培养基院圆园园 早 马铃薯 渊浸提
液冤尧圆园 早 葡萄糖尧圆园 早 琼脂袁加水至 员 园园园 皂蕴遥 液体
培养基除不添加琼脂外其余相同遥
猿远怨员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
表 员摇 供试菌株
栽葬遭造藻 员摇 栽藻泽贼藻凿 泽贼则葬蚤灶泽
菌株名称
晕葬皂藻 燥枣 泽贼则葬蚤灶泽
菌株来源
杂燥怎则糟藻 燥枣 泽贼则葬蚤灶泽
菌株名称
晕葬皂藻 燥枣 泽贼则葬蚤灶泽
菌株来源
杂燥怎则糟藻 燥枣 泽贼则葬蚤灶泽
园园远 上海农科院食用菌所
粤悦悦悦
砸在 黄山灵芝产地
匀怎葬灶早泽澡葬灶 早葬灶燥凿藻则皂葬 遭葬泽藻
员园圆 福建农林大学菌物研究中心
云怎灶早怎泽 糟藻灶贼藻则 燥枣 云粤云哉
蕴匝 浙江龙泉市
在澡藻躁蚤葬灶早 蕴燥灶早择怎葬灶
员圆园 福建农林大学菌物研究中心
云怎灶早怎泽 糟藻灶贼藻则 燥枣 云粤云哉
匀杂 原 员 黄山灵芝产地
匀怎葬灶早泽澡葬灶 早葬灶燥凿藻则皂葬 遭葬泽藻
园园员圆 吉林农科院
允粤粤悦
匀杂 原 圆 黄山灵芝产地
匀怎葬灶早泽澡葬灶 早葬灶燥凿藻则皂葬 遭葬泽藻
允悦蕴 菌草鹿角灵芝分离
杂藻责葬则葬贼藻 枣则燥皂 允怎灶悦葬燥 早葬灶燥凿藻则皂葬 造怎糟蚤凿怎皂
愿 原 匀 福建农林大学菌物研究中心
云怎灶早怎泽 糟藻灶贼藻则 燥枣 云粤云哉
粤蕴 安岭灵芝基地
粤灶造蚤灶早 早葬灶燥凿藻则皂葬 遭葬泽藻
允 原 苑 辕 粤蕴 原 圆 福建农林大学菌物研究中心
云怎灶早怎泽 糟藻灶贼藻则 燥枣 云粤云哉
匝 福建农林大学菌物研究中心
云怎灶早怎泽 糟藻灶贼藻则 燥枣 云粤云哉
允 原 员员 辕 粤蕴 原 员远 福建农林大学菌物研究中心
云怎灶早怎泽 糟藻灶贼藻则 燥枣 云粤云哉
杂 福建仙芝楼
云怎躁蚤葬灶 载蚤葬灶扎澡蚤造燥怎
允 原 员远 辕 粤蕴 原 员源 福建农林大学菌物研究中心
云怎灶早怎泽 糟藻灶贼藻则 燥枣 云粤云哉
杂 原 员 上海农科院食用菌所
粤悦悦悦
允 原 员怨 辕 粤蕴 原 苑 福建农林大学菌物研究中心
云怎灶早怎泽 糟藻灶贼藻则 燥枣 云粤云哉
杂杂员 广东微生物研究所
郧阅郧酝
匀 原源 辕 载 原 员 福建农林大学菌物研究中心
云怎灶早怎泽 糟藻灶贼藻则 燥枣 云粤云哉
匀 浦城灵芝产地
孕怎糟澡藻灶早 早葬灶燥凿藻则皂葬 遭葬泽藻
载 原 员怨 辕 粤蕴 原 怨 福建农林大学菌物研究中心
云怎灶早怎泽 糟藻灶贼藻则 燥枣 云粤云哉
匀猿 浦城灵芝产地
孕怎糟澡藻灶早 早葬灶燥凿藻则皂葬 遭葬泽藻
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摇 摇 注院砸在院日芝曰蕴匝院龙泉曰匀杂 原 员院黄 员曰匀杂 原 圆院黄 圆曰愿 原 匀院愿 号遥 下同遥
晕燥贼藻院砸在 则藻责则藻泽藻灶贼泽 砸蚤 在澡蚤袁 蕴匝 则藻责则藻泽藻灶贼泽 蕴燥灶早 匝怎葬灶袁 匀杂 原 员 则藻责则藻泽藻灶贼泽 匀怎葬灶早 员袁 匀杂 原 圆 则藻责则藻泽藻灶贼泽 匀怎葬灶早 圆袁 愿 原 匀 则藻责则藻泽藻灶贼泽 愿 匀葬燥援 栽澡藻 泽葬皂藻 葬泽
枣燥造造燥憎蚤灶早援
员郾 员郾 猿摇 主要仪器摇 在匀宰再 原圆员园圆 恒温培养振荡器院上
海智城分析仪器制造有限公司曰砸圆园远阅 旋转蒸发仪院
上海申生科技有限公司曰阅匀郧 原 怨圆源园粤 电热鼓风干燥
箱院上海一恒科技有限公司曰匀宰杂圆源 型电热恒温水浴
锅院上海一恒科技有限公司曰哉灾 原 员远园员 紫外可见分光
光度计院北京北分瑞利分析仪器渊集团冤公司曰杂月圆缘 原
员圆阅栽阅晕超声波机院宁波新芝生物科技股份有限公司曰
悦云员缘砸载域冷冻离心机院天美渊中国冤科学仪器有限公
司曰蕴悦 原圆园粤阅载砸超快速分离液相色谱仪院日本岛津公
司遥
员郾 圆摇 方法
员郾 圆郾 员摇 摇瓶发酵摇 将斜面菌种接种至含 孕阅粤的平板
渊怨 糟皂冤上袁圆愿益培养袁菌丝长满后用 怨 皂皂 打孔器取边
缘菌种块 怨 个至装有 员园园皂蕴 液体 孕阅粤 的摇瓶
渊圆缘园皂蕴冤袁员缘园 则窑皂蚤灶 原员尧圆愿益培养 员园 凿遥
员郾 圆郾 圆摇 生物量测定摇 挑去原菌种块袁置双层滤纸抽滤
收集菌丝袁蒸馏水洗涤数次袁远园益烘干菌丝至恒重袁每
处理重复 猿 次遥
员郾 圆郾 猿摇 多糖的测定摇 收集抽滤液 缘皂蕴袁加入 源 倍体积
无水乙醇袁源益过夜袁缘 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 缘皂蚤灶袁沉淀烘干
后加 源皂蕴 去离子水溶解袁再用 杂藻增葬早 法脱蛋白 员 次袁
缘 园园园则窑皂蚤灶 原员离心 员园皂蚤灶取上清 员皂蕴 定容至 员园皂蕴袁即
为胞外多糖遥 称取 园郾 员 早 研磨菌丝至 圆皂蕴 去离子水袁
怨园益水浴 源 澡袁缘 园园园 则窑皂蚤灶 原员离心 员园 皂蚤灶 收集上清袁沉
淀再浸提 员 次袁合并上清袁醇沉袁杂藻增葬早 法脱蛋白 圆 次袁
离心吸取上清 员皂蕴 定容至 圆缘皂蕴咱员缘暂 袁即为胞内多糖遥
采用苯酚 原硫酸法咱员远暂测定多糖含量遥
员郾 圆郾 源摇 三萜的测定摇 称取 园郾 员 早 烘干的菌丝粉末袁加
入 猿园皂蕴 愿缘豫乙醇袁室温浸提 圆 澡袁员缘园 宰 下超声 园郾 缘
澡袁 远园益减压抽滤至干袁色谱级甲醇定容至 圆缘皂蕴袁重复
猿 次遥 采用香草醛 原冰醋酸分光光度法测三萜含量遥
员郾 圆郾 缘摇 灵芝酸分析 摇 采用高效液相色谱渊匀孕蕴悦冤进
源远怨员
摇 员园 期 灰色关联度法筛选适合液体深层发酵灵芝菌株
行分析袁乙醇提取物经 园郾 圆圆滋皂 有机过滤膜过滤遥 色
谱条件院园郾 员豫乙酸渊粤泵冤和乙腈渊月 泵冤梯度洗脱袁洗
脱比例为 月 泵浓度为 园 耀 圆园皂蚤灶院猿园豫 耀 源园豫 曰圆园 耀
圆缘皂蚤灶院源园豫 耀 缘缘豫 曰圆缘 耀 猿园皂蚤灶院 缘缘豫 耀 远缘豫 曰 猿园 耀
源园皂蚤灶院远缘豫 耀远缘豫 遥 柱温 源园益曰流速 园郾 愿皂蕴窑皂蚤灶 原员曰检
测波长 圆缘源灶皂曰色谱柱为 粤造造贼蚤皂葬 悦员愿曰进样量 员园滋蕴遥
通过峰面积计算灵芝酸含量遥
员郾 圆郾 远摇 灰色关联度分析摇 灰色关联度分析以各个参
试菌株的关联系数大小表示其优劣程度袁关联系数越
大表明该菌株的综合性状越优良遥 灰色关联度理论认
为所有参试菌株作为一个灰色系统袁菌株的主要性状
值作为评价指标袁构建一个比各个菌株的主要性状优
良的参考菌株袁再计算所有参试菌株与参考菌株的关
联度程度咱员苑 原 员愿暂 遥 关联度系数 孜蚤渊噪冤 越 喳皂蚤灶吟蚤渊噪冤 垣 孕皂葬曾吟蚤渊噪冤札 辕 喳吟蚤渊噪冤 垣 孕 皂葬曾吟蚤渊噪冤札袁其中吟蚤渊噪冤
越 渣 载忆园渊噪冤 原 载忆蚤渊噪冤 渣 袁载忆蚤 越 载蚤渊噪冤 辕 载园渊噪冤遥 等权关联系
数 砸蚤 越 渊员 辕 灶冤 伊 移灶蚤 越 员孜 蚤 渊噪冤曰加权关联系数 砸蚤 越移
灶
蚤 越 员宰渊噪冤伊 孜 蚤 渊噪冤遥 式中 载园渊噪冤为参考菌株各个性状值构成的
数列袁载蚤渊噪冤为参试菌株各个性状值构成的数列袁蚤 为
本试验中的参试菌株袁噪 为某个性状值袁孕 为分辨系
数遥
注院 粤为菌丝醇提物和灵芝酸 悦标准品的 匀孕蕴悦图谱曰月为菌丝醇提物和灵芝酸 云标准品的 匀孕蕴悦图谱遥
晕燥贼藻院 粤 蚤泽 贼澡藻 匀孕蕴悦 枣蚤灶早藻则责则蚤灶贼 燥枣 澡赠责澡葬造 藻曾贼则葬糟贼 遭赠 藻贼澡葬灶燥造 葬灶凿 早葬灶燥凿藻则蚤糟 葬糟蚤凿泽 悦援 月 蚤泽 贼澡藻 匀孕蕴悦 枣蚤灶早藻则责则蚤灶贼
燥枣 澡赠责澡葬造 藻曾贼则葬糟贼 遭赠 藻贼澡葬灶燥造 葬灶凿 早葬灶燥凿藻则蚤糟 葬糟蚤凿泽 云援
图 员摇 菌丝三萜 匀孕蕴悦图谱
云蚤早援 员摇 匀孕蕴悦 枣蚤灶早藻则责则蚤灶贼 燥枣 澡赠责澡葬藻 贼则蚤贼藻则责藻灶藻
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 灵芝菌株性状值及显著性分析
表 圆 为 圆源 株灵芝菌株生物量尧胞内多糖尧胞外多
糖以及三萜含量及显著性分析遥 菌株 匀杂 原 圆 生物量
最高袁为 员郾 远源源 早窑员园园皂蕴 原员曰其次为菌株 园园远尧园园员圆 和 愿
原 匀袁其余菌株生物量较低遥 菌株 匀 胞内多糖含量最
高袁为 员园郾 员猿 早窑员园园早 原员袁与其他菌株有显著差异遥 胞外
多糖以菌株 园园远 和 杂 原 员 最高袁分别为 员远郾 怨远尧员远郾 员员
皂早窑皂蕴 原员袁其余菌株较低遥 比较发现胞外多糖与胞内
多糖无直接关联袁可能与菌株不同的菌丝体形态有关遥
菌株 允 原 员远 辕 粤蕴 原 员源 三萜含量最高袁为 猿圆郾 怨愿 皂早窑早 原员袁
与其他菌株三萜含量有极显著性差异袁其余菌株菌丝
三萜含量均较低且差异不显著遥 可见袁不同灵芝菌株
发酵活性物质含量以及生物量表现出极大差异袁未见
各指标均理想的菌株遥
圆郾 圆摇 灰色关联度分析
根据灰色关联度分析原理袁参考品种各性状值应
稍优于所有参试菌株相应性状值遥 参考品种和参试菌
株的主要性状平均值见表 猿遥
摇 摇 表 猿 数据进行无量纲化处理袁取分辨系数 孕 为
园郾 缘袁取产物性状的权值院生物量 园郾 源尧三萜 园郾 圆尧胞内多
糖 园郾 圆尧胞外多糖 园郾 圆 即可得到各个菌株的加权系数
渊表 源冤遥
摇 摇 由表 源 可知菌株 园园远 关联度最接近参考品种袁发
酵生物量与参考菌株很接近袁胞外多糖含量最高袁关联
系数为 园郾 苑猿怨袁高于其他菌株遥 此外袁菌株 园园远 的等权
关联度系数亦高于其他菌株遥 灰色关联度系统理论认
为袁关联度越高的菌株与参考品种就越接近袁因此袁与
供试的其他菌株相比袁菌株 园园远 更适合作为灵芝液体
深层发酵菌株遥 此外袁菌株 匀杂 原 圆 的生物量最高袁关
联度排名第二袁可以根据不同目的作进一步研究遥
圆郾 猿摇 三萜指纹图谱分析
图 员 原 粤 为菌株 园园远 发酵菌丝醇提取物和标准品
灵芝酸 悦的高效液相色谱图袁样品的保留时间与标准
品渊员怨郾 苑猿 皂蚤灶冤相同袁经反复验证后确证为灵芝酸 悦袁
峰面积法显示菌丝干重的灵芝酸 悦 含量为 源郾 源圆愿
皂早窑早 原员遥图 员 原 月 显示样品及标准品的保留时间为
圆愿郾 猿苑皂蚤灶袁出峰时间与标品灵芝酸 云对应袁反复验证后
缘远怨员
核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
摇 摇 摇 摇 表 圆摇 不同灵芝菌株菌丝生物量尧多糖和菌丝三萜含量及显著性分析
栽葬遭造藻 圆摇 酝赠糟藻造蚤葬造 遭蚤燥皂葬泽泽袁 陨孕杂袁 耘孕杂袁 贼则蚤贼藻则责藻灶燥蚤凿泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 郧葬灶燥凿藻则皂葬 泽贼则葬蚤灶泽 葬灶凿 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶糟藻 葬灶葬造赠泽蚤泽
菌株
杂贼则葬蚤灶泽
生物量
月蚤燥皂葬泽泽 辕 渊早窑员园园皂蕴 原员 冤
胞内多糖
陨孕杂 辕 渊早窑员园园早 原员 冤
胞外多糖
耘孕杂 辕 渊皂早窑皂蕴 原员 冤
三萜
栽则蚤贼藻则责藻灶藻 辕 渊皂早窑早 原员 冤
园园远 员郾 缘缘 依 园郾 园源怨 遭月 猿郾 员源 依 园郾 园源源 早澡郧匀 员远郾 怨远 依 园郾 园愿员 葬粤 员愿郾 园圆 依 园郾 猿源猿 枣早澡蚤耘云郧
员园圆 园郾 远员 依 园郾 园猿缘 澡蚤躁噪匀陨允 源郾 苑猿 依 园郾 园远 凿阅 园郾 愿员 依 园郾 园猿缘 造蕴 员愿郾 怨源 依 园郾 猿园怨 藻枣早耘云
员圆园 园郾 远苑 依 园郾 园猿怨 枣早澡云郧匀 源郾 源怨 依 园郾 员猿缘 凿阅 源郾 员苑 依 园郾 园远圆 蚤陨 圆圆郾 员圆 依 园郾 苑猿怨 阅糟凿
园园员圆 员郾 源源 依 园郾 园圆员 糟悦 猿郾 猿苑 依 园郾 园愿远 枣早郧 源郾 愿怨 依 园郾 园远源 枣云郧 愿郾 缘愿 依 园郾 员远猿 酝噪
允悦蕴 园郾 愿愿 依 园郾 园员苑 藻耘 猿郾 源苑 依 园郾 员缘源 枣早郧 缘郾 园缘 依 园郾 园圆苑 枣云 圆员郾 怨远 依 园郾 源缘 凿悦阅
粤蕴 园郾 猿源 依 园郾 园圆源 皂灶蕴酝晕 源郾 猿缘 依 园郾 员员怨 凿阅耘 猿郾 缘员 依 园郾 园圆远 躁允 员圆郾 苑愿 依 园郾 圆园苑 造陨允
匝 园郾 远源 依 园郾 园圆愿 枣早澡蚤躁云郧匀 源郾 缘猿 依 园郾 园怨愿 凿阅 远郾 源员 依 园郾 园源源 凿阅 圆缘郾 远远 依 园郾 怨圆猿 遭月
杂 园郾 猿缘 依 园郾 园员 皂蕴酝 猿郾 源 依 园郾 园缘 枣早郧 员郾 远员 依 园郾 园缘 噪运 圆圆郾 圆猿 依 园郾 圆源缘 糟凿悦阅
杂 原 员 园郾 源员 依 园郾 园园怨 造皂运蕴 源郾 猿远 依 园郾 员园缘 凿阅耘 员远郾 员员 依 园郾 员园源 遭月 圆圆郾 猿圆 依 园郾 苑圆猿 糟凿悦阅
杂杂员 园郾 缘怨 依 园郾 园园苑 早澡蚤躁噪郧匀陨 猿郾 苑愿 依 园郾 员愿远 藻枣耘云郧 猿郾 猿圆 依 园郾 园缘缘 躁允 员愿郾 员源 依 园郾 缘员猿 枣早澡耘云郧
匀 园郾 缘圆 依 园郾 园圆猿 噪造皂陨允运蕴 员园郾 员猿 依 园郾 员源猿 葬粤 苑郾 猿猿 依 园郾 员源缘 糟悦 员圆郾 园愿 依 园郾 猿园猿 造允
匀猿 园郾 苑愿 依 园郾 园员圆 藻枣耘云 源郾 缘猿 依 园郾 员愿缘 凿阅 远郾 猿 依 园郾 园苑员 凿阅 圆源郾 苑缘 依 园郾 源圆远 遭糟月悦
砸在 园郾 员愿 依 园郾 园员圆 燥晕韵 苑郾 园苑 依 园郾 园缘圆 遭月 远郾 员 依 园郾 园源圆 凿藻阅耘 员猿郾 圆员 依 园郾 员猿源 噪造陨允
蕴匝 园郾 员猿 依 园郾 园员圆 燥韵 缘郾 苑怨 依 园郾 园愿源 糟悦 缘郾 苑远 依 园郾 园缘缘 藻耘 员圆郾 源源 依 园郾 远缘缘 造允
匀杂 原 员 园郾 缘猿 依 园郾 园园愿 躁噪造匀陨允运 源郾 缘缘 依 园郾 员员愿 凿阅 员郾 源源 依 园郾 园源怨 噪运 员缘郾 源苑 依 园郾 苑苑圆 蚤躁噪郧匀陨
匀杂 原 圆 员郾 远源 依 园郾 园远 葬粤 源郾 圆怨 依 园郾 园愿员 凿藻阅耘云 员郾 远愿 依 园郾 员园猿 噪运 圆员郾 园圆 依 园郾 远员愿 凿藻阅耘
愿 原 匀 员郾 员圆 依 园郾 园猿圆 凿阅 猿郾 圆圆 依 园郾 员员 枣早郧匀 源郾 苑苑 依 园郾 圆猿猿 枣早云郧匀 圆园郾 远园 依 园郾 远园员 凿藻枣阅耘
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允 原 员员 辕 粤蕴 原 员远 园郾 员员 依 园郾 园园猿 燥韵 源郾 缘圆 依 园郾 园缘远 凿阅 源郾 苑远 依 园郾 园源猿 枣早云郧匀 员远郾 猿苑 依 园郾 源愿源 早澡蚤躁云郧匀
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允 原 员怨 辕 粤蕴 原 苑 园郾 圆园 依 园郾 园员员 灶燥酝晕韵 圆郾 远源 依 园郾 园怨缘 澡匀 缘郾 园苑 依 园郾 员源源 枣云 员缘郾 苑员 依 园郾 猿苑猿 澡蚤躁噪郧匀陨
匀 原 源 辕 载 原 员 园郾 远愿 依 园郾 园猿缘 枣早澡蚤云郧匀 源郾 猿员 依 园郾 员员源 凿藻阅耘 源郾 源圆 依 园郾 园怨猿 早澡蚤郧匀陨 圆园郾 怨愿 依 园郾 圆远远 凿藻阅耘
载 原 员怨 辕 粤蕴 原 怨 园郾 苑缘 依 园郾 园员源 藻枣早耘云郧 源郾 圆猿 依 园郾 员园苑 凿藻阅耘云 源郾 圆愿 依 园郾 园苑怨 澡蚤匀陨 圆园郾 园远 依 园郾 猿愿苑 凿藻枣阅耘
载 原 员怨 辕 匀 原 源 园郾 源愿 依 园郾 园源 蚤躁噪造匀陨允运 猿郾 远远 依 园郾 员圆源 枣早云郧 源郾 苑源 依 园郾 园源源 枣早澡云郧匀 员猿郾 苑 依 园郾 员愿源 噪造匀陨允
摇 摇 注院小写字母表示在 孕 约 园郾 园缘 时差异显著袁大写字母表示在 孕 约 园郾 园员 时差异极显著遥
晕燥贼藻院 蕴燥憎藻则糟葬泽藻 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 园郾 园缘 造藻增藻造袁 葬灶凿 贼澡藻 糟葬责蚤贼葬造 造藻贼贼藻则泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 园郾 园员造藻增藻造援 陨孕杂袁 蚤灶贼则葬糟藻造造怎造葬则
责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻曰耘孕杂袁 藻曾贼则葬糟藻造造怎造葬则 责燥造赠泽葬糟糟澡葬则蚤凿藻援
表 猿摇 参试菌株及参考品种的产物性状值
栽葬遭造藻 猿摇 栽澡藻 责则燥凿怎糟贼 贼则葬蚤贼泽 燥枣 贼藻泽贼藻凿 泽贼则葬蚤灶泽 葬灶凿 蚤凿藻葬造 泽贼则葬蚤灶
菌株名称
杂贼则葬蚤灶泽
生物量
月蚤燥皂葬泽泽 辕 渊早窑员园园皂蕴 原员 冤
三萜
栽则蚤贼藻则责藻灶藻 辕 渊皂早窑早 原员 冤
胞内多糖
陨孕杂 辕 渊早窑员园园早 原 员 冤
胞外多糖
耘孕杂 辕 渊皂早窑皂蕴 原员 冤
参考品种 员郾 远缘 猿猿郾 园园 员园郾 圆园 员苑郾 园园
砸在 园郾 员愿 员猿郾 圆员 苑郾 园苑 远郾 员园
匀杂 原 员 园郾 缘猿 员缘郾 源苑 源郾 缘缘 员郾 源源
匀杂 原 圆 员郾 远源 圆员郾 园圆 源郾 圆怨 员郾 远愿
蕴匝 园郾 员猿 员圆郾 源源 缘郾 苑怨 缘郾 苑远
愿 原 匀 员郾 员圆 圆园郾 远园 猿郾 圆圆 源郾 苑苑
粤蕴 园郾 猿源 员圆郾 苑愿 源郾 猿缘 猿郾 缘员
远远怨员
摇 员园 期 灰色关联度法筛选适合液体深层发酵灵芝菌株
表 猿渊续冤
菌株名称
杂贼则葬蚤灶泽
生物量
月蚤燥皂葬泽泽 辕 渊早窑员园园皂蕴 原员 冤
三萜
栽则蚤贼藻则责藻灶藻 辕 渊皂早窑早 原员 冤
胞内多糖
陨孕杂 辕 渊早窑员园园早 原 员 冤
胞外多糖
耘孕杂 辕 渊皂早窑皂蕴 原员 冤
匀 园郾 缘圆 员圆郾 园愿 员园郾 员猿 苑郾 猿猿
匀猿 园郾 苑愿 圆源郾 苑缘 源郾 缘猿 远郾 猿园
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杂杂员 园郾 缘怨 员愿郾 员源 猿郾 苑愿 猿郾 猿圆
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表 源摇 各参试菌株产量结果与关联度分析
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菌株名称
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生物量
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关联系数
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关联
砸藻造藻增葬灶糟藻
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核摇 农摇 学摇 报 圆怨 卷
确证为灵芝酸 云袁峰面积法显示样品灵芝酸 云 含量为
员郾 怨员怨 皂早窑早 原员遥
猿摇 讨论
灵芝是灵芝属内所有真菌的统称袁包含的菌种资
源非常丰富遥 现代分子生物学技术证实灵芝的遗传具
有丰富多样性咱员怨 原 圆园暂 曰不同灵芝菌株生物活性物质含量
表现出极大差异咱圆员暂 遥 因此袁基于灵芝生产方式以及目
标产物不同袁菌株选育的侧重点也不同遥 付立忠等咱圆猿暂
为筛选加工专用型灵芝品种对 员圆 个灵芝品种子实体
多糖和三萜含量进行研究袁选育出适合精工的高含量
灵芝多糖和三萜菌株袁但其多糖含量不如液体深层发
酵的袁且培养时间较长遥 本研究采用灰色关联度综合
评价菌株的生产特性袁弥补了陈春锋等咱圆圆暂筛选高产多
糖菌株却忽视生物量的不足遥
近年来培养基优化和工艺开发成为灵芝液体深层
发酵研究的重要内容咱圆源 原 圆缘暂 袁而以筛选适合液体深层发
酵灵芝菌株的报道较少咱圆源 原 圆远暂 遥 宰藻蚤 等咱圆苑暂从 员圆 株灵
芝菌株筛选高产多糖和灵芝酸菌株作为液体深层发酵
菌株袁与其筛选出的菌株相比袁本研究的菌株 园园远 的三
萜含量较高袁且培养基质更廉价遥 旷思敏等咱圆愿暂通过优
化 责匀值尧摇床转速尧培养温度和时间等因素袁使得灵
芝生物量和胞内三萜都达到最大值袁但都比本研究的
菌株 园园远 来的低袁可能是菌株的特性不同引起差异遥
灵芝三萜在免疫调节和抗肿瘤方面有明显的效果袁主
要是灵芝酸起主要作用袁在日本袁灵芝酸的含量高低被
作为灵芝质量的评判标准咱圆怨暂 遥 一般用紫外分光光度
计检测三萜含量袁陈慧等咱猿园暂指出灵芝三萜除含有灵芝
酸袁还有灵芝醇尧赤芝酸和赤芝酮等袁因此本研究用
匀孕蕴悦验证灵芝酸的存在袁发现菌丝的灵芝酸以灵芝
酸 悦和灵芝酸 云为主遥
本文以 圆源 株灵芝菌株为材料袁由于不同菌株在生
物量尧三萜尧胞内多糖和胞外多糖等主要经济性状具有
较大差异袁而运用灰色系统能评价菌株的综合性状袁故
以灰色关联度分析筛选遥 不论是等权关联分析袁还是
以生物量为主的加权关联分析袁菌株 园园远 与参考品种
关联度都是最接近袁更适合作为灵芝液体深层发酵菌
株遥
源摇 结论
本研究表明不同灵芝菌株发酵生物量尧胞内多糖尧
胞外多糖以及三萜具有极大差异遥 胞外多糖以菌株
园园远 和 杂 原 员 最高曰菌株 匀胞内多糖含量最高曰菌株 匀杂
原圆 生物量最高曰菌株 允 原 员远 辕 粤蕴 原 员源 三萜含量最高曰
未见各性状均理想的菌株遥 生产上袁运用灰色关联度
分析法袁可以对参试菌株的全部重要性状进行综合分
析袁较直观地表现参试菌株的优劣程度遥 本研究通过
灰色关联分析筛选到具有最大化经济效益的菌株
园园远袁更贴近实际生产需要遥
参考文献院
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咱 圆 暂摇 曾祥丽袁包海鹰援灵芝三萜类成分与药理学研究进展咱允暂 援菌物研
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咱 猿 暂摇 毛健袁马海乐援 灵芝多糖的研究进展 咱 允暂 援 食品科学袁圆园员园袁猿员
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咱 苑 暂摇 李平作袁章克昌援灵芝胞外多糖的分离纯化及生物活性咱允暂 援微生
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咱 愿 暂摇 李晔袁朱忠敏袁姚渭溪袁陈若芸援 灵芝三萜类化合物的研究进展
咱允暂 援中国中药学杂志袁圆园员圆袁猿苑渊圆冤院 员远缘 原 员苑员
咱 怨 暂摇 肖智杰袁王进军袁连宾援灵芝产品的研究与开发现状咱 允暂 援食品科
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咱员园暂摇 刘高强袁赵艳袁王晓玲袁朱朝阳援灵芝多糖的生物合成和发酵调控
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咱员缘暂摇 杨娜袁王鸿飞袁宋佳敏袁沈晓俊袁邵兴锋袁许凤援超声波辅助提取裂
褶菌多糖及分离纯化的研究咱允暂 援 核农学报袁圆园员源袁圆愿渊员员冤院圆园员缘
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指标分析及综合评价咱允暂 援核农学报袁圆园员源袁圆愿渊员员冤院圆员员缘 原 圆园圆缘
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猿源缘源
咱圆员暂摇 齐川袁周慧袁斯金平袁刘京晶袁张新凤援 不同品种灵芝主要活性成
分分析咱允暂 援中国实验方剂学杂志袁圆园员圆袁员愿渊员苑冤院 怨远 原 员园园
咱圆圆暂摇 陈春锋袁杨晓彤袁李绪全袁糜可袁杨庆尧援 缘 个不同灵芝种菌丝体
多糖理化性质及免疫活性研究咱 允暂 援 微生物学报袁圆园园苑袁源苑渊源冤院
远圆愿 原 远猿猿
咱圆猿暂摇 付立忠袁吴学谦袁李明焱袁程俊文袁贺亮援 灵芝品种子实体多糖和
三萜含量分析与评价咱允暂 援中国食用菌袁圆园园怨袁圆愿渊源冤院 猿愿 原 源园
咱圆源暂摇 宋频然袁常继东援 灵芝胞外多糖高产菌株筛选及其深层发酵培
养基的优化咱允暂 援食用菌学报袁圆园园猿袁员园渊圆冤院怨 原 员远
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咱圆远暂摇 杨焱袁周昌艳袁冯志勇援深层发酵灵芝高产菌株筛选初探咱 允暂 援食
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咱圆愿暂摇 旷思敏袁赵艳袁陈慧袁王晓玲援灵芝液体发酵生产胞内和胞外三萜
酸的研究咱允暂 援食品科技袁圆园员猿袁猿愿渊苑冤院圆源 原 圆愿
咱圆怨暂摇 周昌艳袁唐庆九袁杨焱援 灵芝中有效成分灵芝酸的抑制肿瘤作用
研究咱允暂 援菌物学报袁圆园园源袁圆猿渊圆冤 院圆苑缘 原 圆苑怨
咱猿园暂摇 陈慧袁杨海龙袁刘高强援灵芝三萜的生物合成和发酵调控咱 允暂 援菌
物学报袁圆园员缘袁猿源渊员冤 院员 原 怨
郧则藻赠 砸藻造葬贼蚤燥灶葬造 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 杂怎蚤贼葬遭造藻 郧葬灶燥凿藻则皂葬
杂贼则葬蚤灶泽 枣燥则 蕴蚤择怎蚤凿 云藻则皂藻灶贼葬贼蚤燥灶
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