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Mutation Breeding of Bacillus amyloliquefaciens BGP20-γ and Its Biocontrol Effect

解淀粉芽孢杆菌BGP20-γ的诱变选育及生防效果


胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora subsp. carotovoraEcc)引起的细菌性软腐病是导致采后蔬菜腐败的主要原因之一,前期研究发现解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BGP20对该病害具有较好的生防效果。为了进一步提高BGP20对采后蔬菜细菌性软腐病的生防效果,本研究利用60Co辐照诱变技术,对该菌株进行诱变选育。结果表明,在200-800 Gy剂量范围内,60Co对BGP20的致死率随着辐照剂量的增加而迅速上升。600 Gy剂量的60Co辐照致死率为78.3%,选用该剂量进行诱变选育。利用辣椒对409株突变菌株的生防效果进行活体评价,获得1株生防效果显著提高的突变菌株BGP20-γP < 0.05)。与野生型菌株BGP20相比,利用突变株BGP20-γ处理的辣椒伤口腐烂面积下降64.4%,其在辣椒伤口上的定殖能力显著提高,将病原菌Ecc的群体数量限制在一个更低的水平。


全 文 :摇 核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊员圆冤院员苑怨员 耀 员苑怨远允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员猿鄄园圆鄄圆缘摇 接受日期院圆园员猿鄄园远鄄员圆
基金项目院江苏省博士后基金渊圆园员员 年第二批冤袁江苏省农业科学院博士后基金渊远缘员员员园远冤袁江苏省农业科技自主创新资金咱悦载渊员圆冤员园园缘 原 园苑暂
作者简介院赵延存袁男袁助理研究员袁主要从事果蔬贮藏与保鲜研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 扎澡葬燥赠糟圆苑岳 员圆远援 糟燥皂
通讯作者院黄开红袁男袁研究员袁主要从事农产品贮藏与加工研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 躁葬葬泽澡怎葬灶早岳 澡燥贼皂葬蚤造援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤员圆鄄员苑怨员鄄园园
解淀粉芽孢杆菌 月郧孕圆园鄄酌的诱变选育及生防效果
赵延存摇 李鹏霞摇 黄开红摇 王毓宁摇 孙摇 娅摇 胡花丽
渊江苏省农业科学院农产品加工研究所袁江苏 南京摇 圆员园园员源冤
摘摇 要院胡萝卜软腐欧文氏菌 渊耘则憎蚤灶蚤葬 糟葬则燥贼燥增燥则葬 泽怎遭泽责援 糟葬则燥贼燥增燥则葬袁 耘糟糟冤引起的细菌性软腐病是导致采
后蔬菜腐败的主要原因之一袁前期研究发现解淀粉芽孢杆菌 渊月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽冤 月郧孕圆园 对该病
害具有较好的生防效果遥 为了进一步提高 月郧孕圆园 对采后蔬菜细菌性软腐病的生防效果袁本研究利用
远园悦燥辐照诱变技术袁对该菌株进行诱变选育遥 结果表明袁在 圆园园 原 愿园园 郧赠 剂量范围内袁远园 悦燥 对 月郧孕圆园 的
致死率随着辐照剂量的增加而迅速上升遥 远园园 郧赠剂量的远园悦燥辐照致死率为 苑愿郾 猿豫 袁选用该剂量进行诱
变选育遥 利用辣椒对 源园怨 株突变菌株的生防效果进行活体评价袁获得 员 株生防效果显著提高的突变菌
株 月郧孕圆园鄄酌渊孕 约 园郾 园缘冤遥 与野生型菌株 月郧孕圆园 相比袁利用突变株 月郧孕圆园鄄酌处理的辣椒伤口腐烂面积
下降 远源郾 源豫 袁其在辣椒伤口上的定殖能力显著提高袁将病原菌 耘糟糟的群体数量限制在一个更低的水平遥
关键词院解淀粉芽孢杆菌曰胡萝卜软腐欧文氏菌曰远园悦燥曰诱变育种曰群体动态
摇 摇 解淀粉芽孢杆菌 渊 月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽冤
月郧孕圆园 菌株是本实验室于 圆园员员 年 员圆 月从长期种植大
白菜和辣椒的菜园土壤中分离获得咱员暂 遥 该生防菌株
产生的次生代谢产物对胡萝卜软腐欧文氏菌 渊耘则憎蚤灶蚤葬
糟葬则燥贼燥增燥则葬 泽怎遭泽责援 糟葬则燥贼燥增燥则葬袁 耘糟糟冤 具有较高的拮抗活
性曰并且在蔬菜伤口上袁月郧孕圆园 相对于病原菌 耘糟糟具有
较强的定殖能力遥 依靠次生拮抗物质和生存竞争能
力袁月郧孕圆园 对 耘糟糟引起的采后蔬菜细菌性软腐病具有
良好的生防效果咱员暂 遥
诱变育种是快速改良野生型微生物菌种资源的主
要方法袁主要包括物理诱变尧化学诱变尧生物诱变尧复合
诱变等方式咱圆 原 源暂 遥 物理方法中的远园悦燥辐照诱变是对微
生物资源进行遗传改良的主要方法之一咱缘 原 怨暂 遥 为了进
一步提高 月郧孕圆园 的生防效果袁本研究利用不同剂量
的远园悦燥对 月郧孕圆园 进行辐照诱变袁对诱变菌株的生防效
果进行活体评价袁比较分析了 月郧孕圆园 野生型与突变菌
株的生防效果遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料
供试菌株院解淀粉芽孢杆菌 月郧孕圆园 为本实验室分
离保存袁具有利福平抗性的胡萝卜软腐欧文氏菌 由南
京农业大学植物保护学院范加勤老师提供遥 试验用辣
椒从南京众采蔬菜批发市场购买遥 所有菌株在 圆再栽
培养基 渊蛋白胨 员苑 早窑蕴 原员袁 酵母浸膏 员园 早窑蕴 原员袁 晕葬悦陨
缘早窑蕴 原员袁 责匀值 苑郾 园冤 中培养袁固体培养基添加琼脂 员苑
早窑蕴 原员遥
员郾 圆摇 月郧孕圆园 菌液的准备及远园悦燥辐照
从平板上挑取 月郧孕圆园 菌株的单菌落于 圆再栽 液体
培养基中袁员缘园 则窑皂蚤灶 原员尧猿园益条件下过夜培养曰然后按
照 员豫 渊增 辕 增冤 的比例接种于新的 圆再栽液体培养基中袁
培养至对数生长期曰将菌液离心浓缩袁用新鲜的 圆再栽
培养基悬浮至菌体密度约 员园员园 悦云哉窑皂蕴 原员袁用 员园 皂蕴
玻璃管封闭好遥 在江苏省农业科学院辐照中心进行
远园悦燥辐照处理袁诱变剂量分别为 园尧圆园园尧源园园尧远园园尧愿园园
郧赠遥
员怨苑员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
员郾 猿摇 辐照致死率的测定
利用灭菌水将辐照菌液梯度稀释袁吸取 员园园 滋蕴凃
布 圆再栽 平板袁每个浓度梯度涂布 猿 个平板遥 然后袁
猿园益条件下培养 员远 澡袁调查每个平板上的单菌落数量袁
计算辐照致死率遥
员郾 源摇 诱变菌株的初步筛选
将 远园园 郧赠剂量的远园悦燥辐照菌液进行梯度稀释袁吸
取 员园园 滋蕴涂布 圆再栽固体平板袁每个浓度梯度涂布 猿 个
平板遥 然后袁猿园益条件下培养 猿远 澡袁挑取较大的菌落于
圆再栽液体培养基中培养 圆源 澡遥 另外袁病原菌 耘糟糟 在
圆再栽 液体培养基中过夜培养袁 培养条件为 员缘园
则窑皂蚤灶 原员尧猿园益袁将培养好的菌液稀释 缘园 倍备用遥 挑选
新鲜尧大小基本一致尧无伤口的健康辣椒袁利用 苑园豫的
乙醇进行消毒 员 皂蚤灶袁然后用灭菌水冲洗袁晾干遥 利用
灭菌手术刀在处理好的辣椒上划长约 缘 皂皂尧深约 员
皂皂 的伤口袁每个伤口接种待测定生防菌菌液 圆园 滋蕴袁
晾干后接种 耘糟糟菌液 缘 滋蕴遥 以仅接种病原菌 耘糟糟的处
理为对照遥 每个处理包含 源 个辣椒遥 将接种好的辣椒
放在乐扣塑料保鲜箱内袁圆圆益条件下孵育 苑圆 澡袁调查辣
椒伤口的腐烂面积遥
员郾 缘摇 诱变菌株的复筛
根据初筛结果袁确定生防效果明显优于野生型菌
株 月郧孕圆园 的诱变菌株遥 将野生型菌株 月郧孕圆园尧初筛的
优良菌株尧耘糟糟和辣椒按照 员郾 源 的描述准备袁用灭菌手
术刀在辣椒表面划 圆郾 缘 糟皂长尧员 皂皂 深的伤口袁首先在
伤口上涂抹 缘园 滋蕴生防菌液袁晾干后接种 员园 滋蕴 耘糟糟菌
液遥 以仅在辣椒伤口滴加 缘园 滋蕴灭菌水的处理为对照
处理袁按照 员郾 源 的描述进行孵育和防效调查遥 每个处
理包括 猿 个独立的重复袁每个重复包含 员园 个辣椒遥
员郾 远摇 野生型菌株 月郧孕圆园 与改良突变菌株生长动态的
比较分析
分别挑取 月郧孕圆园 及突变菌株的单菌落于 圆再栽 培
养基中袁员缘园 则窑皂蚤灶 原员尧猿园益条件下过夜培养遥 然后袁按
照 员豫 渊增 辕 增冤 的比例接种于新的 圆再栽液体培养基中袁
员缘园 则窑皂蚤灶 原员尧猿园益条件下培养遥 按照 员郾 猿 的描述袁分别
于接种后 园尧远 和 圆源 澡调查菌体密度遥
员郾 苑摇 月郧孕圆园尧改良突变菌株和 耘糟糟在辣椒伤口上的生
存动态分析
按照 员郾 缘 的描述接种 月郧孕圆园尧突变菌株和 耘糟糟袁将
接种好的辣椒按照 员郾 缘 的描述进行孵育遥 分别于 园尧
远尧圆源尧源愿尧苑圆 澡袁调查 月郧孕圆园尧突变菌株和 耘糟糟在辣椒伤
口上的群体动态咱员园暂 遥 在每个调查时间点袁每个处理随
机取 缘 个辣椒袁利用灭菌手术刀将辣椒伤口及腐烂区
域切割下来袁放置到灭菌干锅内袁添加 圆 皂蕴 灭菌水研
磨匀浆袁最后利用灭菌水定容至 员园 皂蕴遥 将研磨好的
辣椒样品组织梯度稀释袁分别涂布 圆再栽 平板 渊调查
月郧孕圆园 和突变菌株的菌落数冤 和含有 员园园 滋早窑皂蕴 原员利
福平的 圆再栽平板上 渊调查 耘糟糟 的菌落数冤遥 猿园益条件
下孵育 员远 澡袁调查每个平板上的菌落数量遥 每个处理
包括 猿 个独立的重复袁每个重复接种 猿园 个辣椒遥
员郾 愿摇 统计分析
所有试验数据是 猿 个重复试验结果的平均值遥 利
用 杂孕杂杂 员猿郾 园 软件对试验结果进行统计分析袁采用
栽怎噪藻赠爷泽测验进行差异显著性分析渊孕 约 园郾 园缘冤遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 远园悦燥辐射剂量的选择
远园悦燥辐照剂量与致死率的关系见图 员遥 结果表
明袁远园悦燥辐照致死率随着辐照剂量的增加而迅速上升遥
圆园园 郧赠辐照剂量的致死率仅为 员远郾 员豫 袁源园园尧远园园 郧赠辐
照剂量的致死率迅速上升到 远远郾 猿豫和 苑愿郾 猿豫 袁愿园园 郧赠
辐照剂量的致死率高达 怨远郾 源豫 遥 黄薇等咱员员暂认为 苑园豫
原愿园豫的诱变致死率有利于正突变菌株的产生袁因此袁
本研究选择 远园园 郧赠 辐照剂量的菌液进行诱变菌株的
筛选遥
图 员摇 远园悦燥辐照剂量与生防菌株
月郧孕圆园 致死率的关系
云蚤早援 员摇 砸藻造葬贼蚤燥灶泽澡蚤责 遭藻贼憎藻藻灶 则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 凿燥泽葬早藻 燥枣
远园悦燥 葬灶凿 噪蚤造造 则葬贼藻 燥枣 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 泽贼则葬蚤灶 月郧孕圆园
圆郾 圆摇 改良突变菌株的筛选
将 远园园 郧赠辐照的菌液进行梯度稀释涂布 圆再栽 平
板袁挑取了 源园怨 个单菌落进行摇菌培养遥 利用辣椒直
接测定上述 源园怨 个诱变菌株对 耘糟糟 的生防效果袁结果
发现第 员苑猿 号菌株对 耘糟糟的生防效果显著优于野生型
菌株 月郧孕圆园袁将该菌株命名为 月郧孕圆园鄄酌遥 将 月郧孕圆园鄄酌
在 圆再栽平板上划线培养 远 代袁然后挑取每代的单菌落
圆怨苑员
摇 员圆 期 解淀粉芽孢杆菌 月郧孕圆园鄄酌的诱变选育及生防效果
摇菌发酵袁在辣椒上分别测定它们对 耘糟糟的生防效果袁
结果表明各世代之间没有明显差异袁该突变株的生防
效果稳定遥 从图 圆 和图 猿 可以看出袁孵育 苑圆 澡 后袁野
生型菌株 月郧孕圆园 和突变株 月郧孕圆园鄄酌 对 耘糟糟 引起的辣
椒软腐病均表现出良好的生防效果遥 但是袁与野生型
菌株 月郧孕圆园 相比袁突变株 月郧孕圆园鄄酌处理的辣椒伤口腐
烂面积下降 远源郾 源豫 袁仅为 源圆郾 苑 皂皂圆袁对采后辣椒软腐
病的生防效果显著提高渊孕 约 园郾 园缘冤遥
注院悦燥灶贼则燥造袁仅接种灭菌水曰月郧孕圆园 垣 耘糟糟袁首先接种野生型菌株
月郧孕圆园袁晾 圆 澡后再接种病原菌 耘糟糟曰耘糟糟袁仅接种病原菌 耘糟糟曰月郧孕圆园鄄酌
垣 耘糟糟袁首先接种突变株 月郧孕圆园鄄酌袁晾 圆 澡后再接种病原菌 耘糟糟遥
晕燥贼藻院 悦燥灶贼则燥造袁 杂贼藻则蚤造藻 憎葬贼藻则曰 月郧孕圆园 垣 耘糟糟袁 贼澡藻 糟藻造造 糟怎造贼怎则藻 燥枣 月郧孕圆园
憎葬泽 葬责责造蚤藻凿 责则藻增藻灶贼葬贼蚤增藻造赠 圆 澡 遭藻枣燥则藻 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶 耘糟糟曰
耘糟糟袁 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 燥灶造赠 耘糟糟曰 月郧孕圆园鄄酌 垣 耘糟糟袁 贼澡藻 糟藻造造 糟怎造贼怎则藻 燥枣
月郧孕圆园鄄酌 憎葬泽 葬责责造蚤藻凿 责则藻增藻灶贼葬贼蚤增藻造赠 圆 澡 遭藻枣燥则藻 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 耘糟糟援
图 圆摇 野生型菌株 月郧孕圆园 和突变株 月郧孕圆园鄄酌的生防效果
云蚤早援 圆摇 月蚤燥糟燥灶贼则燥造 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 憎蚤造凿 泽贼则葬蚤灶 月郧孕圆园 葬灶凿
皂怎贼葬灶贼 泽贼则葬蚤灶 月郧孕圆园鄄酌
圆郾 猿摇 野生型 月郧孕圆园 与突变株 月郧孕圆园鄄酌生长动态的
比较分析
生长速度是生防菌的一个重要生物学特性遥 本研
究发现袁在 圆再栽培养基中生长 远 澡时袁突变株 月郧孕圆园鄄酌
的菌体密度为 源郾 远苑 伊 员园远 悦云哉窑皂蕴 原员袁是野生型菌株
月郧孕圆园 菌体密度的 猿怨郾 猿豫 袁两者差异显著 渊 孕 约
园郾 园缘冤遥 但是培养到 圆源 澡 时袁两者差别不显著渊孕 跃
园郾 园缘冤渊图 源冤遥 这个结果表明袁远园悦燥诱变可能降低了突
变株 月郧孕圆园鄄酌对环境条件的应答调节能力袁使 月郧孕圆园鄄
酌早期的生长速度显著低于野生型 月郧孕圆园遥 随着
月郧孕圆园鄄酌对生长环境的适应袁生长速度恢复正常曰同
时袁野生型菌株 月郧孕圆园 进入对数生长后期后袁生长速
度减缓遥 因此袁在培养到 圆源 澡 时袁野生型 月郧孕圆园 和突
注院柱形图上具有不同的字母表示各处理间差异显著 渊孕 约
园郾 园缘冤袁柱形图上的标线代表平均值的标准误遥
晕燥贼藻院 灾葬造怎藻泽 蚤灶 藻葬糟澡 遭葬灶凿 憎蚤贼澡 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 皂藻葬灶 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼
凿蚤枣枣藻则藻灶贼 葬贼 孕 约 园郾 园缘 造藻增藻造援 灾藻则贼蚤糟葬造 遭葬则泽 则藻责则藻泽藻灶贼 泽贼葬灶贼凿葬则凿 藻则则燥则泽
燥枣 贼澡藻 皂藻葬灶泽援
图 猿摇 不同处理辣椒伤口的腐烂面积
云蚤早援 猿摇 蕴藻泽蚤燥灶 葬则藻葬泽 燥枣 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼则藻葬贼皂藻灶贼泽 蚤灶 责藻责责藻则泽
图 源摇 野生型 月孕郧圆园 及突变株 月郧孕圆园鄄酌
在 圆再栽培养基中的生长动态
云蚤早援 源摇 郧则燥憎贼澡 凿赠灶葬皂蚤糟泽 燥枣 憎蚤造凿 泽贼则葬蚤灶 月郧孕圆园
葬灶凿 皂怎贼葬灶贼 泽贼则葬蚤灶 月郧孕圆园鄄酌 蚤灶 圆再栽 皂藻凿蚤怎皂
变株 月郧孕圆园鄄酌的菌体密度差异不显著遥
圆郾 源摇 生防菌和病原菌在辣椒伤口上的群体竞争动态
分析
在接种后 远 澡袁野生型菌株 月郧孕圆园 和突变株
月郧孕圆园鄄酌在辣椒伤口上的群体密度分别下降 怨苑郾 园豫
和 愿怨郾 缘豫 袁原因可能是由于辣椒早期的强大防卫反应
杀死了大部分生防菌遥 此后袁野生型菌株 月郧孕圆园 和突
变株 月郧孕圆园鄄酌的群体密度迅速增加袁均表现出较强的
生存竞争能力渊图 缘冤遥 突变株 月郧孕圆园鄄酌 在辣椒伤口
上的群体密度明显高于野生型菌株 月郧孕圆园袁在接种后
猿怨苑员
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
苑圆 澡袁月郧孕圆园鄄酌的群体密度是 月郧孕圆园 的 猿 倍遥 另外袁与
野生型菌株 月郧孕圆园 相比袁月郧孕圆园鄄酌 对辣椒伤口上病原
菌 耘糟糟 的增殖具有更强的抑制作用遥 在接种后 苑圆 澡袁
月郧孕圆园鄄酌处理辣椒伤口上的 耘糟糟群体密度仅为 月郧孕圆园
处理的 园郾 愿豫 遥 以上结果表明袁在与病原菌 耘糟糟的互作
过程中袁突变株 月郧孕圆园鄄酌比野生型菌株 月孕郧圆园 具有更
强的生存竞争能力遥
注院耘糟糟鄄悦燥灶贼则燥造袁 仅接种病原菌 耘糟糟 辣椒伤口上的 耘糟糟 群体动态曰
月郧孕圆园袁 在 月郧孕圆园 生防 耘糟糟过程中袁辣椒伤口上 月郧孕圆园 的群体动态曰
耘糟糟鄄月袁 在 月郧孕圆园 生防 耘糟糟 过程中袁辣椒伤口上 耘糟糟 的群体动态曰
月郧孕圆园鄄酌袁在 月郧孕圆园鄄酌生防 耘糟糟过程中袁辣椒伤口上 月郧孕圆园鄄酌的群体
动态曰耘糟糟鄄月酌袁 在 月郧孕圆园鄄酌生防 耘糟糟过程中袁辣椒伤口上 耘糟糟 的群体
动态遥
晕燥贼藻院 耘糟糟鄄悦燥灶贼则燥造袁 责燥责怎造葬贼蚤燥灶 凿赠灶葬皂蚤糟泽 燥枣 贼澡藻 责葬贼澡燥早藻灶 耘糟糟 蚤灶 贼澡藻
憎燥怎灶凿泽 燥枣 责藻责责藻则泽 蚤灶燥糟怎造葬贼藻凿 憎蚤贼澡 燥灶造赠 耘糟糟曰 月郧孕圆园袁 责燥责怎造葬贼蚤燥灶
凿赠灶葬皂蚤糟泽 燥枣 月郧孕圆园 蚤灶 贼澡藻 憎燥怎灶凿泽 燥枣 责藻责责藻则泽 贼则藻葬贼藻凿 责则藻增藻灶贼葬贼蚤增藻造赠 遭赠
月郧孕圆园 圆 澡 遭藻枣燥则藻 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 耘糟糟曰 耘糟糟鄄月袁 责燥责怎造葬贼蚤燥灶 凿赠灶葬皂蚤糟泽 燥枣
耘糟糟 蚤灶 贼澡藻 憎燥怎灶凿泽 燥枣 责藻责责藻则泽 贼则藻葬贼藻凿 责则藻增藻灶贼葬贼蚤增藻造赠 遭赠 月郧孕圆园 圆 澡 遭藻枣燥则藻
蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 耘糟糟曰 月郧孕圆园鄄酌袁 责燥责怎造葬贼蚤燥灶 凿赠灶葬皂蚤糟泽 燥枣 月郧孕圆园鄄酌 蚤灶 贼澡藻
憎燥怎灶凿泽 燥枣 责藻责责藻则泽 贼则藻葬贼藻凿 责则藻增藻灶贼葬贼蚤增藻造赠 遭赠 月郧孕圆园鄄酌 圆 澡 遭藻枣燥则藻
蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡 耘糟糟曰 耘糟糟鄄月酌袁 责燥责怎造葬贼蚤燥灶 凿赠灶葬皂蚤糟泽 燥枣 耘糟糟 蚤灶 贼澡藻 憎燥怎灶凿泽
燥枣 责藻责责藻则泽 贼则藻葬贼藻凿 责则藻增藻灶贼葬贼蚤增藻造赠 遭赠 月郧孕圆园鄄酌 圆 澡 遭藻枣燥则藻 蚤灶燥糟怎造葬贼蚤燥灶 憎蚤贼澡
耘糟糟援
图 缘摇 生防菌和病原菌在辣椒伤口上的群体动态
云蚤早援 缘摇 孕燥责怎造葬贼蚤燥灶 凿赠灶葬皂蚤糟泽 燥枣 遭蚤燥糟燥灶贼则燥造 泽贼则葬蚤灶泽
葬灶凿 责葬贼澡燥早藻灶蚤糟 遭葬糟贼藻则蚤葬 蚤灶 贼澡藻 憎燥怎灶凿泽 燥枣 责藻责责藻则泽
猿摇 讨论
胡萝卜软腐欧文氏菌引起的细菌性软腐病是许多
蔬菜生育期及贮藏期的主要病害之一袁特别是对采后
十字花科及茄科蔬菜造成严重危害咱员圆 原 员猿暂 遥 随着人们
食品安全意识的提高袁化学农药和抗生素被禁止在采
后蔬菜上应用袁基于微生物源的生物防治被认为是采
后蔬菜病害防治的主要发展方向之一咱员源 原 员缘暂 遥
利用远园悦燥进行诱变育种是目前生产中广泛应用的
遗传育种方法之一袁特别是对难以进行遗传操作的微
生物和植物材料进行诱变育种咱苑袁怨袁员远 原 员怨暂 遥 由于不同微
生物对远园悦燥辐照剂量的耐受能力差异较大袁利用远园 悦燥
对微生物进行诱变育种研究时袁首先要根据诱变致死
率和突变效率确定合适的辐照剂量咱缘袁怨袁员苑袁圆园暂 遥 黄薇和
邹玉玲等咱员员袁圆员暂认为 苑园豫 耀 愿园豫或更低的诱变致死率
有利于正突变菌株的产生袁但是邹玉玲等认为远园悦燥的
辐照剂量与正突变率没有直接相关性遥 本研究发现袁
圆园园 耀 愿园园 郧赠 辐照剂量的正突变率非常低袁从每个辐
照剂量随机挑选 猿园 个菌株袁均没有筛选到生防效果显
著提高的突变株遥 根据黄薇等咱员员暂的建议袁我们选择
远园园 郧赠 的辐照菌液进行筛选袁该剂量的致死率为
苑愿郾 猿豫 袁从 源园怨 个菌株中仅筛选到 员 株生防效果显著
提高的突变株遥 已有报道和研究结果表明袁辐照菌株
和评价标准的不同都可能导致正突变率差异巨大遥
拮抗次生代谢产物和营养及空间的竞争是生防菌
的两个主要生防机制咱员源暂 遥 前期研究发现袁野生型菌株
月郧孕圆园 对采后蔬菜细菌性软腐病的生防功能也主要
通过这两个途径实现咱员暂 遥 生防菌的诱变改良研究主
要集中在提高其拮抗次生代谢产物的产量咱圆圆 原 圆源暂 遥 但
是袁本研究发现改良突变株 月郧孕圆园鄄酌 的拮抗次生代谢
产物产量与野生型菌株 月郧孕圆园 没有明显差异遥
截止目前袁关于辐射诱变对改良菌株在寄主伤口
上生存竞争能力影响的研究报道还不多见遥 本研究发
现袁在 圆再栽 液体培养基中袁改良突变株 月郧孕圆园鄄酌 的早
期生长显著低于野生型菌株 月郧孕圆园袁但是袁培养到 圆源 澡
时差异不显著遥 在辣椒伤口上袁月郧孕圆园鄄酌 的群体水平
显著高于 月郧孕圆园袁并且 月郧孕圆园鄄酌 对病原菌 耘糟糟 的增殖
具有更强的抑制作用袁从而获得更好的生防效果遥 这
种在 圆再栽培养基和辣椒伤口上生长动态的不一致袁应
该是由于生长环境的不同造成的遥 圆再栽培养基是一种
无生命特征的营养丰富基质袁只有单一的生防菌在其
中生长遥 但是袁在生防过程中袁生防菌尧病原菌和寄主
辣椒存在复杂的互作关系袁营养相对匮乏袁病原菌和生
防菌之间存在激烈的营养和空间竞争遥
源摇 结论
本研究利用 远园园 郧赠 的远园 悦燥 辐照剂量对生防菌解
淀粉芽孢杆菌 月郧孕圆园 进行诱变选育袁通过活体筛选获
得 员 株对采后蔬菜细菌性软腐病生防效果显著提高的
突变株 月郧孕圆园鄄酌遥 与野生型菌株 月郧孕圆园 相比袁突变株
月郧孕圆园鄄酌在辣椒伤口上具有更强的生存竞争能力袁进
源怨苑员
摇 员圆 期 解淀粉芽孢杆菌 月郧孕圆园鄄酌的诱变选育及生防效果
一步降低了病原菌 耘糟糟 在辣椒伤口上的增殖速度袁从
而达到更好的生防效果遥
参考文献院
咱 员 暂摇 在澡葬燥 再 在袁 蕴蚤 孕 载袁 匀怎葬灶早 运 匀袁 宰葬灶早 再 晕袁 匀怎 匀 蕴袁 杂怎灶 再援
悦燥灶贼则燥造 燥枣 责燥泽贼澡葬则增藻泽贼 泽燥枣贼 则燥贼 糟葬怎泽藻凿 遭赠 耘则憎蚤灶蚤葬 糟葬则燥贼燥增燥则葬 燥枣
增藻早藻贼葬遭造藻泽 遭赠 葬 泽贼则葬蚤灶 燥枣 月葬糟蚤造造怎泽 葬皂赠造燥造蚤择怎藻枣葬糟蚤藻灶泽 葬灶凿 蚤贼泽 责燥贼藻灶贼蚤葬造
皂燥凿藻泽 燥枣 葬糟贼蚤燥灶 咱 允 暂 援 宰燥则造凿 允燥怎则灶葬造 燥枣 酝蚤糟则燥遭蚤燥造燥早赠 葬灶凿
月蚤燥贼藻糟澡灶燥造燥早赠袁 圆园员猿袁 圆怨院源员员 原 源圆园
咱 圆 暂摇 韩丽丽袁 刘敏援 诱变方法在微生物育种中的应用咱 允暂 援 酿酒袁
圆园园愿袁 猿缘渊猿冤院 员远 原 员愿
咱 猿 暂摇 李荣杰援 微生物诱变育种方法研究进展咱 允暂 援 河北农业科学袁
圆园园怨袁 员猿渊员园冤院 苑猿 原 苑远袁 苑愿
咱 源 暂摇 张敏袁 汤志良袁 舒凯袁 赵丹萍袁 胡晓援 抗姜瘟病菌芽孢杆菌的诱
变改良咱允暂 援 浙江大学学报院农业与生命科学版袁 圆园员园袁 猿远渊圆冤院
员缘猿 原 员缘愿
咱 缘 暂摇 李卫旗袁 何国庆援 远园悦燥酌 射线诱变选育热凝胶多糖高产菌株的
研究咱允暂援 核农学报袁 圆园园猿袁 员苑渊缘冤院猿源猿 原 猿源远
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