全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊苑冤院员园远源 耀 员园远怨
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员员鄄员圆鄄圆源摇 接受日期院圆园员圆鄄园源鄄圆源
基金项目院国家转基因生物新品种培育项目渊圆园园愿在载园愿园园圆园园猿袁圆园园怨在载园愿园园圆园园愿月冤袁安徽省高校省级自然科学基金研究项目渊 运允圆园园苑月员苑员袁
运允圆园园怨月园苑猿冤袁淮北市应用性技术研究与开发重大项目渊园愿园员园源冤
作者简介院宋运贤渊员怨苑远鄄冤袁男袁江苏宿迁人袁硕士袁副教授袁主要从事农业生物技术研究遥 耘鄄皂葬蚤造院泽燥灶早赠怎灶曾蚤葬灶岳 赠葬澡燥燥援 糟燥皂援 糟灶
通讯作者院陈耀锋渊员怨缘远鄄冤袁男袁陕西岐山人袁博士袁教授袁主要从事小麦生物技术育种研究遥 耘鄄皂葬蚤造院 糟澡藻灶赠枣猿愿圆愿岳 员圆远援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园苑鄄员园远源鄄园远
低温预处理对小麦花药内源激素的影响
宋运贤员袁圆 摇 周素英猿 摇 杜雪玲员 摇 王摇 建员 摇 余如刚员摇 李桂萍员摇 王摇 倩员摇 陈耀锋圆
渊员援淮北师范大学生命科学学院袁安徽 淮北摇 圆猿缘园园园曰圆援西北农林科技大学农学院袁陕西 杨凌摇 苑员圆员园园曰猿援濉溪农科所 安徽 淮北摇 圆猿缘园园园冤
摘摇 要院以烟农 员怨 和皖麦 源员 为材料袁应用酶联免疫吸附法渊耘蕴陨杂粤冤测定不同时间低温预处理的小麦花
药内源激素 粤月粤尧郧粤猿尧允粤尧陨粤粤含量袁并统计了低温预处理后小麦花药愈伤组织诱导率和胚性愈伤组织
比例袁分析了低温预处理过程中小麦花药内源激素的变化规律及其对花药培养特性的影响遥 结果显示袁
小麦花药低温预处理 圆凿愈伤组织诱导率最高袁低温预处理 远凿胚性愈伤组织比例达到最大曰低温预处理
改变了花药内源激素 粤月粤尧郧粤尧允粤尧陨粤粤的含量袁粤月粤尧郧粤尧允粤含量随预处理时间的延长呈较大的波动变
化曰低温预处理 远凿时 粤月粤袁允粤含量达最大值袁郧粤呈波动下降趋势袁陨粤粤含量在低温预处理 圆凿达到最高
值袁其后逐渐下降曰陨粤粤尧陨粤粤 辕 粤月粤尧陨粤粤 辕 允粤 变化与花药愈伤组织诱导率表现出很强的正相关袁粤月粤尧允粤
与胚性愈伤组织比例表现出很强的正相关袁郧粤 辕 粤月粤与胚性愈伤组织比例表现出负相关遥 表明低温预
处理改变了小麦花药内源激素的含量和比例袁阻断了花粉原来的发育方向袁使其由配子体的发育途径转
向孢子体的发育途径袁从而影响了小麦花药培养诱导产生的愈伤组织的数量和质量遥
关键词院小麦曰花药培养曰内源激素曰低温预处理曰相关性分析
耘云云耘悦栽 韵云 蕴韵宰 栽耘酝孕耘砸粤栽哉砸耘 孕砸耘栽砸耘粤栽酝耘晕栽 韵晕
栽匀耘 灾粤砸陨粤栽陨韵晕 韵云 耘晕阅韵郧耘晕韵哉杂 匀韵砸酝韵晕耘杂 陨晕 宰匀耘粤栽 粤晕栽匀耘砸
杂韵晕郧 再怎灶鄄曾蚤葬灶员袁圆 摇 在匀韵哉 杂怎鄄赠蚤灶早猿 摇 阅哉 载怎藻鄄造蚤灶早员 摇 宰粤晕郧 允蚤葬灶员 摇 再哉 砸怎鄄早葬灶早员 摇
蕴陨 郧怎蚤鄄责蚤灶早员 摇 宰粤晕郧 匝蚤葬灶员 摇 悦匀耘晕 再葬燥鄄枣藻灶早圆
渊员援 悦燥造造藻早藻 燥枣 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻袁 匀怎葬蚤遭藻蚤 晕燥则皂葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 匀怎葬蚤遭藻蚤袁 粤灶澡怎蚤摇 圆猿缘园园园曰
圆援 悦燥造造藻早藻 燥枣 粤早则燥灶燥皂赠 袁 晕燥则贼澡憎藻泽贼 粤驭云 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠 袁 再葬灶早造蚤灶早 袁 杂澡葬葬灶曾蚤摇 苑员圆员园园曰
猿援 杂怎蚤曾蚤 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 匀怎葬蚤遭藻蚤袁 粤灶澡怎蚤摇 圆猿缘园园园冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 造燥憎 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 贼澡藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 藻灶凿燥早藻灶燥怎泽 澡燥则皂燥灶藻泽 渊粤月粤袁 郧粤袁 允粤 葬灶凿 陨粤粤冤
燥枣 憎澡藻葬贼 葬灶贼澡藻则 憎葬泽 泽贼怎凿蚤藻凿 贼燥 藻曾责造燥则藻 贼澡藻 则燥造藻 燥枣 藻灶凿燥早藻灶燥怎泽 澡燥则皂燥灶藻泽 蚤灶 贼澡藻 凿藻凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 憎澡藻葬贼 葬灶贼澡藻则援 宰蚤贼澡 贼憎燥
憎澡藻葬贼 增葬则蚤藻贼蚤藻泽袁 再葬灶灶燥灶早 员怨 葬灶凿 宰葬灶皂葬蚤 源员 葬泽 皂葬贼藻则蚤葬造泽袁 藻灶扎赠皂藻鄄造蚤灶噪藻凿 蚤皂皂怎灶燥 泽燥则遭藻灶贼 葬泽泽葬赠 渊耘蕴陨杂粤冤 皂藻贼澡燥凿 憎葬泽
怎泽藻凿 贼燥 凿藻贼藻则皂蚤灶藻 贼澡藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 郧粤猿袁 陨粤粤袁 粤月粤 葬灶凿 允粤 燥枣 憎澡藻葬贼 葬灶贼澡藻则 贼则藻葬贼藻凿 遭赠 造燥憎 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 葬贼 凿蚤枣枣藻则藻灶贼 贼蚤皂藻援悦燥皂遭蚤灶蚤灶早 贼澡藻 蚤灶枣造怎藻灶糟藻 燥枣 造燥憎 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 贼澡藻 枣则藻择怎藻灶糟赠 燥枣 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 葬灶凿 贼澡藻 则葬贼蚤燥 燥枣
藻皂遭则赠燥早藻灶蚤糟 糟葬造造蚤袁 贼澡藻 糟澡葬灶早藻 造葬憎 燥枣 藻灶凿燥早藻灶燥怎泽 澡燥则皂燥灶藻泽 葬灶凿 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 造燥憎 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 贼澡藻 糟怎造贼怎则藻
糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 燥枣 憎澡藻葬贼 葬灶贼澡藻则 憎藻则藻 葬灶葬造赠扎藻凿 遭赠 则藻造葬贼蚤增藻 泽贼葬贼蚤泽贼蚤糟 泽燥枣贼憎葬则藻援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 葬枣贼藻则 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 造燥憎
贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 枣燥则 圆 凿葬赠泽袁 贼澡藻 憎澡藻葬贼 葬灶贼澡藻则 澡葬凿 贼澡藻 澡蚤早澡藻泽贼 枣则藻择怎藻灶糟赠 燥枣 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶 则葬贼蚤燥 憎澡蚤造藻 贼澡藻 则葬贼蚤燥 燥枣
藻皂遭则赠燥早藻灶蚤糟 糟葬造造蚤 则藻葬糟澡藻凿 贼澡藻 皂葬曾蚤皂怎皂 葬枣贼藻则 贼则藻葬贼藻凿 憎蚤贼澡 造燥憎 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 枣燥则 远 凿葬赠泽援 栽澡藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 藻灶凿燥早藻灶燥怎泽 粤月粤袁
郧粤袁 允粤 葬灶凿 陨粤粤 蚤灶 憎澡藻葬贼 葬灶贼澡藻则 增葬则蚤藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 造燥憎鄄贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼袁葬灶凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 责则燥造燥灶早葬贼蚤燥灶 燥枣 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼
源远园员
摇 苑 期 低温预处理对小麦花药内源激素的影响
凿怎则葬贼蚤燥灶袁 贼澡藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 粤月粤袁 郧粤袁 允粤 澡葬凿 造葬则早藻则 枣造怎糟贼怎葬贼蚤燥灶援 栽则藻葬贼藻凿 枣燥则 远 凿葬赠泽袁 贼澡藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 粤月粤 葬灶凿 允粤 则藻葬糟澡藻凿
贼澡藻 皂葬曾蚤皂怎皂援 栽澡藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 郧粤 藻曾澡蚤遭蚤贼藻凿 枣造怎糟贼怎葬贼蚤灶早 葬灶凿 凿藻泽糟藻灶凿蚤灶早 贼藻灶凿藻灶糟赠袁 葬灶凿 陨粤粤 则藻葬糟澡藻凿 贼澡藻 皂葬曾蚤皂怎皂 葬枣贼藻则 圆
凿葬赠泽 葬灶凿 凿藻糟则藻葬泽蚤灶早 早则葬凿怎葬造造赠 葬枣贼藻则憎葬则凿援 栽澡藻 糟燥则则藻造葬贼蚤燥灶 葬灶葬造赠泽蚤泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 陨粤粤袁 陨粤粤 辕 粤月粤袁 陨粤粤 辕 允粤 责燥泽蚤贼蚤增藻造赠
糟燥则则藻造葬贼藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 枣则藻择怎藻灶糟赠 燥枣 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶袁 葬灶凿 粤月粤 葬灶凿 允粤 责燥泽蚤贼蚤增藻造赠 糟燥则则藻造葬贼藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 则葬贼蚤燥 燥枣 藻皂遭则赠燥早藻灶蚤糟
糟葬造造蚤援 栽澡藻则藻 憎葬泽 葬 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼造赠 灶藻早葬贼蚤增藻 糟燥则则藻造葬贼蚤燥灶 遭藻贼憎藻藻灶 贼澡藻 郧粤 辕 粤月粤 葬灶凿 贼澡藻 则葬贼蚤燥 燥枣 藻皂遭则赠燥早藻灶蚤糟 糟葬造造蚤援 蕴燥憎
贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 糟澡葬灶早藻凿 贼澡藻 糟燥灶贼藻灶贼 燥枣 藻灶凿燥早藻灶燥怎泽 澡燥则皂燥灶藻泽 葬灶凿 贼澡藻蚤则 则葬贼蚤燥 蚤灶 贼澡藻 葬灶贼澡藻则泽袁 贼澡怎泽 蚤灶贼藻则则怎责贼藻凿
责则藻增蚤燥怎泽 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 凿蚤则藻糟贼蚤燥灶 燥枣 责燥造造藻灶 葬灶凿 蚤灶凿怎糟藻凿 皂蚤糟则燥泽责燥则藻泽 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼 枣则燥皂 早葬皂藻贼燥责澡赠贼蚤糟 憎葬赠 贼燥 泽责燥则燥责澡赠贼蚤糟
憎葬赠袁 憎澡蚤糟澡 蚤灶枣造怎藻灶糟藻凿 贼澡藻 择怎葬造蚤贼赠 葬灶凿 择怎葬灶贼蚤贼赠 燥枣 糟葬造造蚤
运藻赠 憎燥则凿泽院憎澡藻葬贼曰 葬灶贼澡藻则 糟怎造贼怎则藻曰 藻灶凿燥早藻灶燥怎泽 澡燥则皂燥灶藻泽曰 造燥憎 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼曰 糟燥则则藻造葬贼蚤燥灶 葬灶葬造赠泽蚤泽
摇 摇 虽然利用花药培养技术已选育了一批小麦新品
种袁如京花 员 号尧川辐 缘 号尧花培 远 号等袁但小麦花药离
体培养中诱导再生的频率仍然不高袁致使绿苗产率低袁
选择群体小袁满足不了育种工作的需求遥 以往研究多
注重对培养基的筛选和培养条件的作用进行探讨袁而
对小孢子诱导机制尧启动机理尧生理生化变化的关系等
研究不多遥
已有研究表明内源激素对基因活动起着调控作
用咱员暂 袁从而影响一系列代谢过程袁最终影响到植物细
胞胚性潜力的诱导尧维持和表达遥 内源激素 陨粤粤尧郧粤尧
粤月粤与愈伤组织形成关系密切袁郭子彪发现咱圆暂 袁内源
激素 陨粤粤 含量高袁愈伤组织容易诱导曰内源激素 粤月粤
含量高袁愈伤组织容易分化遥 粤则蚤藻咱猿暂则认为 粤月粤 在促
进柑桔芽愈伤组织的形成中起到了重要作用遥 内源激
素对胚性细胞及体胚的形成有重要作用袁胚性细胞出
现时伴随着较高的内源 陨粤粤咱源暂 袁高水平的内源 粤月粤对
植物胚胎发育尧体细胞胚的发生发育过程有调节作
用咱缘暂 遥 因此探究小麦花药培养过程中内源激素的作
用规律袁对于促进小麦花药愈伤组织的诱导和胚性愈
伤的诱导具有重要意义遥
低温预处理对花药培养内源激素的影响已有报
道遥 杂怎灶凿藻则造葬灶凿等发现烟草花药在低温贮藏过程中内
源 粤月粤含量上升袁认为低温预处理有助于花粉由配子
体途径转向孢子体途径发育咱远暂 遥 徐武等在大麦花药
培养中推测低温预处理改变了花药内源 陨粤粤 和 蚤孕粤
含量袁阻断了花粉固有发育方向咱苑暂 遥 在辣椒花药培养
中低温预处理通过改变花药内源 陨粤粤 和 粤月粤 含量而
改变小孢子的发育方向咱愿暂 遥 但低温预处理对小麦花
药内源激素的影响未见相关报道袁尤其是内源激素茉
莉酸渊允粤冤在花药培养中的作用未见相关报道遥 本文
拟采用酶联免疫吸附法渊耘蕴陨杂粤冤袁通过不同低温预处
理时间对小麦花药培养力的影响袁研究小麦花药中内
源激素的含量和比例袁分析培养力的高低与内源激素
含量和比例的关系及其规律性袁以探明内源激素在小
麦花药愈伤组织诱导中的作用袁为有目标性的通过外
部条件处理来协调小麦花药培养过程中内源激素的平
衡袁进而为提高小麦绿苗产率奠定基础遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 试验材料
烟农 员怨 和皖麦 源员袁由淮北师范大学生命科学学
院农业生物技术实验室提供遥
员郾 圆摇 试验方法
员郾 圆郾 员摇 花药培养摇 取大田种植经镜检小孢子发育到
单核靠边期的小麦幼穗置于保鲜袋袁并用湿纱布包裹袁
在 源益冰箱中分别低温处理 园渊悦运冤尧圆尧源尧远尧愿 和 员园凿袁
接种前用 苑缘豫乙醇擦拭麦穗袁无菌条件下取出花药接
种于癸 垣圆袁源 原 阅 圆郾 园皂早 辕 蕴 垣 运栽 园郾 缘皂早 辕 蕴 垣蔗糖 怨园早 辕
蕴 垣琼脂 远早 辕 蕴诱导培养基中袁每处理接种 愿 耀 员园 瓶袁每
瓶 员圆园 枚左右袁渊圆缘 依 员冤益暗培养 圆 周后于 员缘园园 耀
圆园园园造曾条件下袁每日光照 员圆澡袁缘园凿后统计花药出愈率尧
胚性愈伤组织诱导率和胚性愈伤组织的比例遥 各试验
处理重复 猿 次遥
出愈率 越 产生的愈伤组织数 辕接种花药数 伊
员园园豫 曰胚性愈伤组织诱导率 越产生的胚性愈伤组织
数 辕接种花药数 伊 员园园豫 曰胚性愈伤组织比例 越产生的
胚性愈伤组织数 辕产生的愈伤组织总数 伊员园园豫 遥
员郾 圆郾 圆摇 内源激素测定摇 内源激素测定方法参照何钟
佩咱怨暂的酶联免疫吸附法渊耘蕴陨杂粤冤遥 样品处理参照文献
咱员园暂袁并作适当改进遥 分别取不同低温预处理时间的
小麦花药 园郾 圆早左右袁用 愿园豫甲醇渊含 员皂皂燥造 辕 蕴二叔丁
基对甲苯酚渊月匀栽冤冤匀浆袁源益提取 源澡袁源园园园则 辕 皂蚤灶离心
员缘皂蚤灶袁沉淀后再用 愿园豫甲醇提取 员澡袁合并上清液袁上
清液过 悦 原 员愿 固相萃取柱袁氮气吹干袁样品稀释液定
容遥 采用 耘蕴陨杂粤测定样品中吲哚乙酸渊陨粤粤冤尧赤霉素
渊郧粤猿冤尧茉莉酸渊允粤冤和脱落酸渊粤月粤冤含量遥 所用仪器
为 阅郧缘园猿圆 型酶联免疫检测仪渊南京华东电子集团冤袁
缘远园员
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
激素试剂盒由中国农业大学作物化学控制研究室提
供遥 每个样品重复测定 猿 次袁取平均值遥 各处理重复
猿 次遥
员郾 猿摇 数据分析
用 酝蚤灶贼葬遭员缘 软件对数据进行相关性分析袁应用
耘曾糟藻造软件进行绘图遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 不同低温预处理时间对小麦花药脱分化的影响
不同低温预处理时间对小麦花药培养的影响结果
见图 员遥 图 员 表明袁适当的低温预处理有利于小麦花
药的脱分化袁经过 圆凿 低温预处理袁小麦花药岀愈率达
到最大袁与相应对照相比袁烟农 员怨 提高 员愿源豫 袁皖麦 源员
提高 员远苑豫 袁随着处理天数增加袁花药出愈率呈现下降
趋势袁烟农 员怨 低温预处理 远凿后袁小麦花药岀愈率低于
对照袁但处理 员园凿后略高于对照曰皖麦 源员 低温处理 愿凿
后出愈率低于对照遥 从胚性愈伤组织比例看袁圆凿 时 圆
个品种低于对照袁随后升高袁低温预处理 远凿 胚性愈伤
组织比例达到最大袁烟农 员怨 达 苑远郾 怨圆豫 袁相比对照提
高 源猿豫 袁皖麦 源员 达 愿员郾 源愿豫 袁较对照提高 苑远豫 袁随后逐
渐下降遥 综上结果袁低温预处理 圆凿可以提高愈伤组织
诱导率和胚性愈伤组织诱导率袁处理 远凿可以提高胚性
愈伤的比例遥
图 员摇 低温预处理对小麦花药脱分化的影响
云蚤早援 员摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 造燥憎鄄贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 贼澡藻 凿藻凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 憎澡藻葬贼 葬灶贼澡藻则
圆郾 圆摇 低温预处理对小麦花药内源激素含量的影响
圆郾 圆郾 员摇 内源 粤月粤的变化摇 图 圆 为不同时间低温预处
理后花药中 粤月粤变化情况袁烟农 员怨 和皖麦 源员 两个基
因型在取材时 粤月粤含量相差较多袁但在低温预处理过
程中花药 粤月粤的动态变化趋势大致相同袁即低温预处
理 圆凿 粤月粤含量最低袁随后升高袁源凿 后 粤月粤 含量都大
于对照遥 处理 远凿 粤月粤 含量最高袁烟农 员怨 含量为
圆源猿员郾 苑灶早 辕 早窑云宰袁皖麦 源员 为 远员猿员郾 缘灶早 辕 早窑云宰袁分别比
相应对照提高 员猿缘豫和 猿员圆豫 遥 远 耀 员园凿 两基因型小麦
花药 粤月粤呈下降趋势遥 在低温预处理前以及预处理
过程中皖麦 源员 的 粤月粤 含量都明显高于烟农 员怨袁说明
粤月粤的含量存在明显的基因型差异遥
圆郾 圆郾 圆摇 内源 郧粤 的变化摇 通过对不同预处理时间小
麦花药 郧粤猿含量的研究渊图 猿冤表明袁烟农 员怨 和皖麦 源员
的内源 郧粤猿含量在未经低温预处理前已有差异袁且均
随时间的延长呈现波动较大的下降趋势遥 园 耀 源凿 两个
基因型小麦花药呈下降趋势袁第 源 天具有较低值袁分别
图 圆摇 低温预处理对 粤月粤含量的影响
云蚤早援 圆摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 造燥憎鄄贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 粤月粤 糟燥灶贼藻灶贼
为 猿愿愿圆郾 圆渊烟农 员怨冤和 源员远缘郾 缘灶早 辕 早窑云宰渊皖麦 源员冤遥 源
耀 愿凿袁郧粤猿含量又呈上升趋势袁在第 愿 天达到高峰袁分
别为 远员员员郾 怨 和 远愿远员郾 员灶早 辕 早窑云宰袁之后又呈下降趋势遥
圆郾 圆郾 猿摇 内源 允粤的变化摇 如图 源 所示袁烟农 员怨 和皖麦
远远园员
摇 苑 期 低温预处理对小麦花药内源激素的影响
图 猿摇 低温预处理对 郧粤含量的影响
云蚤早援 猿 耘枣枣藻糟贼 燥枣 造燥憎鄄贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 郧粤 糟燥灶贼藻灶贼
源员 在低温预处理过程中内源 允粤的变化大致呈相似的
趋势遥 圆凿时烟农 员怨 略有下降袁皖麦 源员 下降幅度较
大袁圆 耀 远凿 两个基因型小麦花药 允粤 含量迅速上升袁并
且都在第 远 天时达到最高峰值袁分别是 猿园缘怨郾 缘 和
猿园园源郾 猿灶早 辕 早窑云宰袁皖麦 源员 低于烟农 员怨遥 随后 允粤 含量
便呈下降趋势袁但 圆 个基因型间含量相差较大袁皖麦
源员 明显高于烟农 员怨遥
图 源摇 低温预处理对 允粤含量的影响
云蚤早援 源摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 造燥憎鄄贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 允粤 糟燥灶贼藻灶贼
圆郾 圆郾 源摇 内源 陨粤粤的变化摇 由图 缘 可以看出袁低温预处
理早期袁烟农 员怨 和皖麦 源员 的内源 陨粤粤含量显著升高袁
圆凿时达到最大袁分别为 员苑愿园郾 愿 和 圆缘员苑郾 员灶早 辕 早窑云宰袁随
后均呈下降趋势袁烟农 员怨袁远凿 时的内源 陨粤粤 达到最低
值袁之后又逐渐上升袁在 员园凿有个次高峰袁皖麦 源员 则一
直呈现下降趋势遥 烟农 员怨 低温处理 远凿后内源 陨粤粤含
量低于对照袁皖麦 源员 低温预处理 愿凿后低于对照遥
圆郾 猿摇 低温预处理过程中小麦花药的内源激素与脱分
化的相关性分析
图 缘摇 低温预处理对 陨粤粤含量的影响
云蚤早援 缘 耘枣枣藻糟贼 燥枣 造燥憎鄄贼藻皂责藻则葬贼怎则藻 责则藻贼则藻葬贼皂藻灶贼 燥灶 陨粤粤 糟燥灶贼藻灶贼
利用 酝蚤灶蚤贼葬遭员缘 对低温预处理过程中内源激素与
花药出愈率尧胚性愈伤组织比例的相关性进行分析袁结
果见表 员遥 在低温预处理过程中袁烟农 员怨 和皖麦 源员
的 陨粤粤尧陨粤粤 辕 粤月粤尧陨粤粤 辕 允粤 变化与花药岀愈率表现出
很强的正相关袁与 陨粤粤 相关性达到极显著水平袁与
陨粤粤 辕 粤月粤尧陨粤粤 辕 允粤的相关性达到显著水平遥 粤月粤尧允粤
与胚性愈伤组织的比例表现出很强的正相关袁除皖麦
源员胚性愈伤组织比例与 粤月粤 相关性达显著水平外袁
其余都达极显著水平遥 烟农 员怨尧皖麦 源员 胚性愈伤组
织比例与 郧粤 辕 粤月粤 表现出负相关袁差异达显著水平遥
另外袁低温预处理过程中内源激素变化与胚性愈伤组
织比例的相关性在 圆 个基因型间表现有差异袁烟农 员怨
与 陨粤粤尧陨粤粤 辕 粤月粤尧陨粤粤 辕 允粤 表现负相关袁差异显著袁而
皖麦 源员 差异不显著遥
猿摇 讨论
已有报道袁在许多作物中低温预处理有利于提高花
药培养效率咱员员 耀 员猿暂 袁试验也表明这种处理方法有利于小
麦花药愈伤组织的形成遥 但对于低温处理的时间袁则有
不同看法袁通常认为院不同发育时期的花药低温预处理
效应不同曰低温预处理的最佳时间因基因型的不同也有
差异曰不同处理方法其低温处理效应也不同咱员员暂 遥 匀怎葬灶早
和 杂怎灶凿藻则造葬灶凿咱员圆暂研究了低温预处理对大麦花药培养的
影响袁认为大麦穗子在接种前经过 源益尧猿 耀缘凿预处理对
愈伤组织诱导有利遥 张秀刚咱员猿暂认为 猿 耀 苑凿低温预处理
小麦花药岀愈率最高遥 本研究显示 圆凿低温预处理小麦
花药愈伤组织诱导率最好袁远凿 胚性愈伤组织比例最高袁
与前人研究结果不同袁可能是试验所选取材料尧花粉发
育时期尧基因型均有不同所致遥
苑远园员
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
表 员摇 低温预处理过程中内源激素与小麦花药脱分化特性的相关性分析
栽葬遭造藻 员摇 悦燥则则藻造葬贼蚤燥灶 葬灶葬造赠泽蚤泽 遭藻贼憎藻藻灶 藻灶凿燥早藻灶燥怎泽 澡燥则皂燥灶藻泽 葬灶凿 贼澡藻 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽 燥枣 凿藻凿蚤枣枣藻则藻灶贼蚤葬贼蚤燥灶 燥枣 憎澡藻葬贼 葬灶贼澡藻则
激素
藻灶凿燥早藻灶燥怎泽
澡燥则皂燥灶藻泽
出愈率
枣则藻择怎藻灶糟赠 燥枣 糟葬造造怎泽 蚤灶凿怎糟贼蚤燥灶
胚性愈伤组织比例
则葬贼蚤燥 燥枣 藻皂遭则赠燥早藻灶蚤糟 糟葬造造蚤
烟农 员怨 再葬灶灶燥灶早 员怨 皖麦 源员 宰葬灶皂葬蚤 源员 烟农 员怨 再葬灶灶燥灶早 员怨 皖麦 源员 宰葬灶皂葬蚤 源员
陨粤粤 责 越 园郾 园园苑 则 越 园郾 怨猿员 责 越 园郾 园园猿 则 越 园郾 怨缘苑 责 越 园郾 园圆远 则 越 原 园郾 愿远缘 责 越 园郾 源猿源 则 越 原 园郾 猿怨愿
粤月粤 责 越 园郾 员怨园 则 越 原 园郾 远圆园 责 越 园郾 猿员园 则 越 原 园郾 源怨苑 责 越 园郾 园园源 则 越 园郾 怨源苑 责 越 园郾 园圆源 则 越 园郾 愿苑圆
允粤 责 越 园郾 圆远远 则 越 原 园郾 缘源圆 责 越 园郾 猿怨愿 则 越 原 园郾 源圆苑 责 越 园郾 园园苑 则 越 园郾 怨猿员 责 越 园郾 园园源 则 越 园郾 怨源远
郧粤 责 越 园郾 苑缘圆 则 越 原 园郾 员远苑 责 越 园郾 愿愿圆 则 越 原 园郾 园苑怨 责 越 园郾 缘缘 则 越 原 园郾 猿员 责 越 园郾 愿怨苑 则 越 原 园郾 园远怨
陨粤粤 辕 粤月粤 责 越 园郾 园员园 则 越 园郾 怨员愿 责 越 园郾 园猿圆 则 越 园郾 愿缘员 责 越 园郾 园圆怨 则 越 原 园郾 愿缘怨 责 越 园郾 园愿源 则 越 原 园郾 苑缘猿
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摇 摇 植物激素几乎参与了植物生长过程中所有生理调
节遥 研究表明院粤月粤对植物体细胞胚胎的发生和发育
具有重要作用咱员源袁员缘暂 遥 运蚤赠燥泽怎藻 等咱员远暂 和 砸葬躁葬泽藻噪葬则葬灶
等咱员苑暂认为相对高的内源 粤月粤 含量与狼尾草尧胡萝卜
细胞高的胚胎发生潜力有相关关系袁而低温预处理可
以改变内源 粤月粤 的含量咱远 耀 愿暂 遥 本文结果表明低温处
理 远凿袁粤月粤含量达到最大袁较对照有大幅的提高袁此时
花药培养结果显示胚性愈伤组织比例也达到最大袁与
粤月粤表现出正相关遥 低温预处理 圆凿 时胚性愈伤组织
诱导率最高袁到 远凿时胚性愈伤组织比例最高袁而 圆凿时
陨粤粤浓度最大袁远凿时 粤月粤 最高袁表明在胚性愈伤诱导
过程中袁粤月粤 起着重要的作用袁同时和 陨粤粤 表现出一
定的相互作用遥
陨粤粤是影响愈伤组织诱导的重要内源激素袁
蕴燥泽糟澡蚤葬增燥咱员愿暂提出生长素在任何时候对发育方向的重
新决定都是必需的遥 因为高生长素使细胞 阅晕粤 高甲
基化袁而高甲基化可消除以前的分化程序遥 徐武等咱苑暂
研究发现低温可以提高大麦花药内源 陨粤粤 的含量进
而提高大麦花药愈伤组织诱导率遥 李雪梅等咱员怨暂认为
较易脱分化的外植体 陨粤粤 含量也较高袁内源生长素含
量的高低与诱导体细胞脱分化的难易有关遥 本研究发
现低温预处理可以改变内源 陨粤粤 的含量袁陨粤粤尧陨粤粤 辕
粤月粤尧陨粤粤 辕 允粤 与小麦花药愈伤组织诱导率存在正相
关袁并且出愈率高的基因型袁其内源 陨粤粤 含量也高遥
因此推测内源生长素的高低与小麦花药诱导脱分化的
难易有关遥
王大元等咱圆园暂认为高浓度的 郧粤 和无机盐是将柑
桔胚乳诱发胚状体并进而分化的重要因素遥 而罗琼
等咱圆员暂研究结果表明袁郧粤 对体细胞胚胎发生具有负作
用遥 本研究结果表明袁郧粤 辕 粤月粤 与胚性愈伤比例表现
出负相关袁较高浓度的 郧粤 对胚性愈伤组织的诱导有
一定的抑制作用袁粤月粤 浓度的提高有可能减少 郧粤 对
胚性愈伤组织诱导的负作用遥
有关 允粤在愈伤组织诱导中的作用报道不多遥 茉
莉酸与脱落酸结构有相似之处袁其生理效应也有许多
相似的地方袁例如抑制生长尧抑制种子和花粉萌发尧促
进器官衰老和脱落尧诱导气孔关闭尧促进乙烯产生尧提
高抗逆性等遥 本研究中袁在低温预处理过程中 允粤 和
粤月粤表现出相同的变化趋势袁并且 允粤 与胚性愈伤组
织的比例表现出很强的正相关袁陨粤粤 辕 允粤与小麦花药岀
愈率存在正相关袁表现出与 粤月粤相同的生理效应遥
研究低温预处理过程中小麦花药培养特性与内源
激素的关系袁目的在于探究低温预处理的机理袁并最终
改进培养基配方袁提高小麦花药培养胚性愈伤组织诱
导率遥 本试验发现袁不同内源激素对培养效果的影响
不同袁但呈现一定的规律遥 已有报道表明培养基中添
加适当的外源激素袁可以调节外植体内源激素含量袁使
其有利于胚性愈伤组织的发生和保持遥 李雪梅和刘熔
山咱员怨暂 尧张东向等咱圆圆暂 尧张智奇咱圆猿暂 尧付凤玲等咱员缘暂都曾有添
加 圆袁源 原 阅提高小麦尧玉米尧水稻胚性愈伤组织诱导率
的报道袁陈荣敏等咱圆源暂在小麦花药培养中添加外源 粤月粤
提高了愈伤组织分化率和绿苗产率袁这些结果说明袁通
过培养基中添加外源激素来协调内源激素的不平衡是
提高外植体培养力的一条有效的途径遥 但由于基因型
间的差异以及各种激素间协同作用的复杂性袁要提出
外源激素添加调节内源激素含量的具体方案袁还需要
进一步深入研究遥
源摇 结论
低温预处理不仅影响小麦花药愈伤组织诱导的数
量袁还影响愈伤组织的质量遥 小麦花药内源激素
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粤月粤尧郧粤尧允粤尧陨粤粤含量随预处理时间的延长呈较大的
波动变化曰陨粤粤尧陨粤粤 辕 粤月粤尧陨粤粤 辕 允粤 变化与花药愈伤组
织诱导率表现出很强的正相关袁粤月粤尧允粤 与胚性愈伤
组织比例表现出很强的正相关袁郧粤 辕 粤月粤 与胚性愈伤
组织比例表现出负相关遥 低温预处理影响小麦花药脱
分化袁与内源激素的调节密切相关遥
参考文献院
咱 员 暂 摇 奚元赞援 植物细胞的全能性与细胞分化咱 允暂 援 遗传学报袁员怨苑愿袁缘
渊员冤院员远缘
咱 圆 暂 摇 郭子彪援内源激素 陨粤粤袁粤月粤对大豆萌发子叶胚性愈伤组织诱导
及其分化的调控咱允暂 援大豆科学袁员怨怨苑袁员远渊猿冤院员怨源 原 员怨愿
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咱 源 暂 摇 陈以峰袁周 燮袁汤日圣袁张金渝袁梅传生援水稻体细胞培养中胚性
细胞出现与 陨粤粤 的关系咱允暂 援植物学报袁员怨怨愿袁源园渊缘冤院源苑源 原 源苑苑
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咱 苑 暂 摇 徐 武袁李 明袁张 敬袁方红曼袁李安生援 低温预处理过程中大麦花
药内源激素的变化咱允暂 援遗传学报袁员怨怨苑袁圆源渊圆冤院员远缘 原 员远怨
咱 愿 暂 摇 张菊平袁巩振辉袁张兴志援 低温预处理对辣椒花药内源激素变化
的影响咱允暂 援北方园艺袁圆园园愿袁渊员员冤院缘 原 苑
咱 怨 暂摇 何钟佩援农作物化学控制实验指导[酝 ]援北京院北京农业大学出版
社袁员怨怨猿
咱员园暂摇 金 青袁蔡永萍袁林 毅袁魏 奇援 晕韵 对石斛类原球茎内源激素水平
及生物碱积累的影响咱允暂 援核农学报袁圆园员园袁圆源渊远冤院员圆怨员 原 员圆怨远
咱员员暂摇 庄军平援 辣椒花药培养技术的研究咱阅暂援 西北农林科技大学袁
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咱员猿暂摇 张秀刚援低温预处理在小麦花药培养中的作用咱 允暂 援北京农学院
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导率与内源激素含量的关系咱 允暂 援 核农学报袁圆园园远袁圆园渊员冤院员园 原
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咱员怨暂摇 李雪梅袁刘熔山援小麦幼穗胚性愈伤组织诱导及分化过程中内源
激素的作用咱允暂 援植物生理学通讯袁员怨怨源袁猿园渊源冤院圆缘缘 原 圆远园
咱圆园暂摇 王大元袁张进仁援从胚乳培养再生三倍体柑橘植株咱允暂 援中国农业
科学渊粤辑冤袁员怨苑愿袁渊源冤院源缘圆 原 源缘缘
咱圆员暂摇 罗 琼袁胡延玉袁周开达援 内源激素对水稻成熟胚培养力的影响
咱允暂 援中国水稻科学袁员怨怨愿袁员圆渊源冤院圆缘愿 原 圆源园
咱圆圆暂摇 张东向袁张崇浩袁李杰芬援 玉米叶片胚性愈伤组织诱导及其与内
源 陨粤粤和 粤月粤 关系的初步研究咱 允暂 援 作物学报袁圆园园园袁圆远渊圆冤院
员怨缘 原 员怨怨
咱圆猿暂摇 张智奇援蔗糖浓度尧激素配比及不同培养方式对水稻胚性愈伤组
织的诱导效应咱允暂 援上海农业学报袁员怨怨员袁苑渊猿冤院员怨 原 圆圆
咱圆源暂摇 陈荣敏袁温书敏袁郎明林袁梁凤山援脱落酸渊粤月粤冤对小麦花药培养
的影响咱允暂 援河北农业大学学报袁员怨怨怨袁圆圆渊圆冤院圆源 原 圆远
渊责任编辑摇 邱爱枝冤
怨远园员