全 文 ：摇 核 农 学 报摇 圆园员猿袁圆苑渊猿冤院园圆怨猿 耀 园猿园园允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄园猿鄄圆猿摇 接受日期院圆园员猿鄄园员鄄员远
基金项目院广东省科技项目渊圆园员员月园怨园源园园员远缘冤
作者简介院胡延吉渊员怨缘缘鄄冤袁男袁山东章丘人袁硕士袁教授遥 研究方向院植物遗传育种遥 耘鄄皂葬蚤造院赠葬灶躁蚤澡怎岳 员远猿援 糟燥皂
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员猿冤园猿鄄园圆怨猿鄄园愿
突变率与突变频率的概念及估算
胡延吉摇 梁摇 红
渊仲恺农业工程学院袁 生命科学学院袁广东 广州摇 缘员园圆圆缘冤
摘摇 要院突变率是指单位时间内某种突变发生的几率袁可表示为每个位点尧每个基因尧每个核苷酸或每个
配子在每个世代或每次 阅晕粤复制时发生突变的几率遥 突变频率是指群体内发生某种突变的细胞或个
体数的比例遥 突变的鉴定方法可分为表型鉴定和基因型鉴定两大类遥 基因型鉴定是继表型鉴定以后发
展起来的检测突变的新方法遥 其中袁微卫星技术在突变率的估算中得到较广泛的应用袁但应用于植物突
变率的估算却相对较少遥 本文以植物突变遗传和育种为例袁简述了突变率和突变频率的估算方法袁重点
介绍了在硬粒小麦尧鹰嘴豆尧玉米尧普通小麦和豌豆等作物中估算微卫星突变率的研究进展遥 对
栽陨蕴蕴陨晕郧技术在突变检测中的应用进行了简要介绍遥
关键词院突变率曰突变频率曰表型鉴定曰基因型鉴定曰估算
栽澡藻 悦燥灶糟藻责贼 葬灶凿 耘泽贼蚤皂葬贼蚤燥灶 燥枣 酝怎贼葬贼蚤燥灶 砸葬贼藻 葬灶凿 酝怎贼葬贼蚤燥灶 云则藻择怎藻灶糟赠
匀哉 再葬灶鄄躁蚤摇 蕴陨粤晕郧 匀燥灶早
渊悦燥造造藻早藻 燥枣 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 在澡燥灶早噪葬蚤 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则藻 葬灶凿 耘灶早蚤灶藻藻则蚤灶早袁 郧怎葬灶早扎澡燥怎袁 郧怎葬灶早凿燥灶早摇 缘员园圆圆缘 冤
粤遭泽贼则葬糟贼院粤遭泽贼则葬糟贼院酝怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 蚤泽 贼澡藻 责则燥遭葬遭蚤造蚤贼赠 贼澡葬贼 葬 责葬则贼蚤糟怎造葬则 噪蚤灶凿 燥枣 皂怎贼葬贼蚤燥灶 燥糟糟怎则泽 责藻则 怎灶蚤贼 燥枣 贼蚤皂藻 憎澡蚤糟澡 糟葬灶 遭藻
藻曾责则藻泽泽藻凿 葬泽 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 责藻则 造燥糟怎泽袁 责藻则 早藻灶藻袁 责藻则 灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻袁 燥则 责藻则 早葬皂藻贼藻 蚤灶 藻葬糟澡 早藻灶藻则葬贼蚤燥灶 燥则 葬贼 藻葬糟澡 阅晕粤
则藻责造蚤糟葬贼蚤燥灶援 酝怎贼葬贼蚤燥灶 枣则藻择怎藻灶糟赠 蚤泽 贼澡藻 责则燥责燥则贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 灶怎皂遭藻则 燥枣 皂怎贼葬贼藻凿 糟藻造造 燥则 蚤灶凿蚤增蚤凿怎葬造 蚤灶 葬 责燥责怎造葬贼蚤燥灶援 酝怎贼葬贼蚤燥灶
糟葬灶 遭藻 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 枣则燥皂 藻蚤贼澡藻则 责澡藻灶燥贼赠责藻 燥则 早藻灶燥贼赠责藻援 郧藻灶燥贼赠责蚤糟 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 蚤泽 葬 灶藻憎 皂藻贼澡燥凿 葬枣贼藻则 责澡藻灶燥贼赠责蚤糟
蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 枣燥则 藻泽贼蚤皂葬贼蚤灶早 贼澡藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻袁 蚤灶 憎澡蚤糟澡 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻泽 澡葬增藻 遭藻藻灶 憎蚤凿藻造赠 怎泽藻凿 枣燥则 藻泽贼蚤皂葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻
皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻袁 遭怎贼 增藻则赠 枣藻憎 凿葬贼葬 葬则藻 葬增葬蚤造葬遭造藻 蚤灶 责造葬灶贼泽援 栽澡蚤泽 葬则贼蚤糟造藻 泽怎皂皂葬则蚤扎藻泽 贼澡藻 藻泽贼蚤皂葬贼蚤燥灶 皂藻贼澡燥凿泽 燥枣 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻
葬灶凿 皂怎贼葬贼蚤燥灶 枣则藻择怎藻灶糟赠 枣则燥皂 贼澡藻 责燥蚤灶贼 燥枣 增蚤藻憎 燥枣 责造葬灶贼 皂怎贼葬贼蚤燥灶 早藻灶藻贼蚤糟泽 葬灶凿 遭则藻藻凿蚤灶早袁 藻泽责藻糟蚤葬造造赠 责葬赠蚤灶早 葬贼贼藻灶贼蚤燥灶 贼燥 贼澡藻
则藻泽藻葬则糟澡 葬凿增葬灶糟藻泽 蚤灶 藻泽贼蚤皂葬贼蚤燥灶 皂藻贼澡燥凿泽 燥枣 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 蚤灶 糟则燥责泽 蚤灶糟造怎凿蚤灶早 凿怎则怎皂 憎澡藻葬贼袁 糟澡蚤糟噪责藻葬袁 糟燥则灶袁
糟燥皂皂燥灶 憎澡藻葬贼 葬灶凿 责藻葬援 云怎则贼澡藻则皂燥则藻袁 贼澡藻 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 栽陨蕴蕴陨晕郧 渊 栽葬则早藻贼蚤灶早 陨灶凿怎糟藻凿 蕴燥糟葬造 蕴藻泽蚤燥灶泽 陨晕 郧藻灶燥皂藻泽冤
贼藻糟澡灶燥造燥早赠 蚤灶 皂怎贼葬贼蚤燥灶 泽糟则藻藻灶蚤灶早 蚤泽 遭则蚤藻枣造赠 泽怎皂皂葬则蚤扎藻凿援
运藻赠 憎燥则凿泽院酝怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻曰 酝怎贼葬贼蚤燥灶 枣则藻择怎藻灶糟赠曰 孕澡藻灶燥贼赠责蚤糟 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶曰 郧藻灶燥贼赠责蚤糟 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶曰 耘泽贼蚤皂葬贼蚤燥灶
摇 摇 基因突变渊郧藻灶藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶冤是指染色体上某一基因
位点发生了化学性质的变化袁与原来基因形成对性关
系遥 从 阅晕粤结构的角度看袁突变是 阅晕粤 分子中碱基
序列发生改变的过程遥 在突变遗传和突变育种研究
中袁经常使用野突变率冶与野突变频率冶这两个术语遥 但
在一些科技论文和书刊中袁对这两个概念的表述不够
一致袁难免引起误解和迷惑遥 毛炎麟咱员暂在 员怨怨圆 年曾对
这一问题专门进行过阐述袁但至今仍时常有人将二者
的概念混为一谈遥 在理论层面上袁对概念的准确理解
和诠释是构建学科基本原理和知识体系的基础曰从实
践方面看袁直接影响到不同研究结果的相互比较和借
鉴遥 因此袁作者对突变率与突变频率的概念以及它们
猿怨圆
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
之间的关系进行简要阐述袁并以植物突变遗传和育种
为例袁简述其估算方法遥
员摇 突变率和突变频率的概念
突变率指的是重复发生事件的一种测定袁它是
阅晕粤每次复制时发生突变的几率渊孕则燥遭葬遭蚤造蚤贼赠冤袁亦即
每个世代每个染色体组出现的突变几率袁对有性生殖
的生物来讲袁就是每个世代每个配子所表现的突变几
率曰对于无性生殖的生物如细菌来讲袁则是每个世代每
个细胞的突变几率咱圆暂 遥 这一概念是从染色体组或者
配子的角度来讲的袁据估计袁高等生物中的突变率为 员
伊 员园 原缘 耀 员 伊 员园 原愿袁即在 员园 万至 员 亿个配子中有一个
发生突变曰在低等生物如细菌中袁突变率为 员 伊 员园 原源 耀
员 伊 员园 原员园袁即在 员 万至 员园园 亿个细菌中有一个发生突
变遥 从等位基因的角度袁突变率指每个世代一个等位
基因的拷贝转变为另一种等位形态的几率咱猿暂 遥 突变
率可从每个位点渊蕴燥糟怎泽冤尧每个基因渊郧藻灶藻冤尧每个核苷
酸渊晕怎糟造藻燥贼蚤凿藻冤和每个配子渊郧葬皂藻贼藻冤的突变等不同层
次予以表述袁它们均表示在每个世代渊高等真核生物冤
或者每次 阅晕粤复制渊微生物冤过程中发生的特定突变
类型袁反映的是单位时间内突变的发生几率遥
所谓突变频率则指的是在一个群体中一定时间内
实际发生的突变次数咱员袁圆暂 遥 许多学者给出了相似的定
义袁如 砸怎泽泽藻造造咱源暂给出的概念是野突变频率是指群体内
发生某种突变的细胞或个体数的比例冶遥 因此袁与突
变率一个重要的不同点是院突变频率不是局限于每个
世代或每次细胞分裂袁而是根据在一定时间内或经过
若干世代最终形成的某一群体内突变体出现的频率的
估算遥 所谓突变体是表现某一突变性质的个体遥 因此
如果在一定时间内袁如一年袁比较大肠杆菌和人的突变
频率时袁大肠杆菌显然会大大超过人遥 但是如果我们
用每个世代作为比较的标准袁人的基因突变率则超过
大肠杆菌咱圆暂 遥 图 员 可以较清楚地解释突变率和突变频
率二者概念的差异咱猿暂 遥
图 员摇 突变率与突变频率的区别
云蚤早援 员摇 阅蚤枣枣藻则藻灶糟藻 遭藻贼憎藻藻灶 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 葬灶凿 皂怎贼葬贼蚤燥灶 枣则藻择怎藻灶糟赠
引自院栽葬泽泽蚤 凿蚤 皂怎贼葬扎蚤燥灶藻袁澡贼贼责院 辕 辕 糟则藻葬贼蚤增藻糟燥皂皂燥灶泽援 藻则早 辕 造蚤糟藻灶泽藻泽 辕 遭赠鄄灶糟鄄泽葬 辕 圆郾 缘 辕 凿藻藻凿援 蚤贼
阅葬贼葬 枣则燥皂院 栽葬泽泽蚤 凿蚤 皂怎贼葬扎蚤燥灶藻袁 澡贼贼责院 辕 辕 糟则藻葬贼蚤增藻糟燥皂皂燥灶泽援 藻则早 辕 造蚤糟藻灶泽藻泽 辕 遭赠鄄灶糟鄄泽葬 辕 圆郾 缘 辕 凿藻藻凿援 蚤贼
摇 摇 图 员 中表示在细菌培养中分别由 源 个野生型细胞
进行分裂形成的群体袁原始的 源 个细胞为 郧园袁最终世
代为 郧源袁绿色实心的个体表示发生突变的细胞遥 为了
估算突变率袁需要估算出经过多少次细胞分裂而形成
最终的群体袁还要估算出在这些细胞分裂过程中发生
的突变事件数遥 从图中可以看出袁在最终群体中的突
变细胞数渊酝冤等于 员园袁而总的细胞数渊晕冤为 员远 伊 源 越
远源袁则突变频率渊酝 辕 晕冤为 员园 辕 远源 越 员郾 远 伊 员园 原员遥 突变率
滋则根据总的细胞分裂次数渊阅冤为 员缘 伊 源 越 远园 中发生
的突变事件次数 淄渊 越 圆冤估算袁因此袁滋 越 淄 辕 阅 越 猿郾 猿 曾
员园 原圆遥
一般说来袁直接估计突变率是比较困难的袁在植物
诱变育种研究中袁往往是利用诱变 圆 代渊酝圆冤群体估算
突变频率遥 运燥灶凿则葬泽澡燥增等咱缘暂概括了估算突变率之所以
困难的 远 个主要原因院首先袁单核苷酸突变率非常低袁
真核生物尤其如此袁估算如此低的突变率往往需要极
其精细和费力的方法曰其次袁突变是一个完全随机的过
程袁不知道何时在何位点发生突变曰第三袁突变可分为
不同类型袁包括点突变渊如单核苷酸的替换尧插入和缺
失等冤和大规模突变渊如长片段的插入尧缺失和倒位
等冤袁对其突变率估算的方法不同曰第四袁突变率受遗
传背景的影响袁特别是受相邻位点的影响曰第五袁环境
和生理等因素影响突变率曰第六袁突变率还受到选择和
进化过程等因素的影响遥 然而袁随着科技的发展和试
源怨圆
摇 猿 期 突变率与突变频率的概念及估算
验方法及技术的改进袁上述许多问题已经在很大程度
上得到解决袁特别是 阅晕粤测序技术的开发应用使我们
可以在 阅晕粤水平上直接估算突变率遥 一般说来袁突变
的鉴定方法可分为表型鉴定和基因型鉴定两大类袁本
文以高等植物为例袁简述其在突变率和突变频率估算
中的应用遥
圆摇 基于表型鉴定的估算方法
对于最终会导致表现型变异的突变可以采取此种
方法袁这是人们最早采用的传统的或经典的方法遥 某
些可见的形态变异能相当准确地鉴定出来袁而生理生
化变异的鉴定就较为复杂一些袁需要一定的仪器和分
析技术遥 由于该方法要求突变具有可观测到的表现型
效应袁因此袁阅晕粤 非编码区的突变尧同义密码子突变尧
产生化学性质相似的氨基酸的突变以及冗余基因的突
变渊一个基因突变后的功能可由其他基因补偿冤等都
难以导致表型改变袁从而不能观测计数遥 另外袁生物体
的突变修复反应的概率也会影响群体中最终得到的突
变体数遥
圆郾 员摇 利用酝圆突变体计算突变频率
植物诱变育种中计算突变频率的主要方法咱圆暂有院
若 酝员按穗渊株冤收获袁酝圆按穗行或株行种植袁则院
突变频率豫 越酝圆发生突变的穗渊株冤行数 辕 酝圆种植
的总穗渊株冤行数 伊员园园豫 渊员冤
酝圆突变体个体数与群体总株数之比遥 即院
突变频率豫 越 酝圆发生突变的株数 辕 酝圆群体的总株
数 伊 员园园豫 渊圆冤
采用两个公式得到的数值往往是不一致的袁公式
渊圆冤是目前普遍采用的方法袁也是 酝圆突变体混合种植
时统计突变频率的方法遥 因此袁在比较不同文献的研
究结果时袁应该注意试验设计和统计方法是否相同遥
采用该方法袁人们已分别对小麦尧大麦尧水稻尧大豆尧烟
草等作物的突变频率进行了研究咱远 原 员园暂 遥
在这里需要提及毛炎麟咱员暂介绍的计算突变频率
和突变体频率的相关公式遥
突变体频率豫 越 突变体总数 辕 酝圆 植株总数 伊员园园豫 渊猿冤
可见实际上等于上述由公式渊圆冤计算的突变频
率遥 毛炎麟提出的计算突变频率的公式为院
若统计每 员园园 个 酝员穗后代袁 即 员园园 个 酝圆穗行里
出现的突变次数袁则院
突变频率豫 越突变次数 辕 酝圆穗行数 伊员园园豫 渊源冤
若统计每 员园园 个 酝员株后代袁 即每 员园园 个 酝圆株行
里出现的突变次数袁则院
突变频率豫 越突变次数 辕 酝圆株行数 伊员园园豫 渊缘冤
突变穗行包括一次突变穗行和两次突变穗行两
类遥 所谓两次突变穗行是指同一穗行里出现两种突变
类型袁如叶绿素缺失突变类型渊即白化苗和黄化苗冤遥
假如 酝圆共有 员园园 个穗行袁有 源 个穗行发生了突变袁其
中 圆 个穗行内各发生了一种白化突变袁另 圆 个穗行内
各出现了两种突变渊白化苗和黄化苗冤袁则总的突变次
数等于 远遥 按照公式渊员冤袁突变频率豫 越 酝圆发生突变
的穗行数 辕 酝圆种植的总穗行数 伊 员园园豫 越 源 辕 员园园 越 源 伊
员园 原圆曰按照公式渊源冤袁 突变频率豫 越突变次数 辕 酝圆穗行
数 伊员园园豫 越 远 辕 员园园 越 远 伊 员园 原圆遥 可见公式渊源冤和公式
渊员冤的内涵是不同的遥 因此在比较参考不同的研究文
献时袁需要注意采用的统计方法是否一致遥
圆郾 圆摇 用花粉直感现象估算配子的突变率
经典的例子是用花粉直感现象估算玉米配子的突
变率遥 例如袁为了测定玉米子粒由非甜粒变为甜粒
渊杂怎寅泽怎冤的突变率袁用甜粒玉米纯种渊泽怎泽怎冤作母本袁由
诱变处理非甜粒玉米纯种渊杂怎杂怎冤的花粉作父本进行
杂交遥 已知非甜粒渊杂怎冤对甜粒渊泽怎冤为显性袁理论上授
粉后的果穗应该完全结成非甜粒子粒袁但实际并不是
这样遥 假定在 圆 万个子粒中出现了 圆 粒甜粒玉米袁说
明在父本的 圆 万粒花粉中有 圆 粒花粉的基因已由 杂怎
变为 泽怎袁这样就测知基因 杂怎的突变率为万分之一咱员员暂 遥
猿摇 基于基因型鉴定的估算方法
直接通过 阅晕粤序列检测而鉴别筛选突变体解决
了表型鉴定不能有效识别非编码区序列变异尧同义突
变尧冗余基因突变等困难袁成为继表型鉴定后发展起来
的鉴别突变体的行之有效的新方法遥 其中袁微卫星
渊酝蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻冤技术在基因突变率的估测中得到较广
泛的应用遥 微卫星或简单序列重复咱 杂蚤皂责造藻 泽藻择怎藻灶糟藻
则藻责藻葬贼泽 渊杂杂砸泽冤暂是由 员 耀 远 个碱基为基序的串联重复
阅晕粤 序列遥 由于它们比其他中性标记 渊 晕藻怎贼则葬造
皂葬则噪藻则泽冤具有更大的变异性以及共显性的特点袁因此
在亲缘关系尧连锁尧群体遗传以及进化研究中得到广泛
应用遥 微卫星体现了一种特定的突变过程袁导致原始
等位基因和突变等位基因之间基序重复次数的差异遥
一般认为袁微卫星突变的主要形成机制是 阅晕粤复制过
程中聚合酶滑动渊孕燥造赠皂藻则葬泽藻 泽造蚤责责葬早藻冤 咱员圆袁员猿暂 袁即在 阅晕粤
复制时袁聚合酶从其位置上脱离袁模板链和新合成链暂
时分离袁重新配对时袁新生链和模板链偶尔会错位而产
生错配袁 阅晕粤聚合酶在这种错配的 阅晕粤 链上继续合
缘怨圆
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
成袁 就会导致新生链上基序重复次数的不同遥 该机制
亦称为链滑动渊 杂贼则葬灶凿 泽造蚤责责葬早藻冤尧滑链错配 渊 杂造蚤责责藻凿鄄
泽贼则葬灶凿 皂蚤泽责葬蚤则蚤灶早冤和复制滑动 渊 砸藻责造蚤糟葬贼蚤燥灶 泽造蚤责责葬早藻冤
等咱员源 原 员远暂 遥
总结前人研究微卫星突变率的方法袁可大体分为
四类院一是以系谱分析为依据的估算方法咱员苑 原 员怨暂 曰二是
利用突变积累品系渊酝怎贼葬贼蚤燥灶 葬糟糟怎皂怎造葬贼蚤燥灶 造蚤灶藻泽冤进行
估算咱圆园袁圆员暂 曰三是对反映物种间趋异时期的化石资料进
行比较分析咱圆圆暂 曰四是通过研究物种内等位基因的分布
进行估算咱圆猿袁圆源暂 遥 从所研究的材料的时标渊栽蚤皂藻泽糟葬造藻冤
角度看袁第 员 类和第 圆 类方法属于短时标研究方法袁而
后两种方法则属于长时标研究方法遥 短时标方法由于
以新突变的直接观测为基础袁故认为偏倚性较小袁但为
了提高估算的准确度袁需要足够大的样本以检测到稀
有突变事件遥 长时标方法的优点是充分体现出种群或
物种趋异后所积累的大量减数分裂事件袁但由于受到
选择尧种群统计学因素等混合效应的影响袁可能会导致
估算的偏差遥 上述研究方法均表明不同位点微卫星突
变率存在很大差异袁突变率与微卫星的基序类型和重
复数量有关袁用长时标研究材料获得的突变率低于用
短时标材料获得的突变率咱圆缘暂 遥 许多研究估算了人和
动物中微卫星的突变率袁显示出不同物种间存在很大
差异袁对植物的研究则相对较少遥 在栽培作物中袁圆园园员
年 哉凿怎责葬等咱圆远暂首次以鹰嘴豆为材料研究了微卫星的
突变率袁 随后袁又有人对硬粒小麦尧玉米尧普通小麦尧豌
豆等作物进行了研究咱圆园袁圆苑袁圆怨袁猿园暂 遥 另外袁将人工诱变与
现代分子生物学技术相结合鉴定基因突变的方法亦显
示出广阔的应用前景遥
猿郾 员摇 硬粒小麦微卫星位点突变率的估算
栽澡怎蚤造造藻贼 等咱圆苑暂 直接估算了硬粒小麦 渊 栽则蚤贼蚤糟怎皂
贼怎则早蚤凿怎皂 蕴援 冤员园 个微卫星位点的突变率遥 试验材料为
缘园园 个突变积累品系袁它们由一个纯合的基因型通过
控制自交的方式形成袁其过程如下院用玉米花粉给硬粒
小麦渊品种为 杂澡葬皂 陨袁 陨悦粤砸阅粤冤授粉袁进行胚抢救袁然
后用秋水仙素加倍形成原始的双单倍体遥 对该双单倍
体渊郧园冤自交得到 郧员袁然后采用单粒传的方法连续控制
自交渊即在 郧员群体中每株套袋 员 穗袁从套袋穗中取 员
粒种子混合袁郧圆混合种植袁以后各代都是如此冤袁连续
自交 员缘 代遥 期间袁分别在第 愿尧员园 和 员员 代群体中选单
株袁每个单株再经 猿 代自交繁殖形成品系袁共形成 缘园园
个品系遥 每个品系以及原始品种 杂澡葬皂玉用 园郾 圆早新鲜
叶片提取基因组 阅晕粤袁 对 员园 个微卫星位点进行 孕悦砸
扩增袁扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳袁然后对品种
杂澡葬皂 陨的原始等位基因和突变等位基因进行克隆和
测序遥
对每个位点突变率的计算是用检测到的突变数除
以可能观察到的突变事件数渊灶冤遥 为了计算 灶 值袁考
虑一个品系中在世代 员 发生的一个突变渊在 早园世代袁
所有品系对原始等位基因 粤都是纯合的冤遥 这个品系
在 早员世代对所研究的位点的基因型为 粤葬袁在世代 早袁
该突变处于杂合状态 粤葬的概率是渊员 辕 圆冤 早 原 员袁处于纯合
状态 葬葬的概率为 员 辕 圆咱员 原 渊员 辕 圆冤 早 原 员 暂遥 这样袁在世代
早员首次发生的突变到世代 早 时可观察到的总概率为
渊员 辕 圆冤 早 原 员 垣 员 辕 圆咱员 原 渊员 辕 圆冤 早 原 员暂遥 此公式可简化为 员 辕 圆
咱员 垣 渊员 辕 圆冤 蚤暂袁 蚤 越 渊早 –该突变被首次观察到的世代
数冤遥 每个品系每个世代均可能发生突变袁因此 蚤 的值
可以是 早 原 员 到 早鄄早袁 即从 园 到 早 原 员遥 可能观察到的突
变事件数渊灶冤可用下列公式表示院
灶 越 移早原员蚤 越 园 圆造咱员 辕 圆渊员 垣 员 辕 圆 蚤冤暂 越
移早原员蚤 越 园 造渊员 垣 员 辕 圆 蚤冤 越 造渊圆 原 圆员原早 垣 早冤 渊远冤
式中袁造 为品系数袁早 为世代数遥 对于位点 载早憎皂员源愿袁
载早憎皂员缘猿袁 载早憎皂圆缘苑袁 载早憎皂猿员圆袁载早憎皂猿苑圆袁 载早憎皂猿苑源
和 载早憎皂缘圆远袁 在第 愿 代得到 源远怨 个品系袁所以每个位
点的 灶愿 越 源远怨 渊圆 原 圆员 原 愿 垣 愿冤 越 源远愿远遥 对于 载早憎皂怨怨袁载早憎皂源怨缘 和 载早憎皂缘猿苑 等 猿 个位点袁在第 员园 代得到
源猿缘 个品系袁第 员员 代得到 猿远 个品系袁则每个位点总的
灶值为 灶员园 垣 灶员员 越 缘袁远愿苑遥
在所研究的 员园 个微卫星位点中袁共检测到 员圆 个
突变事件袁则每世代每个等位基因的平均突变率为
员圆 辕 渊苑 伊 源袁远愿远 垣 猿 伊 缘袁远愿苑冤 越 圆郾 源 伊 员园 原源遥 因为突变
率在微卫星位点之间存在很大差异袁栽澡怎蚤造造藻贼 等还计算
了各个位点的突变率袁如 载早憎皂员缘猿 位点的突变率为
员园 原猿袁而 载早憎皂猿员圆 位点的突变率为 远郾 源 伊 员园 原源遥 检测
到的 员圆 个突变均只涉及到 员 个重复基序的改变袁其
中袁愿 个突变是由于增加了 员 个重复基序袁源 个突变则
均是减少了 员 个重复基序遥
猿郾 圆摇 鹰嘴豆渊栽粤粤冤灶微卫星位点突变率的估算
鹰嘴豆渊悦蚤糟藻则 葬则蚤藻贼蚤灶怎皂 蕴援 冤是二倍体自花授粉豆
科作物 渊圆灶 越 员远冤袁 哉凿怎责葬 等咱圆远暂 选用两个地方品种
郧澡葬遭 圆 和 杂赠则蚤葬灶 蕴燥糟葬造遥 每个品种随机选择一个纯合
植株渊世代 郧园冤进行自交袁自交种子渊郧员 冤在下一季节
按粒播种遥 在 郧员袁从 郧澡葬遭 圆 品种的群体中选择 员园苑
株袁每株取 缘园 粒种子混合曰从 杂赠则蚤葬灶 蕴燥糟葬造品种的群体
中选择 员园源 株袁每株亦取 缘园 粒种子混合遥 将按照品种
混合的种子在春季种植并辅之以灌溉遥 在后续的 猿 个
世代渊郧猿 原 郧缘冤于春季采用相同的方法种植遥 每代群
远怨圆
摇 猿 期 突变率与突变频率的概念及估算
体大约 愿袁园园 株袁以最大限度地减少遗传漂变效应遥 在
第 缘 代群体中形态性状和抗病性均表现一致袁表明无
异交或混杂产生遥 从第 缘 代群体中分别随机取 员园苑 株
郧澡葬遭圆 和 员园源 株 杂赠则蚤葬灶 蕴燥糟葬造袁利用幼苗茎尖提取总
阅晕粤并用作 孕悦砸扩增的模板遥 利用 员缘 个渊栽粤粤冤灶 微
卫星位点进行分析袁这 员缘 个位点是从 郧澡葬遭 圆 品种基
因组 阅晕粤的 员圆园 个标记中随机选取的袁这些微卫星位
点的原始等位基因的两侧引物序列和 栽粤粤 的重复数
目是已知的遥 扩增的 阅晕粤 片段进行测序并估算等位
基因的大小渊栽粤粤 的重复数冤遥 检测出的突变体等位
基因的大小通过重复 孕悦砸扩增和片段分析进行验证遥
计算突变率的公式为 滋 越 灶 辕 渊圆郧蕴运冤袁 式中 灶 是
突变的数袁郧 为世代数袁蕴是近交系渊陨灶遭则藻凿 造蚤灶藻泽冤数袁运
为位点数遥 在两个品种形成的近交群体的 员缘 个微卫
星位点中袁郧澡葬遭 圆 品种的 员猿 个位点发生 员远苑 个自然突
变袁杂赠则蚤葬 蕴燥糟葬造 品种的 苑 个位点发生 远园 个自然突变遥
用上述公式求得 郧澡葬遭 圆 所有位点的平均突变率为 员 伊
员园 原圆袁 杂赠则蚤葬灶 蕴燥糟葬造 所有位点的平均突变率为 猿郾 怨 伊
员园 原猿遥 正如品种间突变率存在很大差异一样袁品种内
不同位点间的突变率也存在很大差别袁郧澡葬遭 圆 品种 员猿
个微卫星位点的突变率范围为 怨郾 猿 伊 员园 原源 耀 源郾 缘 伊
员园 原圆曰杂赠则蚤葬灶 蕴燥糟葬造品种 苑 个微卫星位点的突变率范围
为 员郾 怨 伊 员园 原猿 耀 猿郾 苑 伊 员园 原圆遥 影响这些位点突变率的
一个重要因素是位点的大小渊栽粤粤重复的次数冤袁原始
等位基因的大小与突变数之间存在显著的正相关关系
渊对于品种 郧澡葬遭 圆袁则 越园郾 远远袁孕臆园郾 园员曰对于品种 杂赠则蚤葬灶
蕴燥糟葬造袁则 越园郾 缘园袁孕臆园郾 园缘缘 冤遥 两个品种的微卫星位点
突变中绝大多数渊怨远郾 怨豫 冤是由于增加或减少 员 个
栽粤粤重复基序形成的袁其他突变包括 圆 个渊圆郾 圆豫 冤或 源
个渊园郾 怨豫 冤重复基序的变化遥
猿郾 猿摇 玉米微卫星位点突变率的估算
灾蚤早燥怎则燥怎曾 等咱圆园暂通过两个独立设计的试验估算了
玉米渊在藻葬 皂葬赠泽 蕴援 冤微卫星位点的突变率遥 两个试验
原理相似袁限于篇幅仅简介试验玉遥 试验采用 远 个玉
米近交系 渊 月苑猿袁 酝燥员苑袁 韵澡源猿袁 孕匀粤粤园袁 孕匀圆源耘袁 和
孕匀晕源远冤袁它们分别由不同亲本杂交后然后通过至少 苑
代自交选择形成遥 该试验首先对上述近交系进行两代
自交袁利用 缘缘 耀 苑愿 个微卫星鉴别并去除这些近交系中
可能由于其基础原种渊云燥怎灶凿蚤灶早 泽藻藻凿 泽贼燥糟噪泽冤受到花粉
污染而产生的异型株遥 第 员 次自交于 员怨怨愿 年种植在
允燥澡灶泽贼燥灶袁 陨燥憎葬遥 第 圆 次 于 员怨怨怨 年 在 两 个 地 方
允燥澡灶泽贼燥灶袁陨燥憎葬 和 再燥则噪袁晕藻遭种植袁只采用没发生花粉污
染的植株做试验材料遥 于 员怨怨怨 年每个地点 远 个近交
系各取两穗共 圆源 穗用于进一步研究遥 每穗各取 圆猿 粒
渊共 缘缘圆 个后代植株冤袁与亲本同时进行分析比较以鉴
定新的突变遥
用 员园凿苗龄的幼苗叶片提取 阅晕粤袁利用 源愿 个微
卫星位点对每个近交系后代和亲本进行 孕悦砸扩增袁两
次重复遥 微卫星位点的重复基序分别为 圆 个核苷酸尧猿
个核苷酸尧源 个核苷酸尧缘 个核苷酸尧远 个核苷酸以及双
源 核苷酸遥 检测出的突变等位基因和它们的原始亲本
等位基因再进行扩增尧克隆和测序袁突变体的基序重复
数与原始亲本进行比较遥
为了计算突变率袁用检测到的突变数除以最终世
代中两个等位基因经历的独立世代数渊等位基因 原世
代数冤遥 试验中仅考察了一个世代袁所以等位基因 原
世代数 越圆猿 粒 伊圆 等位基因 伊源 穗 伊远 近交系 伊源愿 位
点渊缘圆袁怨怨圆冤 原任何丢失的数据遥 试验所用的 苑 个双
碱基微卫星位点中袁有一个位点检测到突变遥 等位基
因 原世代数 越圆猿 粒 伊 圆 等位基因 伊 源 穗 伊 远 近交系 伊
苑 位点渊苑苑圆愿冤 原 员园 个丢失数据 越 苑苑员愿袁所以每个世代
双碱基微卫星位点的突变率 越 员 辕 苑苑员愿 越 员郾 猿 伊 员园 原源遥
该试验检测到的一个突变位点比亲本的等位基因位点
减少了 员 个重复基序遥 对于重复基序大于 圆 个核苷酸
的微卫星位点没有检测到突变遥
除了上述用微卫星位点测定植物的突变率以外袁
悦造葬则噪等咱圆愿暂将遗传学研究和考古学研究相结合袁从玉
米核苷酸自然置换率的角度估算突变率遥 遗传研究表
明袁玉米的野生祖先大刍草渊在援 皂葬赠泽 泽泽责援 责葬则增蚤早造怎皂蚤泽冤
的 贼遭员 基因是玉米驯化过程中主要的选择目标袁贼遭员 基
因编码序列 缘忆端方向的基因间隔区序列的多样性很
低遥 该区域的多态性与驯化过程中少数 贼遭员 单倍型
渊匀葬责造燥贼赠责藻冤发生的可固定的新突变是一致的遥 考古
学研究表明咱圆愿暂 袁玉米大约在 远圆缘园 耀 员园园园园 年以前完成
驯化袁然后其群体迅速扩大遥 试验选用了位于 贼遭员 核
心选择范围内 远 个区域的序列渊员郾 苑 原 袁圆郾 缘 原 袁苑郾 员 原 袁
猿缘郾 远 原 袁 源缘郾 愿 原 袁和 缘愿郾 远 原 噪遭区域袁指从 缘忆端距离 贼遭员
糟阅晕粤序列的距离冤进行研究遥 利用前人对这 远 个区
域序列的测序数据以及该试验在 贼遭员 区域检测到的突
变数尧玉米驯化的大致时间以及系谱图袁悦造葬则噪 等估算
出这 远 个区域的单个核苷酸置换率为 员郾 园 伊 员园 原愿 耀
苑郾 圆 伊 员园 原愿遥
猿郾 源摇 普通小麦和豌豆微卫星位点突变率的估算
砸葬择怎蚤灶 等咱圆怨暂 选用 员远 个 普 通 小 麦 渊 栽则蚤贼蚤糟怎皂
葬藻泽贼蚤增怎皂 蕴援 冤纯合基因型作亲本袁采用人工逐步聚合杂
交的方法形成一个分离群体遥 然后对该群体连续进行
猿 代混合繁殖袁形成的试验群体定为 园 代群体渊郧园 冤遥
于 员怨愿源 年在 蕴藻 酝燥怎造燥灶渊位于巴黎附近冤种植 郧园种子袁
苑怨圆
核摇 农摇 学摇 报 圆苑 卷
随后将该群体连续种植 员远 代渊每年 员 代冤袁每代种植
缘园园园 耀 员园园园园 个植株袁成熟时将种子混合收获袁从中取
员园园园园 粒种子播种袁使下一代群体达到 缘园园园 耀 员园园园园
株遥 冷藏保存 员远 个亲本的种子并间隔种植 源 次以保
持种子的发芽力遥 提取 员远 个亲本和 郧员缘世代 圆愿苑 个植
株的 圆园园皂早 幼叶的总 阅晕粤袁选用 圆员 个微卫星进行
孕悦砸扩增尧克隆和测序遥 与亲本相比较袁在 郧员缘代中检
测出 圆猿 个新等位基因袁分布在所研究的 圆员 个位点中
的 怨 个位点袁有证据表明这些新等位基因是通过突变
产生的袁估算的每代的突变率为 园 耀 源郾 怨苑 伊 员园 原猿遥
悦蚤藻泽造葬则燥增葬等咱猿园暂选用 苑 个豌豆渊孕蚤泽怎皂 泽葬贼蚤增怎皂 蕴援 冤
品种袁在温室中采用单粒传的方法连续繁殖 员园 代袁每
年在春季和秋季各繁殖 员 代遥 每个世代分单株收获种
子袁然后从中取 缘 粒种子种植繁殖下一代遥 对第 员 代
和第 员园 代样品的 猿 个微卫星位点进行比较分析遥 猿
个微卫星位点分布在豌豆基因组的不同位置袁粤怨 位点
位于高丰度反转录转座子的 蕴栽砸区域袁粤阅圆苑园 位点位
于基因间隔区袁粤云园员远源缘愿 位点位于表达基因的 缘忆端非
翻译区遥 估算微卫星突变率渊砸冤的公式为院 砸 越 晕 辕 栽袁
晕为突变等位基因的数目袁栽 等于所研究位点 员 个世
代所传递的等位基因总数遥 结果表明在第 员园 代样品
的 粤阅圆苑园 位点增加了 员 个野粤栽悦栽冶重复基序遥 估算的
每代每个位点的突变率为 源郾 苑远 伊 员园 原猿袁怨缘豫的置信区
间为 员郾 圆 伊 员园 原源 耀 圆郾 苑 伊 员园 原圆遥
猿郾 缘摇 利用 栽陨蕴蕴陨晕郧技术检测诱发突变
以上介绍的基于基因型鉴定的估算方法实例主要
是利用非诱变群体遥 将人工诱变和现代分子生物学技
术相结合进行基因突变的检测亦取得良好进展袁其中
较为成功的是 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术遥 栽陨蕴蕴陨晕郧 渊 栽葬则早藻贼蚤灶早
陨灶凿怎糟藻凿 蕴燥糟葬造 蕴藻泽蚤燥灶泽 陨晕 郧藻灶燥皂藻泽冤 技术即定向诱导基
因组局部损伤技术袁是一种全新的反向遗传学研究方
法遥 该技术将人工诱变尧孕悦砸 技术和高通量突变检测
技术相结合袁可高通量尧快速准确地鉴定出由例如
耘酝杂等化学诱变剂诱变产生的点突变或小片段缺
失咱猿员暂 遥 传统的 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术先用化学诱变剂诱发产
生一系列的点突变袁再用设计的特异性引物进行 孕悦砸
扩增得到异源双链袁再用一种特异切割错配的内切酶
酶切袁 最后电泳检测酶切片段袁鉴定出变异位点咱猿圆暂 遥
悦燥造遭藻则贼等咱猿猿暂将双红外荧光扫描系统引入 栽陨蕴蕴陨晕郧中袁
有效地排除了假阳性条带袁提高了检测效率遥
在植物中最先利用 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术进行突变检测
的是拟南芥渊粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬 渊蕴援 冤 匀藻赠灶澡冤 咱猿源暂 袁随
后很快应用于其它作物中遥 杂造葬凿藻 等咱猿缘暂 首次将
栽陨蕴蕴陨晕郧技术应用于普通小麦的淀粉品质改良袁在
员怨圆园 个 耘酝杂 诱变的 酝圆单株中袁通过检测 猿 个同源片
段袁共获得 圆源远 个独立的等位变异位点袁突变频率渊亦
称突变密度袁酝怎贼葬贼蚤燥灶 凿藻灶泽蚤贼赠冤为 员 辕 圆源噪遭 耀 员 辕 源园噪遭遥
哉葬怎赠等咱猿远暂将 栽陨蕴蕴陨晕郧技术应用于 耘酝杂诱变的四倍体
与六倍体小麦中袁在两个诱变群体中对淀粉支链合成
酶基因 杂月耘陨陨葬尧杂月耘陨陨遭 与小麦抗条锈病基因 宰运杂员 与
宰运杂圆 的 员员 个目标基因片段检测袁共鉴定出 圆苑缘 个突
变位点袁在六倍体与四倍体小麦中的突变频率分别为
员 辕 猿愿 噪遭和 员 辕 缘员 噪遭遥 潘娜咱猿苑暂以冬小麦品种新麦 员愿 空
间诱变 杂孕圆群体为试验材料袁探索基于 悦耘蕴玉酶切的
高通量 栽陨蕴蕴陨晕郧 筛选体系袁检测小麦品质尧抗逆及抗
病等性状相关的目标基因片段袁并结合 孕悦砸技术检测
小麦 蕴则猿源 基因大片段缺失突变遥 在品种新麦 员愿 杂孕圆
群体 圆猿园源 个样本中袁共检测到 员圆 个样本发生 蕴则猿源 基
因片段缺失突变袁突变频率为 园郾 缘圆豫 遥 栽蚤造造 等咱猿愿暂以
耘酝杂诱变玉米花粉得到的 苑缘园 个单株为材料袁利用
栽陨蕴蕴陨晕郧技术检测 阅晕粤甲基转移酶渊阅酝栽冤尧组蛋白脱
乙酰基酶渊匀阅粤冤等 员员 个不同基因袁目的片段长度均
约为 员 噪遭袁共发现了 员苑 个点突变袁其中包括 员园 个错义
突变和 苑 个沉默突变遥 宰怎等咱猿怨暂利用 耘酝杂尧阅耘月渊双环
氧丁烷冤尧快中子及 酌射线诱导水稻品种 陨砸远源袁获得不
同的突变群体袁共约 远园园园园 单株遥 利用 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术
分析不同浓度 耘酝杂 诱变的 酝圆群体袁当 耘酝杂 浓度为园郾 愿豫和 员豫 时袁通过检测 员园 个基因袁在 圆 个基因
责责圆粤源 与 糟葬造苑 中发现不同的突变位点袁突变频率为
园郾 缘 辕 员酝遭遥 耘酝杂 浓度提高到 员郾 远豫时袁突变频率提高
到 员 辕 员酝遭遥 悦燥燥责藻则 等咱源园暂利用 栽陨蕴蕴陨晕郧 技术分析大豆
的 猿 个 耘酝杂 诱变的 酝圆群体渊粤院品种为 云燥则则藻泽贼袁源园皂酝耘酝杂曰 月院 品 种 为 宰蚤造造蚤葬皂泽愿圆袁 源园皂酝 耘酝杂曰 悦院
宰蚤造造蚤葬皂泽愿圆袁缘园皂酝 耘酝杂冤和 员 个 晕酝哉 诱变的 酝圆群体渊阅院宰蚤造造蚤葬皂泽愿圆袁圆郾 缘皂酝 晕酝哉冤遥 在 源 个群体中均检测
悦蕴粤灾尧晕粤砸运尧孕孕悦运源尧 砸匀郧员月 等 苑 个基因袁共发现
员员远 个突变位点渊粤 群体 猿圆 个袁月 群体 员圆 个袁悦 群体
圆缘 个袁 阅 群体 源苑 个冤遥 粤尧 阅 群体的突变频率为
员 辕 员源园 噪遭袁月尧悦 分别为 员 辕 缘缘园 噪遭 与 员 辕 圆缘园 噪遭遥 杂葬遭藻贼贼葬
等咱源员暂将 栽陨蕴蕴陨晕郧技术应用于向日葵渊匀藻造蚤葬灶贼澡怎泽 葬灶灶怎泽
蕴援 冤基因突变的检测研究袁用 园郾 苑豫 耘酝杂 处理品种
郧灾猿源圆袁在 酝圆群体中检测 噪葬泽陨陨尧噪葬泽陨陨陨 等 源 个基因袁估
算的平均突变频率为 员 辕 源苑缘 噪遭遥 目前袁栽陨蕴蕴陨晕郧 技术
已广泛应用于 圆园 多种作物的基因突变的鉴定袁应用前
景十分广阔咱源圆暂 遥
源摇 结论
突变率与突变频率是两个不同的概念袁二者具有
愿怨圆
摇 猿 期 突变率与突变频率的概念及估算
不同的含义遥 估算突变率和突变频率在进化生物学尧
突变遗传和突变育种研究中具有重要意义遥 突变的鉴
定方法可分为表型鉴定和基因型鉴定两大类遥 人们最
早采用表型鉴定的方法估算突变率和突变频率遥 基因
型鉴定是继表型鉴定以后发展起来的检测突变的新方
法遥 其中袁微卫星技术得到较广泛的应用遥 利用
栽陨蕴蕴陨晕郧 技术进行诱发突变的检测亦取得良好进展遥
在比较参考不同的研究文献时袁需要注意采用的试验
设计和计算方法袁避免对研究结果的误读或进行不恰
当的比较遥
参考文献院
咱 员 暂摇 毛炎麟援 突变率与突变频率咱 允暂 援 核农学通报袁 员怨怨圆袁 员猿袁渊圆冤院
怨源 原 怨缘
咱 圆 暂摇 蔡 旭援 植物遗传育种学咱酝暂援 北京院 科学出版社袁 员怨怨愿院员愿愿 原
员愿怨袁缘远缘
咱 猿 暂 摇 孕则藻泽糟蚤怎贼贼蚤灶蚤 杂援 栽葬泽泽蚤 凿蚤 皂怎贼葬扎蚤燥灶藻咱 耘月 辕 韵蕴暂援 咱圆园员圆 原 员圆 原 圆缘暂援
澡贼贼责院 辕 辕 糟则藻葬贼蚤增藻糟燥皂皂燥灶泽援 燥则早 辕 造蚤糟藻灶泽藻泽 辕 遭赠鄄灶糟鄄泽葬 辕 圆郾 缘 辕 凿藻藻凿援 蚤贼援
咱 源 暂 摇 砸怎泽泽藻造造 孕 允援 云怎灶凿葬皂藻灶贼葬造泽 燥枣 郧藻灶藻贼蚤糟泽 咱 酝 暂援 杂葬灶 云则葬灶糟蚤泽糟燥院
粤凿凿蚤泽燥灶 宰藻泽造藻赠 蕴燥灶早皂葬灶袁陨灶糟援 袁圆园园园院源员圆
咱 缘 暂 摇 运燥灶凿则葬泽澡燥增 云 粤袁 运燥灶凿则葬泽澡燥增 粤 杂援 酝藻葬泽怎则藻皂藻灶贼泽 燥枣 泽责燥灶贼葬灶藻燥怎泽
则葬贼藻泽 燥枣 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 蚤灶 贼澡藻 则藻糟藻灶贼 责葬泽贼 葬灶凿 贼澡藻 灶藻葬则 枣怎贼怎则藻 咱 允 暂 援
孕澡蚤造燥泽燥责澡蚤糟葬造 栽则葬灶泽葬糟贼蚤燥灶泽 燥枣 栽匀耘 砸燥赠葬造 杂燥糟蚤藻贼赠 月袁 圆园员园袁 猿远缘院
员员远怨 – 员员苑远
咱 远 暂 摇 李新华袁邱登林袁孙桂芝袁徐相波援 山东省小麦诱变育种咱允暂 援 核
农学报袁 圆园园远袁 圆园渊员冤院缘员 原 缘猿
咱 苑 暂 摇 张 雄援 大麦辐射育种中突变频率修正法的比较咱 允暂 援 原子能农
业应用袁 员怨愿源袁 源院缘园 原 缘源
咱 愿 暂 摇 杨鹤峰袁陈秀兰袁何震天袁顾世梁袁徐辰武袁杜华章援 诱发籼稻早
熟突变频率和早熟范围的研究咱允暂 援 江苏农学院学报袁 员怨怨员袁 员圆
渊圆冤院员员 原 员缘
咱 怨 暂 摇 王志国袁杜连恩袁魏玉昌袁于秀普援 大豆化学诱变遗传学效应及
育种技术的研究咱 允暂 援 邯郸农业高等专科学校学报袁 圆园园源袁 圆员
渊猿冤院苑 原 员员
咱员园暂摇 任学良袁王 轶袁杨春元袁史跃伟袁王茂胜援 酌 射线与 晕葬晕猿 复合处
理对烟草几种主要农艺性状的诱变效应咱 允暂 援 中国烟草学报袁
圆园园愿袁 员源渊员冤院圆猿 原 员远
咱员员暂摇 朱 军援 遗传学渊第三版冤 咱酝暂援 北京院 中国农业出版社袁 圆园园圆院
圆缘缘 原 圆缘远
咱员圆暂摇 酝葬则则蚤葬早藻 栽 晕袁 匀怎凿皂葬灶 杂袁 酝燥则贼 酝 耘袁 韵则蚤增藻 酝 耘袁 杂澡葬憎 砸 郧袁 运藻造造赠
允 运 援 阅蚤则藻糟贼 藻泽贼蚤皂葬贼蚤燥灶 燥枣 贼澡藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 葬贼 凿蚤灶怎糟造藻燥贼蚤凿藻
皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 造燥糟蚤 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬 渊 月则葬泽泽蚤糟葬糟藻葬藻 冤 咱 允 暂 援
匀藻则藻凿蚤贼赠袁 圆园园怨袁 员园猿院猿员园 原 猿员苑
咱员猿暂摇 张涛袁路宏朝袁李新生援 微卫星进化属性及其功能的研究进展
咱允暂 援 中国农学通报袁 圆园员园袁 圆远渊园员冤院源源 原 源苑
咱员源暂摇 蕴葬责葬灶 杂 宰袁王 勇援 粤灶 蚤灶贼则燥凿怎糟贼蚤燥灶 贼燥 皂燥造藻糟怎造葬则 遭蚤燥造燥早赠 憎蚤贼澡
悦澡蚤灶藻泽藻 贼则葬灶泽造葬贼蚤燥灶咱酝暂援 北京院 化学工业出版社袁 圆园园愿院圆园员
咱员缘暂摇 李成华袁李太武袁宋林生援微卫星 阅晕粤技术及其应用的探讨咱 允暂 援
浙江海洋学院学报院自然科学版袁 圆园园猿袁 圆圆渊源冤院猿缘圆 原 猿缘缘
咱员远暂摇 杂糟澡造燥贼贼藻则藻则 悦援 耘增燥造怎贼蚤燥灶葬则赠 凿赠灶葬皂蚤糟泽 燥枣 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 阅晕粤 咱 允暂援
悦澡则燥皂燥泽燥皂葬 袁圆园园园袁 员园怨院猿远缘 – 猿苑员
咱员苑暂摇 宰澡蚤贼贼葬噪藻则 允 悦袁 匀葬则遭燥则凿 砸 酝袁 月燥曾葬造造 晕袁 酝葬糟噪葬赠 陨袁 阅葬憎泽燥灶 郧袁 酝援
杂蚤遭造赠 砸 酝援 蕴蚤噪藻造蚤澡燥燥凿鄄遭葬泽藻凿 藻泽贼蚤皂葬贼蚤燥灶 燥枣 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶
则葬贼藻泽咱允暂 援 郧藻灶藻贼蚤糟泽袁 圆园园猿袁 员远源院苑愿员 – 苑愿苑
咱员愿暂摇 月则燥澡藻凿藻 允袁 酝燥造造藻则 粤 孕袁 耘造造藻早则藻灶 匀援 陨灶凿蚤增蚤凿怎葬造 增葬则蚤葬贼蚤燥灶 蚤灶
皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 蚤灶 遭葬则灶 泽憎葬造造燥憎泽 咱 允 暂 援 酝怎贼葬贼蚤燥灶
砸藻泽藻葬则糟澡袁 圆园园源袁 缘源缘院苑猿 – 愿园
咱员怨暂摇 郧燥憎 允 蕴袁 晕燥遭造藻 蕴 砸袁 砸燥造造蚤灶泽燥灶 阅袁 允燥灶藻 悦 杂援 粤 澡蚤早澡 蚤灶糟蚤凿藻灶糟藻 燥枣
糟造怎泽贼藻则藻凿 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶泽 则藻增藻葬造藻凿 遭赠 责葬则藻灶贼鄄燥枣枣泽责则蚤灶早
葬灶葬造赠泽蚤泽 蚤灶 贼澡藻 粤枣则蚤糟葬灶 枣则藻泽澡憎葬贼藻则 泽灶葬蚤造袁 月怎造蚤灶怎泽 枣燥则泽噪葬造蚤蚤
渊郧葬泽贼则燥燥凿葬袁孕怎造皂燥灶葬贼葬冤 咱允暂 援 郧藻灶藻贼蚤糟葬袁 圆园园缘袁 员圆源渊员冤院苑苑 – 愿猿
咱圆园暂摇 灾蚤早燥怎则燥怎曾 再袁 允葬择怎藻贼澡 允 杂袁 酝葬贼泽怎燥噪葬 再袁 杂皂蚤贼澡 韵 杂袁 月藻葬增蚤泽 宰 阅袁
杂皂蚤贼澡 允 杂 悦袁 阅燥藻遭造藻赠 允援 砸葬贼藻 葬灶凿 责葬贼贼藻则灶 燥枣 皂怎贼葬贼蚤燥灶 葬贼
皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 造燥糟蚤 蚤灶 皂葬蚤扎藻咱 允暂 援 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠 葬灶凿 耘增燥造怎贼蚤燥灶袁
圆园园圆袁 员怨渊愿冤院员圆缘员 原 员圆远园
咱圆员暂摇 杂藻赠枣藻则贼 粤 蕴袁 悦则蚤泽贼藻泽糟怎 酝 耘袁 云则蚤泽泽藻 蕴袁 杂糟澡葬葬糟噪 杂袁 栽澡燥皂葬泽 宰 运袁
蕴赠灶糟澡 酝援 栽澡藻 则葬贼藻 葬灶凿 泽责藻糟贼则怎皂 燥枣 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 蚤灶
悦葬藻灶燥则澡葬遭凿蚤贼蚤泽 藻造藻早葬灶泽 葬灶凿 阅葬责澡灶蚤葬 责怎造藻曾 咱 允暂 援 郧藻灶藻贼蚤糟泽袁 圆园园愿袁
员苑愿院圆员员猿 原 圆员圆员
咱圆圆暂摇 运葬赠泽藻则 酝袁 灾燥憎造藻泽 耘 允袁 运葬责责藻蚤凿 阅袁 粤皂燥泽 宰援 酝蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 造藻灶早贼澡
凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻泽 遭藻贼憎藻藻灶 澡怎皂葬灶泽 葬灶凿 糟澡蚤皂责葬灶扎藻藻泽 葬贼 葬怎贼燥泽燥皂葬造 造燥糟蚤 葬则藻
灶燥贼 枣燥怎灶凿 葬贼 藻择怎蚤增葬造藻灶贼 澡葬责造燥蚤凿 再 糟澡则燥皂燥泽燥皂葬造 造燥糟蚤咱 允暂 援 郧藻灶藻贼蚤糟泽袁
圆园园远袁员苑猿院圆员苑怨 – 圆员愿远
咱圆猿暂摇 栽澡怎蚤造造藻贼 粤 悦袁 月葬贼葬造造燥灶 栽袁 杂燥怎则葬蚤造造藻 孕袁 阅葬增蚤凿 允 蕴援 云葬糟贼燥则泽 葬枣枣藻糟贼蚤灶早
责燥造赠皂燥则责澡蚤泽皂 葬贼 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 造燥糟蚤 蚤灶 遭则藻葬凿 憎澡藻葬贼 咱栽则蚤贼蚤糟怎皂 葬藻泽贼蚤增怎皂
渊蕴援 冤 栽澡藻造造暂院 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 皂怎贼葬贼蚤燥灶 责则燥糟藻泽泽藻泽 葬灶凿 责澡赠泽蚤糟葬造 凿蚤泽贼葬灶糟藻
枣则燥皂 贼澡藻 糟藻灶贼则燥皂藻则藻咱 允暂 援 栽澡藻燥则藻贼蚤糟葬造 葬灶凿 粤责责造蚤藻凿 郧藻灶藻贼蚤糟泽袁 圆园园源袁
员园愿院猿远愿 原 猿苑苑
咱圆源暂摇 杂赠皂燥灶凿泽 灾 灾袁 蕴造燥赠凿 粤 酝援 粤灶 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 造燥糟蚤 蚤灶
粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬院 皂怎贼葬贼蚤燥灶葬造 凿赠灶葬皂蚤糟泽 葬灶凿 葬责责造蚤糟葬贼蚤燥灶 咱 允 暂 援
郧藻灶藻贼蚤糟泽袁 圆园园猿袁员远缘院员源苑缘 – 员源愿愿
咱圆缘暂摇 在澡蚤增燥贼燥增泽噪赠 蕴 粤袁 哉灶凿藻则澡蚤造造 孕 粤袁 云藻造凿皂葬灶 酝 宰援 阅蚤枣枣藻则藻灶糟藻 遭藻贼憎藻藻灶
藻增燥造怎贼蚤燥灶葬则蚤造赠 藻枣枣藻糟贼蚤增藻 葬灶凿 早藻则皂造蚤灶藻 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 凿怎藻 贼燥
泽贼燥糟澡葬泽贼蚤糟葬造造赠 增葬则赠蚤灶早 澡葬责造燥早则燥怎责 泽蚤扎藻 咱 允暂 援 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠 葬灶凿
耘增燥造怎贼蚤燥灶袁 圆园园远袁 圆猿渊员圆冤院圆圆远愿 – 圆圆苑园
咱圆远暂摇 哉凿怎责葬 杂 酝袁 月怎扎皂 酝援 匀蚤早澡 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 葬灶凿 皂怎贼葬贼蚤燥灶葬造 遭蚤葬泽 葬贼
渊栽粤粤冤泽 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻 造燥糟蚤 蚤灶 糟澡蚤糟噪责藻葬 渊悦蚤糟藻则 葬则蚤藻贼蚤灶怎皂 蕴援 冤 咱 允暂 援
酝燥造藻糟怎造葬则 郧藻灶藻贼蚤糟泽 葬灶凿 郧藻灶燥皂蚤糟泽袁 圆园园员袁 圆远缘院员园怨苑 原 员员园猿
咱圆苑暂摇 栽澡怎蚤造造藻贼 粤 悦 袁 月则怎 阅袁 阅葬增蚤凿 允袁 砸燥怎皂藻贼 孕袁 杂葬灶贼燥灶蚤 杂袁 杂燥怎则凿蚤造造藻 孕袁
月葬贼葬蚤造造燥灶 栽援 阅蚤则藻糟贼 藻泽贼蚤皂葬贼蚤燥灶 燥枣 皂怎贼葬贼蚤燥灶 则葬贼藻 枣燥则 员园 皂蚤糟则燥泽葬贼藻造造蚤贼藻
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