全 文 ：核 农 学 报摇 圆园员圆袁圆远渊苑冤院员园园远 耀 员园员员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
收稿日期院圆园员圆鄄园员鄄员苑摇 接受日期院圆园员圆鄄园缘鄄员源
基金项目院农业部公益性行业渊农业冤科研专项渊圆园员员园猿园园苑冤
作者简介院许舒婷渊员怨愿缘鄄冤袁女袁山东菏泽人袁硕士研究生袁研究方向为食品安全遥 耘鄄皂葬蚤造院曾怎泽澡怎贼蚤灶早怨岳 泽蚤灶葬援 糟燥皂
通讯作者院高美须渊员怨远缘鄄冤袁女袁河北藁城人袁副研究员袁从事致敏蛋白和食品辐照研究遥 耘鄄皂葬蚤造院皂藻蚤曾怎早葬燥岳 圆远猿援 灶藻贼
文章编号院员园园园鄄愿缘缘员渊圆园员圆冤园苑鄄员园园远鄄园远
电子束辐照对花生过敏原免疫原性
及生化性质影响的研究
许舒婷员 摇 高美须员 摇 支玉香圆 摇 潘家荣猿 摇 李淑荣员 摇 王志东员
刘超超员 摇 赵摇 杰员 摇 兰丽平员 摇 徐迎阳圆
渊员援 中国农业科学院农产品加工研究所袁北京摇 员园园员怨猿曰圆援北京协和医院变态反应科袁北京摇 员园园园缘圆曰
猿援中国计量学院袁浙江 杭州摇 猿员园园员愿冤
摘摇 要院研究了电子束辐照降低花生过敏原免疫原性的效果及辐照对花生生化性质的影响遥 选择 圆尧源尧
远尧愿尧员园尧员缘 和 圆园噪郧赠剂量的电子束对花生过敏原液尧脱脂花生粉进行辐照处理袁辐照后花生主要过敏原
渊粤则葬 澡 员袁 粤则葬 澡 圆袁 粤则葬 澡 猿冤蛋白分子质量的变化通过 杂阅杂 原聚丙烯酰胺凝胶电泳测定袁免疫原性的变
化通过免疫印迹和间接竞争 耘蕴陨杂粤法测定曰辐照后花生过敏原溶液的浓度尧浊度及疏水性的变化通过
紫外分光光度计和荧光光度计分别进行测定遥 结果表明袁花生过敏原在溶液状态比固体状态对辐照更
为敏感遥 当辐照剂量低于 员园噪郧赠时处理的过敏原液的免疫原性稍有增强袁剂量大于 员园噪郧赠 时免疫原性
降低袁剂量为 圆园噪郧赠时过敏原液的 陨悦缘园值是未处理的 员员 倍遥 辐照使过敏液的浓度和浊度随着剂量的加
大而增加袁疏水性与对照组相比增强袁但当剂量大于 员缘噪郧赠 时降低遥 电子束辐照改变了过敏原的生化
性质袁降低了其免疫原性袁比较而言袁辐照对液体状态下过敏原的影响更显著遥
关键词院花生曰过敏原曰电子束辐照曰免疫原性曰生化性质
耘云云耘悦栽 韵云 耘蕴耘悦栽砸韵晕 月耘粤酝 陨砸砸粤阅陨粤栽陨韵晕 韵晕 陨酝酝哉晕韵砸耘粤悦栽陨灾陨栽再
粤晕阅 月陨韵悦匀耘酝陨悦粤蕴 孕砸韵孕耘砸栽陨耘杂 韵云 孕耘粤晕哉栽 粤蕴蕴耘砸郧耘晕杂
载哉 泽澡怎鄄贼蚤灶早员 摇 郧粤韵 酝藻蚤鄄曾怎员 摇 在匀陨 再怎鄄曾蚤葬灶早圆 摇 蕴陨 杂澡怎鄄则燥灶早员 摇 宰粤晕郧 在澡蚤鄄凿燥灶早员 摇 孕粤晕 允蚤葬鄄则燥灶早圆
蕴陨哉 悦澡葬燥鄄糟澡葬燥员 摇 在匀粤韵 允蚤藻员 摇 蕴粤晕摇 蕴蚤鄄责蚤灶早员 摇 载哉 再蚤灶早鄄赠葬灶早圆
渊员援 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 粤早则燥鄄孕则燥凿怎糟贼泽 孕则燥糟藻泽泽蚤灶早 杂糟蚤藻灶糟藻 驭 栽藻糟澡灶燥造燥早赠袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园员怨猿曰
圆援 阅藻责葬则贼皂藻灶贼 燥枣 粤造造藻则早赠袁 孕藻噪蚤灶早 哉灶蚤燥灶 酝藻凿蚤糟葬造 悦燥造造藻早藻 匀燥泽责蚤贼葬造袁 月藻蚤躁蚤灶早摇 员园园园缘圆曰
猿援 悦燥造造藻早藻 燥枣 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻袁 悦澡蚤灶葬 允蚤 造蚤葬灶早 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠袁 匀葬灶早扎澡燥怎袁 在澡藻躁蚤葬灶早摇 猿员园园员愿冤
粤遭泽贼则葬糟贼院栽澡藻 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 藻造藻糟贼则燥灶 遭藻葬皂渊耘月冤 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 燥灶 葬造造藻则早藻灶蚤糟蚤贼赠 葬灶凿 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 责则燥责藻则贼蚤藻泽 燥枣 责藻葬灶怎贼 责则燥贼藻蚤灶
憎藻则藻 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻凿 蚤灶 贼澡蚤泽 泽贼怎凿赠援 孕藻葬灶怎贼 责则燥贼藻蚤灶 藻曾贼则葬糟贼泽 泽燥造怎贼蚤燥灶 葬灶凿 凿藻枣葬贼贼藻凿 责燥憎凿藻则 憎藻则藻 蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 葬贼 贼澡藻 凿燥泽藻 燥枣 圆袁 源袁
远袁 愿袁 员园袁 员缘 葬灶凿 圆园噪郧赠援 杂阅杂鄄孕粤郧耘 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 憎葬泽 怎泽藻凿 贼燥 燥遭泽藻则增藻 贼澡藻 糟澡葬灶早藻 燥枣 皂燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼援 悦澡葬灶早藻泽 蚤灶
葬造造藻则早藻灶蚤糟蚤贼赠 燥枣 蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 责藻葬灶怎贼 皂葬躁燥则 葬造造藻则早藻灶 渊粤则葬 澡 员袁 粤则葬 澡 圆袁 粤则葬 澡 猿冤 憎藻则藻 葬灶葬造赠扎藻凿 遭赠 蚤皂皂怎灶燥遭造燥贼贼蚤灶早 葬灶凿
蚤灶凿蚤则藻糟贼 藻灶扎赠皂藻鄄造蚤灶噪藻凿 蚤皂皂怎灶燥泽燥则遭藻灶贼 葬泽泽葬赠 渊悦陨鄄耘蕴陨杂粤冤援 栽澡藻 糟澡葬灶早藻泽 燥枣 糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶袁 贼怎则遭蚤凿蚤贼赠 葬灶凿 澡赠凿则燥责澡燥遭蚤糟蚤贼赠
燥枣 贼澡藻 蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 责则燥贼藻蚤灶 泽燥造怎贼蚤燥灶 憎藻则藻 凿藻贼藻则皂蚤灶藻凿 遭赠 哉灾 葬灶凿 枣造怎燥则藻泽糟藻灶糟藻 泽责藻糟贼则燥责澡燥贼燥皂藻贼藻则援 砸藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼
葬造造藻则早藻灶 泽燥造怎贼蚤燥灶 憎葬泽 皂燥则藻 泽藻灶泽蚤贼蚤增藻 贼燥 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 贼澡葬灶 葬造造藻则早藻灶 蚤灶 泽燥造蚤凿 泽贼葬贼藻援 宰澡藻灶 贼澡藻 蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 凿燥泽藻 憎葬泽 造燥憎藻则 贼澡葬灶
员园噪郧赠袁 贼澡藻 蚤皂皂怎灶燥则藻葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 葬造造藻则早藻灶 泽燥造怎贼蚤燥灶 遭藻糟葬皂藻 造蚤贼贼造藻 泽贼则燥灶早藻则曰 葬灶凿 憎澡藻灶 贼澡藻 凿燥泽藻 澡蚤早澡藻则 贼澡葬灶 员园噪郧赠袁 贼澡藻
蚤皂皂怎灶燥则藻葬糟贼蚤增蚤贼赠 憎葬泽 则藻凿怎糟藻凿援 栽澡藻 陨悦缘园 憎葬泽 员员 贼蚤皂藻泽 贼澡葬灶 贼澡藻 糟燥灶贼则燥造袁 葬枣贼藻则 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 葬贼 贼澡藻 凿燥泽藻 燥枣 圆园噪郧赠援 栽澡藻
远园园员
摇 苑 期 电子束辐照对花生过敏原免疫原性及生化性质影响的研究
糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 葬灶凿 贼怎则遭蚤凿蚤贼赠 燥枣 贼澡藻 葬造造藻则早藻灶 泽燥造怎贼蚤燥灶 蚤灶糟则藻葬泽藻凿 憎蚤贼澡 贼澡藻 蚤灶糟则藻葬泽蚤灶早 燥枣 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 凿燥泽藻援 匀赠凿则燥责澡燥遭蚤糟蚤贼赠 枣蚤则泽贼
憎藻灶贼 怎责 憎蚤贼澡 蚤灶糟则藻葬泽蚤灶早 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 葬灶凿 贼澡藻灶 凿藻糟则藻葬泽藻凿 憎澡藻灶 贼澡藻 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 凿燥泽藻 憎葬泽 葬遭燥增藻 员缘噪郧赠援 栽澡藻 遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造
责则燥责藻则贼蚤藻泽 燥枣 责藻葬灶怎贼 葬造造藻则早藻灶 憎藻则藻 葬造贼藻则藻凿 葬灶凿 蚤皂皂怎灶燥则藻葬糟贼蚤增蚤贼赠 憎葬泽 则藻凿怎糟藻凿 遭赠 耘月 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶袁 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼 燥枣 藻造藻糟贼则燥灶
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运藻赠 憎燥则凿泽院责藻葬灶怎贼曰 葬造造藻则早藻灶曰藻造藻糟贼则燥灶 遭藻葬皂 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶曰蚤皂皂怎灶燥则藻葬糟贼蚤增蚤贼赠曰遭蚤燥糟澡藻皂蚤糟葬造 责则燥责藻则贼赠
摇 摇 食物过敏渊 枣燥燥凿 澡赠责藻则泽藻灶泽蚤贼蚤增蚤贼赠袁 云匀冤被定义为一
种对食物中抗原分子产生的不良免疫介导反应袁是全
球食品行业面临的重要安全问题之一袁很大程度上影
响着过敏人群的健康和生活质量遥 世界粮农组织渊
云粤韵冤 员怨怨缘 年报道袁怨园豫食物过敏主要由以下八大类
引起袁即牛奶尧蛋尧鱼尧甲壳类水产动物尧花生尧大豆尧坚
果类和小麦咱员暂 袁花生是其中重要的一类遥 油料作物花
生的蛋白质含量高达 圆源豫 耀 猿园豫 袁富含人体必需氨基
酸袁但其中也含有致敏蛋白质遥 叶世泰等 员怨愿远 年在我
国常用食品致喘 源园 例分析中指出袁花生等油料作物位
居食物过敏原的前列咱圆暂 遥 据中国协和医科大学变态
反应科对其科就诊的病人调查表明院约有 源豫的病人
对花生过敏袁花生过敏通常会引起严重的变态反应尧过
敏性休克甚至危及生命袁花生过敏多数是终身的袁只有
员园豫的过敏儿童会随年龄的增长产生耐受性咱猿暂 遥 治
疗食物过敏疾病的唯一有效方法就是严格控制食物过
敏原袁但随着当代食品加工的迅猛发展袁食品多样化凸
显袁深加工和精加工食物过敏成分标识不完善袁使食物
过敏患者难以选择遥 因此寻求降低或根除食物致敏性
的方法袁已成为食品安全研究的关键之一遥
食物中引起机体过敏反应的物质称为过敏原袁多
为蛋白质袁具有紧凑的三维结构袁配位键尧二硫键以及
糖基化袁这些结构特点都使其在酸尧碱尧加工等处理时
保持结构的稳定性咱源暂 遥 常规生化方法难以彻底消除
过敏原的致敏性袁但辐照技术可以促进生物大分子的
降解尧交联和分子构象改变袁降低蛋白质的热稳定性袁
破坏其抗原决定簇袁可望成为降低食物过敏反应的重
要技术咱缘暂 遥 近年来袁国内外有关辐照对食物过敏原的
研究还处于探索阶段遥 韩国也有报道 酌射线辐照对鸡
蛋尧牛奶及海产品的致敏性有一定的破坏作用袁我国对
辐照海产品的研究中也得到了相似的结果咱远袁苑暂 遥 但研
究表明杏仁尧腰果尧胡桃及小麦等植物过敏原在 酌射线
辐照后致敏原性没有变化或是有一定的增高袁说明植
物过敏原的分子结构更难被 酌射线破坏遥 电子束辐照
是辐照技术的另一种主要形式袁近些年发展迅速袁有望
在食品辐照确保食物安全和植物安全方面发挥重要作
用遥 和 酌射线辐照相比袁电子束具有高能量和高剂量
率的特点袁美国 宰葬造贼藻则砸藻藻 军事医疗中心研究已证明
高剂量电子束辐照对螨尧链格胞菌等过敏原有破坏作
用咱愿暂 遥
国际免疫联合会命名小组委员会现认可的花生过
敏原有 员员 种咱怨暂 院粤则葬 澡 员 耀 员员袁其中 粤则葬 澡 员 耀 猿咱员园暂是国
内外学者公认的花生主要过敏原遥 本文将研究电子束
辐照对这 猿 种主要过敏原的生化性质及免疫原性的影
响袁进一步探讨其抗原变化机理袁以期为脱敏花生制品
的开发提供理论支持遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 材料尧设备与试剂
员郾 员郾 员摇 材料摇 供试花生为市购白沙花生遥 花生过敏
患者血清 员园 例袁混合后使用袁由北京协和医院变态反
应科提供遥
员郾 员郾 圆摇 设备摇 粤耘 原 愿员猿园 型电泳仪尧粤耘 原 远源缘园 型
垂直电泳槽渊日本 粤 栽栽韵 公司冤曰栽郧蕴 原 员远酝 型高速
台式冷冻离心机渊长沙湘仪离心机仪器有限公司冤曰
允再怨圆 原域晕 超声波粉碎细胞机渊宁波新芝生物技术股
份有限公司冤曰远猿园园 紫外分光光度计尧云圆圆缘园园 荧光分
光光度计 渊日立冤曰 郧藻灶藻泽蚤泽圆缘载蕴 冷冻干燥机 渊美国
灾蚤则贼蚤泽冤曰月蚤燥鄄砸葬凿 远愿园 全自动酶标仪渊美国 月蚤燥鄄则葬凿 公
司冤曰粤造责澡葬耘葬泽藻誖 云悦 凝胶成像系统渊美国 粤造责澡葬 公司冤
等遥
员郾 员郾 猿摇 试剂 摇 十二烷基磺酸钠 渊 杂阅杂冤尧丙烯酰胺
渊粤糟则 冤尧 甲叉双丙烯酰胺 渊 月蚤泽 冤尧 四甲基二乙胺
渊栽耘酝耘阅冤尧巯基乙醇尧晕袁晕袁晕鸳袁晕鸳原甘氨酸渊郧造赠冤尧三羟
甲基氨基甲烷渊栽则蚤泽冤尧吐温 原 圆园尧辣根过氧化物酶标记
的羊抗人 陨早耘尧硝酸纤维素膜渊晕悦冤尧愿 原苯氨基 原 员 原
萘磺酸渊粤晕杂冤尧猿袁猿鸳袁缘袁缘鸳原四甲基联苯胺渊栽酝月冤均购
自 杂蚤早皂葬公司袁预染的蛋白 酝葬噪藻则渊员源郾 源 耀 怨苑郾 源噪阅冤购
自 晕耘宰 耘晕郧蕴粤晕阅 月蚤燥造葬遭泽 陨灶糟袁 怨远 孔酶标板购自
悦燥泽贼葬则袁其他试剂为国产分析纯试剂遥
员郾 圆摇 方法
员郾 圆郾 员摇 花生过敏原的提取摇 花生仁烘干袁脱红衣后袁
粉碎袁称取一定量的花生粉置于离心管中袁按 苑皂造 辕 早 加
入正己烷袁于 源益过夜振荡提取袁随后 源益离心 员园皂蚤灶
渊员园园园园早冤袁取沉淀风干得脱脂花生粉遥 脱脂花生粉按
苑园园员
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
员颐 圆园渊皂 辕 增冤比例加入 员园皂燥造 辕 蕴 磷酸缓冲液渊 责匀 苑郾 源袁
园郾 员缘皂燥造 辕 蕴 晕葬悦造冤袁低温超声波处理渊圆园园宰袁超声 缘泽袁间
隔 圆泽袁远园 次冤袁然后于 源益离心 员缘皂蚤灶渊员圆园园园早冤袁取上清
液即花生过敏原液袁源益透析 源愿澡后冷冻干燥成过敏原
粉袁冷藏备用遥
员郾 圆郾 圆摇 辐照处理摇 电子束辐照处理在清华同方威视
股份有限公司密云实验基地进行袁电子加速器型号
陨杂员园圆园袁辐照能量为 员园酝藻灾袁辐照剂量用经中国计量科
学院标定的剂量片渊云宰栽 原 远园冤进行测定袁冻干过敏原
粉溶于磷酸盐缓冲液得过敏原液渊员皂早 辕 皂造冤尧脱脂花生
粉于真空包装袋中室温下进行电子束辐照处理袁辐照
剂量分别为 园尧圆尧源尧远尧愿尧员园尧员缘 和 圆园噪郧赠袁每处理 圆 次
重复遥 辐照后所有样品立即贮于 原圆园益冰箱中遥 辐照
后的脱脂花生粉按 员郾 圆郾 员 方法提取得到过敏原液袁测
定过敏原液的免疫原性及生化性质遥
员郾 圆郾 猿摇 杂阅杂鄄孕粤郧耘摇 凝胶电泳咱员员暂将过敏原液与 圆 伊蛋
白上样缓冲液混合袁煮沸袁离心数秒后静置袁员园滋造 进
样遥 浓度 员猿豫的分离胶定压 员圆园灾袁缘豫的浓缩胶定压
愿园灾袁直到溴酚蓝跑到凝胶底遥 考马斯亮蓝 砸 原 圆缘园 染
色尧脱色袁用凝胶成相系统照相遥
员郾 圆郾 源摇 免疫印迹咱员圆暂 摇 渊员 冤花生过敏原通过 杂阅杂鄄
孕粤郧耘电泳分离后袁将分离胶与 晕悦膜夹紧放在转印槽
中袁转印电流为 怨远皂粤袁转移 圆郾 缘澡曰渊圆冤转移完成后取出
晕悦膜袁将其浸泡在丽春红染色液中袁染色 员皂蚤灶袁然后
用蒸馏水冲洗袁确认蛋白已转印到膜上曰渊猿冤已转印的
晕悦膜用 缘豫的脱脂奶粉 源益孵育过夜曰渊源冤次日取出
膜袁加入一抗渊封闭液 员颐 缘稀释的过敏患者血清冤猿苑益
摇动孵育 怨园皂蚤灶曰渊缘冤栽月杂栽渊栽月杂加 栽憎藻藻灶 原 圆园冤洗膜 缘
次袁每次 苑皂蚤灶曰渊远冤加入 栽月杂栽渊员颐 圆 园园园冤稀释的酶标二
抗渊羊抗人 陨早耘鄄 匀砸孕冤猿苑益摇动孵育 远园皂蚤灶曰渊苑冤同渊缘冤
洗涤曰渊愿冤加入 阅月粤 显色液袁猿苑益避光显色袁以蒸馏水
终止反应遥 将显色的 晕悦 膜在滤纸上吸干袁出现棕褐
色条带为阳性袁及时封膜尧凝胶系统照相遥
员郾 圆郾 缘摇 间接竞争 耘蕴陨杂粤方法咱员猿暂 摇 以未辐照花生过敏
原作为抗原袁用包被液稀释为 员滋早 辕 皂造袁每孔 员园园滋造 加
入 怨远 孔酶标板袁源益过夜包被曰渊圆冤次日取出袁孕月杂栽
渊孕月杂加 栽憎藻藻灶 原 圆园冤洗涤 缘 次袁每次 缘皂蚤灶曰渊猿冤每孔加
入 缘豫脱脂奶粉封闭液 员缘园滋造袁猿苑益封闭 员郾 缘澡曰渊源冤同
渊圆冤洗涤曰渊缘冤每孔加入 缘园滋造 稀释的辐照花生过敏原
和 缘园滋造用洗涤液稀释的过敏患者血清袁不加抗原或样
品的反应孔为无竞争反应体系袁猿苑益孵育 员澡曰渊远冤同
渊圆冤洗涤曰渊苑冤每孔加入 员园园滋造用洗涤液渊员颐 源园园园冤稀释
的酶标二抗渊羊抗人 陨早耘鄄匀砸孕冤尧猿苑益孵育 员澡曰渊愿冤同
渊圆冤洗涤曰渊怨冤每孔加入 缘园滋造 新鲜配制的 栽酝月 底物缓
冲液袁猿苑益孵育 员缘皂蚤灶曰渊员园冤每孔加入 缘园滋造 圆皂燥造 辕 蕴 匀圆杂韵源袁终止反应袁然后于酶标仪 源缘园灶皂处测定吸光值遥员郾 圆郾 远摇 过敏原溶液浓度尧浊度尧疏水性的测定摇 蛋白
质浓度采用考马斯亮蓝 郧 原 圆缘园 染色法咱员源暂 曰蛋白质浊
度于 圆愿园灶皂下直接测定吸光值咱员缘暂 遥 利用 粤晕杂 做荧光
探针法测定其疏水性咱员远暂 袁即在 圆皂造 的过敏原溶液中加
入 圆园滋蕴 愿皂皂燥造 辕 蕴 的 粤晕杂 液混匀袁室温下放置 圆澡袁在
激发波长 猿愿缘灶皂 做发射波长袁在 源圆园 耀 缘缘园灶皂 范围内
荧光强度扫描遥
员郾 猿摇 数据分析
采用 阅孕杂 苑郾 园缘 对数据进行方差分析遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 辐照对过敏原分子量的影响
典型的花生蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳结果如图
员鄄粤所示袁与 陨造鄄匀燥 运咱员苑暂等的研究结果是一致的袁目前
已经鉴定的 粤则葬 澡 圆 有 圆 个 糟阅晕粤 同源物形式袁粤则葬 澡 猿
有很多分子量为 员源 耀 源缘噪阅 不等的同源物遥 根据凝胶
成像软件得到主要蛋白的分子量 粤则葬 澡员渊远源噪阅冤尧粤则葬
澡圆渊圆园尧员苑噪阅冤和 粤则葬 澡猿渊猿怨尧猿缘尧猿园尧圆源尧员源噪阅冤袁如图 员鄄
粤所标识遥
花生过敏原液辐照前后的变化如图 员 月遥 可以看
出袁当剂量小于 员园噪郧赠 时袁过敏原条带没有发生变化遥
当剂量大于 员园噪郧赠时袁粤则葬 澡员尧粤则葬 澡猿渊员源噪阅冤这 圆 条带
的颜色逐渐变浅袁剂量为 圆园噪郧赠 时基本消失曰粤则葬 澡圆
渊圆园尧员苑噪阅冤在剂量为 员缘噪郧赠 时消失曰粤则葬 澡猿 渊猿怨尧猿缘尧
猿园噪阅冤这 猿 条带随着辐照剂量的增加颜色逐渐降低袁
但 圆园噪郧赠处理后仍然存在曰而辐照对 粤则葬 澡猿渊圆源噪阅冤条
带基本没有任何影响遥 脱脂花生粉的变化如图 员鄄悦 所
示袁经相同剂量辐照后袁电泳的结果显示没有明显的变
化遥 在溶液状态下花生过敏原经过不同剂量的辐照
后袁其蛋白条带发生了明显的变化袁有些条带变得模糊
或是消失袁但是没有新的条带产生袁而固态下的过敏原
分子量未发生显著变化遥
圆郾 圆摇 辐照对花生过敏原免疫原性的影响
蛋白质电泳图谱可以判断过敏原分子量的变化袁
而辐照对过敏原免疫原性的影响袁需通过免疫印迹图
来说明遥 图 圆 表明袁电泳条带 粤则葬 澡员尧 粤则葬 澡圆 渊圆园尧
员苑噪阅冤尧粤则葬 澡猿渊员源噪阅冤逐渐变浅甚至消失袁在免疫印迹
上也是从浅到逐渐消失袁而 粤则葬 澡猿渊圆源噪阅冤虽然在电泳
条带图谱上没有变化袁但是印迹条带与对照相比颜色
强度明显下降遥 说明电子束辐照使过敏原与 陨早耘 结合
能力有减弱的趋势遥
愿园园员
摇 苑 期 电子束辐照对花生过敏原免疫原性及生化性质影响的研究
图 员摇 花生过敏原的 杂阅杂 原聚丙烯酰胺凝胶电泳图
云蚤早援 员摇 杂阅杂鄄孕粤郧耘 燥枣 责藻葬灶怎贼 葬造造藻则早藻灶
酝院预染标准蛋白曰园袁 圆袁 源袁 远袁 愿袁 员园袁 员缘袁 圆园 为辐照剂量渊噪郧赠冤曰粤主要的花生过敏原曰月辐照花生过敏原液曰 悦辐照脱脂花生粉
酝院酝葬则噪藻则曰园袁 圆袁 源袁 远袁 愿袁 员园袁 员缘袁 圆园 蚤灶凿蚤糟葬贼藻 贼澡藻 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 凿燥泽藻渊噪郧赠冤曰
粤院皂葬蚤灶 责藻葬灶怎贼 葬造造藻则早藻灶曰 月院蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 责藻葬灶怎贼 葬造造藻则早藻灶 泽燥造怎贼蚤燥灶曰 悦院蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 凿藻枣葬贼贼藻凿 责藻葬灶怎贼 责燥憎凿藻则
图 圆摇 辐照花生过敏原的免疫印迹图谱
云蚤早援 圆摇 宰藻泽贼藻则灶 遭造燥贼贼蚤灶早 燥枣 蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 责藻葬灶怎贼 葬造造藻则早藻灶
酝院预染标准蛋白曰园袁远袁员缘袁圆园 表示辐照剂量渊噪郧赠冤
酝院酝葬则噪藻则曰园袁 远袁 员缘袁 圆园 陨灶凿蚤糟葬贼藻 贼澡藻 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 凿燥泽藻渊噪郧赠冤
以辐照处理的花生过敏原作为竞争物袁间接竞争
耘蕴陨杂粤方法可以定量检测辐照处理的花生过敏原与抗
体的结合能力袁结果见表 员遥 在小剂量渊 约 员园噪郧赠冤的辐
照下袁过敏原溶液的免疫原性略有增高袁当剂量达到
员缘噪郧赠和 圆园噪郧赠时袁其 陨悦缘园值分别为未辐照组的 缘郾 圆苑
和 员园郾 远愿 倍袁说明高剂量辐照显著降低了花生过敏原
溶液的免疫原性遥 同时从表 员 中也可以看出袁圆园噪郧赠
剂量辐照对固体状态下过敏原的免疫原性有显著影
响袁但免疫原性没有显著降低遥 当剂量达到 远噪郧赠 时袁
其 陨悦缘园值是未辐照的 园郾 愿怨 倍袁说明免疫活性有显著增
强袁当剂量达到 圆园噪郧赠 时袁其 陨悦缘园值是未辐照的 员郾 猿缘
倍袁说明脱脂花生粉经高剂量辐照后袁免疫活性才显著
降低遥
圆郾 猿摇 辐照对花生过敏原溶液生化性质的影响
圆郾 猿郾 员摇 对过敏原溶液浓度的影响摇 辐照后过敏原溶液
浓度的变化见表 圆袁该变化由花生蛋白质于 缘怨缘灶皂处的
吸光值体现遥 过敏原提取液经辐照处理后袁与未辐照的
溶液相比浓度有显著的增高袁不同剂量辐照处理间无显
著差异遥 辐照对过敏原粉的浓度影响不显著遥
表 员摇 电子束辐照对过敏原免疫原性的影响
栽葬遭造藻 员摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 耘月 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 燥灶
蚤皂皂怎灶燥则藻葬糟贼蚤增蚤贼赠 燥枣 葬造造藻则早赠
剂量
凿燥泽藻渊噪郧赠冤
过敏原溶液
葬造造藻则早藻灶 泽燥造怎贼蚤燥灶
辐照脱脂花生粉
蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 凿藻枣葬贼贼藻凿
责藻葬灶怎贼 责燥憎凿藻则
园 员郾 园园 依 园郾 园苑糟 园郾 怨怨 依 园郾 员圆糟
圆 园郾 苑源 依 园郾 员园枣 园郾 怨猿 依 园郾 员员糟
源 园郾 愿员 依 园郾 园愿藻 园郾 怨缘 依 园郾 员员糟
远 园郾 苑苑 依 园郾 园圆枣 园郾 愿怨 依 园郾 员圆凿
愿 园郾 愿苑 依 园郾 员园凿 园郾 怨圆 依 园郾 员园糟
员园 员郾 园源 依 园郾 圆员糟 员郾 园苑 依 园郾 员怨遭
员缘 缘郾 圆苑 依 园郾 圆缘遭 员郾 园愿 依 园郾 员园遭
圆园 员园郾 远愿 依 园郾 源员葬 员郾 猿缘 依 园郾 员圆葬
注院同列不同字母代表在 缘豫水平上差异显著袁下表同曰表中数据为辐照
过敏原与未辐照过敏原的 陨悦缘园比值
晕燥贼藻院阅蚤枣枣藻则藻灶贼 造藻贼贼藻则泽 蚤灶 泽葬皂藻 糟燥造怎皂灶 泽贼葬灶凿 枣燥则 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻 葬贼 缘豫
造藻增藻造袁 贼澡藻 泽葬皂藻 葬泽 枣燥造造燥憎蚤灶早 贼葬遭造藻泽曰阅葬贼葬 葬则藻 藻曾责则藻泽泽藻凿 葬泽 则葬贼蚤燥 燥枣 陨悦缘园 燥枣
蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 辕 陨悦缘园 燥枣 糟燥灶贼则燥造 泽葬皂责造藻泽
表 圆摇 电子束辐照对过敏原溶液浓度的影响
栽葬遭造藻 圆摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 耘月 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 燥灶
糟燥灶糟藻灶贼则葬贼蚤燥灶 燥枣 葬造造藻则早藻灶
剂量
凿燥泽藻渊噪郧赠冤
过敏原溶液
葬造造藻则早藻灶 泽燥造怎贼蚤燥灶
辐照脱脂花生粉
蚤则则葬凿蚤葬贼藻凿 凿藻枣葬贼贼藻凿
责藻葬灶怎贼 责燥憎凿藻则
园 园郾 猿园源 依 园郾 园园源遭 园郾 猿员圆 依 园郾 园圆员葬
圆 园郾 猿苑远 依 园郾 园猿圆葬 园郾 猿员怨 依 园郾 园员猿葬
源 园郾 猿苑圆 依 园郾 园员苑葬 园郾 猿员远 依 园郾 园园缘葬
远 园郾 猿愿园 依 园郾 园园缘葬 园郾 猿员员 依 园郾 园源猿葬
愿 园郾 猿苑源 依 园郾 园圆猿葬 园郾 猿员愿 依 园郾 园园远葬
员园 园郾 猿苑苑 依 园郾 园园圆葬 园郾 猿员苑 依 园郾 园员圆葬
员缘 园郾 猿苑猿 依 园郾 园员圆葬 园郾 猿圆园 依 园郾 园员猿葬
圆园 园郾 猿远怨 依 园郾 园园怨葬 园郾 猿圆圆 依 园郾 园圆远葬
圆郾 猿郾 圆摇 对过敏原溶液浊度的影响摇 辐照处理后过敏
怨园园员
核摇 农摇 学摇 报 圆远 卷
原溶液浊度见表 猿遥 从表中可以看出袁浊度与浓度的
变化趋势相似袁辐照后过敏原溶液的浊度变化显著袁辐
照使溶液的浊度增加遥 辐照花生过敏原粉的浊度在剂
量大于 员缘噪郧赠 时开始显著增加袁而辐照过敏原液在
圆噪郧赠时已经开始显著增加遥
圆郾 猿郾 猿摇 对过敏原液疏水性的影响摇 愿 原苯氨基 原 员 原
萘磺酸渊粤晕杂冤荧光探针在水溶液中的荧光强度很弱袁
而与蛋白质表面的疏水集团结合后会发出很强的荧
光袁其 源苑园灶皂时荧光强度与蛋白质的疏水性成正相关
性遥 从图 源 可以看出袁花生过敏原溶液经过辐照后袁其
荧光强度与对照组渊园噪郧赠冤相比显著增大袁圆噪郧赠 时吸
收强度最大袁当剂量超过 员缘噪郧赠 时袁荧光强度又减弱遥
说明辐照使过敏蛋白的疏水性基团大量暴露在分子表
面袁使过敏蛋白溶液的疏水性提高袁当剂量大于 员缘噪郧赠
时分子结构遭到破坏袁疏水性又降低遥 同浓度与浊度
的变化趋势一致袁辐照后固体状态的过敏原疏水性没
有发生明显变化渊图未列冤遥
表 猿摇 电子束辐照对过敏原浊度的影响
栽葬遭造藻 猿摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 耘月 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 燥灶
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剂量
凿燥泽藻渊噪郧赠冤
过敏原溶液
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辐照脱脂花生粉
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责藻葬灶怎贼 责燥憎凿藻则
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圆园 园郾 愿员怨 依 园郾 园员苑葬 园郾 苑猿苑 依 园郾 园员员葬
图 猿摇 电子束辐照过敏原液疏水性的影响
云蚤早援 猿摇 耘枣枣藻糟贼 燥枣 耘月 蚤则则葬凿蚤葬贼蚤燥灶 燥灶 澡赠凿则燥责澡燥遭蚤糟蚤贼赠 燥枣 葬造造藻则早藻灶 泽燥造怎贼蚤燥灶
猿摇 讨论
猿郾 员摇 花生过敏原在液体状态比固体状态对电子束辐
照敏感
现今用于食品辐照的电离辐射主要有 圆 种袁即由
电磁辐射产生的 载射线和 酌 射线尧微粒辐射产生的电
子束辐照咱员愿暂 遥 以往用于辐照脱敏的研究大都选择 酌
射线袁本研究探讨了微粒辐射产生的电子束辐照对花
生过敏原的影响遥
本研究发现袁不同存在状态的花生过敏原对电子
束辐照的敏感性不同袁溶液状态比固体状态过敏原对
辐照处理更敏感遥 当含水食品被辐照时袁食品中产生
的辐射效应可由食品成分吸收辐射能直接引起袁也可
以由食品中水吸收辐射后产生的活性粒子渊藻鄄葬早袁匀援 袁
韵匀援 袁匀韵圆援等冤间接引起遥 而水的电离袁激发作用要远
多于食品中的其他成分袁食品中其他成分通过水的辐
解而受间接影响大于辐照的直接影响袁因此可以解释
为什么辐照脱脂花生粉中过敏原的生化及抗原性质都
没有发生显著的变化袁此结果也与顾可飞咱员怨暂 尧王烁咱圆园暂
的研究结果一致遥
猿郾 圆摇 电子束辐照可以改变花生过敏原的结构袁使过敏
原的免疫原性降低
粤则葬 澡员 单体的羧基端由反平行 茁 折叠片组成的 茁
桶状结构和由 琢螺旋组成的环状区构成咱圆员暂 袁粤则葬 澡员 单
体可以聚合成高度稳定的同源三聚体曰粤则葬 澡圆 中 愿 个
半胱氨酸形成的 源 个保守的二硫键是稳定高级结构的
主要作用力咱圆圆暂 曰粤则葬 澡猿 由分子量为 员源 耀 源缘噪阅 的一系
列蛋白组成遥 由于辐照的作用袁会引起 原 杂匀 基氧化袁
脱氧袁脱羧以及苯酚和多环式氨基自由基的氧化反应遥
园员园员
允燥怎则灶葬造 燥枣 晕怎糟造藻葬则 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 杂糟蚤藻灶糟藻泽
圆园员圆袁圆远渊苑冤院员园园远 耀 员园员员
从而导致蛋白质的一级结构发生变化袁二级三级结构
遭到破坏袁产生分子变形尧凝聚尧粘度下降袁或大量的隐
藏在内部的氨基酸暴露遥 因此辐照后的过敏原溶液的
浓度及浊度发生改变遥 韩国学者的研究咱缘袁员缘袁员苑暂也表
明袁过敏原溶液经辐照处理后的浓度与浊度都有显著
变化遥 疏水性氨基酸主要位于单体相互作用的区域袁
疏水作用则是维系蛋白质高级结构的主要作用力遥 过
敏原溶液经辐照处理后在 圆噪郧赠 时的吸收值达到最
大袁表明蛋白分子由折叠到伸展袁更多疏水区域产生和
暴露遥 随辐照剂量再增加袁蛋白质分子结构遭到更大
的破坏袁疏水基团的疏水性发生改变袁荧光强度减弱遥
张明琦咱愿暂等的研究发现袁蟹过敏蛋白经 酌 辐照处理
后袁猿噪郧赠荧光强度最大随后呈下降趋势遥
电泳图谱与免疫印迹结果均显示辐照使过敏原的
分子量发生了改变袁推测辐照可能改变了过敏原的分
子结构袁使蛋白质发生交联或是解聚遥 杂澡蚤灶咱圆猿暂等研究
表明袁蛋白质分子中位于表位中间的亲水性残基对于
陨早耘的结合能力有很大的作用袁而辐照的作用使亲水
性残基发生改变袁使花生过敏原的致敏性发生变化遥
间接竞争酶联免疫显示袁在低剂量辐照下致敏性略有
增强袁高剂量时致敏性才明显降低袁与李振兴咱远暂等研
究结果一致遥 原因可能是由于辐照使隐藏在蛋白质分
子内部的抗原决定簇暴露了出来袁增强了其免疫原性袁
前人也有研究表明辐照小麦粉而使其过敏原性增加遥
当辐照剂量增大到一定程度以后袁一些过敏表位的多
肽片断从过敏原上分离下来袁游离的表位被破坏袁进而
导致花生过敏原活性降低遥
猿郾 猿摇 植物源过敏原的稳定性相比动物源的更强
国内外的研究均表明辐照可以降低或消除卵白蛋
白渊韵灾粤冤尧牛血清白蛋白渊月杂粤冤尧琢 原酪蛋白渊粤悦粤冤尧茁
原乳球蛋白渊月蕴郧冤和原肌球蛋白渊 贼则燥责燥皂赠燥泽蚤灶冤等过敏
原遥 酝藻灶早灶葬 杂怎咱圆源暂等发现坚果在辐照或辐照与加热联
合处理后袁过敏原活性仍然没有明显的变化遥 由此可
见袁植物性过敏原在溶液状态下袁经过辐照或辐照与其
他加工方式联合处理后袁控制辐照剂量的同时最大限
度的降低过敏原的活性将是下一步研究的重点遥 目前
国内外有关电子束辐照在降低过敏原致敏性的研究鲜
见报道袁急需寻求一种更安全更有效的辐照处理方式
降低过敏原致敏性的方法遥
源摇 结论
电子束辐照处理可使花生过敏原液的浓度和浊度
增加袁疏水性增强袁但花生过敏原在液体状态下比固体
状态下对电子束辐照处理更加敏感袁辐照对脱脂花生
粉的影响不显著遥 低剂量辐照使花生过敏原液的免疫
原性稍有增加袁剂量高于 员园噪郧赠 的电子加速器辐照能
够降低花生过敏原蛋白的免疫原性遥
参考文献院
咱 员 暂摇 云粤韵 砸藻责燥则贼 燥枣 贼澡藻 云粤韵 栽藻糟澡灶蚤糟葬造 悦燥灶泽怎造贼葬贼蚤燥灶 燥灶 云燥燥凿 粤造造藻则早蚤藻泽
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咱 猿 暂摇 李摇 宏援 花生过敏原致敏组分分析咱阅暂援 北京院 中国协和医科
大学袁 圆园园园援
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咱 愿 暂摇 张明琦袁高美须袁支玉香袁潘家荣袁李淑荣袁吕淑霞援 辐照对蟹过
敏蛋白生化性质和抗原性的影响咱 允暂 援 中国农业科学袁圆园园怨袁源圆
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圆园源猿 原 圆园缘圆
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咱员源暂摇 王剑锋袁 刘建玲袁 王摇 璋援从土壤中筛选产漆酶微生物菌株的研
究咱允暂 援 食品与发酵工业袁 圆园园苑袁 猿猿渊员园冤 院 猿缘 原 猿怨
咱员缘暂摇 任广明袁 李滇华袁 曲娟娟袁 于学佳袁 王摇 朋援 漆酶高产菌株筛选
及漆酶基因片段的克隆咱允暂 援 中国林副特产袁 圆园员园袁 渊缘冤 院 猿怨 原
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圆园园员袁 员愿渊远冤 院 缘缘猿 原 缘缘愿
咱员愿暂摇 杨清香袁王摇 涛袁 王摇 栋袁李学梅援 平菇漆酶的性质和应用研究
咱允暂 援 环境科学与技术袁 圆园园愿袁 怨渊猿员冤 院 猿怨 原 源员
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咱员愿暂摇 施培新援食品辐照加工原理与技术咱酝暂援 北京院中国农业科学技
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咱员怨暂摇 顾可飞袁高美须袁李春红援 辐照对虾过敏原生化性质的影响咱 允暂 援
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咱圆园暂摇 王摇 烁袁张春红袁李淑荣援 辐照处理对花生致敏蛋白的影响咱 允暂 援
花生学报袁圆园园怨袁猿愿渊圆冤院员 原 缘
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