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EFFECT OF ELEVATED CO2 ON Cs UPTAKE AND MICROBIAL CHARACTERISTICS IN RHIZOSPHERE SOIL OF Phytolacca americana L.

 CO2浓度升高对美洲商陆富积铯及其根际微生物特征的影响



全 文 :核 农 学 报 2010,24(6):1255 ~ 1261
Journal of Nuclear Agricultural Sciences
收稿日期:2010-04-14 接受日期:2010-06-12
基金项目:国家自然科学基金(40773078)
作者简介:张习美(1984-),女,河南新乡人,硕士,主要从事污染土壤生物修复方面的研究。Tel:022-23003713;E-mail:zhangximeicui@ 163. com
通讯作者:唐世荣(1963-),男,广西桂林人,研究员,主要从事生态毒理与环境修复方面的研究。Tel:022-23003707;E-mail:tangshir@ hot. com
文章编号:1000-8551(2010)06-1255-07
CO2 浓度升高对美洲商陆富积铯
及其根际微生物特征的影响
张习美1,2 唐世荣1,2 宋正国1,2 冯人伟1,2
(1. 农业部环境保护科研监测所生态毒理与环境修复研究中心,天津 300191;
2. 农业部农业环境与农产品安全重点开放实验室,天津 300191)
摘 要:在开顶式气室(OTC)中采用盆栽试验研究了不同 Cs 污染浓度(0、100、300、500、1000mg /kg)下,
CO2 浓度(860μl / L)对美洲商陆(Phytolacca americana Linn.)生物量、Cs 富集量及根际土壤微生物的影
响。结果表明,与正常 CO2 浓度相比,CO2 浓度升高显著增加美洲商陆地上、地下部分的生物量,其增
幅分别为 3% ~ 30%和 6% ~ 56%;也显著提高了美洲商陆地上、地下部分 Cs 的含量,最大增幅分别为
41%和 60%。同时,CO2 浓度升高还显著增加美洲商陆根际土壤中细菌、放线菌、真菌的数量,其增幅
分别为 19% ~ 32%、41% ~ 21%、25% ~ 58%。同一 CO2 浓度条件下,根际土壤微生物总量与美洲商陆
总生物量之间存在显著的相关性。植物生物量、Cs 吸收量以及根际土壤微生物量增加,意味着 CO2 浓
度升高有利于利用美洲商陆修复 Cs 污染土壤。
关键词:CO2 浓度升高;Cs;植物修复;美洲商陆
EFFECT OF ELEVATED CO2 ON Cs UPTAKE AND MICROBIAL CHARACTERISTICS
IN RHIZOSPHERE SOIL OF Phytolacca americana L.
ZHANG Xi-mei 1,2 TANG Shi-rong 1,2 SONG Zheng-guo 1,2 FENG Ren-wei 1,2
(1. Centre for Research in Ecotoxicology and Environmental Remediation,Agro-Environmental Protection Institute,
Ministry of Agriculture,Tianjin 300191;2. Open Key Laboratory of Agro-environment and
Agro-product Safety of Ministry of Agriculture,Tianjin 300191)
Abstract:In this paper,we used open-top chambers (OTC)to investigate the effects of elevated CO2(860 μl / L)on
biomass,cesium (Cs)uptake and soil rhizosphere microorganisms of Phytolacca americana L. growing on soils spiked
with various levels of Cs (0,100,300,500 and 1000mg /kg). The results showed that compared to the ambient CO2,
elevated CO2 significantly improved not only the aboveground and underground biomass of P. americana by 3% ~ 30%
and by 6% ~ 56%,respectively,but also uptake of cesium in the aboveground and underground of P. americana with
maximum increase rate by 41% and 60%,respectively. Meanwhile,elevated CO2 could also significantly increased the
number of bacteria by 19% ~ 32%,actinomycetes by 41% ~ 21%,and fungi by 25% ~ 58% in the rhizosphere soils of
P. americana,respectively. . Under the same CO2 level,a significant correlation was noted between the numbers of
microorganisms and total biomass of P. americana. Increasing in plant biomass,Cs accumulation,and rhizosphere
microorganism biomass implied that elevated CO2 may be favorable to the use of P. americana for phytoremediation of Cs
contaminated soil.
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核 农 学 报 24 卷
Key words:elevated CO2;cesium;phytoremediation;Phytolacca americana L.
20 世纪中期以来,随着核工业和核技术的发展,
放射性核素污染在世界范围内广泛存在并日益严重,
其中铯(Cs)是危害较大的常见放射性核素之一,有关
Cs 污染土壤修复方面的研究成为近年的热点[1]。目
前,用于治理放射性核素污染土壤的方法包括物理的、
化学的和工程的方法[2,3],这些方法成本高、易造成二
次污染,难用于治理大面积放射性核素污染的土壤。
与传统的理化方法相比,植物修复具有投资少、效率
高、环境友好等特点[4],是具发展前景的修复技术之
一。但植物修复本身也存在一定的缺点,如植物生长
周期长、生长缓慢、生物量小等。因此,增加植物对放
射性核素的吸收量以提高植物修复的绝对效率便成为
人们关注的焦点[5,6]。
CO2 浓度持续升高已成为事实。Tang 等研究表
明,与正常 CO2 浓度相比,CO2 浓度升高不仅增加铜
污染土壤上印度芥菜(Brassica juncea L. Czern)和向
日葵(Helianthus annuus L.)的生物量,而且诱导它们
吸收更多的铜[7],从而提高这 2 种植物对 Cs 污染土壤
的修复效率;但 CO2 浓度升高是否提高植物对放射性
核素污染土壤的修复效率,目前研究很少。美洲商陆
在我国分布范围广,具有生长快、生物量大的特点。本
文在开顶式气室(OTC)中采用盆栽试验研究不同 Cs
污染浓度下,CO2 浓度升高对美洲商陆(Phytolacca
americana L.)生物量、Cs 富集量及根际土壤微生物的
影响。由于自然界中放射性核素 Cs 与稳定 Cs 化学行
为相近,植物在吸收的过程中无法将二者区分[8],故
本文用稳定 Cs 来推断放射性 Cs 在 Cs 污染和 CO2 浓
度升高环境中的化学行为,研究结果可为放射性铯核
素污染土壤植物修复提供科学依据。
1 材料与方法
1. 1 供试材料
供试植物为美洲商陆,种子采自湖南省锰矿区。
供试土壤为水稻土,采自广东省未受污染的农田土壤
(0 ~ 20cm 耕层),土壤主要性质见表 1。
表 1 供试土壤理化性质
Table 1 Physical and chemical characteristics of used soil
全氮含量
total N
content
(g / kg)
全磷含量
total P
content
(g / kg)
全钾含量
total K
content
(g / kg)
有机质含量
organic matter
content
(g / kg)
Cs 本底值
[Cs]
in soil
(mg /kg)
阳离子交换量
CEC
(cmol / kg)
pH 土壤质地
soil texture
1. 80 2. 81 21. 6 32. 23 2. 76 9. 41 5. 24 砂质壤土 sandy loamy soil
1. 2 供试土壤与处理
盆栽试验在农业部环境保护科研监测所内(天
津)进行。盆栽使用的土壤均过 2mm 筛,采用逐步稀
释法分别在土壤中加入 0(CK,对照)、100、300、500 和
1000mg /kg 的 Cs(以 CsCl 溶液形式加入)。保持土壤
含水量为最大田间持水量的 70%,室温、避光条件下
平衡 2 个月,取出、混匀;用逐步稀释法加入基肥:氮肥
用量 150mg /kg、磷肥用量 100mg /kg、钾肥用量 100mg /
kg,混匀后装盆。试验采用塑料盆钵,每盆装土
1. 0kg。基肥施用后,盆钵土壤在最大田间持水量条件
下保持 2 周。每个处理重复 5 次。
1. 3 盆栽试验
试验地点设在农业部环境保护科研监测所内的 6
个 OTC(开顶式生长室)中(表 2),其中 3 个 OTC 的
CO2 浓度为 360μl / L,与外界 CO2 浓度保持一致;另外
3 个的 CO2 浓度控制在 860μl / L 左右。OTC 通气情况
如下:晴天每天通CO2气,时间为9:00 - 17:00;阴雨
表 2 盆栽试验期间 OTC 各项运行参数
Table 2 Parameters of the OTC in the pot experiment
气室编号
chamber
No.
温度
tempera-
ture
(℃)
湿度
humidity
(%)
CO2 浓度
CO2
concentration
(μl / L)
光强 a PPF (μmol /m2 s)
多云
cloudy
晴天
shining
1 31 ± 5 42 ± 8 867 ± 68 320 ± 141 747 ± 236
3 29 ± 5 39 ± 7 859 ± 52 332 ± 157 814 ± 349
5 30 ± 5 40 ± 8 854 ± 75 304 ± 168 729 ± 265
2 31 ± 5 41 ± 9 363 ± 38 339 ± 181 824 ± 356
4 28 ± 5 40 ± 7 357 ± 25 328 ± 151 832 ± 362
6 30 ± 5 45 ± 7 361 ± 49 316 ± 138 753 ± 277
注:a 表示光合成有效光量子流。
Note:a indicates photosynthetic photon flux.
天不通 CO2 气。
育种采用直接播种的方法,选取饱满的美洲商陆
种子,用 1%次氯酸钠溶液浸泡 10min,取出种子用去
离子水清洗 5 ~ 7 次后,每盆以梅花形播 5 颗种子,待
植株长出 3 片真叶时,间苗,保留 1 株大小均匀的健壮
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6 期 CO2 浓度升高对美洲商陆蓄积铯及其根际微生物特征的影响
苗。将种植苗的盆钵移至 OTC,让其生长 52d。植物
生长期间保持土壤含水量为最大田间持水量的 70%
左右,温度和光照情况见表 2。为减少试验误差,每 7
d 随机交换同一 CO2 浓度条件下不同 OTC 内的盆钵。
1. 4 植物样品采集和 Cs 含量测定
收获前,用去离子水洗去叶片和茎上的灰尘,用不
锈钢剪刀在美洲商陆植株距离土面约 2cm 处剪下。
用竹铲将盆钵中土壤松动后,倒出土和根,将根周围的
土小心剥离,保留根际土壤约 200g,保存在 4℃冰箱,
用于测定土壤微生物指标。剥离出的根分别用自来
水、去离子水冲洗后,放入 10mmol /L 的 CaCl2 溶液中
浸泡 10min,取出后用去离子水淋洗 5 次,收集装袋。
上述新鲜样品放入烘箱 105℃杀青 30min,再在 65℃
条件下烘干 72 h 至恒重,取出放入干燥器中冷却后称
重,称重的样品用研磨机(IKA A-11,Germany)磨碎,
过 200 目筛后,用于 Cs 的测定。
图 1 CO2 浓度升高对不同 Cs 污染水平下美洲商陆地上(a)和地下部分(b)生物量的影响
Fig. 1 Effect of elevated CO2 on dry weight shoot and root biomass of
P. americana L. growing at various levels of Cs
A-CO2:正常 CO2;E-CO2:CO2 升高。
大写和小写字母分别表示不同 Cs 污染土壤间及不同 CO2 浓度间比较的显著性差异(P < 0. 05)。下图同。
A-CO2:ambient CO2;E-CO2:elevated CO2 .
Captial and swall leters means significant differences with different Cs treatment soils and different CO2 treatments (P < 0. 5),respeetively.
The same as following figures
Cs 含 量 采 用 原 子 吸 收 分 光 光 度 法 (AAS
ZEEnit700,Germany)测定。准确称取 0. 5000g 地上、地
下部植物样品到 100 ml 的烧杯中,加 7. 5ml 浓 HNO3,
轻轻摇匀,盖上表面皿,静置过夜。100℃加热溶解样
品,冷却后加 2. 5ml HClO4,220℃加热至消煮液呈无色
或清亮色,再次冷却后,转移至 50ml 容量瓶中,超纯水
定容。消煮的同时做空白试验以校正试剂误差。
1. 5 土壤微生物指标测定
可培养微生物用平板稀释计数法测定,细菌、放线
菌、真菌分别用牛肉膏蛋白胨培养基(NA)、改良高氏
1 号培养基(NG)、马铃薯葡萄糖培养基(PDA)培养计
数[9]。土壤微生物量 C、N 用氯仿熏蒸法处理后测
定[10,11]。熏蒸后用 0. 5 mol /L 的 K2SO4 溶液浸提,浸
提液中的有机 C 用可溶性 C 自动分析仪(TOC)测定,
浸提液中的 N 用凯氏定氮法测定。
1. 6 数据分析
试验 各 组 数 据 均 用 Excel 进 行 处 理,采 用
SPSS16. 0 统计分析软件进行双因素方差分析和相关
分析(* P < 0. 05 为显著水平)。
2 结果与分析
2. 1 CO2 浓度升高对 Cs 污染条件下美洲商陆生物
量的影响
盆栽试验表明,当美洲商陆种植在 Cs 添加浓度为
0、100、300mg /kg 的土壤上时,CO2 浓度升高显著增加
美洲商陆地上部分和根的生物量,而在 Cs 添加浓度更
高则呈现不显著趋势。与 CO2 浓度对照相比,在 CO2
浓度升高条件下,随着 Cs 添加浓度的升高,种植在 Cs
添加浓度为 0、100、300、500 和 1000mg /kg 的土壤上的
美洲商陆,其地上、地下部生物量分别增加 20%、
30%、18%、17%、3% 和 56%、35%、22%、6%、10%
(图 1)。美洲商陆地上部分和根生物量干重对土壤添
加不同含量 Cs 的响应曲线不仅与土壤中 Cs 含量有
关,还与 CO2 浓度有关。正常 CO2 浓度条件下,随着
Cs 添加量的升高美洲商陆地上部分生物量呈先缓慢
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降低后又大幅降低的趋势;根生物量呈现先增加后降
低的趋势,其最大生物量出现在 Cs 添加浓度为
100mg /kg 时;但 CO2 浓度升高条件下,随着 Cs 添加量
的升高,美洲商陆地上部分和根生物量均出现先增加
后降低的趋势,最大生物量都出现在 Cs 添加量为
100mg /kg 时。
2. 2 CO2 浓度升高对 Cs 污染条件下美洲商陆 Cs 蓄
积量的影响
由图 2 知,CO2 浓度升高显著增加了美洲商陆地
上部、根部的 Cs 含量,随着 Cs 添加浓度的升高,0、
100、300、500 和 1000mg /kg 浓度的地上部、根部 Cs 含
量,分别增加 41%、18%、11%、35%、15% 和 60%、
20%、14%、15%、19%(图 2)。同一 CO2 浓度条件下,
美洲商陆地上部和根部随着 Cs 添加量的升高其含量
显著增加。其中,正常 CO2 浓度条件下,随着 Cs 添加
量的升高,0 ~ 1000mg /kg 浓度下的美洲商陆地上部和
根部 Cs 含量依次为 3、2720、7600、9263、15443mg /kg
和 0. 2、1374、4095、5934、6954mg /kg;而 CO2 浓度升高
条件下,根部和地上部 Cs 含量依次为 5、3219、8421、
12495、17818mg /kg 和 2、1651、4651、6840、7870mg /kg。
图 2 CO2 浓度升高对美洲商陆地上(a)和地下部分(b)蓄积 Cs 量的影响
Fig 2 Effect of elevated CO2 on Cs concentration in the shoots (a)and roots (b)of P. americana L.
2. 3 CO2 浓度升高对美洲商陆 Cs 富集系数的影响
CO2 浓度升高提高美洲商陆对 Cs 的富集系数。
与 CO2 浓度对照比,随着 Cs 添加浓度的升高,种植在
Cs 添加浓度为 0、100、300、500 和 1000mg /kg 土壤上
的美洲商陆,对 Cs 的富集系数分别提高 58%、18%、
11%、36%、16% (表 3)。无论是正常 CO2 浓度还是
CO2 浓度升高,美洲商陆 Cs 富集系数均随着 Cs 添加
量的升高而呈现先增加后降低的分布趋势,且最大富
集系数分别为 26. 5、31. 3,都出现在 Cs 添加量为
100mg /kg 的情况下。
2. 4 CO2 浓度升高对美洲商陆根际土壤微生物菌落
组成的影响
由图 3 知,CO2 浓度升高显著增加美洲商陆根际
土壤中细菌、放线菌、真菌的数量。与 CO2 浓度对照
比,CO2 浓度升高条件下,种植在 Cs 添加浓度为 0、
100、300、500 和 1000mg /kg 土壤上的美洲商陆,其根
际土壤中细菌数量分别增加 19%、23%、17%、31%、
32%,放线菌数量分别增加 27%、41%、25%、21%、
39%,真菌数量分别增加 25%、32%、58%、43%、
38%。同一 CO2 浓度条件下,美洲商陆根际土壤中细
菌、放线菌、真菌数量随 Cs 添加量的升高而显著增加,
之后显著降低,细菌、放线菌的最大数量出现在 Cs 添
加量为 100mg /kg 时,而真菌最大数量出现在 Cs 添加
量为 300mg /kg 时。
表 3 CO2 浓度升高对美洲商陆 Cs 富集系数的影响
Table 3 Effect of elevated CO2 on Cs
bioaccumulation factor (BF)of P. americana L.
Cs 添加量
spiked Cs
(mg /kg)
CO2 浓度
[CO2]
(μl / L)
地上部分
Cs 含量
shoot
[Cs]
(mg /kg)
土壤中 Cs 含量
Cs concentration
in soil(mg /kg)
富集系数
bioconcentration
factor
0 360 4. 3 ± 0. 1 2. 76 1. 2
860 5. 0 ± 1. 1 1. 9
100 360 2720 ± 278 102. 76 26. 5
860 3219 ± 820 31. 3
300 360 7600 ± 349 302. 76 25. 1
860 8421 ± 519 27. 8
500 360 9263 ± 450 502. 76 18. 4
860 12495 ± 985 24. 9
1000 360 15443 ± 1240 1002. 76 15. 4
860 178418 ± 1398 17. 8
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6 期 CO2 浓度升高对美洲商陆蓄积铯及其根际微生物特征的影响
图 3 CO2 浓度升高对美洲商陆根际土壤细菌
(a)、放线菌(b)和真菌(c)数量的影响
Fig. 3 Effect of elevated CO2 on
populations of bacteria(a),actinomycetes
(b)and fungi (c)in rhizosphere soils of
P. americana L.
2. 5 根际土壤微生物总量与美洲商陆总生物量的相
关性分析
从图 4 知,同一 CO2 浓度条件下,根际土壤微生
物总量与美洲商陆总生物量之间都存在显著的相关
性,正常 CO2 浓度和 CO2 浓度升高条件下的相关系数
分别为 0. 7832、0. 9618。
3 讨论
3. 1 CO2 浓度升高对不同 Cs 污染水平下美洲商陆
生物量的影响
在大气 CO2 浓度持续升高和全球气候变暖的前
提下,CO2 浓度升高对陆地生物的影响越来越受到人
图 4 根际土壤微生物总量与美洲
商陆总生物量之间的关系
Fig. 4 Relationship of total numbers of
microorganisms to total dry biomass of
P. americana L.
们的关注。研究表明,CO2 浓度升高对植物影响最明
显的特征是增加植物生物量和农作物产量[6,12,13]。
Kimball 等[14]通过 430 个模拟试验仔细比较了 37 种
植物,结果表明,在 CO2 较正常浓度加倍时,37 种植物
平均产量可提高 33%左右;Wu 等研究表明,当 CO2 浓
度为 860μl / L 时,高丹草(C3)和红三叶(C4)的生物
量平均增幅为 39%和 12% [6]。本试验中,不同 Cs 污
染水平条件下,CO2 浓度升高时美洲商陆地上部分和
根都出现了生物量显著增加的现象;较正常 CO2 浓度
增加的范围为 5% ~ 36%,地上部分和根生物量增幅
分别为 3% ~ 30%、6% ~ 56%,与以上研究结果类似;
同时本研究结果还显示,CO2 浓度升高对美洲商陆地
下部分的影响明显高于地上部分。
3. 2 CO2 浓度升高对不同 Cs 污染水平下美洲商陆
蓄积 Cs 的影响
本课题组前期研究表明,CO2 浓度升高可促进植
物对污染物的吸收[7]。Cs 作为植物非必需营养元素,
自然条件下植物体内含量普遍较低,范围大概为
0. 0005 ~ 0. 373mg /kg[15 ~ 17]。但生长在 Cs 污染土壤上
的某些植物却表现出较高的 Cs 富集量,如 Kuwahara
等[18]发现与大米、土豆、白菜、绿叶蔬菜等相比蘑菇能
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够多吸收 2 个数量级的稳定性 Cs;唐世荣等[19]通过不
同134 Cs 比活度处理的水培试验综合比较了 6 种苋科
植物对 Cs 的富集情况,结果表明,籽粒苋较其他植物
生物量高、根系密度大、生长速率快,具有较高的134 Cs
去除速率。本试验中,CO2 浓度升高明显促进美洲商
陆对 Cs 的富集。在同一 Cs 污染浓度条件下,与正常
CO2 浓度相比,CO2 浓度升高不仅显著增加了美洲商
陆植物地上、地下部分的生物量,还诱导了美洲商陆对
Cs 的吸收。在 Cs 污染浓度为 0 ~ 1000mg /kg 时,无论
是正常 CO2 浓度还是 CO2 浓度升高条件下,美洲商陆
地上部分和根的 Cs 含量随着 Cs 浓度的升高而逐渐升
高,美洲商陆对 Cs 的吸收与土壤中 Cs 的污染水平呈
正相关。但相同 CO2 浓度条件下,美洲商陆对 Cs 的
富集系数随 Cs 添加浓度的升高出现先增加后降低的
趋势,最大富集系数均出现在 Cs 污染浓度为 100 ~
500mg /kg 时;这主要是因为当 Cs 浓度超过 500mg /kg
时,美洲商陆体内富集的高浓度 Cs 对其生长产生了严
重毒害作用,使生物量下降,因此尽管美洲商陆地上部
分 Cs 含量很高但生物量低、富集系数小,但总吸收量
与低浓度 Cs 污染条件下相比却相对较少。综合分析
表明,当土壤中 Cs 污染浓度在 100 ~ 500mg /kg 左右
时,美洲商陆对 Cs 污染土壤有较好的修复效果。
3. 3 CO2 浓度升高对不同 Cs 污染水平下美洲商陆
根际微生物的影响
土壤微生物是土壤环境的重要组成部分,对土壤
有机质的分解、营养物质的转化、土壤结构的保持以及
温室气体的产生等起着重要作用[20,21]。研究表明,重
金属污染不仅会明显降低土壤中微生物的数量,还会
使土壤微生物各生理类群和群落组成都发生明显变
化[22 ~ 25]。本试验中,相同 CO2 浓度条件下,美洲商陆
根际土壤中细菌、放线菌、真菌数量均随着 Cs 添加量
的升高先增加后降低的趋势;其中细菌、放线菌最大数
量出现在 Cs 添加量为 100mg /kg 的情况下,而真菌最
大数量出现在 Cs 添加量为 300mg /kg 的情况下。表明
土壤中低浓度 Cs 对土壤微生物有刺激作用,但浓度较
大时则有抑制作用,这与尹军霞等[25]的研究结果相
似。从细菌、放线菌、真菌的数量由增加转为受抑制时
对应的土壤 Cs 浓度来看,细菌、放线菌对 Cs 较为敏
感,而真菌对 Cs 的耐性相对较高,与相关文献报道的
结果一致[27 ~ 29]。本试验中,与正常 CO2 浓度相比 CO2
浓度升高使美洲商陆根际土壤中的细菌、放线菌、真菌
群落数量显著增加,且微生物总数量与美洲商陆总生
物量呈明显的线性相关关系,表明 CO2 浓度升高时,
土壤微生物与植物生长之间为正效应,即由于根际微
生物种群数量增加而促进了植物生长[30]。但 Cs 与土
壤微生物种群之间的关系还有待进一步的深入研究。
4 结论
CO2 浓度升高不仅使美洲商陆地上部分和根生物
量显著增加,还诱导美洲商陆对 Cs 的富集,且美洲商
陆对 Cs 污染浓度为 100 ~ 500mg /kg 土壤具有较好的
修复效果。CO2 浓度升高显著增加了美洲商陆根际土
壤中细菌、放线菌、真菌的数量,且微生物总数量与美
洲商陆总生物量之间存在显著的相关性。
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(责任编辑 邱爱枝)
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