全 文 ：植物生理学报 Plant Physiology Journal 2014, 50 (3): 283~289 283
收稿 2014-01-16　　修定 2014-02-24
资助 辽宁省“十二五”重大项目(2011215003)、沈阳市科技项目
(F11-092-3-00)和教育部归国留学人员启动基金。
* 通讯作者(E-mail: suner116@126.com; Tel: 024-88487231)。
缺氧及氧恢复对马铃薯块茎线粒体中活性氧及抗氧化酶的影响
王芳1,2,3, 孙周平1,2,3,*, 刘义玲1,2,3
1设施园艺省部共建教育部重点实验室, 2辽宁省设施园艺重点实验室, 3沈阳农业大学园艺学院, 沈阳110866
摘要: 选用马铃薯‘Favorita’品种, 采用淹水及淹水后恢复通气的方法, 研究了缺氧及氧恢复条件对马铃薯块茎亚细胞水平
线粒体中活性氧(ROS)及抗氧化酶的影响。结果表明: 缺氧胁迫会导致块茎线粒体中超氧阴离子(O2¯·
)的发生速率、过氧化
氢(H2O2)及丙二醛(MDA)的含量先升高后下降, 其中在缺氧第1天时分别比对照升高43.95%、49.18%、69.20%, 在缺氧第3
天时各项指标均达到最大值; 而缺氧胁迫下超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、过氧化氢酶(CAT)活性
呈现先降低、后升高、再降低的趋势, 其中缺氧第1天分别比对照降低28.35%、31.48%、37.36%。氧恢复时O2¯·
发生速率,
H2O2及MDA含量, SOD、APX、CAT的活性同样呈现先升高后降低的趋势, 其中与缺氧1 d未恢复对照相比, 氧恢复1 d分别
提高144.69%、63.45%、59.07%、39.29%、11.45%、2.88%。另外, 上述各项指标因缺氧胁迫与氧恢复时间的不同而有较
大的变化。由此推测: 氧恢复比缺氧胁迫更能促进马铃薯块茎线粒体ROS的爆发, 加剧膜脂过氧化, 并增强线粒体抗氧化
酶的短时防御性能。
关键词: 马铃薯; 线粒体; 活性氧; 抗氧化酶; 缺氧; 氧恢复
Effects of Anoxia and Post-Anoxia on Reactive Oxygen Species (ROS) and
Antioxidant Enzymes in Tuber Mitochondria of Potato (Solanum tuberosum L.)
WANG Fang1,2,3, SUN Zhou-Ping1,2,3,*, LIU Yi-Ling1,2,3
1Key Laboratory of Protected Horticulture of Education Ministry and Liaoning Province, 2Key Laboratory of Protected
Horticulture of Liaoning Province, 3College of Horticulture, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, China
Abstract: With the methods of waterlogging and subsequent recovery, different responses of reactive oxygen
species (ROS) and antioxidant enzymes at the subcellular level of potato (Solanum tuberosum cv. ‘Favorita’)
tuber mitochondria to anoxia and post-anoxia were investigated. The results showed that the superoxide anion
(O2¯· ) generating rate, the contents of hydrogen peroxide (H2O2) and malondialdehyde (MDA) in tuber
mitochondria under anoxia raised at first and then declined, increased by 43.95%, 49.18% and 69.20%
respectively at the first day of anoxia compared with the control, and reached the maximum at the third day.
Meanwhile the activities of superoxide dismutase (SOD), ascorbate peroxidase (APX) and catalase (CAT) of
tuber mitochondria presented the trend of declining-rising-declining, and decreased by 28.35%, 31.48% and
37.36% respectively at the first day of anoxia compared with the control. Similarly, the O2¯·
generating rate, the
contents of H2O2 and MDA, and the activities of SOD, APX and CAT in tuber mitochondria under post-anoxia
also increased first and then decreased, and increased by 144.69%, 63.45%, 59.07%, 39.29%, 11.45% and
2.88% respectively for one-day post-anoxia compared with the one-day anoxia. Moreover, the above indexes
showed a relatively large change for the different treatment time of anoxic stress and post-anoxia. Above all, the
ROS in tuber mitochondria was easier to burst and aggravate the membrane lipid peroxidation under post-
anoxia than anoxic stress. As a result, the short-term defensive abilities of mitochondrial antioxidant enzymes
were enhanced.
Key words: potato; mitochondria; reactive oxygen species; antioxidant enzymes; anoxia; post-anoxia
洪涝灾害是包括我国在内的世界上很多国家
普遍存在的问题, 尤其是季风性气候条件下具有
“发生-消退-再发生”特点的洪涝, 严重影响着种植
业的发展。为减轻作物因淹水而造成的不良影响,
提高作物地下部耐涝性, 国内外众多学者对此做
了大量研究。研究普遍认为, 自然界的植物会由
植物生理学报284
于间断或持续的淹水而出现供氧不足的现象, 氧
浓度的降低又迫使植株进行乏氧生活, 即经受缺
氧胁迫(anoxic stress); 而淹水消退时又会出现再通
气现象 , 称作缺氧后氧恢复(post-anoxia)。如
Biemelt等(1998)认为, 缺氧胁迫会造成小麦胚根细
胞能荷下降、电子传递链饱和、还原力水平升
高、氧自由基加快生成, 对作物造成极大伤害; 而
Blokhina等(2000, 2003)则认为氧恢复不仅不能减
缓缺氧胁迫造成的伤害, 还会给细胞造成更严重
损伤, 如细胞能量消耗加快、细胞还原态升高、
内膜超极化等; Drew (1997)对沼泽植物根系的研
究得出结论: 缺氧后的氧恢复对细胞结构和功能
造成的伤害可能更严重。更深一步的研究发现,
持续的缺氧胁迫会对细胞中氧气的主要消耗
者——线粒体造成严重伤害, 导致其结构改变、
功能受限(Møller 2001; Vartapetian等2003), 甚至会
影响膜通道的开放(杨福愉1999; Cassarino等1999);
而氧恢复条件会更加剧羽扇豆根系线粒体活性氧
(reactive oxygen species, ROS)的生成(Garnczarska
和Bednarski 2004), 其对大麦根系细胞缺氧后抗氧
化能力下降的恢复作用, 仍须通过增强细胞线粒
体的防御性, 以此抑制ROS的加速生成(Skutnik和
Rychter 2009)。然而, Skutnik和Rychter (2009)同时
还认为, 缺氧胁迫时大麦根系线粒体呼吸性能无
明显降低, 抗氧化酶的防御性能也会因部位不同
而存在差异。因此, 缺氧胁迫及氧恢复对线粒体
的影响还需要深入研究。
马铃薯是世界第四大粮食作物, 在我国也是
重要的粮、菜兼用型作物。但在我国东北、西
南、华南等大面积种植区(约占全国种植面积的近
50%), 常由于降水过多、阶段性降水等原因导致
马铃薯饱经缺氧和氧恢复胁迫, 尤其是进入块茎
膨大期, 涝渍造成薯块大量腐烂, 减产损失严重。
Pavelic等(2000)以马铃薯块茎组织培养细胞为试
材研究了缺氧和氧恢复在脂膜抗氧化方面的影响,
但缺氧胁迫和氧恢复对马铃薯块茎亚细胞线粒体
水平上ROS生成和抗氧化酶的影响鲜有报道。为此,
本文采用淹水和淹水后恢复通气的方法, 研究了
缺氧胁迫及氧恢复对马铃薯块茎线粒体中ROS和
抗氧化酶的影响, 探究其对于不同时间淹水胁迫和
淹水后恢复的响应规律, 以期为马铃薯的抗涝品
种选育及其栽培农艺措施的改进提供理论指导。
材料与方法
1 材料
供试材料为马铃薯(Solanum tuberosum L.)
‘Favorita’品种。试验于2013年2~7月在沈阳农业
大学园艺学院科研基地进行。
马铃薯‘Favorita’种薯薯块经催芽、切块、消
毒, 使用草炭与蛭石1:1 (V/V)的混合基质, 栽培于
21 cm×21 cm的营养钵中。昼夜温度(25±3) ℃/
(15±3) ℃, 昼夜时间(15±0.5) h/(9±0.5) h。进入块
茎膨大期(植株高度25 cm左右)后, 挑选长势一致
的植株进行处理。
2 试验方法
2.1 缺氧和氧恢复处理
将植株放入装有清水的矩形塑料水箱(长420
cm, 宽290 cm, 高30 cm)中进行淹水处理, 淹水线
位于营养钵2/3处(植株根系完全浸入水中)。持续
淹水1~5 d和淹水后持续恢复1~5 d后分别取块
茎。与未处理对照组同时进行相关指标测定, 试
验设5次重复。
2.2 分析测定
参考Neubrger (1985)和傅爱根等(2000)的方法
进行线粒体分离: 1 g块茎组织加入5 mL研磨液[含
0.3 mol·L-1甘露醇、5 mmol·L-1 HEPES (pH 7.5)、1
mmol·L-1 EDTA、2 mmol·L-1巯基乙醇、0.1% (W/V)
BSA、0.5% (W/V) PVP], 快速匀浆, 纱布过滤, 滤
液经1 500×g离心15 min, 所得上清液经10 000×g离
心15 min, 将沉淀悬浮在10 mmol·L-1磷酸钾缓冲液
[含0.3 mmol·L-1甘露醇、1 mmol·L-1 EDTA、0.1%
(W/V) BSA, pH 7.2]中, 再经1 200×g离心10 min, 所
得上清液以10 000×g离心15 min, 沉淀即为线粒体,
悬浮于1 mL上述磷酸钾缓冲液中作为提取液。所
有操作在0~4 ℃下进行。
超氧阴离子(O2¯· )发生速率的测定参考王爱国
和罗广华(1990)、傅爱根等(2000)的方法: 取1 mL
提取液, 依次加入0.5 mL的17 mmol·L-1对氨基苯磺
酸和0.5 mL的7 mmol·L-1 α-萘胺, 在25 ℃下反应20
min, 反应后用同体积正丁醇充分摇匀, 静置分层,
取正丁醇相测定OD580。
过氧化氢(H2O2)含量的测定参考Macnevin和
Urone (1953)、Paetterson等(1984)的方法: 取l mL
提取液, 加入0.l mL的20%四氯化钛(TiCl4)浓盐酸
王芳等: 缺氧及氧恢复对马铃薯块茎线粒体中活性氧及抗氧化酶的影响 285
溶液和0.2 mL氨水, 3 000×g离心10 min, 最后将沉
淀溶于3 mL的l mol·L-1硫酸中, 测定OD410。
丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量的测定
参考Cakmak和Marschner (1992)的方法: 取提取液l
mL, 加3 mL含2% TBA的30%三氯乙酸(TCA)溶液,
95 ℃水浴中保温30 min后, 立即置于冰浴中冷却,
1 500×g离心10 min, 测定OD532和OD600, 按(OD532–
OD600)/155换算MDA含量(μmol)。
测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,
SOD)活性参照Giannopolitis和Ries (1977)的方法:
取提取液1 mL加3 mL反应液[50 mmol·L-1 磷酸缓
冲液, pH 7.8, 含15 mmol·L-1甲硫氨酸、65 μmol·L-1
N B T、2 . 0 μ m o l · L - 1核黄素、0 . 1 m m o l · L - 1
EDAT]。在25 ℃、4 000 µmol·m-2·s-1下照光15 min
后, 于黑暗下终止反应, 然后立即在560 nm波长处
测定吸光值。以缓冲液代替酶液作为空白对照,
以抑制NBT光化学反应50%为1个酶活性单位。
抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,
APX)活性的测定参照Amako等(1994)的方法: 反
应混合液为25 mmol·L-1磷酸缓冲液(含0.1 mmol·L-1
EDTA, pH 7.0)、1 mmol·L-1 H2O2、0.25 mmol·L
-1
抗坏血酸(ascorbic acid, AsA)和1 mL提取液。测定
间隔为20 s, 以不加H2O2的反应速率作空白校正。
过氧化氢酶(catalase, CAT)活性的测定参考
Cakmak和Marschner (1992)的方法: 取提取液1 mL,
加入25 mmol·L-1磷酸(含0.1 mmol·L-1的EDTA, pH
7.0) 1.7 mL和10 mmol·L-1 H2O2 0.2 mL, 25
℃下反
应。测定OD470的动力学变化, 取其中20 s的动力学
变化计算酶促反应速率。
2.3 数据处理
采用SPSS 17.0进行数据统计和显著性差异
分析。
实验结果
1 缺氧胁迫对O2¯·发生速率及H2O2和MDA含量的
影响
如图1所示, 与对照相比, 缺氧胁迫第1天时线
粒体O2¯·发生速率、H2O2及MDA的含量分别升高
43.95%、49.18%、69.20%, 差异显著; 第3天时分
别达到最大值2.817 nmol·min-1·g-1 (FW)、139.951
和17.751 nmol·g-1 (FW); 而后迅速下降, 第5天时分
别高出对照49.91%、22.57%、34.91%, 其中O2¯·差
异不显著, H2O2及MDA均差异显著, 且低于缺氧胁
迫第1天(P=0.05)。
2 缺氧胁迫对SOD、APX、CAT活性的影响
如图2所示, 与对照相比, 缺氧胁迫第1天时线
粒体SOD、APX、CAT活性分别下降28.35%、
31.48%、37.36%, 差异显著; 第3天时分别达到最
图1 缺氧胁迫对马铃薯块茎线粒体中O2¯·发生速率及
H2O2和MDA含量的影响
Fig.1 Effects of anoxia stress on the generating rate of
mitochondrial O2¯· , and the contents of H2O2 and
MDA in potato tubers
不同小写字母表示5%显著差异水平; 图2同此。
植物生理学报286
大值141.235、0.639、46.034 U·g-1 (FW); 而后逐渐
下降, 第5天时, 与对照相比, SOD下降27.12%, APX
高出54.17%, CAT下降61.30%, 差异显著(P=
0.05)。
3 缺氧后氧恢复对O2¯·发生速率及H2O2和MDA含
量的影响
如图3-A所示, 氧恢复使淹水1、2、3、4、5 d
后线粒体中O2¯·发生速率呈现先升高后下降趋势,
其中 , 氧恢复1 d分别比对照升高144 .69%、
图3 缺氧后氧恢复对马铃薯块茎线粒体中O2¯·发生速率及
H2O2和MDA含量的影响
Fig.3 Effects of post-anoxia stress on the generating rate of
mitochondrial O2¯· , and the contents of H2O2 and
MDA in potato tubers
图2 缺氧胁迫对马铃薯块茎线粒体中
SOD、APX和CAT活性的影响
Fig.2 Effects of anoxia stress on the activities of
mitochondrial SOD, APX and CAT in potato tubers
35.49%、35.15%、23.24%、5.35%, 除淹水5 d外,
均差异显著; 氧恢复3 d出现急剧下降, 分别比对照
降低37.50%、52.86%、80.61%、57.65%、
63.95%, 除淹水1 d外, 差异显著, 且除淹水5 d外,
下降趋势呈倒V型; 氧恢复4和5 d, 趋于平稳, 两者
相比, 差异不显著。
如图3-B所示, 氧恢复使淹水1、2、3、4、5 d
后线粒体中H2O2的含量呈现先升高后下降趋势,
王芳等: 缺氧及氧恢复对马铃薯块茎线粒体中活性氧及抗氧化酶的影响 287
其中除淹水5 d外, 氧恢复2 d均达到最大值, 分别
比对照升高122.63%、71.04%、21.22%、50.27%,
差异显著; 氧恢复3 d逐渐下降, 但仍高于对照; 氧
恢复4和5 d, 趋于平稳, 两者相比, 差异显著。
如图3-C所示, 氧恢复使淹水1、2、3、4、5 d
后线粒体中MDA的含量呈现先缓慢上升后逐渐下
降趋势 , 氧恢复1 d分别比对照升高59.07%、
18.51%、15.21%、9.03%、11.50%, 其中除淹水4
和5 d外, 均呈显著差异; 氧恢复3 d均达到最大值,
分别比对照升高135.86%、55.26%、73.65%、
57.68%、115.73%, 差异显著; 氧恢复4和5 d, 逐渐
下降, 两者相比, 差异显著。
4 缺氧后氧恢复对SOD、APX、CAT活性的影响
如图4-A所示, 氧恢复使淹水1、2、4、5 d后
线粒体中SOD活性呈现先升高后下降趋势, 其中,
氧恢复1 d分别比对照升高39.29%、45.28%、
10.77%、7.24%, 除淹水5 d外, 均差异显著, 而淹水
3 d后则先略下降而后上升再下降; 除淹水5 d外,
氧恢复2 d均达到最大值, 分别比对照升高82.66%、
74.59%、2.89%、19.00%, 除淹水3 d外, 均差异显
著; 氧恢复4和5 d, 逐渐下降并趋于平稳, 两者相
比, 差异不显著。
如图4-B所示, 氧恢复使淹水1 d后线粒体中
APX活性呈现略升高后下降、整体平稳趋势, 其
中氧恢复1 d比对照升高11.45%, 差异显著, 氧恢复
2、3、4、5 d分别比对照下降9.68%、22.52%、
21.17%、27.93%, 差异显著, 但四者间差异不显著;
氧恢复使淹水2和3 d后APX活性同样呈现先升高
后下降趋势, 均在氧恢复2 d达到最大值, 分别比对
照升高22.35%和5.56%, 前者差异显著, 后者差异
不显著; 氧恢复使淹水4和5 d后APX活性呈现较低
水平, 整体趋于平稳, 除淹水4 d后氧恢复1 d外, 差
异均不显著。
如图4-C所示, 氧恢复使淹水1和2 d后线粒体
中CAT活性呈现先略升高后下降趋势, 且前者在氧
恢复2 d、后者在氧恢复1 d时达到最大值, 分别比
对照升高19.29%和22.71%, 差异显著; 氧恢复使淹
水3、4、5 d后CAT活性缓慢下降并趋于平稳, 其
中氧恢复3 d分别比对照下降27.84%、37.00%、
35.86%, 差异显著; 另外, 淹水1、2、3 d的CAT活
性在氧恢复4和5 d后, 差异不显著。
讨　　论
Dennis等(2000)将植物对缺氧胁迫的反应划
分为3个阶段: 一是信号转导组分的快速诱导与活
化阶段; 二是代谢适应阶段, 包括代谢酶和合成酶
的诱导; 三是通气组织的形成阶段。Skutnik和
Rychter (2009)的研究表明, 氧恢复后由于ROS爆发
加剧, 根中抗氧化系统会受到不同程度的损伤; 当
图4 缺氧后氧恢复对马铃薯块茎线粒体中
SOD、APX和CAT活性的影响
Fig.4 Effects of post-anoxia stress on the activities of
mitochondrial SOD, APX and CAT in potato tubers
植物生理学报288
淹水胁迫减轻时 , 氧恢复会导致细胞严重受损
(Blokhina等2000); 重新通气后, ATP的损耗加速恶
化细胞环境, 缺氧时线粒体内膜剧烈的两极分化
加剧了通气后ROS的生成和氧化胁迫(Blokhina等
2003)。由此可见, 低氧胁迫后的氧恢复过程对细
胞结构和功能的扰乱, 可能造成细胞更加严重的
伤害(Drew 1997)。
SOD作为植物抗氧化系统的第一道防线, 能
清除细胞中多余的O2¯· , 催化O2¯·还原成H2O2, 同时保
护基质中可溶性酶被氧化。通过SOD将O2¯·转变成
为H2O2, 能有效阻止或者减少O2¯·自由基对细胞的
毒害作用(宋松泉等2003; Bailly 2004; Berjak和
Pammenter 2008)。有研究得出, APX具有清除H2O2
的作用(Miyake和Asada 1992; Yoshimura等2000);
可还原从乙醛酸体和过氧化物酶体漏出的H2O2。
CAT和APX一样, 可将由SOD催化生成的H2O2转变
为水 (宋松泉等2003; Bai l ly 2004; Ber jak和
Pammenter 2008), 且在所有的抗氧化酶中, CAT的
催化效率最高。
我们的研究表明: 缺氧胁迫加剧线粒体ROS
的大量生成和膜脂过氧化程度; ROS的产生和脂
质过氧化程度超过一定范围后, 细胞防御性能下
降, 细胞可能出现凋亡, 以减轻对组织的进一步伤
害, 其中线粒体膜脂过氧化比ROS爆发更易发生和
持续(图1); 而图2显示, 在缺氧1 d时, 线粒体抗氧化
酶在进行防御时表现出延后性, 这或许与ROS的信
号传递相关联; 细胞凋亡的出现, 造成线粒体抗氧
化酶环境改变或/和本身被破坏, 防御性能更弱, 其
中CAT的活性更易受到伤害, SOD的防御性最强
(图2-A和C)。
另外, 我们的研究还表明: 缺氧胁迫后氧恢复
可促进线粒体中ROS产生, 可能更容易造成ROS爆
发; 在一定范围内, 胁迫时间越长, 越加剧ROS爆
发和膜脂过氧化; 但在细胞线粒体环境能够得到
恢复的前提下, 植株能够恢复到正常水平, 反之,
无法恢复(图3)。线粒体抗氧化酶在胁迫后的恢复
过程中, 可能受到更多ROS的干扰, 脂质过氧化程
度更加严重, 导致酶环境恶化、活性变弱, 且随着
淹水胁迫天数增多, 酶的活性越趋于下降(图4)。
参考文献
傅爱根, 罗广华, 王爱国(2000). 绿豆线粒体呼吸链在不同电子传递
途径中的电子漏. 热带亚热带植物学报, 8 (2): 97~103
宋松泉, 龙春林, 殷寿华, 兰芹英(2003). 种子的脱水行为及其分子
机制. 云南植物研究, 25 (4): 465~479
王爱国, 罗广华(1990). 植物的超氧物自由基与羟胺反应的定量关
系. 植物生理学通讯, (6): 55~57
杨福愉(1999). 蛋白质跨线粒体膜的运送. 生物化学与生物物理学
报, 31 (4): 353~356
Amako K, Chen GX, Asada K (1994). Separate assays specific
for ascorbate peroxidase and guaiacol peroxidase and for the
chloroplastic and cytosolic isozymes of ascorbate peroxidase in
plants. Plant Cell Physiol, 35 (3): 497~504
Bailly C (2004). Active oxygen species and antioxidants in seed
biology. Seed Sci Res, 14: 93~107
Berjak P, Pammenter NW (2008). From Avicennia to Zizania: seed
recalcitrance in perspective. Ann Bot, 101: 213~228
Biemelt S, Keetman U, Albrecht G (1998). Re-aeration following
hypoxia or anoxia leads to activation of the antioxidative
defense system in roots of wheat seedlings. Plant Physiol, 116:
651~658
Blokhina OB, Virolainen E, Fagerstedt KV, Hoikkala A, Wähälä K,
Chirkova TV (2000). Antioxidant status of anoxia-tolerant and
-intolerant plant species under anoxia and reaeration. Physiol
Plant, 109: 396~403
Blokhina O, Virolainen E, Fagerstedt KV (2003). Antioxidants,
oxidative damage and oxygen deprivation stress. Ann Bot, 91:
179~194
Cakmak I, Marschner H (1992). Magnesium deficiency and high light
intensity enhance activities of superoxide dismutase, ascorbate
peroxidase, and glutathione reductase in bean leaves. Plant
Physiol, 98: 1222~1227
Cassarino DS, Parks JK, Parker WD Jr, Bennett JP Jr (1999).
The parkinsonian neurotoxin MPP+ opens the mitochondrial
permeability transition pore and releases cytochrome c in
isolated mitochondria via an oxidative mechanism. Biochim
Biophys Acta, 1453: 49~62
Dennis ES, Dolferus R, Ellis M, Rahman M, Wu Y, Hoeren FU,
Grover A, Ismond KP, Good AG, Peacock WJ (2000). Molecular
strategies for improving waterlogging tolerance in plants. J Exp
Bot, 51: 89~97
Drew MC (1997). Oxygen deficiency and root metabolism: injury and
acclimation under hypoxia and anoxia. Ann Rev Plant Physiol
Plant Mol Biol, 48: 223~250
Garnczarska M, Bednarski W (2004). Effect of a short-term hypoxic
treatment followed by re-aeration on free radicals level and
antioxidative enzymes in lupine roots. Plant Physiol Biochem,
42: 233~240
Giannopolitis CN, Ries SK (1977). Superoxide dismutases. I.
王芳等: 缺氧及氧恢复对马铃薯块茎线粒体中活性氧及抗氧化酶的影响 289
Occurrence in higher plants. Plant Physiol, 59: 309~314
Macnevin WM, Urone PF (1953). Separation of hydrogen
peroxide from organic hydroperoxides. Anal Chem, 25:
1760~1761
Miyake C, Asada K (1992). Thylakoid-bound ascorbate peroxidase in
spinach chloroplasts and photoreduction of its primary oxidation
product monodehydroascorbate radical in thylakoids. Plant Cell
Physiol, 33: 541~553
Møller IM (2001). Plant mitochondria and oxidative stress: electron
transport, NADPH turnover, and metabolism of reactive oxygen
species. Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol, 52: 561~591
Neubrger M (1985). Large-scale preparation of washed mitochondria.
In: Douce R, Day DA (eds). Higher Plant Cell Respiration.
Berlin, Heidelberg: Springer-Verlag Press, 9~12
Patterson BD, Macrae EA, Ferguson IB (1984). Estimation of
hydrogen peroxide in plant extracts using titanium (VI). Anal
Biochem, 139: 487~492
Pavelic D, Arpagaus S, Rawyler A, Brändle R (2000). Impact of post-
anoxia stress on membrane lipids of anoxia-pretreated potato
cells. Plant Physiol, 124: 1285~1292
Skutnik M, Rychter AM (2009). Differential response of antioxidant
systems in leaves and roots of barley subjected to anoxia and
post-anoxia. J Plant Physiol, 166: 926~937
Vartapetian BB, Andreeva IN, Generozova IP, Polyakova LI, Maslova
IP, Dolgikh YI, Stepanova AY (2003). Functional electron
microscopy in studies of plant response and adaptation to
anaerobic stress. Ann Bot, 91: 155~172
Yoshimura K, Yabuta Y, Ishikawa T, Shigeoka S (2000). Expression
of spinach ascorbate peroxidase isoenzymes in response to
oxidative stresses. Plant Physiol, 123: 223~233