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蓬蘽的组织培养和植株再生



全 文 :植物生理学通讯 第 45卷 第 7期,2009年 7月 689
收稿 2009-04-20 修定  2009-04-30
资助 江苏省农业高科技项目(BG2007311)和江苏省科技基础
设施建设计划(BM20 08 10 1)。
* 通讯作者(E-mail: lwlcnbg@mail.cnbg.net; Tel: 025-
8 4 3 4 7 0 6 3。
蓬蘽的组织培养和植株再生
李海燕, 王小敏, 李维林 *, 吴文龙
江苏省·中国科学院植物研究所, 南京 210014
Tissue Culture and Plant Regeneration of Rubus hirsutus Thunb.
LI Hai-Yan, WANG Xiao-Min, LI Wei-Lin*, WU Wen-Long
Institute of Botany, Jiangsu Province and Chinese Academy of Sciences, Nanjing 210014, China
1 植物名称 蓬蘽(Rubus hirsutus Thunb.)。
2 材料类别 茎段。
3 培养条件 基本培养基为MS。启动培养基(即初
代培养基): (1) MS+6-BA 0.5 mg·L-1 (单位下同); 增
殖培养基: (2) MS+6-BA 0.5+NAA 0.3; 生根培养基:
(3) 1/2MS+NAA 0.01。所有培养基均加 25%蔗糖
和 5.8 g·L-1琼脂, pH 5.8~5.9。培养温度为(25±2)
℃, 光照时间为 14 h·d-1, 光照强度为 30~40 μmo1·m-2 ·
s-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得与启动培养 以生长健壮的蓬
蘽一年生植株的幼嫩含腋芽茎段为外植体, 用自来
水冲洗 10 min, 加 0.1%的洗衣粉浸泡 10 min, 然后
再用自来水冲洗45~60 min, 转入超净工作台操作。
在无菌条件下, 将材料放入 70%酒精浸泡 45 s, 然
后用无菌水冲洗 3次, 再用 0.1%HgC12溶液处理
5~10 min, 最后用无菌水冲洗 3~4次, 取出茎段在
吸水纸上吸干水分, 切去基部的受损组织, 接种在
启动培养基(1)中, 于培养室内培养。接种 1周左
右腋芽萌发生长, 25 d后腋芽长至 1~2 cm, 将其切
下进行增殖培养。
4.2 增殖培养 腋芽转入增殖培养基(2)后, 芽继续
生长, 节间不断伸长, 培养 10~15 d后, 茎基部出现
绿色的愈伤组织; 培养 30~40 d后, 芽增殖数量达
到 2~3个, 从基部切下单一不定芽, 转接到新鲜的
增殖培养基中, 促使其不断增殖(图1), 增殖系数最
大超过 20, 最小也可达到 5。将茎段基部的愈伤组
织切下, 接种到相同的新鲜培养基(2)中, 15 d后愈
伤组织分化出小苗。
4.3 生根培养 选取生长健壮且长势一致的组培苗
进行生根培养, 要求苗高 2~3 cm, 每株带有 2~4片
叶, 转入生根培养基(3)中诱导生根(图 2)。30 d后
生根率达到 100%, 平均根数为 11.13, 平均根长为
3.95 cm。
4.4 移栽 培养瓶于培养室内打开瓶盖炼苗 5 d后
从培养瓶中取出, 洗去根部多余的培养基, 移栽到
由泥炭土、珍珠岩、沙(4:3:2)混合的基质上(图 3),
遮阴保湿, 成活率达 90%以上。
5 意义与进展 蓬蘽是蔷薇科悬钩子属浆果植物,
其果实香味独特, 营养物质含量丰富, 酸甜适中, 可
以加工果汁、果酱、果酒和果冻, 或制茶。蓬蘽
全株还可药用。采用组织培养技术, 对保存我国的
悬钩子种质资源及其开发利用可能有一定的潜在应
图 1 蓬蘽的增殖培养
图 2 蓬蘽的生根培养
植物生理学通讯 第 45卷 第 7期,2009年 7月690
用价值。悬钩子属中一些种, 特别是栽培种的组织
培养和快速繁殖已有报道(金炜等1990, 1991; 金炜
和郑生智 1993; 罗建 2003; 许奕华等 2004; 黄苏珍
等 2004; 徐中志等 2006; 毕海林等 2007; 杨洪涛等
2008), 但蓬蘽的组织培养和快速繁殖尚未见报道。
图 3 蓬蘽组培苗的移栽
参考文献
毕海林, 徐中志, 和加卫, 和秀云, 朱映安, 杨正松, 杨洪涛(2007).
野生树莓组织培养技术研究. 中国野生植物资源, 26 (2 ):
68~69
黄苏珍, 韩玉林, 孙桂弟, 谢明云(2004). 地被悬钩子的组织培养
和快速繁殖. 植物生理学通讯, 40 (1): 60
金炜, 陈品良, 郑生智(1990). 高粱泡的组织培养和植株再生. 植
物生理学通讯, 26 (2): 43
金炜, 郑生智(1993). 盾叶莓的组织培养及植株再生. 植物生理
学通讯, 29 (3): 190~191
金炜, 郑生智, 顾 (1991). 川莓的组织培养与快速繁殖. 植物生
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罗建(2003). 粉枝莓的组织培养与植株再生. 林业科技, 28 (1):
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徐中志, 和加卫, 唐开学, 毕海林, 和秀云(2006). 刺萼粉枝莓的
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许奕华, 张玉平, 陈梅香(2004). 山莓的组织培养及快速繁殖. 植
物生理学通讯, 40 (1): 57
杨洪涛, 和加卫, 唐开学, 杨正松, 杨燕林, 王朝文, 毕海林(2008).
三叶悬钩子的组织培养. 植物生理学通讯, 44 (5): 945~946