全 文 ：植物生理学报 Plant Physiology Journal 2015, 51 (9): 1405~1413　　doi: 10.13592/j.cnki.ppj.2015.0128 1405
收稿 2015-03-09　　修定 2015-04-24
资助 河北省科技支撑计划项目(14826820D)和农业科技创新人
才队伍建设(2013055003)。
* 通讯作者(E-mail: junfeng-guan@263.net; Tel: 0311-87652132)。
‘富士’苹果Ca2+/H+反向转运蛋白基因生物信息学及表达模式分析
程玉豆1,2, 冯云霄1,2, 关军锋1,2,*
1河北省农林科学院遗传生理研究所, 石家庄050051; 2河北省植物转基因研究中心, 石家庄050051
摘要: 本研究借助生物信息学分析从苹果基因组数据库中获得了6个含全长编码序列的Ca2+/H+反向转运蛋白(Ca2+/H+ antiporter,
CAX)基因, 分别命名为MdCAX1、MdCAX2、MdCAX3、MdCAX4、MdCAX5和MdCAX6。基因和蛋白结构特性分析结果显
示: 6个CAX在基因结构和蛋白特性等方面存在差异; MdCAXs隶属于I-A型和I-B 2个亚型, 均含有N-端自我抑制区(N-terminal
regulatory region, NRR)、CaD功能域、C-端功能域、C功能域和D功能域。荧光定量PCR分析表明, MdCAX1在‘富士’苹果叶
片中表达量表现为基部叶片>中部叶片>顶端叶片, 在果皮和果肉中的表达量低于叶片; MdCAX2在果皮和果肉中表达量高于
叶片; MdCAX3在叶片和果实中的表达模式与MdCAX1相似, 但在叶片中的表达量低于MdCAX1; MdCAX4在各被检测样本中
表达量无明显变化; MdCAX5和MdCAX6在果皮和果肉组织中的表达量随发育进程呈逐渐升高趋势。叶片中Ca2+含量在不同
叶位叶片中差异显著, 果皮和果肉中Ca2+含量随着果实发育均呈下降趋势。上述研究结果表明: 6个MdCAXs基因在基因结
构、蛋白特性以及表达模式上存在差异, MdCAX1和MdCAX3基因表达与‘富士’苹果叶片和果实Ca2+含量变化密切相关。
关键词: 苹果; Ca2+/H+反向转运蛋白; 生物信息学分析; 钙; 基因表达
Bioinformatics and Expression Analysis of Ca2+/H+ Antiporter Gene Family in
‘Fuji’ Apple
CHENG Yu-Dou1,2, FENG Yun-Xiao1,2, GUAN Jun-Feng1,2,*
1Institute of Genetics and Physiology, Hebei Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Shijiazhuang 050051, China; 2Plant
Genetic Engineering Center of Hebei Province, Shijiazhuang 050051, China
Abstract: Six Ca2+/H+ antiporter (CAX) genes which contained full-length coding sequences were obtained from
the apple genome database by bioinformatics analysis in this work, and designated as MdCAX1, MdCAX2, Md-
CAX3, MdCAX4, MdCAX5 and MdCAX6 respectively. The studies of gene and protein characteristics indicated
that the gene formations and protein characteristics of the six MdCAXs were different. The MdCAXs were clus-
tered into two groups: I-A type and I-B type, and all of the 6 CAXs contained N-terminal regulatory region (NRR),
CaD domain, C-terminal domain, C domain and D domain. The results of real-time PCR showed that the expres-
sion level of MdCAX1 presented base leaf > middle leaf > top leaf, and showed lower levels in peel and flesh than
that in leaves. The expression levels of MdCAX2 in peel and flesh were higher than that in leaf. The expression
pattern of MdCAX3 was similar to MdCAX1 in leaf, but the expression level was lower than MdCAX1. No mark-
edly change of MdCAX4 expression level was detected in all the tested simples. The expression levels of MdCAX5
and MdCAX6 gradually increased during the development of peel and flesh. The contents of Ca2+ increased gradu-
ally accompanied by the grade of maturity rising in leaf, while the Ca2+ content in peel and flesh showed a down-
trend in fruit during the course of development. The above-mentioned results showed that the gene formations,
protein characteristics and expression patterns of the six MdCAXs were different, and the expression levels of Md-
CAX1 and MdCAX3 were closely related to Ca2+ content in leaf of ‘Fuji’ apple.
Key words: apple; Ca2+/H+ antiporter; bioinformatics analysis; calcium; gene expression
研究报告 Original Papers
Ca2+不仅是植物生长发育必需的营养元素, 其
还可作为第二信使参与植物生长发育和众多生理
反应(White和Broadley 2003; Kudla等2010; 沈金秋
等2014; 张瑞鑫等2014)。植物缺乏Ca2+可导致多
植物生理学报1406
种生理病害的发生。特别是在果实中, 缺乏Ca2+可
导致苹果苦痘病、水心病、樱桃裂果和番茄顶腐
病等(Conway等1994; Brown等1996; Ho和White
2011)。近期研究表明: Ca2+/H+反向转运蛋白(Ca2+/
H+ antiporters, CAXs)参与了植物体内Ca2+平衡, 能够
调节植物钙含量的变化(Manohar等2011), 然而在木
本果树中却鲜有报道。因此, 系统解析果实中CAX
基因家族结构和时空表达模式、探索其与苹果叶
片和果实钙含量的关系具有重要的理论价值。
CAXs是一个多基因家族, 在模式植物拟南芥
和水稻中分别有6和5个CAX基因。CAXs主要定位
在液泡膜上(Martinoia等2007), 具有11个跨膜区和
5个典型的功能域: 即N-端自抑制区域(N-terminal
regulatory region, NRR)、CaD功能域、C-端功能
域、C功能域和D功能域。其中, NRR和CaD功能
域是调节CAXs转运Ca2+能力的关键区域(Shigaki
等2001, 2003, 2005, 2006)。研究发现, 外源施加
Ca2+可显著诱导拟南芥AtCAX1 (Hirschi等2000)、
水稻OsCAX1a (Kamiya等2006)、棉花GhCAX3 (Xu
等2013)和大麦HvCAX2 (Edmond等2009)的基因表
达。在烟草、番茄、胡萝卜、水稻和莴苣中过量
表达拟南芥N端自我抑制区缺失的AtCAX1基因
(sAtCAX1)均可显著提高植株体内Ca2+含量(Hirschi
1999; Kim等2005; Park等2005; Mei等2007; Con-
nolly 2008; Morris等2008; de Freitas等2011)。拟南
芥cax1cax3双重突变体与各自单突变体相比, 显著
减少了植株钙含量; 过量表达sAtCAX1基因植株体
内AtCAX3表达量也显著升高, 暗示着AtCAX3可通
过与AtCAX1相互协同作用来增强CAXs的Ca2+转
运功能(Cheng等2005; Zhao等2009; Punshon等
2011)。研究发现, 拟南芥AtCAX2、AtCAX4和
AtCAX5除具有Ca2+转运功能外, 还能够将环境中
的Mn2+和Cd2+转入到液泡内, 提高植株对重金属胁
迫的耐受性(Hirschi等2000; Korenkov等2007; Mei
等2009; Wu等2011)。果实材料中, 苹果苦痘病发
病部位CAX2 (与拟南芥AtCAX2同源)和CAX3 (与
拟南芥AtCAX5同源)两个基因的表达量显著低于
未发病部位(de Freitas等2010), 番茄CAX3 (与拟南
芥AtCAX1同源)和CAX4 (与拟南芥AtCAX3同源)与
果实钙吸收以及顶腐病的发生密切相关(de Freitas
等2012)。此外, CAXs还参与了调控植物生长发育
中盐、冷胁迫反应和改变种子萌发期间对ABA敏
感性等过程(Catalá等2003; Cheng等2003, 2005;
Zhao等2008; Xu等2013)。
在苹果中, 叶片等营养组织Ca2+含量较高, 往
往不缺钙; 但果实中的Ca2+含量却较低, 缺钙时容
易导致苦痘病、痘斑病、水心病等生理病害的发
生(Conway等1994)。因此, 系统分析苹果中CAXs
基因结构和功能, 利于深入研究苹果树钙素营养
的分配机制; 有助于揭示果实因缺钙引起的各种
生理病害的原因。本研究以‘富士’苹果材料, 通过
生物信息学分析从苹果基因组数据库中获得6个
CAX基因; 并通过生物在线软件分析了它们的基因
和蛋白结构; 借助实时定量PCR技术对其基因表达
模式进行了检测; 利用原子吸收技术分析了叶片
和果实钙含量动态变化, 分析了钙含量与CAX基因
表达模式的关系, 旨在进一步认识CAX的功能。这
有助于阐明其调控果实钙分布的分子机制, 为新
品种的改良与选育提供前期工作基础。
材料与方法
1 材料
以河北省农林科学院石家庄果树研究所10年
生‘富士’ (Malus domestica Borkh. cv. Fuji)苹果树
(中间砧木为SH3, 基础砧为海棠)为材料。分别于
盛花后90、135、180和190 d采集外围果实样品,
每株10个果实。在盛花后90 d时采集外围营养枝
顶端叶片(L1)、中部叶片(L2)和基部叶片(L3), 每
株每叶位选取10个叶片, 选取3株。样品处理时,
将果实样品仔细分成果皮和果肉组织。上述所有
样品一半经液氮速冻后–80 ℃保存备用; 另一半洗
干净后烘干至恒重, 用于测定钙元素含量。
2 方法
2.1 总RNA提取及第一链cDNA合成
总RNA提取采用改良CTAB法(Gasic等2004),
cDNA第一链的合成参照PrimeScript RT reagent
Kit With gDNA Eraser反转录试剂盒(宝生物工程公
司, 中国大连)说明书进行。
2.2 生物信息学分析
苹果CAXs蛋白序列获得: 将已报道物种的
CAX序列与苹果基因组数据库(http://www.rosace-
ae.org/projects/apple_genome)进行比对, 将在功能
程玉豆等: ‘富士’苹果Ca2+/H+反向转运蛋白基因生物信息学及表达模式分析 1407
域序列高度保守、Score分值最高和E-value值最低
的蛋白序列作为候选CAXs蛋白。拟南芥(Arabi-
dopsis thaliana) CAX蛋白序列从http://www.arabi-
dopsis.org/网站获得, 水稻(Oryza sativa) CAX蛋白
序列从http://rapdblegacy.dna.affrc.go.jp/网站获得,
黄瓜(Cucumis sativus)、大麦(Hordeum vulgare)、
番茄(Lycopersicon esculentum)和绿豆(Vigna radia-
ta)等物种的CAX蛋白序列从NCBI数据库(National
Center for Biotechnology Information)获得。CAX基
因结构在http://gsds.cbi.pku.edu.cn/网站进行绘图;
CAX蛋白跨膜结构域预测在http://www.cbs.dtu.dk/
services/TMHMM/网站进行; 分子量和等电点在
www.expasy.org/tools/网站进行预测; 系统进化树
构建借助MEGA 5.10软件, 进化树生成算法采用邻
接法(neighbor-joining, NJ), 校验参数Bootstrap重复
1 000次。
2.3 CAX定量时空表达分析
根据从苹果数据库中比对获得的各CAXs基因
序列, 利用Omiga 2.0软件设计定量表达特异性引物
(表1)。以苹果Actin基因做内参(Ampomah-Dwamena
等2012)。利用ABI 7500型荧光定量PCR仪(Applied
Biosystems公司, 美国)进行检测, 反应体系参考SYBR
Premix Ex TaqTM (宝生物工程公司, 中国大连)试剂
盒说明书。反应体系包括: 2×SYBR Green PCR
Premix Ex Taq™ 12.5 µL, 正向、反向游引物(1
µmol·L-1)各0.5 µL, ROX dye II 0.5 µL, 4 ng·µL-1 cDNA
2.5 µL, ddH2O补足至25 µL。反应程序为: 95 ℃预变
性 30 s; 95 ℃ 5 s, 60 ℃ 34 s; 40个循环。反应结束后
做熔解曲线确定扩增目的基因片段的特异性。每
个样本做4次重复, 采用ABI7500定量PCR仪分析软
件中2-ΔΔCT法计算各CAX基因相对表达量。将Md-
CAX1在L1样本中的表达量作为1, 利用PermutMa-
trixEN软件绘制CAX基因表达模式聚类分析图。
2.4 钙含量测定
参照董宇等(2013)的方法, 样本烘干粉碎后,
经HClO4和HNO3 (按照1:3比例)混合液消化后, 用
原子吸收分光光度计(TAS-990F型, 北京普析通用
仪器有限责任公司)进行分析。测定时3次重复, 钙
含量用mg·g-1 (DW)表示。
2.5 统计学分析
试验数据分析采用DPS 7.05软件, 作图采用
GraphPad Prism 4软件。
实验结果
1 苹果CAXs家族基因结构预测分析
利用生物信息学方法, 从苹果全基因组中鉴
定得到6个CAX基因, 命名为MdCAX1、MdCAX2、
MdCAX3、MdCAX4、MdCAX5和MdCAX6。其中,
MdCAX1和MdCAX4定位于4号染色体上, 编码序列
长度分别为1 353 bp和1 311 bp, 蛋白序列长度分别
为450和436个氨基酸; MdCAX2和MdCAX3定位于3
号染色体上, 编码序列长度分别为1 308 bp和1 356
bp, 蛋白序列长度分别为435和451个氨基酸; Md-
CAX5定位于17号染色体上, 编码序列长度为1 302
bp, 蛋白序列长度为433个氨基酸; MdCAX6定位于
9号染色体上, 编码序列长度为1 314 bp, 蛋白序列
长度为437个氨基酸。利用www.expasy.org/tools/
网站在线预测各CAX蛋白基本参数结果显示: 6个
CAX蛋白分子量在47~50 kDa之间, 等电点在4.9~
5.9之间(表2)。在基因结构上 , MdCAX1、Md-
CAX3、MdCAX5含有11个外显子, MdCAX2、Md-
CAX4、MdCAX6含有10个外显子(图1)。
表1 定量PCR所需引物序列
Table 1 Primers for quantitative PCR
基因名称 正向引物序列(5’→3’) 反向引物序列(5’→3’)
MdCAX1 TTACACCGGTCCAACAGTGG TGTGTTGGGCTAGGGCAAAT
MdCAX2 CAATTTATGCACTGAAACGTGG CTGAAGAATGCACAACCAAGC
MdCAX3 GCTGAACGTGTCAGCTTCC TGATCATCTCTGTTGCATTTCC
MdCAX4 TTCTTCCAACTGTGGACTCACC TCCAGAAACCGACCTCAGC
MdCAX5 AAGGGGCATACACTGGCCTA CTCGATGAGTCATGTGCAGGT
MdCAX6 AAAGGCTTGATGCTTATTCTGTG CAGTAAGTTTCTTGTGGCTCACC
Actin TGACCGAATGAGCAAGGAAATTACT TACTCAGCTTTGGCAATCCACATC
植物生理学报1408
2 苹果CAXs蛋白结构分析
蛋白跨膜结构预测结果表明: MdCAX1和Md-
CAX2含有10个跨膜域; MdCAX3、MdCAX4、
MdCAX5和MdCAX6 4个CAX蛋白含有11个跨膜
域(图2-A)。通过CPHmodels软件(http://www.cbs.
dtu.dk/services/CPHmodels/)和Rasmol可视化工具
分析、预测所得到的苹果CAXs三维结构图显示:
苹果MdCAX1、MdCAX3和MdCAX4蛋白三维结
构与拟南芥AtCAX1相似; MdCAX2、MdCAX5和
MdCAX6与拟南芥AtCAX2和AtCAX5较为相似
(图2-B)。
3 苹果CAX系统进化树及功能域分析
CAX蛋白序列比对和系统进化树分析结果显
示: 不同植物CAX蛋白可分为I-A和I-B两个亚型。
其中苹果(MdCAX1、MdCAX3和MdCAX4)与拟
南芥(AtCAX1、AtCAX3 和AtCAX4)、水稻(Os-
CAX1a、OsCAX1b 和OsCAX1c)和黄瓜(Cs-
CAX1、CsCAX2和CsCAX3)属于I-A亚型; 苹果
(MdCAX2、MdCAX5和MdCAX6)与拟南芥(At-
CAX2、AtCAX53 和AtCAX6)、水稻(OsCAX2 和
OsCAX3)和黄瓜(CsCAX2、CsCAX5和CsCAX6)
属于I-B亚型。MdCAX1与黄瓜CsCAX3、绿豆
VrCAX1和拟南芥AtCAX1同源, 氨基酸序列一致
性分别达到74%、72%和67%; MdCAX2与黄瓜
CsCAX5和拟南芥AtCAX2同源, 氨基酸序列一致
性分别为75%和70%; MdCAX3与黄瓜CsCAX4同
源, 氨基酸序列一致性为62%; MdCAX4与黄瓜
CsCAX3氨基酸序列一致性最高 , 为63%; Md-
CAX5和MdCAX6同源, 它们的氨基酸序列一致性
达到96% (图3-A)。
6个苹果CAX均含有NRR自抑制区, 苹果I-A
亚型CAXs NRR区与拟南芥AtCAX1 (I-A亚型)相
似度较高; I-B亚型CAXs间 NRR区差异较大, 苹果
I-B亚型3个CAXs NRR区显著短于拟南芥AtCAX2
和AtCAX5。苹果I-B亚型CAXs蛋白CaD功能域的
9个氨基酸序列与拟南芥AtCAX2和AtCAX5 (I-B
亚型) CAXs相似度较高, 而I-A亚型CAXs之间差异
较大。C功能域中, 苹果I-B亚型CAXs与拟南芥At-
CAX2和AtCAX5均含有Mn2+转运特异性氨基酸序
列(CAF残基), 而I-A亚型CAXs则不含有CAF序
列。I-A亚型CAXs D功能域的氨基酸序列在苹果
与拟南芥间差异较大, 而I-B亚型CAXs则较为保
守。C-端功能区域(C-1, C-2)在2个物种的CAXs间
保守性较高(图3-B)。
图 1 苹果CAX家族基因结构
Fig.1 The structures of CAX genes in apple
表2 推测的苹果CAX基因和蛋白特性参数
Table 2 Predicted characteristic parameters of CAX genes and proteins in apple
基因名称 GDR数据库编号 编码序列全长/bp 染色体定位 氨基酸数目 分子量/kDa 等电点
MdCAX1 MDP0000233396 1 353 4号染色体 450 48.32 5.85
MdCAX2 MDP0000289952 1 308 3号染色体 435 47.55 5.16
MdCAX3 MDP0000193502 1 356 3号染色体 451 49.38 5.65
MdCAX4 MDP0000166875 1 311 4号染色体 436 47.52 5.19
MdCAX5 MDP0000244954 1 302 17号染色体 433 47.76 5.36
MdCAX6 MDP0000320927 1 314 9号染色体 437 48.23 4.99
程玉豆等: ‘富士’苹果Ca2+/H+反向转运蛋白基因生物信息学及表达模式分析 1409
4 CAX基因家族组织表达模式
6个CAX基因在苹果叶片和果实中的表达模
式存在差异。CAX1在叶片中的表达高于其他5个
CAX基因, 并且随着叶位升高其表达量呈下降趋
势; 果皮和果肉中CAX1表达量低于叶片, 并且不同
发育阶段变化不明显。叶片中CAX2表达量低于
图 2 苹果CAX蛋白结构预测
Fig.2 Prediction of CAX protein structures in apple
A: 预测的CAX蛋白跨膜结构域; B: CAX蛋白三维结构, 图中颜色由深到浅代表蛋白质N端→C端, 黑色代表N端, 白灰色代表C端。
植物生理学报1410
图 3 不同植物物种CAX蛋白进化树及序列比对
Fig.3 Phylogenetic tree and sequence alignment of CAX in different plant species
A: 系统进化树分析; 进化树采用邻接法构建, bootstrap值设置为1 000, 分支上的数值表示置信度, 即在bootstrap验证中该树枝可信度
的百分比。B: CAX氨基酸序列比对; At: Arabidopsis thaliana, 拟南芥; Cs: Cucumis sativus, 黄瓜; Hv: Hordeum vulgare, 大麦; Le: Lycopersi-
con esculentum, 番茄; Md: Malus domestica, 苹果; Os: Oryza sativa, 水稻; Vr: Vigna radiata, 绿豆。
程玉豆等: ‘富士’苹果Ca2+/H+反向转运蛋白基因生物信息学及表达模式分析 1411
CAX1, 基部叶片(L3)微高于中、上部叶片(L2、
L1); 果皮和果肉中CAX2表达量高于其他CAX基因,
在盛花后135和190 d时, 果皮和果肉中CAX2基因表
达量高于盛花后90和180 d。CAX3表达模式与
CAX1相似, 在叶片中的表达量同样表现为基部叶
片(L3)>中部叶片(L2)>顶端叶片(L1), 但低于相同
叶位叶片中CAX1表达量; 果皮和果肉中CAX3表达
量较低且保持不变。CAX4表达量在被检测的各组
织和器官中均较低, 且无明显变化。CAX5和CAX6
表达模式相似, 在叶片中表达量较低, 并且不同部
位叶片中的表达量无明显变化; 但随着果实的发
育, 果皮和果肉中的表达量呈逐渐升高趋势(图4)。
图4 CAX基因家族在‘富士’苹果叶片和果实中的表达谱分析
Fig.4 Expression profile of CAX gene family in leaf and fruit of ‘Fuji’ apple
5 苹果叶片和果实Ca2+含量分析
在叶片中, 营养枝基部叶片(L3) Ca2+含量最
高, 中部叶片(L2) Ca2+含量次之, 顶端叶片(L1) Ca2+
含量最低(图5-A)。随着果实发育, Ca2+含量在果皮
中呈逐渐下降趋势(图5-B)。在果肉中, Ca2+含量变
化模式与果皮相似(图5-C), 也呈逐渐下降趋势。
就单位干重的叶片和果实Ca2+含量比较显示: 叶片
中的Ca2+含量>果皮Ca2+含量>果肉Ca2+含量(图5)。
讨　　论
本研究获得的6个苹果CAX蛋白含有10~11个
跨膜结构域(图2-A)。它们在三维结构上与拟南芥
CAXs高度相似(图2-B); 并且均含有NRR区、CaD
功能域、C-端功能区域、C功能域和D功能域(图
3-B), 符合典型的CAX蛋白结构特征(Shigaki等
2001, 2003, 2005, 2006)。6个CAX在等电点、染色
体定位、编码氨基酸数目(表2)以及基因结构(图1)
等方面存在差异。
苹果MdCAX1、MdCAX3和MdCAX4与拟南
芥AtCAX1、AtCAX3和AtCAX4在系统进化树上
位于同一分支, 同属于I-A亚型; 并且它们之间在氨
基酸序列上高度一致(图3-A), 这暗示着苹果和拟
植物生理学报1412
南芥I-A亚型CAXs在生物学功能上可能相似。已
有研究证实, 过量表达拟南芥sAtCAX1基因可显著
提高番茄、胡萝卜Ca2+含量 , 而缺失拟南芥At-
CAX1和AtCAX3表达可显著减少植株Ca2+含量
(Kim等2005; Park等2005; Edmond等2009)。番茄
中过量表达拟南芥N端自我抑制区缺失的AtCAX4
基因(sAtCAX4)虽可提高植株Ca2+含量, 但却显著
低于过量表达 s A t C A X 1植株C a 2 +含量 ( M e i等
2007)。本文结果显示, MdCAX1和MdCAX3 2个基
因表达量在基部叶片最高, 顶端叶片最低; 而CAX4
表达量在叶片中无明显变化(图4)。联系到叶片
Ca2+含量的变化(图5), 这表明不同部位叶片Md-
CAX1和MdCAX3基因的表达与Ca2+含量呈正相关
关系。在果实发育后期, 果皮和果肉中Ca2+含量较
低, 且呈逐渐下降趋势(图5); 同时, MdCAX1、Md-
CAX3和MdCAX4 3个基因表达量过低(图4), 暗示
着MdCAX1和MdCAX3基因表达模式与苹果叶片和
果实Ca2+含量的变化密切相关。
苹果MdCAX2、MdCAX5和MdCAX6与拟南
芥AtCAX2、AtCAX5和AtCAX6属于I-B亚型, Md-
CAX2与拟南芥AtCAX2氨基酸序列一致性达到
70%; MdCAX5和MdCAX6与已报道的番茄Le-
CAX2同源性较高, 暗示着不同物种I-B亚型CAX
功能可能相似。本研究中, MdCAX2、MdCAX5和
MdCAX6 3个基因的表达量(图4)与叶片和果实Ca2+
含量变化(图5)无正相关性。然而, 已有研究表明,
拟南芥中AtCAX2不受外源Ca2+诱导(Cheng等2002;
Xu等2013), 但番茄中过量表达拟南芥N端自我抑
制区缺失的AtCAX2基因(sAtCAX2)可显著提高果
实Ca2+含量(Chung等2010); 烟草中过量表达At-
CAX2也可提高根中Ca2+含量, 但茎中不明显(Shi-
gaki等2006)。因此, MdCAX2、MdCAX5和Md-
CAX6如何参与苹果叶片和果实Ca2+含量变化过程
仍需深入研究。
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图5 苹果叶片和果实Ca2+含量变化
Fig.5 Changes of Ca2+ contents in leaf and fruit of apple
A: 叶片; B: 果皮; C: 果肉; 图中不同小写字母表示5%水平显著性差异。
程玉豆等: ‘富士’苹果Ca2+/H+反向转运蛋白基因生物信息学及表达模式分析 1413
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