全 文 ：植物生理学通讯 第 46卷 第 6期, 2010年 6月 611
收稿 2010-04-06 修定 　2010-04-14
资助 黑龙江省自然科学基金项目(C200816)和东北农业大学
创新项目(CXZ0 0 4 )。
* 通讯作者(E-mail: shufanggong@yahoo.com.cn; Tel:
0 45 1-55 1 90 93 7)。
狼尾草成熟种子的无菌播种与组织培养
龚束芳 1,*, 张瀚俪 1, 张晓莹 1, 康英 2
1东北农业大学园艺学院, 哈尔滨 150030；2鹤岗市园林管理处, 黑龙江鹤岗 154100
Asepsis Sowing and Tissure Culture of Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng.
GONG Shu-Fang1,*, ZHANG Han-Li1, ZHANG Xiao-Ying1, KANG Ying2
1College of Horticulture, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China; 2Hegang City Garden Bureau, Hegang,
Heilongjiang 154100, China
1 植物名称 狼尾草[Pennisetum alopecuroides (L.)
Spreng.]。
2 材料类别 成熟种子。
3 培养条件 (1)种子萌发及愈伤组织诱导培养基:
MS+2,4-D 3 mg·L-1 (单位下同)+KT 1; (2)分化培养
基: MS+2,4-D 2+6-BA 3; (3)生根培养基: 1/2MS。
以上培养基中均含有 3%蔗糖和 0.78%琼脂粉, pH
为 5.8。培养温度为(25±2) ℃, 光照强度为 15~20
μmol·m-2·s-1, 光照时间为 15 h·d-1。
4 生长及分化情况
4.1 无菌材料的获得 选取成熟饱满的种子, 剥去种
子外包片, 自来水冲洗外表面。在超净工作台中用
75%的酒精浸泡消毒 30 s, 无菌水冲洗 2次后放入
4%的次氯酸钠溶液中浸泡消毒 10 min, 无菌水冲
洗3次。
4.2 愈伤组织的诱导 将消毒好的种子接种到诱导
培养基(1)中, 盾片朝下。1周左右种子开始萌芽,
同时, 在其下胚轴周围出现白色透明状的愈伤组织
(图 1)。每 10 d继代一次, 愈伤组织逐渐膨大, 约
50%的白色透明愈伤组织转变为白色颗粒状的胚
性愈伤组织(图2), 其他白色透明愈伤组织逐步褐化
死亡。
4.3 愈伤组织分化 将白色颗粒状的胚性愈伤组织
转接到分化培养基(2)中, 每 10 d继代一次, 20 d左
右愈伤组织上有绿点出现, 再过10 d左右绿点开始
分化出幼嫩的芽(图 3), 此时增殖倍数达到 60~90。
图 1 狼尾草芽和愈伤组织的诱导
图 2 狼尾草胚性愈伤组织
图 3 狼尾草愈伤组织分化
4.4 壮苗和生根培养 将已分化的胚性愈伤组织接
入原培养基(2)中进行壮苗, 嫩芽迅速生长, 20 d左
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右苗高为 4~5 cm (图 4)。将分化的无根苗分成单
株, 接入生根培养基(3)中, 10 d后基部分化出 4~5
条白色带有根毛的根, 生根率达 90%以上(图 5)。
的基质中, 保持适宜的湿度和温度, 置于阴凉通风
处。30 d后成活率达 85%以上(图 6)。
图 4 狼尾草增殖苗
图 5 狼尾草生根培养
图 6 狼尾草移栽
4.5 炼苗与移栽 移栽前将试管苗瓶口逐步打开, 以
慢慢适应外部环境, 炼苗 10 d后取出生根苗, 洗净
根部附着的培养基, 将苗移栽到事先经过高压灭菌
5 意义与进展 狼尾草为禾本科狼尾草属多年生草
本植物, 可做牧草使用, 其花序如瓶刷状,喜光照充
足的生长环境, 耐旱、耐湿, 亦能耐半阴, 抗寒性
强, 是最具有观赏价值和开发前景的观赏草之一。
狼尾草的根、茎及全草可入药, 具清肺止咳、凉
血明目之功效。由于狼尾草多采用分株繁殖, 繁殖
量受到很大限制, 本实验为狼尾草规模化生产和新
品种繁育提供了前期基础。王凭青等(2005)对美
洲狼尾草 ×象草的杂交种进行了组织培养的研究,
但目前关于狼尾草的无菌播种以及以成熟种子为外
植体的组织培养研究尚未见报道。
参考文献
王凭青, 段传人, 王伯初, 周兴龙, 谢伟伟(2005). 杂交狼尾草不同
外植体材料组织培养实验. 重庆大学学报(自然科学版), 28
(6): 118~110