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地被悬钩子的组织培养和快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 1期,2004 年 2 月60
收稿 2003-01-13 修定   2003-06-04
资助 江苏省重点实验室资金和江苏省科技厅农业攻关项目
(BE2001353)。
*通讯作者(E-mail:h1957@163.com , Tel:025-84347049)。
地被悬钩子的组织培养和快速繁殖
黄苏珍 韩玉林* 孙桂弟 谢明云
江苏省、中国科学院植物研究所, 南京 210014
Tissue Culture and Rapid Propagation of Rubus calycinoides
HUANG Su-Zhen, HAN Yu-Lin*, SUN Gui-Di, XIE Ming-Yun
Institute of Botany, Jiangsu Province and Chinese Academy of Science, Nanjing 210014
1 植物名称 地被悬钩子(Rubus calycinoides)。
2 材料类别 茎段。
3 培养条件 基本培养基为 MS 培养基。(1)
诱导愈伤组织培养基: MS+6-BA 2.0 mg.L-1(单
位下同)+ NAA 0.1;(2)诱导分化培养基:
MS+6-BA 2.0+NAA 0.5;(3)丛芽增殖培养基:
MS+6-BA 2.0+NAA 0.1;(4)生根培养基:
4/5MS+NAA 0.5。以上培养基均加入 0.7% 的琼
脂、3% 蔗糖、pH 5.6。培养温度为(25 ±1)℃,
光照度1 500~2 000 lx, 光照12 h.d-1。
4 生长与分化情况
4.1 愈伤组织诱导 取生长旺盛的嫩枝顶端,用
自来水冲洗干净,于 10% 的洗涤剂水溶液中浸 5
min, 去除叶片,留取约2 cm嫩枝顶端于75%酒
精浸 1 min,再用 0.1% HgCI2 消毒 5 min,无
菌水冲浸 10~15 min 后,置灭菌培养皿纱布吸
干,切成长 2 m m 茎段外植体块,接种于培养
基(1)上。约 30 d后,首先在茎段切口处形
成愈伤组织并逐渐增大,培养期间每 3~4 周更
换1次新培养基。一般在诱导分化出芽之前不宜
切 割 。
4.2 芽诱导分化 将已形成的增大愈伤组织块不切
割直接接于培养基(2)上。在此培养基上培养
约20~30 d后,愈伤组织表面便出现紫红色的点
状突起,再经 10~15 d,便分化出不定幼芽。
4.3 丛芽的增殖 不定芽形成后,暂不切割,将
其转接于培养基(3)上。经20~30 d 培养,在
每个相对独立的不定芽基部,长出许多小的不定
芽,形成不定芽丛。在增殖培养过程中,相对
小的不定芽丛不宜切割,需切割时最好采用不定
芽间的分离(剥离)方式进行。
4.4 根的诱导 将单个不定芽从不定芽丛上分离
或剥离下来,接种于培养基(4 )上。约经过
30~40 d,从不定芽的基部便生出不定根。不定
芽的平均生根率为 95%,每个不定芽平均不定根
8~10 条。
4.5 试管苗的移栽 生根后的试管苗一般选择春季
或秋季出瓶移栽,有条件的也可以四季出苗。出
苗前打开培养瓶盖,在实验室条件下炼苗 2~3
d。小心出苗后,用水洗净根部琼脂,植于珍珠
岩、泥炭土、河砂混合(1∶1∶1)的基质中,稍
加遮荫养护,成活率 9 5 % 以上。
5 意义与进展 地被悬钩子属蔷薇科悬钩子属多
年生匍匐小灌木。本文取用材料为地被悬钩子的
优良品种“绿宝石地毯”(R.ca ly c i n o i d e s
‘Emerald Carpet’),1996 年引自加拿大。经
我所驯化栽培试验的结果表明,此品种适应我国
华东、华中、华南以及西南等大部分地区栽培,并
具有抗性强、分枝密、匍匐性优良、叶形美观
以及耐寒性强等优良特性,在长江以南地区是一
种难得的常绿绿化地被种类。地被悬钩子“绿宝
石地毯”早已在北美广泛应用,但我国尚未应
用。地被悬钩子组培快繁尚未见报道。