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灰毡毛忍冬新品种‘ 银翠蕾’ 的组织培养及快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第42卷 第3期,2006年6月474
灰毡毛忍冬新品种 ‘银翠蕾 ’的组织培养及快速繁殖
王晓明1,2,* 易霭琴1 宋庆安1 聂启英3 李永欣1
1 湖南省林业科学院,长沙 410004;2 中南林学院,长沙 410004;3 长沙环境保护职业技术学院,长沙 410004
Tissue Culture and Rapid Propagation of Lonicera macranthoides cv. ‘Yincuilei’
WANG Xiao-Ming1,2,*, YI Ai-Qin1, SONG Qing-An1, NIE Qi-Ying3, LI Yong-Xin1
1Hunan Academy of Forestry, Changsha 410004, China; 2Central South Forestry University, Changsha 410004, China; 3Changsha
Environment Protect College, Changsha 410004, China
收稿 2005-09-26 修定  2006-02-05
资助  湖南省林业科技攻关重点项目(2000-16)。
*E-mail: castanea@163.com, Tel: 0731-5313036
1 植物名称 灰毡毛忍冬新品种‘银翠蕾’ (Lonicera
macranthoides cv. ‘Yincuilei’)。
2 材料类别 带腋芽或顶芽的春梢嫩茎段。
3 培养条件 启动培养基:(1) MS+6-BA 1.0 mg·L-1
(单位下同)+NAA 0.1;增殖培养基:(2)改良 MS+
6-BA 0.5+NAA 0.1+ 生物素 D 1.0;(3)改良 MS+
6-BA 0.5+NAA 0.1;生根培养基:(4) 1/2MS+IBA
3.0+活性炭200,(5) 1/2MS+IBA 3.0。改良MS是
MS 基本培养基中的硝酸钾为 0,磷酸二氢钾、硝
酸铵、氯化钙和硫酸镁的用量分别减半。以上培
养基均附加 3% 蔗糖、0.7% 琼脂,pH 5.8。培
养温度为(25±2)℃,光强为30~40 mmol·m-2·s-1,
光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 启动培养 取带腋芽或顶芽的嫩茎段,剪去叶
片,留叶柄基部,先用自来水冲洗 3 ~ 5 遍,用
软毛刷蘸洗洁精溶液轻轻刷洗,再用自来水冲洗
洁净。将外植体置于超净工作台,用 7 5 % 酒精
浸泡 10 s,无菌水冲洗 2~3 次,再用 0.1% 升汞
溶液(加入 2~3滴吐温 -80)消毒5~6 min,无菌水
冲洗 4~5 次,用消毒滤纸吸干表面水分。将茎段
切成1.5~2.5 cm长的小段,接种到启动培养基(1)
上。结果是带顶芽的茎段,8 d 左右开始萌发,
25 d萌芽可长至2~3 cm长;带腋芽的茎段,10 d
左右腋芽才开始萌动,25 d长成 1.5~2.0 cm高。
4.2 增殖培养 将启动培养萌动的嫩梢,剪切成
2.0~2.5 cm长的茎段,转接到增殖培养基(2)和(3)
上进行继代培养。结果表明,6~7 d 后开始分化
为丛生芽,培养基(2)的增殖效果较好,增殖系数
为 4.7,且生长快,培养 25 d 的苗高 2.8 cm,
芽苗粗壮 ;培养基(3)上的芽苗增殖和生长缓慢,
增殖系数为 4.1,培养 25 d 的苗高 2.3 cm。说
明添加生物素 D 有利于组培苗增殖与生长。
4.3 生根培养 将2~3 cm高的丛芽切成单株后转入
生根培养基(4)和(5)上,10 d左右开始生根。25 d
后,培养基(4)上平均根数4 条以上,须根较多,
生根率达94.4%;而培养基(5)上根较粗,须根较
少,生根率仅77.8%。可见,在生根培养基中添
加适量活性炭有利于诱导组培苗生根。适当低温有
利于组培苗生根,20℃下的生根率高达98.7%。
4.4 试管苗的移栽 生根培养25 d左右的苗高达3
c m 以上时,采用独创的“塑料杯单株一步移栽
法”,不需炼苗,直接从培养瓶中取出试管苗,
洗掉根部培养基,在0.1%瑞毒霉-锰锌(浙江禾本
农药化学有限公司生产,58%可湿性粉剂)溶液中
浸泡3 min,栽入盛有黄心土、炭化谷壳灰、细
砂(1∶2∶2)混合基质的塑料杯中。以0.1% 瑞毒
霉溶液淋透基质,再用组培废弃的封口膜封口保
湿,置于自动喷雾的塑料大棚中。30 d 后,揭开
封口膜,40 d 后移入大田,成活率达95% 以上。
5 意义与进展 ‘ 银翠蕾 ’ 为忍冬科忍冬属灰毡毛
忍冬植物的变异类型,是湖南省林业科学院选育
出的高产、优质“花蕾型”新品种,其花期花
冠一直不开裂,干花产量及有效成分绿原酸含量
是普通品种的 2~3 倍,且具有较强的适应性和抗
逆性。它含有挥发油、黄酮类、三萜皂甙、有
机酸及无机元素等,具有抑菌、抗病毒、解热、
抗炎、保肝、止血、抗氧化及免疫调节等作用。
此品种的常规无性繁殖困难,扦插、嫁接成活率
很低,繁殖系数小,无法满足种植业的种苗需
求。本文通过组织培养,苗木生产已实现了规模
化繁殖,有利于该品种的推广应用。灰毡毛忍冬
的组织培养和快速繁殖尚未见报道。