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苹果无融合生殖矮生砧木的组织培养



全 文 :植物生理学通讯 第 41卷 第 2期,2005年 4月 199
苹果无融合生殖矮生砧木的组织培养
李宗伟 董文轩* 王爱东
沈阳农业大学园艺学院,沈阳 110161
Tissue Culture of Apomictic Dwarfing Root Stock of Apple
LI Zong-Wei, DONG Wen-Xuan*, WANG Ai-Dong
College of Horticulture, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110161
收稿 2004-06-17 修定   2004-12-27
资助  辽宁省自然科学基金项目(20022086)。
*通讯作者(E-mail: wxdong63@126.com, Tel: 024-
88487143)。
1 植物名称 苹果属创新无融合生殖矮生砧木资源,
即“扎矮山定子”(Malus baccata)与平邑甜茶(M.
hupehensis)杂交后代优系93-10和93-24。
2 材料类别 带腋芽的茎段。
3 培养条件 培养基有:(1) MS;(2)MS+6-BA 1.0
mg·L-1 (单位下同)+NAA 0.1;(3)MS+6-BA 1.0+NAA
0.2;(4)MS+6-BA 0.9+IBA 0.3;(5)MS+6-BA 0.8+IBA
0.4;(6)1/2MS+NAA 0.6+IBA 0.2;(7)1/2MS+NAA
0.3+IBA 0.6。上述培养基均加3%蔗糖、0.7%琼
脂,pH 5.8。培养温度(24±2)℃,光照度1 500~
2 000 lx,光照时间16 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 3月底、4月初在田间选用腋
芽饱满的枝条,剪成1.5 cm 大小的茎段(每个茎
段的一端带有1个腋芽),剥去茎段外表皮及少许
芽鳞片后,流水冲洗30 min,70%酒精消毒35 s,
倒出多余酒精,直接加入0.1% HgCl2 振荡灭菌10
min,无菌水冲洗4~5 遍,再使用2.5 mg·mL-1 的
头孢曲松钠溶液(注射用头孢曲松钠,上海新先锋
药业有限公司)浸泡1.0~1.5 h效果更好。
4.2 不定芽的分化及丛生芽增殖 将经头孢曲松钠
溶液浸泡后的无菌腋芽从茎段上取下,直接接种
至培养基(1)上。1周左右选择萌发良好的腋芽分
别转接在培养基(2)、(3)上,4 周后不定芽分化。
在培养基(2)上不定芽分化效果较好。将丛生芽切
成含2~3个芽的小块,分别接种到培养基(4)、(5)
上,丛生芽得到大量增殖(图1)。每20 d继代1次,
其中培养基( 4 ) 的新芽分化更好,增殖系数为
7 ~ 8。
4.3 诱导生根及移栽 取株高1.5~2.0 cm的小苗,
接种到生根培养基(6)、(7)上培养3周左右,生根
率达90%。炼苗 1 d 后,取出,洗干净,去掉根
上的琼脂,栽于经高锰酸钾消毒后的砂床上,上
覆地膜,保持 80% 湿度。移栽 2 周后开始长出新
的根、叶,成活率达 8 0 % 。
5 意义与进展 苹果矮化密植已成为当前苹果集约
化栽培的主要方式。苹果的矮生砧木实生化研究
是现代苹果砧木育种研究中的一个重要领域。
“扎矮山定子”是一株含有 D w 矮生基因的突变
山定子,可使嫁接在其上的冬光苹果树体矮化,
是珍贵的抗寒矮生砧木资源。我院率先采用了这
一矮化资源和无融合生殖资源(平邑甜茶)杂交的技
术培育无融合生殖型实生矮化砧木,获得具有Dw
基因的皱叶矮生型的杂种后代,并选出能用种子
进行繁殖的苹果矮砧。本文建立的苹果无融合生
殖矮生砧木快繁体系,可能会实现周年生产,获
得大量具备无融合生殖特性的矮生砧木,以满足
果树种植业对苹果矮砧的需求。其组培快繁未见
报道。
图1 苹果杂交后代优系93-24(左)和93-10(右)的丛生芽增殖