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灰毡毛忍冬的组织培养与快速繁殖



全 文 :植物生理学通讯 第41卷 第5期,2005年10月642
灰毡毛忍冬的组织培养与快速繁殖
唐效蓉1,* 李午平2 彭晓锋2
1 湖南省林业科学院,长沙 410004;2 湖南省林木种苗繁育示范中心,长沙 410007
Tissue Culture and Rapid Propagation of Lonicera macranthoides Hand. Mazz
TANG Xiao-Rong1,*, LI Wu-Ping2, PENG Xiao-Feng2
1Hunan Academy of Forestry Sciences, Changsha 410004; 2The Centre of Forestry Seed and Seedlings Regeneration of Hunan
Province, Changsha 410007, China
1 植物名称 灰毡毛忍冬(Lonicera macranthoides
Hand. Mazz),别名大花忍冬。
2 材料类别 茎尖、带腋芽茎段。
3 培养条件 芽诱导与继代增殖培养基:(1)MS+6-
BA 0.3 mg·L-1(单位下同)+NAA 0.3;(2)MS+6-BA 0.3+
NAA 0.5;(3)MS+6-BA 0.3+NAA 0.8;(4)MS+6-BA
0.3+NAA 1.2;(5)MS+6-BA 0.5+NAA 0.3;(6)MS+6-
BA 0.8+NAA 0.3;(7)MS+6-BA 1.2+NAA 0.3;(8)
MS+KT 0.5+NAA 0.3。生根培养基:(9)1/2MS+NAA
0.4+IBA 1.0。培养基加0.8%琼脂;(9)中加2%蔗
糖,(1)~(8)中加3%蔗糖;pH 5.8。培养温度(25±
1)℃,光照度1 200 lx,光照时间12 h·d-1。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取成年植株未木质化或半木
质化嫩枝,去叶片,自来水冲洗,置超净工作
台上,以 0.1% 升汞消毒 10 min,无菌水洗 5~7
次。切取 8~10 mm 茎尖或带腋芽茎段,接种于
MS+6-BA 0.2+NAA 0.1上预培养 3~5 d。
4.2 腋芽诱导 将茎尖转至培养基(5)~(8)上,带腋
芽茎段转至(1)~(8)上。12 d左右,茎的下切口膨
大且有愈伤组织形成;带腋芽茎段腋芽膨大萌
发,每茎段萌生 2 个对生芽。20 d 后,腋芽伸
长,叶片展开;带顶芽茎段 15 d 后顶芽萌动伸
长,25 d左右长出1~3个节,基部腋芽成对萌发。
芽的生长发育在含6-BA的培养基中明显较含KT的
正常,生长快;腋芽萌发与顶芽伸长并正常生长
的比例随 6-BA 增加而减少。6-BA 含量相同时,
随 N A A 增加愈伤组织生长加快,但易老化,抑
制了芽的萌发与生长。
4.3 丛芽诱导与增殖 当芽长至2~3 cm,形成 2~3
个节时,切下芽并剪成 1.0~1.2 cm 小段,接于
培养基(5)中。10 d左右,下切口明显膨大;15~
20 d,具顶芽小段的顶芽伸长,基部腋芽萌动,无
顶芽小段腋芽处形成丛芽。每4~5周继代1次,增
殖系数5~8。多代继代后,部分丛芽密集而纤细,
转至培养基(1)中,4~5 周后有壮苗效果。
4.4 生根与移栽 选长2~3 cm的壮苗,接种至培
养基(9)上。10 d 后芽的下切口稍膨大,14 d 后
芽基部形成白色突起,18 d 后分化出3~5 根白色
小根,20~30 d 后,根长1~3 cm,生根率达95%
以上。25~30 d后,将瓶苗移入光照度30 000 lx
的温室炼苗 7~10 d。取出瓶苗以自来水冲洗干
净,以0.1%多菌灵液浸0.5~1 min,于通风、荫
凉处凉干苗木表面水分(叶片不能有萎蔫状),将
苗包裹于经消毒的湿纱布中,移植于装有 60% 阔
叶林林下腐殖质土与40%珍珠岩混合基质的50孔
塑料穴盘中,再以 0.1% 多菌灵液浇透定根,置
于通风良好、光照度 30 000 lx、温度 20~32℃
的温室中。前15 d叶面喷雾 5~7次 ·d-1,之后正
常浇灌,以保持基质湿润为度。50~60 d 后,试
管苗生长健壮,根系发育良好,苗高 20~25 cm,
移栽成活率达 98% 以上。
5 意义与进展 灰毡毛忍冬为忍冬科,忍冬属藤
本植物。主产湖南和贵州,花入药,是我国重要
的药用和观赏植物。湖南隆回、溆浦等地大规模
人工栽培,已成为当地支柱产业之一。其优良栽
培品种“金蕾”系列1~6 号是湖南重点推广的品
种。因其扦插繁殖较常规品种成活率低,生产用
苗主要以嫁接繁殖,但扩繁速度慢,生产成本高,
周期长,植株易衰老退化。采用组织培养方法快
速繁殖,有可能解决这些问题。以灰毡毛忍冬优
良品种的茎尖和带腋芽茎段为外植体的组培快繁尚
未见报道。
收稿 2004-10-27 修定  2005-04-04
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