全 文 ：植物生理学通讯 第 43卷 第 5期，2007年 10月954
暗培养对沙枣愈伤组织中原儿茶酸含量的影响
詹亚光 *，宋继园，王巍巍
东北林业大学生命科学学院，哈尔滨 150040
收稿 2007-04-16 修定 2007-07-30
资助 大庆市科学技术计划项目。
* E -m a i l：y a g u a n g z h a n @ 1 2 6 . c o m；T e l：0 4 5 1 -
82191752
沙枣(Elaeagnus angustifolia L.)中含有丰富的
具较高医药价值的次生代谢产物——原儿茶酸。
本文探讨暗培养对沙枣愈伤组织中原儿茶酸含量的
影响。
取树龄3年的沙枣幼嫩叶片于流水下冲洗1 h，
用 75 %酒精浸泡 30 s，再用 10 %的 Ca(ClO)2消
毒10 min后以无菌水冲洗5次。接入附加1.00 mg·L-1
6-BA与 0.30 mg·L-1 IAA的MS培养基上诱导愈伤
组织。选取生长良好、大小一致的愈伤组织以附
加 1.00 mg·L-1 2,4-D与 0.50 mg·L-1 6-BA的MS培养
基进行继代培养，每个处理 15~20块，重复 5次。
另设暗培养处理。培养温度为(25±2) ℃；光照
强度为 58.4 µmol·m-2·s-1；光照时间为 12 h·d-1。
分别取生长 7、14、21、28 d的沙枣愈伤组织
样品于 60 ℃下烘干、研成细粉，按前文(詹亚光
等2006)中方法提取和测定原儿茶酸，得到以下结
果。
1. 光照和暗培养 21 d的沙枣愈伤组织的鲜重
和原儿茶酸含量最大，愈伤组织生长和原儿茶酸
含量变化进程是一致的。
2. 暗培养的沙枣愈伤组织增长比光照下大，
分裂产生的细胞大、排列疏松，易于培养和继
代，更利于悬浮细胞培养和原儿茶酸含量的提
高，说明暗培养比光下促进原儿茶酸积累的作
用大些。
3. 天然野生沙枣中原儿茶酸的含量为 286.80
µg·g-1 (DW) (Ayaz和 Bertoft 2001)，本文在已建
立的愈伤组织培养体系基础上结合暗培养，可使
原儿茶酸含量达到 1 005.86 µg·g-1 (DW)，远远超
过天然野生沙枣的含量。
图 1 光和暗培养对沙枣愈伤组织培养及原儿茶酸含量的影响
参考文献
詹亚光, 纪丽丽, 亓磊, 郭艳茹(2006). 水曲柳雌雄株酚类物质和
几种氧化酶活性的比较. 林业科学, 42 (7): 131~136
Ayaz FA, Bertoft E (2001). Sugar and phenolic acid composition
of stored commercial oleaster fruits. J Food Comp Anal, 14:
505~511
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