全 文 :植物生理学通讯 第 40 卷 第 3期,2004 年 6 月332
收稿 2003-05-12 修定 2003-07-24
资助 陕西省教育厅2001年重点实验室专项科研项目(2001-11)。
* E-mail:pjyang@hz163.net, Tel:0916-2641661
马蹄香的组织培养与植株再生
李会宁* 杨培君 赵桦
陕西理工学院陕西省资源生物重点实验室,汉中 723001
Tissue Culture and Plantlet Regeneration of Saruma henryi
LI Hui-Ning*, YANG Pei-Jun , ZHAO Hua
Bio-resources Key Laboratory of Shaanxi Province, Shaanxi College of Technology, Hanzhong 723001
1 植物名称 马蹄香(Saruma henryi)。
2 材料类别 顶芽和茎段。
3 培养条件 诱导生长培养基:(1)MS+6-BA 2.0
mg.L-1(单位下同)+IBA 0.2+LH 800。愈伤组织诱
导培养基:(2)MS+6-BA 2.0+NAA 0.5。增殖及
壮苗培养基:(3)MS+6-BA 1.5+KT 0.5+IBA 0.2。
生根培养基:(4)1/2MS+IBA 0.1(或 MS)。所用培
养基均加0.8%~0.9% 琼脂、3% 白砂糖,pH 5.6~
5.8。培养温度(20±2)℃,相对湿度65%~75%,光
照12~14 h.d-1,光照度为1 500~2 000 lx 。
4 生长与分化情况
4.1 无菌材料的获得 取秦岭(陕西留坝)野生马蹄
香(移栽于实验室内植株)的顶芽和茎段,流水冲洗
3~6 h;经 75% 酒精消毒10~15 s,无菌水冲洗1
次,0.2% 升汞消毒 4~5 min,无菌水冲洗 3 次;
分割成0.5~1 cm去叶的带1个节的茎段或顶芽,接
种于培养基(1)、(2)上,使茎节部处于培养基表
面。培养基(1)中,15 d 后基部切口处稍膨大呈
黑褐色,无明显愈伤组织产生,顶芽外植体生长
较快,幼叶展开,腋芽萌动;茎节外植体节上
1~2 个芽萌动生长;20~30 d 后产生 2~4 个丛生
芽,长0.5~1.5 cm;40~50 d 后产生 5~7 个丛生
芽,苗高2~3 cm左右。该培养基中产生的芽苗数
多,但苗较纤细。培养基(2)中,15 d 后基部切
口处略膨大,有少量淡绿色愈伤组织产生;35~50
d 后愈伤组织明显增生,长至1~1.5 cm 左右,并
有1~2个不定芽产生。培养基(1)、(2)芽的诱导率
均可达 100 %。
4.2 增殖培养 将培养基(1)中产生的芽或苗分割
后,转接于培养基(3)中,培养15~25 d其基部略
膨大,并可产生 2~4 不定芽,同时侧芽也开始生
长。芽苗生长健壮,叶色浓绿,30~35 d 后可产
生 4~6 不定芽,多的可达 8~10 个芽,苗高 1.7~
2.5 cm 左右。30~35 d 可继代培养1次。
4.3 生根与移栽 取培养基(3)培养的芽苗转接于(4)
中,20~30 d左右其基部可产生1~3条0.5 cm左右
长的不定根;30~35 d 后产生不定根 3~5 条,长
约1.5~3.5 cm,株高可达2.5~3 cm,生根率95%
以上。培养 30~35 d、炼苗 3~4 d 后移栽,于
18~22℃下移入沙和腐殖土(1∶1)的基质中,浇
透水,塑料薄膜适当覆盖保湿,成活率90% 以上。
5 意义与进展 马蹄香又称冷水丹、高脚细辛等,
属马兜铃科马蹄香属多年生草本植物。根及根状
茎入药,有温中散寒,利气镇痛之功效。治胃
寒痛、心前区痛、关节炎症等,鲜叶外敷可治
化脓疮疡[1]。马蹄香属我国特有的单种属植物,
也是马兜铃科现存最原始的种类[2,3],经第四纪冰
川作用后在我国的华中及西南少数省(区)残存下
来,在研究植物区系演化中有重要的意义,陕西
省将其列为省级保护物种[4]。自然条件下以种子
和分株繁殖,繁殖力低,且因分布狭窄,种群
数量稀少,又常遭人为采挖,已成濒危物种。采
用组织培养方法,可获得大量种苗。关于马兜铃
科植物的组织培养仅有零星报道[5]; 本文结果可为
马蹄香离体无性繁殖系的建立提供参考,这方面
的工作尚未见报道。
参考文献
1 江苏新医学院.中药大辞典(上册).上海:上海科学技术
出版社,1977.1160~1161
2 赵桦,杨培君.马蹄香大、小孢子发生及雌配子体的发
育.西北植物学报,1994,14(5):17~21
3 李思锋,常朝阳,陈彦生.马蹄香的保护生物学研究.西
北植物学报,1994,14(5):104~108
4 狄维忠,于兆英.陕西省第一批国家珍稀濒危保护植物.
西安:西北大学出版社,1989.238
5 程治英,王锦亮,刘道华等.马兜铃茎段组织培养.植
物生理学通讯,1983,(5):44